低离子聚凝胺技术低离子聚凝胺技术原理原理 聚聚凝凝胺胺（Polybrene），一一种种高高价价离离子子季季胺胺盐盐多多聚聚物物，溶溶解解后后能能产产生生很很多多正正电电荷荷，可可以以中中和和红红细细胞胞表表面面的的负负电电荷荷，使使红红细细胞胞之之间间距距离离减减小小，能能引引起起正正常常红红细细胞胞可可逆逆性性的的非非特特异异性性凝凝集集。如如果果是是抗抗体体致致敏敏的的红红细细胞胞被被聚聚凝凝胺胺凝凝集集，则则凝凝集集不可逆不可逆。LISS(低离子强度溶液低离子强度溶液)的原理的原理抗抗原原非离子非离子静电作用力静电作用力抗抗体体静电作用力静电作用力离子离子抗抗原原抗抗体体当溶液中离子增多时，抗原抗体之间的静电作用力减弱当溶液中离子增多时，抗原抗体之间的静电作用力减弱当溶液中缺少离子时，抗原抗体之间的静电作用力较强当溶液中缺少离子时，抗原抗体之间的静电作用力较强基本操作方法基本操作方法基本操作方法基本操作方法1 1、试管中加入待检血清或血浆、试管中加入待检血清或血浆、试管中加入待检血清或血浆、试管中加入待检血清或血浆1 1滴滴滴滴2 2、加入用、加入用、加入用、加入用LIMLIM溶液配置的溶液配置的溶液配置的溶液配置的2323的红细胞悬液的红细胞悬液的红细胞悬液的红细胞悬液2323滴滴滴滴3 3、摇匀，室温放置、摇匀，室温放置、摇匀，室温放置、摇匀，室温放置1 1分钟（时间长，效果好）分钟（时间长，效果好）分钟（时间长，效果好）分钟（时间长，效果好）4 4、加、加、加、加PolybrenePolybrene试剂试剂试剂试剂1 1滴，混匀后滴，混匀后滴，混匀后滴，混匀后3400rpm3400rpm离心离心离心离心1515秒秒秒秒5 5、轻摇观察由、轻摇观察由、轻摇观察由、轻摇观察由PolybrenePolybrene引起的红细胞非特异性凝引起的红细胞非特异性凝引起的红细胞非特异性凝引起的红细胞非特异性凝 集，若未见红细胞凝集则需重做试验集，若未见红细胞凝集则需重做试验集，若未见红细胞凝集则需重做试验集，若未见红细胞凝集则需重做试验6 6、加入、加入、加入、加入1 1滴重悬液，轻摇观察结果滴重悬液，轻摇观察结果滴重悬液，轻摇观察结果滴重悬液，轻摇观察结果 由由由由PolybrenePolybrene引起的非特异性凝集应在引起的非特异性凝集应在引起的非特异性凝集应在引起的非特异性凝集应在1 1分钟内分钟内分钟内分钟内完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散开散开散开散开 聚凝胺聚凝胺(Polybrene)配血方法配血方法患患者者献献血血者者主主侧侧次次侧侧室温放置室温放置1 分钟分钟主次侧均主次侧均加聚凝胺加聚凝胺 聚凝胺聚凝胺(Polybrene)配血方法配血方法离离心心聚凝胺引起聚凝胺引起红细胞非特红细胞非特异性凝集异性凝集阳阳性性阴阴性性主次侧均主次侧均加重悬液加重悬液看结果看结果经典操作方法经典操作方法经典操作方法经典操作方法1 1、试管中加、试管中加、试管中加、试管中加2 2滴待检血清或血浆，加滴待检血清或血浆，加滴待检血清或血浆，加滴待检血清或血浆，加1 1滴试剂红细胞滴试剂红细胞滴试剂红细胞滴试剂红细胞2 2、 加加加加LIMLIM溶液溶液溶液溶液0.60.6毫升（或毫升（或毫升（或毫升（或1212滴）混匀，室温放置滴）混匀，室温放置滴）混匀，室温放置滴）混匀，室温放置1 1 分钟分钟分钟分钟3 3、加、加、加、加PolybrenePolybrene试剂试剂试剂试剂2 