实验15药物对离体豚鼠回肠的 作用（2）药物对离体豚鼠回肠的作用摘要】目的：了解胆碱能神经递质乙酰胆碱(acetylcholine, ACh)和局部炎症介质组胺(histamine)对肠道平滑肌M胆碱受体和H1受 体的激动作用,以及它们的受体拮抗剂阿托品(atropine)和扑尔敏(chlorpheniramine)的 阻断作用。方法：取离体豚鼠回肠1cm，利用RM6240 系统和张力换能器,分别检测乙酰胆碱, 组胺，阿托品，扑尔敏和 BaCl 作用前后，回肠2平滑肌张力的变化。结果：乙酰胆碱和组胺能使 离体豚鼠回肠平滑肌的收缩幅度增高,用阿托品 处理标本后，乙酰胆碱的收缩平滑肌效应被阻断(P0.01)；用扑尔敏处理标本后，组胺的收缩 平滑肌效应被阻断(P0.01)； BaCl能使离体豚2鼠回肠平滑肌大幅度收缩，再用阿托品处理标 本, BaCl的收缩平滑肌效应被部分阻断。结论:2乙酰胆碱为M胆碱受体激动药,组胺为H受体激1动药，BaCl为肌肉兴奋剂，三者分别作用与回2肠平滑肌时，使平滑肌收缩。阿托品为 M 胆碱受 体阻断药，扑尔敏为H受体阻断药，两者可以分1别阻断乙酰胆碱和组胺对平滑肌的激动作用。【关键词】乙酰胆碱组胺阿托品扑尔敏M胆 碱受体H受体1 胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势，小剂量 或低浓度的ACh即能激动M胆碱受体，产生与兴 奋胆碱能神经节后纤维相似的作用，兴奋胃肠道 平滑肌。Atropine与胆碱受体结合而本身不产 生或较少产生拟胆碱作用，却能阻断胆碱能递质 或拟胆碱药物与受体的结合，从而产生抗胆碱作 用。Histamine对多种动物的胃肠道和气道平滑 肌H1受体有兴奋作用，豚鼠尤其敏感。Chlorpheniramine为H1受体拮抗剂，能阻断 histamine与H1受体的结合，从而产生抗 histamine作用。BaCl为肌肉兴奋剂，能够使平2滑肌强烈收缩1。1. 材料和方法1.1实验动物 豚鼠1只（雄性，健康）1.2仪器 离体装置，麦氏浴槽（25ml），HSS -1 （B）超级恒温器（成都仪器厂）,张力换能器, RM6240BD型生物信号采集处理系统（成都仪器 厂），移液器20200 u 1,1001000 u l各一把（Finnipipette），手术器械一套。1.3药品和试剂 台氏溶液，10-2g/L氯化乙酰胆碱溶液，1g/L硫酸阿托品溶液，10-2g/L磷酸 组织胺溶液， 10-3g/L 扑尔敏溶液， 10g/L BaCl2 溶液。1.4 实验方法in1.4.1 实验装置准备 向麦氏浴槽中加固定 量的台氏液，调节超级恒温器的温度，使麦氏浴 槽内温度稳定在3705C。通气管接95%O2+ 5%CO2 混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道 的气体流量，调节至浴槽中气泡一个个逸出为 止。张力换能器固定于铁支柱上，换能器输出线 接微机生物信号处理系统。142 仪器参数设置 通道时间常数为直 流，滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz, 扫描速度1s/div （已设定）。mi143 标本的制备 取豚鼠一只，先用木槌 击其头部致昏死，股动脉放血，立即剖开腹腔， 找到回盲部，然后在离回盲部 1cm 处剪断，取 出回肠约10cm,置于氧饱和的台氏液培养皿中, 沿肠壁除去肠系膜，然后将回肠剪成数小段（约 11.5cm）,用注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净，换以新鲜台氏液备用。注意操作时勿牵 拉肠段以免影响收缩功能。取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角壁处分别用缝针穿线，并打结。注意保持肠管通畅，勿使其封闭。肠管一端连线系 于浴槽固定钩上，然后放入37C麦氏浴槽中。再将肠管的另一端系在张力换能器的悬臂梁上， 将 RM6240 归零，调节肌张力至约 1g。1.4.4 实验处理 待离体回肠稳定 15min后，记录一段正常收缩曲线，加入 10-2g/L Ach 02ml,观察并记录收缩曲线，23min后换液。 注意每次浴槽的量应相等。重复以上Ach剂量，稳定15min,待收缩达最高点时，加入1g/Latropine 02ml,观察并记录其收缩曲线。不换液，待曲线基本稳定后，再加入相同浓度的Ach,观 察并记录其收缩曲线。换液,加入 10-2 g/L histamine 溶液 03ml, 待作用明显时迅速换液,使肠肌张力恢复正常加入 10-3g/L chlorpheniramine 溶液 02ml,5min 后（不换液）加入同量histamine,观察并记录 其收缩曲线。加入10g/L BaCl2溶液1ml,观察其反应，当作用达最高点,加 入 1g/L atropine 溶 液0.2ml,观察并记录其收缩曲线。