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整合大概念整合大概念1培培养养基基一一般般都都含含有有水水、碳碳源源、氮氮源源和和无无机机盐盐,有有时时还还需需要要加加入入一一些些特特殊殊的的物物质质。()2消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害。()3为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落。()4选择培养基可以鉴定某种微生物的种类选择培养基可以鉴定某种微生物的种类。()5对细菌进行计数只能采用稀释涂布平板法,而不能用平板划线法对细菌进行计数只能采用稀释涂布平板法,而不能用平板划线法。()6筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中,尿素是唯一的氮源筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中,尿素是唯一的氮源。()7分分解解尿尿素素的的细细菌菌在在分分解解尿尿素素时时,可可以以将将尿尿素素转转化化为为氨氨,使使培培养养基基的的酸酸碱碱度度降降低低。()8统统计计菌菌落落数数目目时时为为保保证证结结果果准准确确,一一般般选选择择菌菌落落数数目目最最多多的的平平板板进进行行统统计计。()系统学习系统学习(一一)培养基及微生物的纯培养技术培养基及微生物的纯培养技术(释疑点释疑点)基础知识基础知识全面掌握全面掌握1培养基的配制培养基的配制(1)概概念念:人人们们按按照照微微生生物物对对_的的不不同同需需求求,配配制制出出的的供供其其_的的营养基质。营养基质。(2)种类种类营养物质营养物质生长繁殖生长繁殖划分标准划分标准种类种类特点特点用途用途物理性质物理性质_培培养基养基不加凝固剂不加凝固剂工业生产工业生产半固体培养基半固体培养基加凝固剂,如琼脂加凝固剂,如琼脂观察微生物的运动观察微生物的运动固体培养基固体培养基微生物分离、鉴定微生物分离、鉴定,_液体液体活菌计数活菌计数划分标准划分标准种类种类特点特点用途用途化学成分化学成分_培培养基养基含化学成分不明确的天然物质含化学成分不明确的天然物质工业生产工业生产_培培养基养基培养基成分明确培养基成分明确(用化学成分已用化学成分已知的化学物质制备知的化学物质制备)微生物的分类、鉴定微生物的分类、鉴定用途用途_培培养基养基允许特定种类微生物生长,同允许特定种类微生物生长,同时时_其其他种类微生物生他种类微生物生长的培养基长的培养基富集、分离出特定的微生物富集、分离出特定的微生物(如用以尿素为唯一氮源的培如用以尿素为唯一氮源的培养基筛选尿素分解菌养基筛选尿素分解菌)鉴别培养基鉴别培养基根据微生物的代谢特点,在培养根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物鉴别不同种类的微生物(如用如用伊伊红红-亚甲亚甲蓝培养基鉴别饮用蓝培养基鉴别饮用水中是否有大肠杆菌水中是否有大肠杆菌)天然天然合成合成选择选择抑制或阻止抑制或阻止(3)成分成分各各种种培培养养基基一一般般都都含含有有水水、_、氮氮源源和和_,此此外外还还要要满满足足微微生生物物生生长长对对_、特殊营养物质以及特殊营养物质以及O2的需求。的需求。碳源碳源无机盐无机盐pH2无菌技术无菌技术(1)含义:在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。含义:在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。(2)常用方法常用方法项目项目消毒消毒灭菌灭菌条件条件_的的物理、化学或生物等方法物理、化学或生物等方法强烈的理化方法强烈的理化方法结果结果杀杀死死物物体体表表面面或或内内部部的的部部分分微微生生物物(不不包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子)杀死物体内杀死物体内外外_(包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子)常用常用方法方法煮沸消毒法煮沸消毒法、_、化学药化学药剂消毒法、紫外线消毒法剂消毒法、紫外线消毒法_、干热灭菌干热灭菌、_较为温和较为温和所有的微生物所有的微生物巴氏消毒法巴氏消毒法湿热灭菌湿热灭菌灼烧灭菌灼烧灭菌3.