五章凝集反应Stillwatersrundeep.流静水深流静水深,人静心深人静心深Wherethereislife,thereishope。有生命必有希望。有生命必有希望第一节第一节 凝集反应的特点凝集反应的特点第二节第二节 直接凝集反应直接凝集反应第三节第三节 间接凝集反应间接凝集反应 一、间接凝集反应的类型一、间接凝集反应的类型 二、间接血凝试验二、间接血凝试验 三、胶乳凝集试验三、胶乳凝集试验 四、明胶凝集试验四、明胶凝集试验 五、间接凝集反应的应用五、间接凝集反应的应用第四节第四节 自身红细胞凝集试验自身红细胞凝集试验第五节第五节 抗球蛋白试验抗球蛋白试验思考题思考题小结小结第一节第一节 凝集反应的特点凝集反应的特点凝集反应定义凝集反应定义 细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒性抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应抗体（或抗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应抗体（或抗原）发生特异性反应，在适当电解质存在下，原）发生特异性反应，在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。形成肉眼可见的凝集现象。反应阶段：反应阶段：抗原抗体的特异性结合抗原抗体的特异性结合出现肉眼可见的凝集现象出现肉眼可见的凝集现象反应特点：反应特点：IgMIgM的作用比的作用比IgGIgG大数百倍大数百倍IgGIgG与抗原结合后，常不出现凝集反应，称不完全与抗原结合后，常不出现凝集反应，称不完全抗体抗体凝集反应凝集反应可见反应形成可见反应形成第二节第二节 直接凝集反应直接凝集反应直接凝集反应直接凝集反应(direct agglutination)： 颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。（一）玻片凝集试验（一）玻片凝集试验+ +方法评价方法评价: :定性试验定性试验简便和快速简便和快速敏感度低敏感度低临床应用临床应用: :菌种鉴定菌种鉴定血清学分型血清学分型血型鉴定血型鉴定 在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。现象。（二）试管凝集试验（二）试管凝集试验试管凝集试验试管凝集试验试管凝集试验试管凝集试验方法评价：方法评价：半定量试验半定量试验简便、快速简便、快速敏感度低敏感度低可有假阳性可有假阳性临床应用：临床应用：Widal reactionWeil-felix reactionWright test:布鲁菌病布鲁菌病交叉配血试验交叉配血试验第三节第三节 间接凝集反应间接凝集反应间接凝集反应间接凝集反应(indirect agglutination): 将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象现象载体种类载体种类：RBCRBC（醛化）醛化）聚苯乙烯胶乳颗粒（羧化）聚苯乙烯胶乳颗粒（羧化）正向间接凝集试验正向间接凝集试验反向间接凝集试验反向间接凝集试验间接凝集抑制试验间接凝集抑制试验协同凝集试验协同凝集试验一、间接凝集反应的类型一、间接凝集反应的类型用抗原致敏载体用抗原致敏载体-检测抗体检测抗体正向间接凝集试验正向间接凝集试验反向间接凝集试验反向间接凝集试验用抗体致敏载体用抗体致敏载体-检测抗原检测抗原间接凝集抑制试验间接凝集抑制试验用抗原致敏载体用抗原致敏载体-检测抗原检测抗原SPA:SPA-IgG Fc;SPA抗体致敏抗体致敏-测抗原测抗原协同凝集试验协同凝集试验二、间接血凝试验二、间接血凝试验1/21/21/41/41/81/81/161/161/321/321/641/641/1281/1281/2561/2561/5121/5121/10241/1024Pos.Pos.Neg.Neg.TiterTiter64648 