1.5数据记录 记录在Ach和阿托品+AchHis 和扑尔敏+His的作用下，离体豚鼠回肠平滑肌 的收缩强度共 4 组数据。比较阿托品加入前后和 扑尔敏加入前后两种情况下平滑肌收缩强度的 变化。1.6统计处理 实验结果用乓土 S表示，用Microsoft Excel 软件处理，两组间比较采用 t检验， p0.05 认为有显著性差异。2. 实验结果用 RM6240BD 型生物信号采集处理系统记 录和测量各种试剂作用前后平滑肌张力变化。实 验的张力变化趋势见附图 1，各试剂作用前后张 力变化幅度数据如表 1 所示。Ach收缩幅度(g )h.t.收缩幅度(g)histamine样本号AchAch+atropine扑尔敏+histaminehistamine13.050.1173.580.34422.810.1032.230.56433.430.1253.070.11143.260.1873.460.39451.340.2712.160.77662.150.1202.980.23073.34-0.083.010.41883.460.1542.590.10392.880.0801.750.390r 土S2.86 土07010 120 土 0 0938*2.760.618 0.370.213*注 ：*P=4.47349E-060.01*P=9.82568E-060.01由以上数据以及处理结果可知，Ach能够使平 滑肌强烈收缩，收缩幅度为2.860.701，而经 阿托品作用后其收缩幅度成0.1200.0938，两 者用t检验可得P001,两者有显著差异，说明阿托品能够阻断 M 胆碱能受体，具有对抗 Ach 的 作用。如上 histamine 同样具有使回肠平滑肌收缩 的能力，作用前后其张力变化幅度为 2.76 0.618，经扑尔敏作用后，再加入 histamine 平 滑肌的收缩幅度变为0.370.213,用t检验得 P0.01，两者差异显著。说明扑尔敏具有对抗 histamine 的作用,主要是阻断了肠道上的 H1 受体。由附件1的趋势图可知，BaCl能使平滑肌剧2 烈收缩，阿托品则只能部分阻断其收缩作用。3. 讨论3.1 M 受体激动药及拮抗药对平滑肌的药理作M 胆碱受体激动药可分为两类，即胆碱酯类 和天然形成的拟胆碱生物碱。乙酰胆碱属于胆碱 酯类药物2，小剂量时为 M 胆碱受体激动作用。Ach与M胆碱能受体结合，使平滑肌Ca2+通道开=1放，Ca2+内流增加，肌浆Ca2+浓度增大，平滑肌 收缩幅度增高。大剂量时也有 N 胆碱受体激动作 用，使胃肠道平滑肌兴奋。Atropine为M胆碱 受体阻断药，其与平滑肌细胞膜M-受体结合，本身不产生或较少产生拟胆碱作用，却能阻断乙 酰胆碱与M-受体结合，阻断乙酰胆碱与M-受体 的激动作用3。3.2 H受体激动药及拮抗药对平滑肌的药理作用1组胺是一种血管活性胺。与平滑肌细胞膜H受体结合，通过激活G蛋白-磷酸脂酶C系统,1使细胞内Ca2+增高，平滑肌收缩。扑尔敏为H1受体阻断药，与平滑肌细胞膜H受体结合，从而1 阻断组胺对 H 受体的激动作用。13.3 氯化钡引起回肠平滑肌收缩机制氯化钡为肌肉兴奋剂，可通过两种机制使平滑肌收缩。一是Ba2+经钙通道进入胞浆，使肌浆Caz+浓度提高，平滑肌收缩幅度增高；二是氯化钡能兴奋胆碱能 N 受体， N 受体有神经型和肌 肉型，N受体激动时改变Na+、K+、Caz+通道的 电生理学特性，使肌肉收缩4。用大剂量阿托品处理标本后，阿托品对 N 型受体有阻断作用，产生抗氯化钡作用。但由于 阿托品无法阻断氯化钡兴奋肌肉的离子效应，所 以在附图1上表现出收缩幅度部分下降的现象。3.4非特异性的肠道平滑肌抑制药对Ach作用的 影响非特异性肠道平滑肌抑制药可拮抗平滑肌 的收缩效应，但其受体选择性较低，作用的受体 类型多，具有广谱性，因此相对于 Ach 等选择 性较高的药物来说，其药效不佳。所以，非特异 性肠道平滑肌抑制药还是具有一定的对抗 Ach的肠道平滑肌收缩作用4。3.5西咪替丁(cimetiding)的药理作用西咪替丁是 H2 受体阻断药，通过阻断壁细胞 上的 H2 受体，抑制基础胃酸和夜间胃酸分泌， 对胃泌素及 M 受体激动药引起的胃酸分泌也有 抑制作用5。而组胺为 H1 受体激动药，其选择 性作用于 H1 受体，所以西咪替丁不能阻断组胺 对肠道平滑肌的兴奋作用。参考资料：1. 陆源,夏强. 生理科学实验教程. 杭州：浙江大 学出版社,2004：245247.2. 陈季强.基础医学各论(下册) .北京：科学出版社，2004：267.3. 杨世杰. 药 理学. 北京：人民卫生出版社,2005:6364,8082,163166.4. 姚泰. 生理学. 北京：人民卫生版社,2005：2855. 陈季强.基础医学各论（下册）.北京：科学出 版社，2004：643.附图1：药物（乙酰胆碱，组胺，阿托品，扑尔敏和BaCl ）对离体豚鼠回肠的作用2