新疆医科大学临床床检验方法的比方法的比对试验Zhang ZhaoxiaZhang ZhaoxiaZhang ZhaoxiaZhang ZhaoxiaThe Clinic laboratory The Clinic laboratory The Clinic laboratory The Clinic laboratory Department ofDepartment ofDepartment ofDepartment of Xinjiang Medical University Xinjiang Medical University Xinjiang Medical University Xinjiang Medical UniversityA A、复、复习测量量误差差一、一、测量量误差差 测量量误差差为测量量结果果减去被减去被测量的量的真真值的的差，差，简称称误差。差。 将将误差表示差表示为： 误差差= =测量量结果果- -真真值 = =随机随机误差差+ +系系统误差差复复习测量量误差差二、随机二、随机误差与系差与系统误差差 （一）随机（一）随机误差差(Random error RE)(Random error RE) 定定义：测量量结果与在重复条件下，果与在重复条件下，对同一被同一被测量量进行无限多次行无限多次测量所得量所得结果的平均果的平均值之差。之差。 重复条件：重复条件：是指在尽量相同的条件下，包括是指在尽量相同的条件下，包括测量程序、人量程序、人员、仪器器环境，以及尽量短的境，以及尽量短的时间间隔内完成隔内完成测量任量任务特点特点特点特点：不能估不能估计, ,无法避免无法避免 趋于正于正态分布：分布：对称性、有界性、称性、有界性、单峰性峰性 相当于不精密度相当于不精密度 不易不易纠正正, ,但可以控制在一定范但可以控制在一定范围之内之内来源来源来源来源：人人员因素、因素、仪器性能、操作器性能、操作误差以及差以及实验条条 件的改件的改变. .实际实际表示方法：表示方法：表示方法：表示方法：标准差（准差（S S）、）、变异系数（异系数（CV%CV%）控制方法控制方法控制方法控制方法: : : :严格格执行操作行操作规程程; ; 重复重复测定定; ;开展室内开展室内质控控. .复复习测量量误差差Random errorRandom error单峰性峰性有界性有界性对称性称性复复习测量量误差差( (二二) )系系统误差差(Systematic error SE)(Systematic error SE)定定义: :在重复性条件下，在重复性条件下，对同一被同一被测量量进行无限行无限多次多次测量所得量所得结果的平均果的平均值与被与被测量的真量的真值之之差称差称为系系统误差。亦称差。亦称为正确度正确度 特点特点: :按一定按一定规律重复出律重复出现; ; 不服从正不服从正态分布分布; ; 相当于不准确度相当于不准确度; ; 可以校正可以校正; ;来源来源: :方法方法误差、差、仪器或器或试剂误差、操作差、操作误差，差， 样本本误差等差等实际表示方法表示方法: :偏差偏差(Bias %)(Bias %)控制方法：控制方法：仪器的定期校准，方法学的更新与器的定期校准，方法学的更新与评价，空白及价，空白及对照照试验，严格格规章制度，开章制度，开展室内展室内质量控制。量控制。复复习测量量误差差复习测量误差均值真值T1.96s - TX一、准确度（一、准确度（Accuracy)Accuracy) 准确度是准确度是测量量结果中果中系系统误差差与与随机随机误差差的的综合合, ,表示表示测量量结果与真果与真值的一致程度。的一致程度。 准确度不能以数字表达，它往往以准确度不能以数字表达，它往往以不准不准确度确度来衡量来衡量, ,以不准确度的数据表达。以不准确度的数据表达。