微生物的纯培养微生物的纯培养(1)概概念念:由由_繁繁殖殖所所获获得得的的微微生生物物群群体体是是纯纯培培养养物物,获获得得_的的过程就是纯培养。过程就是纯培养。(2)过程:包过程:包括括_、灭菌、接种灭菌、接种、_和培和培养等步骤。养等步骤。(3)常用方法常用方法:_法和法和_法法。单一个体单一个体纯培养物纯培养物配制培养基配制培养基分离分离平板划线平板划线稀释涂布平板稀释涂布平板(4)实例实例酵母菌的纯培养酵母菌的纯培养链教材资料链教材资料发展科学思维发展科学思维1(选选择择性性必必修修3P10旁旁栏栏思思考考)无无菌菌技技术术除除用用来来防防止止实实验验室室的的培培养养物物被被其其他他外来微生物污染外,还有什么作用?外来微生物污染外,还有什么作用?提示:提示:还能有效避免操作者自身被微生物感染还能有效避免操作者自身被微生物感染。2(选择性必修选择性必修3P12“探究探究实践实践”思考分析思考分析)(1)为为什什么么需需要要使使锥锥形形瓶瓶的的瓶瓶口口通通过过火火焰焰?平平板板冷冷凝凝后后,为为什什么么要要将将平平板板倒倒置置?提提示示:通通过过灼灼烧烧灭灭菌菌,防防止止瓶瓶口口的的微微生生物物污污染染培培养养基基。平平板板冷冷凝凝后后,皿皿盖盖上上会会凝凝结结水水珠珠,凝凝固固后后的的培培养养基基表表面面湿湿度度也也比比较较高高,将将平平板板倒倒置置,既既可可以以防防止止培培养养基表面的水分过快地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。基表面的水分过快地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。(2)在在倒倒平平板板的的过过程程中中,如如果果不不小小心心将将培培养养基基溅溅在在皿皿盖盖与与皿皿底底之之间间的的部部位位,这这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?个平板还能用来培养微生物吗?为什么?提提示示:不不能能。因因为为空空气气中中的的微微生生物物可可能能在在皿皿盖盖和和皿皿底底之之间间的的培培养养基基上上滋滋生生,可能会造成污染。可能会造成污染。(3)平平板板划划线线法法在在作作第第二二次次以以及及其其后后的的划划线线操操作作时时,为为什什么么总总是是从从上上一一次次划划线线的末端开始划线?目的是什么?的末端开始划线?目的是什么?提提示示:划划线线后后,线线条条末末端端细细菌菌的的数数目目比比线线条条起起始始处处要要少少,第第二二次次以以及及其其后后的的划划线线从从上上一一次次划划线线的的末末端端开开始始,能能使使细细菌菌的的数数目目随随着着划划线线次次数数的的增增加加而而逐逐步步减减少少,最最终终能能得得到到由由单单个个细细菌菌繁繁殖殖而而来来的的菌菌落落。这这样样做做的的目目的的是是将将聚聚集集的的菌菌种种逐逐步步稀稀释释分散以便获得单个菌落分散以便获得单个菌落。重难盲点重难盲点讲练疏通讲练疏通微点释解微点释解(一一)培养基及消毒和灭菌培养基及消毒和灭菌1培养基营养成分的作用培养基营养成分的作用成分成分含义含义作用作用碳源碳源提供碳元素的物质提供碳元素的物质构成生物体细胞的物质和一些代谢物,构成生物体细胞的物质和一些代谢物,有些也是异养生物的能源物质有些也是异养生物的能源物质氮源氮源提供氮元素的物质提供氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢物合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢物无机盐无机盐为微生物提供除碳、氮以外为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素,包括大量的各种重要元素,包括大量元素和微量元素元素和微量元素是细胞的组成成分、生理调节物质、某是细胞的组成成分、生理调节物质、某些化能自养菌的能源,酶的激活剂等些化能自养菌的能源,酶的激活剂等水水生物体内含量很高的无机物生物体内含量很高的无机物不仅是良好的溶剂,而且可维持生物大不仅是良好的溶剂,而且可维持生物大分子结构的稳定分子结构的稳定2.