一、解释下列名词1伴胞晶体 ：少数芽孢杆菌在其形成芽孢的同时，会在芽孢旁边形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体内毒素 , 称为伴胞晶体（59）2菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体，成为菌落。3选择培养基：用来将某种或某种微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。根据不同种类微生物的特殊营养需求或对某种化学物质的敏感性不同，在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，一直不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。（91）4革兰氏阳性菌：在革兰氏染色法里，通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞膜内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物。革兰氏阳性菌由于其细胞壁厚度大和肽聚糖网层次多和交联致密，故遇乙醇或丙酮酸脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，在加上它不含类脂，故乙醇处理不会溶出缝隙，因此能吧结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色。（49）革兰氏阳性菌细胞壁特点是厚度大、化学组分简单，一般只含90%肽聚糖和10% 磷壁酸，从而与层次多、厚度地、成分复杂的革兰氏阴性菌的细胞壁有明显的差别。革兰氏阴性菌因含有LPS外膜，故比革兰氏阳性菌更能抵抗毒物和抗生素对其毒害。（40）5LPS:脂多糖 ，位于革兰氏阴性菌细胞壁最外层的一层较厚的类脂多糖类物质，由类脂、可信多糖和O-特异侧脸三部分组成。（43）6营养缺陷型 ：某些菌株发生突变（自然突变或人工诱变）后，失去合成某种（或某些）对该菌株生长必不可少的物质（通常是生长因子如氨基酸、维生素）的能力，必须从外界环境获得该物质才能生长繁殖，这种突变型菌株成为营养缺陷性（85）(218) 7氨基酸异养型生物：不能合成某些必须的氨基酸，必须从外源提供这些氨基酸才能成长，动物和部分异养微生物为氨基酸异养型生物。如乳酸细菌需要谷氨酸、天门冬氨酸、半胱氨酸、组氨酸、亮氨酸和脯氨酸等外源氨基酸才能生长。（baidu) （氨基酸自养型：能以无机氮为唯一氮源，合成氨基酸，进而转化为蛋白质及其他含氮有机物。8芽孢 ：某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成一个圆形或团圆性、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体（ 55）9鉴别培养基：用于鉴别微生物。在培养基中加入某种特殊化学物质，某种微生物在培养基中生长后能产生某种带些产物，而这种带些产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征性变化，根据这种特征性变化，可讲该种微生物与其他微生物区分开来（91）10 PHB ：聚 -B- 羟丁酸，直径为0.20.7um 的小颗粒，是存在于许多细菌细胞质内属于类脂兴致的碳源类贮藏无。不溶于水，可溶于氯仿，可用尼罗蓝或苏丹黑染色。具有贮藏能量、碳源和降低细胞内渗透压的作用。 （53）11 糖被 ：包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的胶状物质。（60）精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页，共 27 页12 假丝酵母：有些酵母菌与其子代细胞连在一起成为链状。