B B、复、复习准确度和精密度准确度和精密度 在在单次次测量量时，每个，每个测量都会量都会显示出某示出某种不准确的程度，即它与真种不准确的程度，即它与真值的偏离，的偏离，实际上，一个即使没有系上，一个即使没有系统误差的差的测量也不可能量也不可能产生准确的生准确的单次次测量量值，因，因为随机随机误差差为零零的几率的几率为零。零。复复习准确度和精密度准确度和精密度复复习准确度和精密度准确度和精密度（二）精密度（二）精密度（Precision)Precision) 表示表示测量量结果中随机果中随机误差大小的程度。差大小的程度。精密度是指在一定条件下精密度是指在一定条件下进行多次行多次测定定时, ,所所得得测定定结果之果之间的符合程度。的符合程度。 精密度无法直接衡量精密度无法直接衡量, ,往往以不精密度往往以不精密度表达表达, ,常用常用标准差准差(S)(S)或或变异系数异系数(CV%)(CV%)表示表示, ,较小的小的S S或或CVCV表示有表示有较高的精密度。高的精密度。( (三）准确度与精密度的关系三）准确度与精密度的关系 准确度与精密度准确度与精密度虽然概念不同然概念不同, ,但两者却但两者却有密切的关系，准确度是由系有密切的关系，准确度是由系统误差与随机差与随机误差所决定的。而精密度是由随机差所决定的。而精密度是由随机误差决定的，差决定的，准确度与精密度的关系如下准确度与精密度的关系如下: :精密度高准确度低精密度低准确度高精密度高准确度高精密度低准确度低复复习准确度和精密度准确度和精密度检验结果应该：准确精确迅速复复习分析方法分分析方法分级决定性方法（决定性方法（definitive methoddefinitive method）：）：经详尽研究尽研究尚未尚未发现不准确度或不确定性原因的方法。不准确度或不确定性原因的方法。参考方法（参考方法（reference methodreference method）：）：经详尽研究尽研究证实其不准确度与不精密度可以忽略的方法。其不准确度与不精密度可以忽略的方法。常常规方法（方法（routing methodrouting method）：可）：可满足足临床或其床或其他目的需要的日常使用的方法。他目的需要的日常使用的方法。分析方法分分析方法分级分析物分析物决定性方法决定性方法参考方法参考方法CaCaID-MSID-MS(同位素质谱法) 原子吸收分光原子吸收分光光度法光度法ClCl电量滴定量滴定中子活化法中子活化法电流滴定流滴定K KID-MSID-MS中子活化法中子活化法火焰光度法火焰光度法NaNa重量分析法中子活重量分析法中子活化法化法火焰光度法火焰光度法分析方法分分析方法分级分析物分析物决定性方法决定性方法参考方法参考方法GLUGLUID-MSID-MS己糖激己糖激酶法法CHOLCHOLID-MSID-MS胆固醇氧化胆固醇氧化酶法法TGTGID-MSID-MS酶法法TBILTBIL重氮法重氮法方法分方法分方法分方法分级级被被测物物决定性方法决定性方法参考方法参考方法血血细胞胞计数数ICSHICSH( (国国际血液学血液学标准化委准化委员会会)血清血清酶IFCCIFCC( (国国际临床化学床化学联合会合会) ) HbA1cHbA1cIFCC or NGSPIFCC or NGSP国家糖化血国家糖化血红蛋白蛋白标准化准化纲要要 常常常常规规方法方法方法方法参考方法参考方法参考方法参考方法决定性决定性决定性决定性 方法方法方法方法准确度增加准确度增加准确度增加准确度增加应应用范用范用范用范围围增加增加增加增加不同方法的关系不同方法的关系标准品分准品分级标准品（准品（reference materialreference material）：充分均匀并具有一个或）：充分均匀并具有一个或多个良好确定的特性多个良好确定的特性值的材料或物的材料或物质，用来校准，用来校准仪器器设备、评估估测定方法或定方法或给其它物其它物质赋值。一一级标准品（原准品（原级参考物）：具有最高参考物）：具有最高计量学特性的参量学特性的参考物考物质，由一，由一级参考参考测量量过程定程定值 二二级标准品：用一准品：用一级标准品校准，参考方法定准品校准，参考方法定值。