比较消毒和灭菌比较消毒和灭菌方法方法条件条件结果结果常用方法常用方法应用范围应用范围消毒消毒较为温和的较为温和的物理、化学物理、化学或生物方法或生物方法仅杀死物体表面仅杀死物体表面或内部的部分微或内部的部分微生物生物煮沸消毒法煮沸消毒法日常用品日常用品巴氏消毒法巴氏消毒法不耐高温的液体,如牛奶不耐高温的液体,如牛奶化学药剂消毒法化学药剂消毒法用酒精擦拭双手,用氯气用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源消毒水源灭菌灭菌强烈的理化强烈的理化方法方法杀死物体内外所杀死物体内外所有的微生物,包有的微生物,包括芽孢和孢子括芽孢和孢子灼烧灭菌法灼烧灭菌法接种工具接种工具干热灭菌法干热灭菌法玻璃器皿、金属用具玻璃器皿、金属用具湿热灭菌法湿热灭菌法培养基及容器培养基及容器对点练习对点练习1大大肠肠杆杆菌菌是是寄寄生生于于人人和和动动物物肠肠道道中中的的细细菌菌,利利用用其其代代谢谢产产物物能能与与染染料料伊伊红红-亚亚甲甲蓝蓝反反应应,使使菌菌落落呈呈黑黑色色的的特特性性,从从而而将将其其鉴鉴别别出出来来。下下表表是是其其培培养养基基配配方方,相相关关叙述错误的叙述错误的是是()成分成分 蛋白胨蛋白胨 乳糖乳糖磷酸磷酸二二氢钾氢钾X蒸馏水蒸馏水2%伊红伊红水水溶溶液液0.5%亚甲亚甲蓝蓝水溶液水溶液含量含量10g10g2g2030g1000mL20mL13mLA.培养基配方中培养基配方中X的成分可以是琼脂的成分可以是琼脂B该培养基中蛋白胨提供的主要营养有碳源、氮源和维生素该培养基中蛋白胨提供的主要营养有碳源、氮源和维生素C可采用干热灭菌法对该培养基灭菌可采用干热灭菌法对该培养基灭菌D可利用培养基上菌落的特征来判断和鉴别大肠杆菌的存在可利用培养基上菌落的特征来判断和鉴别大肠杆菌的存在解析:解析:对培养基进行灭菌应该采用高压蒸汽灭菌法,对培养基进行灭菌应该采用高压蒸汽灭菌法,C错误错误。答答案:案:C2在在生生产产、生生活活和和科科研研实实践践中中,经经常常通通过过消消毒毒和和灭灭菌菌来来避避免免细细菌菌的的污污染染。回回答答下列问题:下列问题:(1)在在实实验验室室中中,玻玻璃璃和和金金属属材材质质的的实实验验器器具具_(填填“可可以以”或或“不不可可以以”)放放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)牛牛奶奶的的消消毒毒常常采采用用巴巴氏氏消消毒毒法法或或高高温温瞬瞬时时消消毒毒法法,与与煮煮沸沸消消毒毒法法相相比比,这这两两种方法的优点是种方法的优点是_。(3)密密 闭闭 空空 间间 内内 的的 空空 气气 可可 采采 用用 紫紫 外外 线线 照照 射射 消消 毒毒,其其 原原 因因 是是 紫紫 外外 线线 能能_。在照射前,适量喷洒。在照射前,适量喷洒_,可强化消毒效果。,可强化消毒效果。(4)水水厂厂供供应应的的自自来来水水通通常常是是经经过过_(填填“氯氯气气”“乙乙醇醇”或或“高高锰锰酸酸钾钾”)消消毒毒的。的。(5)某某同同学学在在使使用用高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌锅锅时时,若若压压力力达达到到设设定定要要求求,而而锅锅内内并并没没有有达达到到相应温度,最可能的原因是相应温度,最可能的原因是_。解解析析:(1)干干热热灭灭菌菌是是指指将将灭灭菌菌物物品品放放入入干干热热灭灭菌菌箱箱内内,在在160170的的热热空空气气中中维维持持23h。能能耐耐高高温温、需需要要保保持持干干燥燥的的物物品品,如如玻玻璃璃器器皿皿(吸吸管管、培培养养皿皿)和和金金属属用用具具等等,可可采采用用干干热热灭灭菌菌的的方方法法灭灭菌菌。(2)与与煮煮沸沸消消毒毒法法相相比比,巴巴氏氏消消毒毒法法或或高高温温瞬瞬时时消消毒毒法法可可以以杀杀死死牛牛奶奶中中的的绝绝大大多多数数微微生生物物,并并且且使使牛牛奶奶的的营营养养物物质质损损失失较较少少。(3)接接种种室室、接接种种箱箱或或超超净净工工作作台台在在使使用用前前,可可以以用用紫紫外外线线照照射射30min,紫紫外外线线能能破破坏坏微微生生物物的的DNA结结构构,从从而而杀杀死死物物体体表表面面或或空空气气中中的的微微生生物物。在在照照射射前前,适适量量喷喷洒洒石石炭炭酸酸或或煤煤酚酚皂皂溶溶液液等等消消毒毒液液,可可以以强强化化消消毒毒效效果果
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