仅供科研版本号：170313考马斯亮蓝G250染料试剂产品组成】ComponentSBJ-1008SSBJ-1008MStore at考马斯亮蓝G250染料试剂100ml500ml室温，避光保存条件】室温,避光,3 个月产品概述】Bradford法是常用的蛋白浓度检测的方法，与传统方法相比，更简单、更稳定、兼容性更好。Bradford 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中B -巯基乙醇的浓度可高达1M，DTT的浓度 可高达5mM。但受高浓度的去垢剂的影响明显，故在用BradfordProteinAssayKit进行蛋白定量时，需确保 SDS低于0.01%, TritonX-100低于0.05%，Tween20,60,80低于0.015%，含高浓度去污剂的蛋白定量，建议 采用 BCAProteinAssayKit。考马斯亮蓝G250染料试剂由考马斯亮蓝G250、乙醇、磷酸组成，用于考马斯染料结合(Bradford)分析 的总蛋白测量，其特点在于对蛋白样品中可能存在的大多数盐、溶剂、缓冲液、硫醇、金属螯合剂、还原性 物质等均不排斥。检测浓度下限达到25 u g/ml，最小检测蛋白量达到0.5ug,待测样品体积为120ul, 在501000 ug/ml浓度范围内有较好的线性关系。使用方法】1、稀释蛋白标准(一般为BSA5mg/ml)使其终浓度为0.5mg/ml。注意：蛋白样品在什么溶液中，蛋白标 准也应用什么溶液稀释，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释蛋白标准。2、将标准品按0,1,2,4,8,12,16,20 ul加到96孔板的蛋白标准孔中，加蛋白标准稀释液补足至20 ul。3、加适当体积样品到96孔板的样品孔中，补加标准品稀释液至20ul。4、各孔加入200 ul考马斯亮蓝G250染料试剂，室温放置35min。5、酶标仪测定 595nm 波长处的吸光值， 560610nm 之间的波长也可。6、根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。注意事项】1、待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也应溶解于什么样的稀释液中，否者待测蛋白与蛋白 标准中所含非蛋白成分不一致，有可能导致测定不准确。2、需可检测560610nm之间波长的酶标仪一台，最佳检测波长为595nm。3、建议每次测定时都做标准曲线。因为测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应的速度 和温度有关，所以除非精确控制显色反应的时间和温度，否则如需精确测定应每次都做标准曲线。4、如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但测定时，考虑根据比色皿的最小检测体积。 应按比例适当加大考马斯亮蓝G250染料试剂的用量使总体积不小于最小检测体积，样品和标准品的用量亦 相应按比例放大。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。南京森贝伽生物科技有限公司第1页网址：http:/www.senbeijia.com/