校准品：用二校准品：用二级标准品校准，准品校准，拟被用于校准的常被用于校准的常规方法方法定定值。用于。用于对常常规方法和方法和仪器的校准。器的校准。方法的方法的评价的主要内容价的主要内容初步初步评价（价（NCCLS EP10NCCLS EP10） 精密度（精密度（ NCCLS EP5NCCLS EP5） 对比及偏差（比及偏差（ NCCLS EP9NCCLS EP9） 线性（性（ NCCLS EP6NCCLS EP6） 抗干抗干扰能力（能力（ NCCLS EP7NCCLS EP7） 基基质效效应（ NCCLS EP14NCCLS EP14） 临床准确度（床准确度（NCCLS GP10NCCLS GP10）如何保证检测的准确性1 1、溯源性（决定性方法、参考方法溯、溯源性（决定性方法、参考方法溯源来的源来的标准品）准品）2 2、参加室、参加室间质量量评价。价。3 3、与有溯源性的系、与有溯源性的系统进行比行比对方法一、按方法一、按NCCLSNCCLS文件文件EP9-AEP9-A ( ( 美国美国临床床实验室室标准化委准化委员会文件用患者会文件用患者样本本进行方法行方法对比及偏差比及偏差评估估- -批准指南批准指南 ) ) 1. 1. 首先首先选择一台本一台本实验室内技室内技术性能最好的性能最好的仪器，器，该仪器器应使用配套的校准物定期校正，使用配套的校准物定期校正，每天有每天有质量控制系量控制系统监控，并参加室控，并参加室间质评活活动， 各各项目均在可接受性能范目均在可接受性能范围之内。其他之内。其他仪器分器分别与与该仪器比器比较。比对试验操作步骤 2. 2.每日随机每日随机选取取8 8份份样本（其中本（其中应包括高、中、包括高、中、低低值），同），同时用各台用各台仪器按常器按常规样本本测定的方定的方法，法，测定其各定其各项参数，每份参数，每份样本本测定定2 2次，次，样本本排列的排列的顺序序为1 1、2 2、3 3、4 4、5 5、6 6、7 7、8 8、8 8、7 7、6 6、5 5、4 4、3 3、2 2、1 1。连续测定五天，共定五天，共4040份份样本。本。3.3.记录与与统计1 1 将每日将每日结果果记录、分、分别统计两台两台仪器器4040份份样本双份本双份测定的平均定的平均值、两台、两台仪器器测定的平定的平均均值。2 2 制制图a.a.散点散点图：Y Y轴：确定：确定仪器每器每样本双份本双份测定的定的均均值（Y Y）；）；X X轴：对比比仪器每器每样本双份本双份测定定的均的均值（X X）。）。b. b. 散点散点图：Y Y轴：确定：确定仪器每次器每次测定的定的值（YijYij）;X;X轴：对比比仪器每器每样本双份本双份测定的均定的均值（X X）。）。c.c.偏差偏差图：Y Y轴：每个：每个样本两台本两台仪器双份器双份测定的均定的均值差（差（Yi-XiYi-Xi）；）；X X轴：对比比仪器每器每样本双份本双份测定的均定的均值（x x），以直），以直线X=0X=0作作为水平中水平中线。d. Yd. Y轴：每个：每个样本两台本两台仪器每次器每次测定的差（定的差（Yij-Yij-XijXij）；）；X X轴：对比比仪器每器每样本双份本双份测定的均定的均值（x x），以直），以直线X=0X=0作作为水平中水平中线。4.4.目目测线性关系性关系5.5.检查方法方法间的离群点，的离群点，a.a.绝对值允允许误差范差范围b.b.相相对值允允许误差范差范围6.6.检查X X测定范定范围是否足是否足够宽7.7.线性回性回归：斜率：斜率b,yb,y轴截距截距a a的的计算。算。8.8.计算算预计偏差及其可信范偏差及其可信范围。c.c.残量和残量和标准准误的的计算；算；d.d.计算算给定的医学决定水平；定的医学决定水平；( (四四) )计算与核算与核对标准准1.1.通通过作作图直直观地分析地分析线性是否良好、偏差性是否良好、偏差大小如何、有无离群点等初步印象。