EGF对卵母细胞、胚胎体外发育的影响对卵母细胞、胚胎体外发育的影响 EGF对卵母细胞胚胎体外发育的影响 表皮生长因子表皮生长因子( (Epidermal growth factor简称简称EGF) )是是Cohen.S于于1962年研究神经生长年研究神经生长因子时发现的。因子时发现的。 EGF主要由颌下腺腺管细胞分泌，此外主要由颌下腺腺管细胞分泌，此外, ,十二指肠的十二指肠的Brunners腺，包括胰腺在内的其腺，包括胰腺在内的其他外分泌腺，均可分泌他外分泌腺，均可分泌EGF。EGF也也见于正于正常生理状常生理状态下的几乎所有体液中下的几乎所有体液中 。 EGF对卵母细胞胚胎体外发育的影响 EGF的分子结构的分子结构 目前已基本搞清楚小鼠目前已基本搞清楚小鼠EGF(mEGF)和和人人EGF(hEGF)的分子结构。在鼠领下腺和的分子结构。在鼠领下腺和人尿中分离出的人尿中分离出的EGF前体为前体为9000、28000和和30000个氨基酸残基的多肤，对热稳定个氨基酸残基的多肤，对热稳定, ,分子量分子量6054道尔顿，等电点道尔顿，等电点4.6，含有，含有3个个二硫键，活性中心位于二硫键，活性中心位于48-53氨基酸残基之氨基酸残基之间。间。EGF的三级结构为致密环状，的三级结构为致密环状，片层片层占占25 %，无规则卷曲占，无规则卷曲占75 % 。EGF对卵母细胞胚胎体外发育的影响 EGF的理化特性的理化特性 目前公认目前公认EGF有以下特点：有以下特点：EGF不是由不是由特殊腺体分泌的，而是由多种组织、多种细胞分特殊腺体分泌的，而是由多种组织、多种细胞分泌的。泌的。EGF无特异靶细胞，靶细胞谱很广。无特异靶细胞，靶细胞谱很广。EGF通过旁分泌通过旁分泌(paracrine) 和自分泌和自分泌(autocrine)的方式发挥作用。的方式发挥作用。EGF受体不仅受体不仅具有受体功能，而且具有酶活性，故既有结合配具有受体功能，而且具有酶活性，故既有结合配体发生构象变化的特点，又能作为激酶，催化底体发生构象变化的特点，又能作为激酶，催化底物蛋白发生酪氨酸磷酸化。物蛋白发生酪氨酸磷酸化。EGF对卵母细胞胚胎体外发育的影响 EGF的一般生物学效应的一般生物学效应 促进细胞的增殖促进细胞的增殖 增加物质的转运和糖代谢增加物质的转运和糖代谢 增加物质的转运和糖代谢增加物质的转运和糖代谢 对骨和钙代谢的影响对骨和钙代谢的影响 在体内在体内EGF能强化甲基胆蒽的致癌作用能强化甲基胆蒽的致癌作用 EGF刺激人真皮成纤维细胞内胶原酶的活性刺激人真皮成纤维细胞内胶原酶的活性 使之提高使之提高3 3倍。倍。 EGF对卵母细胞胚胎体外发育的影响 EGF对卵母细胞的影响对卵母细胞的影响 EGF在卵泡发育、卵母细胞成熟、胚胎早期在卵泡发育、卵母细胞成熟、胚胎早期发育、胚胎着床及子宫蜕膜化等过程中都起着重发育、胚胎着床及子宫蜕膜化等过程中都起着重要作用。有研究表明要作用。有研究表明EGF可提高体外成熟卵子的可提高体外成熟卵子的精子穿透率，使体外培养的小鼠胚胎精子穿透率，使体外培养的小鼠胚胎mRNA转录转录加快，蛋白质合成增加，加速细胞的分裂，从而加快，蛋白质合成增加，加速细胞的分裂，从而使得在相同的时间内，经使得在相同的时间内，经EGF处理胚胎的细胞数处理胚胎的细胞数多于未处理胚胎的细胞数。多于未处理胚胎的细胞数。EGF可以促进多种动可以促进多种动物如免、牛、猪、鼠物如免、牛、猪、鼠及及人等的卵子在体外成熟。人等的卵子在体外成熟。 EGF对卵母细胞胚胎体外发育的影响 EGF的促进功能是与其促进颗粒细泡的孕酮的促进功能是与其促进颗粒细泡的孕酮分泌作用分不开的。如果用孕酮合成关键酶分泌作用分不开的。如果用孕酮合成关键酶3-羟基甾醇脱氢酶（羟基甾醇脱氢酶（3-HSD）的抑制剂）的抑制剂Epostane抑制抑制3-HSD的活性，的活性，EGF的促进功能就减弱。