称为假丝酵母，如解脂假丝酵母（145）13 碳氮比 ：指培养基中碳元素与氮元素的摩尔数比值，有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比（87）14化能（有机）异养型：碳源通常是有机物，大多数细菌、真菌、原核生物都是此类型，根据其生物利用的有机物性质的不同，又可分为腐生型和寄生型，前者用无生命的有机物作为碳源，后者寄生在活的寄主机体内吸取营养物质，离开寄主就不能生存。还包括兼性腐生型和兼性寄生型。（85）15担子菌 ：多细胞的菌丝体组成的有机体，其有性繁殖是通过担子上着生出外生孢子担孢子来进行。（383）16. 菌株 ：表示任何由一个独立分离的单细胞繁殖而成的纯种群体极其一切后代；实际上是一个微生物达到遗传性纯的标志。 （334）17. 微生物的种 ：种是最基本的分类单位, 它是一大群表型特征高度相似，亲缘关系极其相近，与同属内其它种有着明显差异的菌株的总称。18. CFU : 采用菌落计数法时，由于不能绝对保证一个菌落只是由一个活细胞形成，计算出的活细胞数称为菌落形成单位（152）二、问答题1. 简述证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则。（7）柯赫法则： 1 在每一相同病例中都出现这种微生物 2要从寄主分离这种微生物并在培养基上培养 3接种健康寄主，生同样的病 4从实验发病的寄主能在分离这种微生物2. 若要从环境中分离得到厌氧固氮菌，请问如何设计实验？一、接种：灭过菌的、盛有无氮培养基的培养皿，没有生长任何微生物的培养皿供实验用，取土壤，放在无菌研钵中，注入5mL无菌水，并用无菌玻璃棒搅拌均匀，接种环灭菌接种稀泥浆于培养基的表面上二、培养：将接过种的培养皿放入恒温箱内，在28 30的温度下培养三、观察： 34d 后，观察培养基上稀泥浆周围长出的培养物黏液。黏液初为无色透明，以后为乳白色，最后变成褐色，表明含有自生固氮菌。四、镜检：加结晶紫染色，干燥，在显微镜下观察，可以看到染成紫色的自生固氮菌。3. 在分离与培养极端嗜盐菌时，倾倒培养平板、接种划线、挑取菌落等系列操作常常是在日常环境中进行，而其研究结果并没有受到杂菌的影响，为什么？极端嗜盐菌多生活于饱和盐水这样恶劣的极端环境中，一般的杂菌不能忍受这种高钠环境，无法维持正常的精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页，共 27 页细胞形态等继而生长。 （30） （375）4. 采用什么方法分离到能分解苯作为碳源的细菌纯培养物？将细菌放入以苯作为碳源的培养基中培养，能够正常生长成为菌落的再进行筛选、过滤5 如何防止微生物菌种的衰退？常用菌种保藏方法有哪些？“ATCC ”是一个什么组织？防止微生物菌种的衰退：1 减少传代次数 2 创造良好的培养条件 3 经常进行纯种分离并对相应的性状指标进行检查 4 采用有的菌种保藏方法常用菌种保藏方法1、传代培养保藏 2 、冷冻保藏 3 、干燥保藏ATCC: 美国菌种保藏中心，又称美国模式菌种收集中心6 试比较革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌之间的区别成 分革兰氏阳性细菌革兰氏阴性细胞肽聚糖磷壁酸类脂质蛋白质含量很高（ 30-95）含量较高（ 50）一般无（ 2）0 含量很低（ 520）0 含量较高（约20）含量较高7 霉菌孢子与细菌芽孢有何区别？霉菌孢子细菌芽孢大小大小数目一条菌丝或一个细胞产多个一个细胞只产一个形态多样简单形成部位细胞内或外细胞内细胞核真核原核功能最重要的繁殖方式不是繁殖方式，是抗性构造（休眠方式）抗热性不强 60-70 极强 100数十分钟产生菌绝大多数种类少数菌8. 根据你所学的知识，阐述我们可以根据微生物的哪些特点在哪些方面去利用有益微生物造福人类。（10）微生物的特性和共性：微生物有其他生物学不具备的生物学特性。如。可在在其他生物无法生存的极端环境下生存和繁殖，具有其他生物不具备的代谢途径和功能，如化能营养、厌氧生活、生物固氮和不释放氧的光合作用等，反应了微生物极其丰富的多样性。微生物有其他生物共有的基本生物学特征：生长、繁殖、代谢、公用一套遗传密码等，甚至其基因组上含有与高等生物同源的基因，充分反映了生物高度的统一性。