大小如何、有无离群点等初步印象。2.2.目目测线性关系：性关系：观察两台察两台仪器器间的的线性关性关系。系。3.3.检查方法方法间的离群点可接受限的离群点可接受限为：4*E4*E即：即：4*4*两台两台仪器器间平均平均绝对差。差。4.4.检查X X测定范定范围是否足是否足够宽的依据是以的依据是以计算算相关系数相关系数r r，要求，要求 r0.975r0.975或或r20.95.r20.95.5.5.线性回性回归是用是用统计学的方法学的方法评价回价回归图的相的相关性。关性。6.6.可接受偏差大于可接受偏差大于预其偏差可信范其偏差可信范围的上限，的上限，有有97.597.5的可能性，的可能性，预期偏差小于可接受偏期偏差小于可接受偏差，差，说明参加比明参加比对的的仪器器测定的定的结果在可接果在可接受范受范围。反之。反之为不可接受。不可接受。方法二、方法二、简易比易比对方法方法1. 1. 首先首先选择一台本一台本实验室内技室内技术性能最好性能最好的的仪器，器，该仪器使用配套的校准物定期校器使用配套的校准物定期校正，每天有正，每天有质量控制系量控制系统监控，并参加控，并参加室室间质评活活动， 各各项目均在可接受性能范目均在可接受性能范围之内。其他之内。其他仪器分器分别与与该仪器比器比较。2.选择高、中、低浓度五份样本同时用各台仪器按常规样本测定的方法，测定其各项参数，每份样本测定2次，求其均值。3.3.计算与核算与核对标准准1 1 计算：按算：按PTPT计算方法算方法计算偏倚。算偏倚。 PT PT计算公式：（确定算公式：（确定仪器器测定定值- -比比对仪器器测定定值）/ /确定确定仪器器测定定值1001002 2 标准：准：仪器比器比较试验允允许偏倚范偏倚范围（B B为指定指定仪器器值） 项目目比比较允允许偏倚范偏倚范围% %白白细胞（胞（WBCWBC）B5%B5%红细胞（胞（RBCRBC）B2%B2%血血红蛋白（蛋白（HbHb）B2%B2%红细胞胞压积（HCTHCT）B2%B2%红细胞平均体胞平均体积（MCVMCV）B2%B2%红细胞平均血胞平均血红蛋白（蛋白（MCHMCH）B2%B2%红细胞平均血胞平均血红蛋白蛋白浓度（度（MCHCMCHC）B2%B2%血小板（血小板（PLTPLT）B10%B10%临床化学床化学质量控制允量控制允许偏倚范偏倚范围（T T指靶指靶值） 项目目允允许偏倚偏倚项目目允允许偏倚偏倚钾T0.5mmol/LT0.5mmol/L总胆固醇胆固醇T10%T10%钠T4mmol/LT4mmol/L淀粉淀粉酶T30%T30%氯T5%T5%肌酸激肌酸激酶T30%T30%总钙T0.25mmol/LT0.25mmol/LASTASTT20%T20%磷磷T20%T20%GGTGGTT20%T20%葡萄糖葡萄糖T10%T10%LDHLDHT20%T20%肌肌酐T15%T15%HDL-CHDL-CT30%T30%尿素尿素T9%T9%ALPALPT30%T30%总蛋白蛋白T10%T10%pOpO2 2T3sT3s白蛋白白蛋白T10%T10%pCOpCO2 2T8%T8%尿酸尿酸T17%T17%pHpHT0.04T0.04ALTALTT20%T20%LDL-CLDL-CT30%T30%总胆胆红素素T20%T20%APO-A1APO-A1T30%T30%三三酰甘油甘油T25%T25%APO-BAPO-BT30%T30%血凝血凝项目允目允许偏倚范偏倚范围）项目允许偏倚范围%PT-INRT15%APTTT15%FIBT20%TTT20%说明明2.2.如不符合要求如不符合要求应检查原因，重复原因，重复“操作操作步步骤”和和“计算和核算和核对标准准”重新比重新比对。3.3.仪器故障器故障检修后也要重复修后也要重复“操作步操作步骤”和和“计算和核算和核对标准准”重新比重新比对。4. 4. 书写和保存写和保存评价价报告，交科室存档。告，交科室存档。检验科比对记录