851251222323212812832324 4PatientPatient1 12 23 34 45 56 67 78 8反向间接血凝试验反向间接血凝试验血凝试验强度血凝试验强度三、胶乳凝集试验三、胶乳凝集试验四、明胶凝集试验四、明胶凝集试验 将病毒抗原或重组抗原吸附于粉红将病毒抗原或重组抗原吸附于粉红色明胶颗粒上，当致敏颗粒与样品血清色明胶颗粒上，当致敏颗粒与样品血清作用时，若血清含有抗病毒抗体则可形作用时，若血清含有抗病毒抗体则可形成肉眼可见的粉红色凝集成肉眼可见的粉红色凝集 五、间接凝集反应的应用五、间接凝集反应的应用抗原的检测抗原的检测 反向间接凝集试验可用于检测病原反向间接凝集试验可用于检测病原体的可溶性抗原，也可用于检测各种蛋体的可溶性抗原，也可用于检测各种蛋白质成分。白质成分。抗体的检测抗体的检测检测细菌、病毒、寄生虫等感染后检测细菌、病毒、寄生虫等感染后产生的抗体。产生的抗体。 第四节第四节 自身红细胞凝集试验自身红细胞凝集试验未经致敏的受检者新鲜红细胞未经致敏的受检者新鲜红细胞试剂：试剂：抗人抗人O O型红细胞的单克隆抗体型红细胞的单克隆抗体临床应用临床应用：HIVHIV检测、检测、HBVHBV检测检测自身红细胞凝集试验自身红细胞凝集试验抗球蛋白试验抗球蛋白试验又称又称Coombs试验试验第五节第五节 抗球蛋白试验抗球蛋白试验（一）直接（一）直接CoombsCoombs试验试验不完全抗体不完全抗体检测红细胞上抗体检测红细胞上抗体（二）（二）间接间接CoombsCoombs试验试验检测血清中的抗红细胞抗体检测血清中的抗红细胞抗体临床应用：临床应用：在输血上的应用在输血上的应用血型抗原抗体的检查血型抗原抗体的检查对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断对溶血性贫血的研究对溶血性贫血的研究对细菌或立克次体的不完全抗体检查对细菌或立克次体的不完全抗体检查1 1凝集反应的特点是什么？凝集反应的特点是什么？2 2什么叫直接凝集反应，什么叫间接凝集反什么叫直接凝集反应，什么叫间接凝集反 应？它们之间有何异同？应？它们之间有何异同？3 3叙述间接血凝试验的原理。叙述间接血凝试验的原理。4 4彩色胶乳凝集试验的特点是什么？彩色胶乳凝集试验的特点是什么？5 5什么是不完全抗体？什么是不完全抗体？6 6什么是直接什么是直接Coombs? Coombs? 什么是间接什么是间接CoombsCoombs， 它们之间有何区别？它们之间有何区别？7 7叙述抗人球蛋白试验的类型及其原理？叙述抗人球蛋白试验的类型及其原理？8 8叙述抗人球蛋白试验的临床应用叙述抗人球蛋白试验的临床应用9 9凝集反应的优缺点是什么？凝集反应的优缺点是什么？1010凝集反应的发展趋势是什么？凝集反应的发展趋势是什么？思考题思考题小结小结 凝集反应是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被抗凝集反应是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被抗原的颗粒性载体与相应抗体结合后，可出现肉眼可见的凝原的颗粒性载体与相应抗体结合后，可出现肉眼可见的凝集现象。集现象。 可以分为直接凝集反应和间接凝集反应。可以分为直接凝集反应和间接凝集反应。 在临床检验中最常用的为间接血凝试验、胶乳凝集试验在临床检验中最常用的为间接血凝试验、胶乳凝集试验和明胶试验。和明胶试验。 抗球蛋白试验又称抗球蛋白试验又称为为Coombs试验，是检测抗红细胞不试验，是检测抗红细胞不完全抗体的一种很有用的方法。直接完全抗体的一种很有用的方法。直接Coombs试验用于病人试验用于病人红细胞上不完全抗体检测；间接红细胞上不完全抗体检测；间接Coombs试验用于检测游离试验用于检测游离的血清中的不完全抗体。的血清中的不完全抗体。