贵定县独特地理环境之“云雾贡茶”茶多酚抗氧化能力探究摘要：茶多酚是茶叶中含有的茶多酚物质的的总称，具有很高的养颜功效。贵州省贵定县盛产云雾山绿茶，含茶多酚的含量高达34.40%。采用乙醇萃取茶多酚获得浓缩的粗晶态茶多酚，然后进行贵定云雾贡茶茶多酚与BHT、Ve抗氧化性能对比实验,以及贵定云雾贡茶与其他茶叶抗氧化性能对比实验。关键词：云雾山茶叶 茶多酚 抗氧化性能 一、 实验目的：探究云雾贡茶茶多酚抗氧化能力1.实验物品介绍1.1 主要材料贵州地处祖国西南腹地，位于云贵高原之东部，而苗岭山脉横亘贵州中部、为长江和珠江两大流域的分水岭。其中云雾山就在此山脉中。贵定“云雾茶”，产于贵定海拔1580多米高的云雾山腰，云雾山风景秀丽，常年云雾缭绕，山上的茶叶也因此而得名。云雾山山体高大、生态环境独特，亚热带季风气候，日照长，云雾笼罩，光照柔和，散射光多，昼夜温差大，有利于物质积累和芳香物的形成。面朝阳，背夕阳，为“云雾茶”的香高味浓造就了得天独厚的自然环境。云雾茶芽叶肥大壮实，叶色绿，茸毛特多，芽形秀丽，内含物质丰富，按照国标GB52/34392规定，经传统工艺和现代新科技结合精制而成，外形美观，形若鱼钩，条索紧卷弯曲，白毫充分显露，色泽翠绿，香气鲜爽、浓烈，汤色黄绿明亮，滋味醇厚，回味甘甜、悠远，并具有独特浓厚的蜂蜜清香味。其成分含量为：氨基酸3.32%茶多酚34.40%，咖啡碱4.7%水浸出物44. 40%。该茶不仅能止渴，退热解暑，提神醒脑，消炎杀菌，而且有将脂将压，防癌辐射及保持美容、抗衰老等多种保健功能，有益于身心健康，因而在国内外享有盛名。因此本次实验的主要原材料取于贵定云雾山云雾贡茶1.2茶多酚作用调查吸收紫外线，防止晒伤自由基是引起衰老的重要因素，而紫外线是皮肤自由基的主要来源，茶多酚可直接吸收紫外线，因而茶多酚可直接阻止紫外线损失皮肤。有紫外线“过滤器”之称的茶多酚，是皮肤最大的有效保护剂。 抗氧化，防衰老茶多酚有清除自由基的作用，可抑制皮肤线立体中脂氧合酶和脂质过氧化作用，可以预防皱纹，延缓衰老。研究表明，茶多酚的抗氧性明显优于维生素E，且与维生素C、E有增效效应。抑制黑色素，美容护肤茶多酚是水溶性物质，用它洗脸能清除面部的油腻，收敛毛孔，具有消毒、灭菌、抗皮肤老化等功效。茶多酚能够阻挡紫外线和清除紫外线诱导的自由基，从而保护黑色素细胞的正常功能，抑制黑色素的形成。同时对脂质氧化产1.3研究价值研究的价值则为了当下空气的质量日趋下降，皮肤因此受损严重的现状作出改善，茶多酚的抗氧化能力是二丁基羟基甲苯（BHT）、丁基羟基茴香醚（BHA）的46倍，是Ve的67倍，Vc的510倍，而无合成物的潜在毒副作用。也是为了检验贵州得天独厚的地理区位条件的下的绿茶对人的影响。二实验过程2.1茶多酚的提取茶多酚是一种淡褐色至白色的无定型粉末, 易溶于水, 并可溶于乙醇、甲醇、丙酮、乙醚、乙酸乙脂, 不溶于氯仿。茶叶中含20%-30%的茶多酚, 八十年代以来,国内外对茶多酚提取方法都进行了大量的研究报道, 目前提取茶多酚的方法, 通常以成品绿茶、红茶、乌龙茶、速溶茶或鲜茶叶为原料,使用多种有机溶剂,或用对人体有害的重金属盐,步骤繁复,成本较高,有些产品不能脱咖啡碱,为其产品的商品化生产带来了困难。本实验采用目前较为先进的热水浸提, 以对人体无毒的石灰作为沉淀剂,然后用稀酸转溶得到液态抗氧化剂,经萃取得粗品态抗氧化剂。