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.高效液相色谱图从这十种“奇葩峰”开始.2016-01-18实验与分析异常峰是色谱实验工作中最棘手的问题,通常是指色谱图中无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况,这些峰严重影响色谱分析的结果。色谱图中不可能有纯正的高斯对称峰,轻微的拖尾是正常的,这是由分离系统所决定的。本帖今天针对十种奇葩峰形进行分析。无规律的基线噪音可能原因:1、 漏液 :检查接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。(如有必要,更换密封。检查流通池是否漏液。 )2、流动相污染、变质或由低质溶剂配成 ,先 检查流动相 。3、检测器/记录仪电子元件的问题 :(断开检测器和记录仪的电源,检查并更正。)4、气泡 (系统内或检测器内): ( a、用强极性溶液清洗系统 b、清洗检测器。)5、流通池污染,即使是极少的污染物也会产生噪音。 (a、用甲醇等极性溶剂清洗流通池 b、用1N的硝酸(不能用磷酸)清洗流通池 )6、检测器灯能量不足,(更换灯 )。7、色谱柱填料流失或阻塞 。(a、更换色谱柱 )8、流动相混合不均匀或混合器工作不正常 。( a、维修或更换混合器,在流动相不走梯度时,建议不使用泵的混合装置 。)有规律的基线噪音可能原因:1、 在流动相、检测器或泵中有空气:(a、流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。 )2、漏液:(a、见第三部分。检查管路接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换泵密封。)3、流动相混合不完全:(a、用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂 )4、温度影响(柱温过高,检测器未加热):(a、减少差异或加上热交换器 )5、在同一条线上有其他电子设备:(a、断开LC、检测器和记录仪,检查干扰是否来自于外部,加以更正。) 精品.基线漂移可能原因:1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。) 2、流动相不均匀。流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。( a、使用HPLC级的溶剂,高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气,使用中使用氦气。)3、流通池被污染或有气体:( a、用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要,可以用1N的硝酸。)4、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成:(a、检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂 。)5、样品中有强保留的物质(高K值)以馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。鬼 峰即使不进样也会出现的峰双峰或分叉峰精品.峰展宽拖尾峰精品.前伸峰负峰宽 峰精品.保留时间的异常现象分析(一)保留时间变化 可能的原因 :1、流速变化:(a、重新设定流速 )。2、泵中有气泡 :(a、从泵中除去气泡 )。3、流动相选择不恰当 :( a、更换合适的流动相 b、选择合适的混合流动相) 。4、色谱柱没有平衡 (a、在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱 ;b、新安装的柱没有达到稳定状态)。(二)保留时间缩短 可能的原因 :1.流速增加 : 检查泵,重新设定流速 ;2.样品超载 : 降低样品量 ; 3.键合相流失 : 流动相PH值保持在37.5检查柱的方向; 4.流动相组成变化:防止流动相蒸发或沉淀; 5.温度增加 : 柱恒温 。(三)保留时间延长 可能的原因 : 1.流速下降:管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡; 2.硅胶柱上活性点变化 : 用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱; 3.键合相流失 : 流动相PH值保持在37.5检查柱的方向 ;4.流动相组成变化 : 防止流动相蒸发或沉淀 ;5.温度降低 : 柱恒温。如有侵权请联系告知删除,感谢你们的配合!精品
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