DNA的粗提取与鉴定教学目标：1、知识与能力目标理解DNA勺理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理，初步掌握DNA勺粗提取和鉴定方法，理解相关溶液的作用机理，培养学生的分析能力，通过实验使学生能够简述科学探究 的基本过程。2、情感态度与价值目标通过探索培养科学的怀疑精神和创新精神；通过实验结果，学生树立生命物质性的观点。教学重点：提取DNA勺相关原理和步骤教学难点：提取DNA勺相关原理和步骤教学过程：开门见山：讲解本实验的目的是提取 DN解口 DNA勺鉴定，其中提取 DNA是本实验的重点和难点。提出问题：“ DNAfe要存在于什么结构上？ ” “如何提取DNA ” “选什么材料好？”达成共识：1、造适宜材料：选动物细胞，易打破细胞结构2、破坏细胞膜、核膜结构，得核物质。3、将DNAW蛋白质等物质分开，得 DNA4、去掉 DNA中杂质，提纯 DNA探究实验原理：屏幕展示表格1NaCl2mo1/LNaC10.14mo1/LNaC10.015mo1/LDNA蛋白质表格2DNA蛋白质杂质95%酉精不同浓度的NaC1溶液可溶解或析出 DNA 95%g精可提取 DNA填表1 :NaCl2mo1/LNaC10.4mo1/LNaC10.015mo1/LDNA取大最小变大蛋白质解聚取大变小填表2:DNA蛋白质杂质95%酉精不溶可溶可溶通过对实验原理的预习，表格的比较，使学,生明确了各溶液的用途，保证理解实验。请学生代表简述DN砥取实验步骤投影展示实验设计思路：鸡血细胞液aDNA释放bDNAf蛋白质的分离 cDN丽出dDNAfet （提纯）获得鸡血细胞核物质：提核物质一溶解一析出一溶解一析出实验步骤：方法步骤加入物质目的1.制备鸡血细胞柠檬酸衲溶液2.提取鸡血细胞的细胞核物 质20 mL蒸圈水3,溶解细胞核内的DNA2 mol/L 的 NaCl 溶液 40 mL4.析出含DNA的黏稠物蒸僵水5,港取含DNA的黏稠物_ .-乱将DNA的黏稠物再溶解2 moVL 的 NaCl 溶液 2D mL7,过港含DNA的NaCl溶液乱提取含有杂质较少的DNA冷却的95%的酒精50 mL工DNA的鉴定A（1）向试管中加入0,015 mul/L的溶液5 mLC2）加入DNAC3）加入4 mL二基胺试剂B； （1）向前管中加入0.015 mol/L的NaCl溶液5 mL（2）加入4 mL二年胺试剂引导学生讨论、回忆并回答目的 逆。防止血凝。加速血细胞破裂。溶解DNA使2 mol/L的NaCl溶液稀释至0.14 mol/L，促DNAt大限度地析出。使含DNA的黏稠物被留在纱布上。使含DNA的黏稠物尽可能多地溶于溶液中。除去含DNA的滤液中的杂质。提取DNAA:出现蓝色。B:无变化讨论与结论：投影给出如下讨论提纲，供学生讨论。（1） DNA提取过程中的关键是哪几步？（2）提取鸡血中的DNA寸，为什么要除去血液中的上清液？（3） DNA勺直径约为2 nm,实验中出现的丝状物的粗细是否表示一个DN册子直径的大小？学生分组进行讨论并发表讨论结果。教师对讨论进行全程指导，并与学生一起归纳总结。（1） a.提取鸡血细胞的核物质。应用低渗原理和机械搅拌，可得到最大量的DNAb.析出DNAa稠物。加蒸储水要慢，搅拌要轻。c.沉淀DNAM,必须用冷酒精。（2）提取DNA去除杂质是关键。由于上清液是血液中的血浆部分，不含DNA所以要除去（含蛋白质）。（3）实验中出现的丝状物是肉眼可以观察到的，这种丝状物的直径要比DNA分子的直径2 nm大许多倍，所以实验中出现的丝状物并不表示一个DN册子 的直径。实验结论：细胞中有 DNA DNAM二苯胺试剂在沸水浴中变蓝色。教学目标巩固1 .实验中步骤1和步骤3都需要加入蒸储水，两次加入的作用相同吗？为什么？2 .实验中NaCl的物质的量浓度为 2 mol/L和0.14 mol/L 对DNAW何影响？3 . DNAM二苯胺（沸水浴）会染成 A .砖红色 B.橘黄色 C.紫色D .蓝色补充知识：1、鉴定DNA勺其他方法用紫外灯照射法鉴定 DN果很好。具体鉴定方法如下。1 .配制染色剂。用蒸储水配制万分之五的澳化乙锭（EB）溶液。2 .将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上，再滴一滴EB溶液染色。3 .将蜡纸放在紫外灯（260 nm）下照射（暗室中），可见橙红色的萤光（DNA的紫外吸收高峰 在 280 nm 处）。2、DNA粗提取与鉴定的另一种 方法1 .材料用具新鲜菜花（或蒜黄、菠菜）。塑料烧杯，量筒，玻璃棒，尼龙纱布，陶瓷研钵，试管，试管架，试管夹，漏斗，酒精灯，石棉网，三角架，火柴，刀片，天平。研磨液，体积分数为 95%勺酒精溶液，二苯胺试剂，蒸储水。2 .方法步骤A. DNA勺粗提取(1)准备材料：将 新鲜菜花和体积分数为 95%勺酒精溶液放入冰存f冷冻室，至少 24小时。(2)取材：称取30 g菜花，去梗取花，切碎。(3)研磨：将碎菜花放入研钵中，倒入10 mL研磨液，充分研磨 10 min。(4)过滤：在漏斗中垫上尼龙纱布，将菜花研磨液滤入烧杯中(有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心，用1000 r/min 的旋转频率，离心 25 min;取上清液放入烧杯.中)。在4c冰箱中放置 几分钟后，再取上清液。(5)加冷酒精：将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95%勺酒精溶液中，并且玻璃棒缓缓地轻轻搅拌溶液(玻璃棒不要直插烧杯底部)。沉淀35 min后，可见白色的 DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓 旋转，絮状物会缠在玻璃棒上。B. DNA勺鉴定(1)配制二苯胺试剂：取 0.1 mL B液；滴入到10 mL A液中，混匀。(2)鉴定：取4 mLDN碾取液放入试管中，加入 4 mL二苯胺试剂，混匀后观察溶液颜色(不 变蓝)。用沸水浴(100C)加热10 min。在加热过程中，随时注意试管中溶液颜色的变化(逐 渐出现浅蓝色)。结课：这节课咱们验证了细胞是由化合物按照一定的方式组成的这一结论。从知识结构角度来说，一要加深对生物的物质性理解；二要掌握一般的物质提取方法；三要注意不同的化学物质要用不同的原理鉴定。从实验过程角度来说，要理解各种溶液和试剂的作用和目的。