2滴，混匀后滴，混匀后滴，混匀后滴，混匀后3400rpm3400rpm离心离心离心离心1515秒秒秒秒4 4、倒去上清液，轻摇观察由、倒去上清液，轻摇观察由、倒去上清液，轻摇观察由、倒去上清液，轻摇观察由PolybrenePolybrene引起的红细胞引起的红细胞引起的红细胞引起的红细胞 非特异性凝集，若未见红细胞凝集则需重做试验非特异性凝集，若未见红细胞凝集则需重做试验非特异性凝集，若未见红细胞凝集则需重做试验非特异性凝集，若未见红细胞凝集则需重做试验4 4、 加入加入加入加入1 1滴重悬液，轻摇观察结果滴重悬液，轻摇观察结果滴重悬液，轻摇观察结果滴重悬液，轻摇观察结果 由由由由PolybrenePolybrene引起的非特异性凝集应在引起的非特异性凝集应在引起的非特异性凝集应在引起的非特异性凝集应在1 1分钟内分钟内分钟内分钟内完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散开散开散开散开结果判定结果判定结果判定结果判定阴性结果：红细胞迅速散开，并在阴性结果：红细胞迅速散开，并在阴性结果：红细胞迅速散开，并在阴性结果：红细胞迅速散开，并在1 1分钟内完全散开分钟内完全散开分钟内完全散开分钟内完全散开阳性结果：红细胞不完全散开，弱凝集可能在阳性结果：红细胞不完全散开，弱凝集可能在阳性结果：红细胞不完全散开，弱凝集可能在阳性结果：红细胞不完全散开，弱凝集可能在3030分钟分钟分钟分钟 内明显减弱或消失，因此，以立刻观察结内明显减弱或消失，因此，以立刻观察结内明显减弱或消失，因此，以立刻观察结内明显减弱或消失，因此，以立刻观察结 果为准果为准果为准果为准质控试验：可以用阳性对照液代替待检血清，按同样质控试验：可以用阳性对照液代替待检血清，按同样质控试验：可以用阳性对照液代替待检血清，按同样质控试验：可以用阳性对照液代替待检血清，按同样 步骤进行质控试验，结果应为步骤进行质控试验，结果应为步骤进行质控试验，结果应为步骤进行质控试验，结果应为“ “1+”1+”的弱的弱的弱的弱凝凝凝凝 集集集集说明及注意事项说明及注意事项说明及注意事项说明及注意事项1 1、配置、配置、配置、配置LIM红细胞悬液：红细胞悬液：红细胞悬液：红细胞悬液： 取抗凝或不抗凝血样标本的压积红细胞可直接取抗凝或不抗凝血样标本的压积红细胞可直接取抗凝或不抗凝血样标本的压积红细胞可直接取抗凝或不抗凝血样标本的压积红细胞可直接加加加加LIM溶液配置悬液，若红细胞中含有较多血清或溶液配置悬液，若红细胞中含有较多血清或溶液配置悬液，若红细胞中含有较多血清或溶液配置悬液，若红细胞中含有较多血清或血浆，则需要用血浆，则需要用血浆，则需要用血浆，则需要用LIM溶液洗涤红细胞一次，红细胞溶液洗涤红细胞一次，红细胞溶液洗涤红细胞一次，红细胞溶液洗涤红细胞一次，红细胞 悬液为悬液为悬液为悬液为23%，该悬液可替代盐水红细胞悬液使用该悬液可替代盐水红细胞悬液使用该悬液可替代盐水红细胞悬液使用该悬液可替代盐水红细胞悬液使用2 2、加入血清量应严格按照操作方法，多加血清会提、加入血清量应严格按照操作方法，多加血清会提、加入血清量应严格按照操作方法，多加血清会提、加入血清量应严格按照操作方法，多加血清会提 高离子强度，降低致敏效果。高离子强度，降低致敏效果。高离子强度，降低致敏效果。高离子强度，降低致敏效果。3 3、使用肝素抗凝的血浆配血需多加、使用肝素抗凝的血浆配血需多加、使用肝素抗凝的血浆配血需多加、使用肝素抗凝的血浆配血需多加1 1滴滴滴滴Polybrene， 以中和肝素以中和肝素以中和肝素以中和肝素