检测细胞中的DNA和RNA一、 学习任务分析检测细胞中的DNA与RNA是浙科版必修1第一章第三节中的建议活动，在实验的操作上看，本活动可以锻炼学生使用显微镜的高倍物镜的能力。同时，本活动能使学生增加对核酸的种类和性质的认识，为以后相关内容的学习打下基础。本活动将科学知识同实际操作相结合，突出了所学内容一定程度的实用应用性。二、学习者分析本活动的授课对象是高二年级的学生。从知识起点上来看，学生通过上节课的学习已经知道了一定程度的关于核酸的知识，他们自然会对“检测细胞中的DNA与RNA”的方法、过程以及原理产生兴趣，这正是促成学生进行本节活动的兴奋点。此外，学生通过初中实验已掌握了显微镜的运用方法，这为本活动的开展奠定了知识基础。而从认知思维起点上看，高二学生的思维方式已经开始从具象思维转向抽象思维，具备了一定的理论分析能力和逻辑思维能力。所以本活动应注重学生与教师的双向交流，引导学生积极思考，锻炼他们获取信息、从现象发掘本质、建构知识体系的能力。三、教学重难点1、教学重点：实验原理、显微镜的使用2、教学难点：甲基绿使DNA呈绿色，派洛宁使RNA呈红色。四、教学目标1、知识与技能目标： (1)能够分析说明DNA和RNA在结构上的不同点 (2)熟悉显微镜的使用方法2、过程与方法目标： (1)掌握制作装片的方法 (2)能够使用试剂对材料进行染色3、 情感态度和价值观目标： 在动手能力方面上得到培养，在学习态度上得以提升而变得更加积极、乐观。五、 教学过程1、实验原理分析(1)真核细胞的DNA主要分布在细胞核内，RNA主要分布在细胞质中。(2)甲基绿和派洛宁两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿对DNA亲和力强，使DNA显现出绿色，而派洛宁对RNA的亲和力强，使RNA呈现出红色。用甲基绿、派洛宁的混合染色剂将细胞染色，可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。(3)盐酸的作用 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜运输； 盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离，便于DNA与染色剂的结合。2、实验材料用具(1)材料：新鲜动物（蛙）肝脏。(2)用具：恒温水浴，100mL的烧杯，1000mL烧杯，量筒，滴管，天平，载玻片，盖玻片，吸水纸，显微镜。(3)试剂及配制方法 试剂：1mol/L的盐酸，蒸馏水（盛于滴瓶内），派洛宁甲基绿混装粉，乙酸钠，乙酸。如果实验室没有派洛宁甲基绿混装粉，可以分别用甲基绿和派洛宁G，然后按染色剂A液配制中的方法2进行配制。 染色剂的配制染色剂A液的两种配制方法方法1：取派洛宁甲基绿粉1g，加入到100mL蒸馏水中溶解，然后用滤纸过滤，将滤液放入棕色瓶中备用。方法2：取甲基绿2g溶于98mL蒸馏水中，取派洛宁G 5g溶于95mL蒸馏水中。取6mL甲基绿溶液和2mL派洛宁溶液加入到16mL蒸馏水中，即为A液，放入棕色瓶中备用。染色剂B液的配制方法：B液是一种缓冲液，由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠16.4g，用蒸馏水溶解至1000mL备用；再取乙酸12mL，用蒸馏水稀释至1000mL备用。取配好的乙酸钠溶液30mL和稀释的乙酸20mL，加蒸馏水50mL，配成pH为4.8的B液（缓冲液）。染色剂的配制染色剂是由A液和B液混合配制而成的。取A液20mL和B液80mL混合，就是实验中所用的甲基绿-派洛宁染液。应该注意的是该试剂应现用现配。3、实验步骤(1)涂片 取新鲜的动物肝脏切开，将其断面在一干净的载玻片中央涂抹数下，晾干。(2)水解 将盛有60mL 1mol/L盐酸溶液的小烧杯，置于30的恒温水浴中。将晾干的载玻片倾斜着浸没于30的盐酸溶液中水解10min（温度适中控制在301）。(3)漂洗 用镊子取出涂血的载玻片，用滴管向稍微倾斜的载玻片上加水，让水从一端缓慢流过血膜，这样反复冲洗2-3次。(4)染色 用吸水纸吸去血膜周围的水分，再将载玻片放入盛有60mL甲基绿-派洛宁染液的烧杯中，冲洗残存的染液，再次用吸水纸吸干血膜周围的水分。(5)观察 低：在低倍物镜下，寻找染色均匀，色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰； 高：转到高倍物镜，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。 在显微镜下，含RNA的区域被染成红色，而含DNA的区域被染成蓝绿色或淡绿色。注意RNA、DNA在细胞中的分布。4、注意事项(1)材料的选择 选用的实验材料既要容易获得，又要便于观察； 常用的观察材料：新鲜的动物肝脏(2)取材要点 动物肝脏要新鲜。(3)冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗。(4)换用高倍镜观察材料时，只能用细准焦螺旋进行调焦，切不可动粗准焦螺旋。5、实验相关知识(1)加入1mol/L盐酸进行水解的目的是：改变细胞膜通透性，加速染色剂进入细胞；使染色剂中的DNA与蛋白质分离；杀死细胞，有利于DNA与染色剂结合。(2)为什么要进行水解：甲基绿和派洛宁不是活细胞所需要的物质，正常情况下，无法穿过细胞膜进入细胞内，因此实验中使用盐酸破坏细胞膜，增加细胞膜的通透性，以方便染色剂进入细胞。同时，盐酸还能使细胞中染色体中的DNA和蛋白质分离，有利于DNA与甲基绿染色剂结合。(3)将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在盛有30温水的大烧杯中保温。水浴加热的目的是使小烧杯受热均匀。六、形成性评价 将对比自己做出来的实验结果和理想中的实验结果，发现其中的差异并分析产生差异的原因。