一种未知中枢抑制剂的ED50测定方法摘要本文通过对给定的三种作用于中枢神经系统药物的筛选，从而找出中枢抑制 剂，并通过合理有效的设计，以观察小鼠翻正反射为指标的质反应完成这种中枢 抑制剂的半数有效量即ED50的测定。在有限的实验条件下完成测定有着极强的现 实指导意义。实验方法设计简单、合理、科学，结论可信度高。对已知或未知的 药物，较短时间内获得其ED50均可参考此种方法。关键词ED50中枢抑制剂一、引言中枢神经系统的药物主要作用于递质和受体，如药理性质不明，给药剂量不 明确，会对病人产生毒性作用，治病却成为致病。药物药效的重要参数，能适当地 标志该药物的疗效和毒力水平。如半数有效量ED50、半数致死量LD50、治疗指 数TI等。二、材料2.1受试对象：小鼠、205g、实验前禁食12小时、腹腔注射给药。2.2试验材料：电子天平（分度值：O.OOlg）、注射器（lml）、量筒10ml、 刻度吸量管（5.00ml）、生理盐水。2.3供试药物：中枢兴奋药（7.5%）、中枢抑制药（2%）、安慰剂，以上均 由实验室提供（药物采取编号）。2.4被试因素：实验采用自身前后对照原则。三、方法3.1预试方法取18只小鼠，称重并随机单纯随机分为6组，并标记组别AF。A组小鼠分别按0.1ml/10g腹腔注射供试药品母液，定性判断供试品性质（中 枢兴奋药、中枢抑制药或安慰剂）。B组实验方法同上。（结果见表1）将抑制药母液按二分法稀释，方法同上，探索ED0、ED100。并观察给药后并 显效时间和维持时间。（表2）3.11预试指标：ED100观察小鼠翻正反射消失达到15分钟或以上，ED0观 察小鼠无特殊反应。32正式实验方法将小鼠编号，称重。单纯随机分为6组，每组8只，标记为AF。剂量计算：由预试结果找出的D（0.5%）和D . （0.375%），设正式实验剂maxmin量组数为n （n=6）,求出剂量公比r,n1 :Dr minD max 则各组剂量为D #-1, k为第几组（k=l,2,3） max第1组：0.5%第2组：0.5% X 0.944=0.472%第3组：0.5% X 0.944人2=0.445%第4组：0.5% X 0.944人3=0.420%第5组：0.5% X 0.944人4=0.397%第 6 组：0.5% X 0.944人5=0.375%采用各组每10g体重小鼠的用药容量相等，注射体积=0.lml/10g。321观察指标：以翻正反射消失为入睡指标，观察药物的催眠效应，记录各组腹 腔注射后15min内睡眠鼠数。（表3） 统计学数据处理：Bliss法计算得四、结果与分析表1 A、B组小鼠给药后现象药物编号121314小鼠编号A1、B1A2、B2A3、B3给药后小鼠现象惊厥、而后兴奋过 度、死亡镇静，挣扎，随后死亡无特殊反应推断药物中枢兴奋药中枢抑制药安慰剂由小鼠现象可得知13号药物腹腔给药后，出现镇静的生理现象，即可筛选出13号 药物为中枢抑制药。表1预实验-ED 0与ED 100的确定组 编号 重量（g）给药浓度给药量旳1）给药时间起始正反射束时间是否有效114.20.14214:3915:0015:50是C220.51.000%0.20515:0015:0115:52是317.40.17415:02死亡否118.20.18215:1215:1416:22是D215.70.500%0.15715:1415:1516:28是319.40.19415:1515:1716:20是120.10.20115:1815:20 .15:42 .是E216.40.375%0.16415:19否321.20.21215:21否117.90.17915:25/ /否F215.80.250%0.15815:26/ /否320.60.20615:27/ /否初步确定ED0约为0.375%,ED100约为0.5%。 Bliss法测中枢抑制药的ED50组别剂量()总动物数有效动物有效率()剂量对数概率单位(P+5)10.5008787.5-0.3286.15520.4728787.5-0.3716.15530.4458675.0-0.3765.67040.4208450.0-0.4015.00050.3978225.0-0.4354.33060.37581125-0.4623.850回归方程为：Y=12.7812+19.1860X； (r=0.9588)a=0.01时，查的r为：0.9170 (其中Y为概率单位加5后的值，X为计量的对 数 log X) 即 ED50=0.3930%置信系数a=0.05时的置信区间为：0.3710SED50S0.4164, 0.0251五、讨论(discussion)实验中得到结论为该种中枢抑制药物的ED50为0.3930%,即0.079g/100ml。 实验中，由于小白鼠的大小、性别不同，机体的生理状况及其药物耐受性会存在 较大差异。实验设计时遵循实验设计原则，选生理状况良好的小白鼠，以便有效 减少实验误差。由于小鼠体质所限，每次给药剂量少，在药物稀释配制时，应当注意精密配 制，腹腔注射给药时，注意推注速度要均一，避免药物浓度过高时推注过快到时 的假阳性反应。根据我们的实验经验可知，实验中，给药，配制药液，应由专人 配制，尽量避免由于个人操作的原因所带来的误差。若要对该种药物更多指标的评价，需要进一步设计实验方案，如 LD50，TI 等，有待进一步研究。六、参考文献(reference)1 谭毓治.药理学实验M.人民卫生出版社.2008.98-95,136-137.2 朱坤杰等.地西泮和戊巴比妥钠对两种小鼠镇静催眠作用强度的观察J. 现代生物医学进展,2006,6(8):44-45.3 梅福荣.0.3%戊巴比妥钠用于大鼠麻醉的方法J实验动物科学与管理,3003,20(3):43-45.