的促进功能就减弱。EGF促进单层培养颗粒细胞的孕酮分泌作用也为促进单层培养颗粒细胞的孕酮分泌作用也为Epostane所抑制，证明所抑制，证明EGF是通过促使卵巢颗粒是通过促使卵巢颗粒细胞产生孕酮来实现其诱发小鼠卵母细胞减数分细胞产生孕酮来实现其诱发小鼠卵母细胞减数分裂重新启动功能的。裂重新启动功能的。 EGF对卵母细胞胚胎体外发育的影响 EGF可能还通过细胞内可能还通过细胞内Ca2+影响细胞的活影响细胞的活性。卵母细胞内的游离性。卵母细胞内的游离Ca2+在小鼠卵母细胞的在小鼠卵母细胞的减数分裂启动过程中起重要作用。通过显微注减数分裂启动过程中起重要作用。通过显微注射射CaCl2升高细胞内游离升高细胞内游离Ca2+浓度可以诱发卵浓度可以诱发卵母细胞母细胞GVBD。肝素钠可抑制细胞内三磷酸肌。肝素钠可抑制细胞内三磷酸肌醇醇IP3敏感钙库中敏感钙库中Ca2+的释放而降低的释放而降低EGF的促的促进作用，这表明进作用，这表明EGF可能是通过细胞内的可能是通过细胞内的Ca2+实现其生理功能的。实现其生理功能的。EGF对卵母细胞胚胎体外发育的影响 进一步的研究表明，进一步的研究表明，EGF和孕酮均可使卵丘和孕酮均可使卵丘细胞内细胞内Ca2+有一个波动过程，然后恢复到比原来有一个波动过程，然后恢复到比原来高或低于原来的水平，所以高或低于原来的水平，所以EGF可能是通过与卵可能是通过与卵丘细胞膜上的受体结合，经过丘细胞膜上的受体结合，经过Ca2+升高传递信号升高传递信号促进孕酮合成，孕酮在促进孕酮合成，孕酮在Ca2+的参与下促进了卵母的参与下促进了卵母细胞减数分裂的启动。也可能是细胞减数分裂的启动。也可能是EGF使卵丘细胞使卵丘细胞内内Ca2+水平升高并直接进入卵母细胞而促进减数水平升高并直接进入卵母细胞而促进减数分裂的启功。分裂的启功。EGF对卵母细胞胚胎体外发育的影响 EGF对胚胎体外发育的影响对胚胎体外发育的影响 EGF可激活胞质膜结合的可激活胞质膜结合的Na+ +/ /K+ +转换子，转换子，而而Na/ /K 转换子活性是囊胚腔形成所必需的。转换子活性是囊胚腔形成所必需的。因此推测，因此推测，EGF 可能是通过激活胚胎细胞质膜可能是通过激活胚胎细胞质膜上上Na/ /K 转换子而加速胚泡腔形成，并引起转换子而加速胚泡腔形成，并引起胚泡腔液体迅速增多，从而促进了囊胚扩展。胚泡腔液体迅速增多，从而促进了囊胚扩展。与此同时，与此同时， 也有证据表明，也有证据表明，EGF 可激活滋养可激活滋养层细胞的纤维蛋白溶酶原，促进透明带的溶解，层细胞的纤维蛋白溶酶原，促进透明带的溶解，使囊胚从透明带孵出，这可能就使囊胚从透明带孵出，这可能就EGF可提高囊可提高囊胚孵出率的化学机制。胚孵出率的化学机制。 EGF对卵母细胞胚胎体外发育的影响 EGF及其受体在雌性哺乳动物的生殖过程中及其受体在雌性哺乳动物的生殖过程中发挥了十分重要的作用。发挥了十分重要的作用。EGF及其受体在子宫及及其受体在子宫及输卵管中都有表达，并通过输卵管中都有表达，并通过EGF及其受体的相互及其受体的相互作用，能够促进卵泡的发育，卵母细胞的成熟，作用，能够促进卵泡的发育，卵母细胞的成熟，早期胚胎发育。然而，目前对早期胚胎发育。然而，目前对EGF及其受体的研及其受体的研究虽然取得了一些成果，但具体的作用机理以及究虽然取得了一些成果，但具体的作用机理以及信号通路还不是十分清楚。尤其是对于信号通路还不是十分清楚。尤其是对于EGF和和EGFR在影响早期胚胎发育中的机制有待于进一在影响早期胚胎发育中的机制有待于进一步的研究，这对于揭示胚胎早期发育机理以及胚步的研究，这对于揭示胚胎早期发育机理以及胚胎工程的发展有十分重要的意义。胎工程的发展有十分重要的意义。 EGF对卵母细胞胚胎体外发育的影响Thank you very much for your attention!EGF对卵母细胞胚胎体外发育的影响