2.1.1工艺流程本实验所采用的工艺流程如下 浓缩焦糖色素 天然咖啡碱成品绿茶粉碎热水浸提抽滤脱咖啡碱稀酸转溶萃取 浓缩干燥粗晶态茶多酚2.1.2操作要点本实验以贵州云雾山绿茶为原料，粉碎成茶叶末，80热水二次浸提, 固液比分别为112；15。时问分别为15min；5min。通过抽滤，二次的总浸出率为70%,茶叶中的茶多酚、咖啡碱、氨基酸、色素、多糖类、维生素等水溶性物在浸提时溶出。2.1.3脱咖啡碱 加入饱和石灰水溶液,调节PH=9.使茶多酚完全沉淀，静置30min, 将沉淀物分离。咖啡碱留在上层分离液中，上层分离液经分离可得含咖啡碱的焦糖。使茶多酚形成金属盐沉淀，在碱性条件下，一方面蛋白质溶解度增加，降低蛋白质与茶多酚及氧化物的聚合；另一方面碱性环境下，羧基可破坏咖啡碱与茶多酚及其氧化物结合的分子间的氢键。从而使咖啡碱留存在溶液中。 避免茶多酚及氧化物再次与咖啡碱结合。2.1.4 茶多酚转溶 以稀硫酸调节茶多酚沉淀，使其PH=2。硫酸破坏茶多酚一钙化合物。Ca2+与硫酸反应生成硫酸钙沉淀。将茶多酚置换出来，达到转溶的目的。然后静置30min可将90%的茶多酚溶出。2.1.5 分离纯化 茶多酚转溶后经抽滤得到茶多酚溶液。2.1.6 萃取 在室温（251)、PH=1.6条件下，用乙酸乙酯与茶多酚溶液以11的比例进行萃取。时间5min。连续萃取二次。在各种有机萃取剂中。以乙醉、丙酮、乙酸乙酯萃取物的抗氧化效果最好, 而乙醚、正己烷的萃取物则无抗氧化性，其中又以乙酸乙醋的萃取率最高。2.1.7浓缩干燥 于水浴锅中, 85将乙酸乙酯萃取物进行浓缩干操，同时回收乙酸乙酚，成品为粗品态茶多酚，产品获得率为4.02%2.1.8实验图片2.2贵州云雾绿茶茶多酚与BHT、Ve抗氧化性能对比试验：2.2.1油脂氧化的自由基反应及抗氧化食品中所含油脂其主要成分都是各种脂肪酸甘油酯的混合物, 脂肪酸有饱和的，也有不饱和的。油脂及食品中的油脂在贮藏过程中会发生变质，特别是含有不饱和脂肪酸的甘油醋。由于其结构上有不饱和键的存在, 很容易和空气中的氧气发生自动氧化反应，生成过氧化物，进而又断裂分解, 产生具有臭味的醛或碳链较短的羧酸，食用含有过氧化物的脂肪食品，会进一步促使人体的脂肪过氧化, 过氧化的脂质可破坏生物膜，引起细胞功能衰退乃至组织的坏死诱发各种生理异常而导致疾病的发生。最近的研究表明，癌症的发生或人体的老化也与过氧化脂质有关。所以, 防止油脂及食品中油脂的氧化对人体的健康至关重要。 油脂的自动氧化是一种自由基反应，氧分子具有二价自由基结构吧 （O一O)，容易参加自由基反应，氧分子能夺取不饱和脂肪酸烯键位上的氢。从而引发自由基连锁反应，即油脂的自动氧化, 抗氧化剂能提供氢质子，能与脂肪酸自由基结合，使自由基转化为惰性化合物, 中止自由基的连锁反应，即中止油脂的自动氧化，抗氧化剂的机理以通式表示如下： Roo(过氧化自由基)+RH（抗氧化剂）ROOH- RH RH+ HR2R+H2 Roo+ RHROOH+ R 酚类物质具有较活泼的羧基氢，能提供氢质子，因此酚类物质常作为抗氧化剂，阻止或延缓油脂的自动氧化。2.2.2材料2.2.2.1猪油经熬炼, 过滤后待用。2.2.2.2茶多酚以贵州云雾绿茶为原料, 按上文方法在实验室中提取的粗晶态产物, 茶多酚含量90% 2.2.2.3 BHT：食品级2.2.2.4 Ve：市售药品Ve胶丸 2.2.3设备实验室常规分析仪器及设备。2.2.4方法准确称取50pm粗晶态的茶多酚,0.02%BHT(以50克猪油计),200mgVe , 茶多酚经用95%乙醇溶解后, 将这三种抗氧化剂分别加入盛有50克猪油的三个烧杯中, 另取50克猪油做空白试验。将四只烧杯于60下加热, 搅拌30min, 使加入物充分溶解混合, 之后放入60恒温水浴锅内作强氧化试验, 每隔一天测定其过氧化值(POV%), 测定方法按国家标准（GB5009.37-85)2.2.5结果及讨论2.2.5.1实验结果如下表：表一 贵州云雾绿茶茶多酚、BHT、Ve在猪油中抗暇化能力对照表 天数 POV抗氧化剂0123456789101112空白0.01000.01350.01910.02040.02530.02860.03150.03330.03760.03920.04380.05010.0569贵州云雾绿茶茶多酚0.01000.01060.01380.01470.01790.02020.02180.02250.02410.02590.02660.02810.0296BHT0.01000.01280.01520.01780.02070.02250.02380.02520.02610.02720.02860.03050.0326Ve0.01000.01330.01850.02020.02680.02810.03010.03290.03460.03830.04020.04310.0489 2.2.5.2结论通过12日的贵州的云雾山茶叶中提取的茶多酚与其他抗氧化剂的性能对比试验，我们可以看出贵州的云雾山茶叶中提取的茶多酚的抗氧化能力明显高于其他抗氧化剂。2.3云雾贡茶茶多酚与其他茶叶茶多酚抗氧化性能对比试验：2.3.1材料2.3.1.1猪油经熬炼, 过滤后待用。2.3.1.2茶多酚以贵州云雾绿茶为原料, 按上文方法在实验室中提取的粗晶态产物, 茶多酚含量90% 2. 3.1.3其他地区的绿茶提取出的粗晶态茶多酚，茶多酚含量90% 2.3.2设备实验室常规分析仪器及设备。2.3.3方法准确称取50pm粗晶态的云雾贡茶茶多酚、准确称取50pm粗晶态的其他地区的茶叶茶多酚, 将这两种抗氧化剂分别加入盛有50克猪油的两个烧杯中, 另取50克猪油做空白试验。将三只烧杯于60下加热, 搅拌30min, 使加入物充分溶解混合, 之后放入60恒温水浴锅内作强氧化试验, 每隔一天测定其过氧化值(POV%), 测定方法按国家标准（GB5009.37-85)2.3.4结果及讨论2.3.4.1实验结果如下表：表二 贵定云雾贡茶茶多酚、其他地区绿茶提取的茶多酚在猪油中抗暇化能力对照表 天数 POV抗氧化剂0123456789101112空白0.01000.01350.01910.02040.02530.02860.03150.03330.03760.03920.04380.05010.0569云雾贡茶茶多酚0.01000.01060.01380.01470.01790.02020.02180.02250.02410.02590.02660.02810.0296其他地区的绿茶茶多酚0.01000.011