易操作性：微生物个体小、繁殖快（生长周期短）、易大量培养、易变异、重复性强分布广、结构简单、等级低9 微生物发展史上代表人物形态学时期列文虎克：微生物学的先驱者，利用自制显微镜看到了细菌和原核生物生理学时期巴斯德，曲颈瓶实验，正式发酵是由微生物引起的，巴斯德消毒法。科赫，流动蒸汽灭菌、细菌培养方法、各种培养基、染色观察、显微摄影。发展期 E.B chner 生物化学奠基人，用无细胞存在的酵母菌抽提液对葡萄糖进行酒精发酵成功精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页，共 27 页分子生物学水平研究阶段J.Watson 和 F.Crick：分子生物学奠基人，提出DNA双螺旋结构弗莱明发现青霉素放线菌之父瓦克斯曼10 细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类微生物的菌落有何不同？（P59，周德庆）它们的细胞壁成分的异同？菌落细菌酵母菌放线菌霉菌含水形态很湿或较湿较湿干燥或较干燥干燥外观形态小而突起或大而平坦大而突起小而紧密大而疏松或大而致密菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明菌 落 与 培 养基 结 合程度不结合不结合牢固结合较牢固结合菌落颜色多样单调，一般呈乳脂或矿烛色，少数红色或黑色十分多样十分多样菌 落 正 反 面颜 色 的差别相同相同一般不同一般不同菌落边缘一 般 看 不 到 细胞可见球状， 卵圆状或假丝状细胞有时可见细丝状细胞可见粗丝状细胞气味一般有臭味多带酒香味带有泥腥味往往有霉味细菌分为G+和 G-，G+ 肽聚糖含量高，G-含量低； G+ 磷壁酸含量较高，而G-不含磷壁酸；G+ 类脂质一般无，而 G-含量较高； G+ 不含蛋白质，G-含量较高。放线菌为G-，其细胞壁具有G-所具有的特点。酵母菌和霉菌为真菌，酵母菌的细胞壁外层为甘露聚糖，内层为葡聚糖；而霉菌的细胞壁成分为几丁质、蛋白质、葡聚糖。11 细菌细胞的特殊结构中糖被、芽孢、伴胞晶体功能、在科学研究及生产实践中有何应用糖被：在制药工业和试剂工业中提取葡聚糖以制备“代血浆”或葡聚糖生化试剂；利用野油菜黄单胞菌的粘液层可提取十分有用的胞外多糖黄原胶，可用于是由开采中的钻井液添加剂，也可用于印染、食品等工业。产生菌胶团的细菌在午睡的微生物处理过程中有分解、吸附和沉降有害物质的作用。半孢晶体：对200 多种昆虫尤其是鳞翅目的幼虫有毒杀作用，可将这类细菌制成有利于环境保护的生物农药细菌杀虫剂芽孢（见14）12 食用菌的定义、种类；食用菌形态特点食用菌一般是指可食用的有大型子实体的高等真菌，分类上主要属于担子菌亚门，其次为子囊菌亚门。其蛋白质丰富，多糖含量高，营养含量较平衡，味道鲜美，有的还具有保健功效。我国已知的使用菌有720 多种。颜色各异、形态多样。（450）13 试举一例说明一些重要的食用菌所具有的主要价值、功能和用途。黑木耳木耳中铁的含量极为丰富，故常吃木耳能养血驻颜，令人肌肤红润，容光焕发，并可防治缺铁性贫血； 2、木耳含有维生素K，能维持体内凝血因子的正常水平，防止出血； 3 、木耳中的胶质可把残留在人体消化系统内的灰尘、杂质吸附集中起来排出体外，从而起到清胃涤肠的作用；它对胆结石、肾结石等内源性异物也有比较显著的化解功能；它还有帮助消化纤维类物质功能，对无意中吃下的难以消化的头发、谷壳、木渣、沙子、金属屑等异物有溶解与烊化作用，因此，它是矿山、化工和纺织工精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页，共 27 页人不可缺少的保健食品；木耳含有抗肿瘤活性物质，能增强机体免疫力，经常食用可防癌抗癌。降血脂及抗动脉粥样硬化的作用、延缓衰老作用、抗辐射及抗炎作用、抗溃疡作用、降血糖作用、抗生育作用、抗癌、抗突变作用、抗菌作用功效：木耳中的胶质可把残留在人体消化系统内的灰尘、杂质吸附集中起来排出体外，从而起到清胃涤肠的作用。同时，它还有帮助消化纤维类物质功能，对无意中吃下的难以消化的头发、谷壳、木渣、沙子、金属屑等异物有溶解与烊化作用。它对胆结石、肾结石等内源性异物也有比较显著的化解功能。黑木耳能减少血液凝块，预防血栓等病的发生，有防治动脉粥样硬化和冠心病的作用。它含有抗肿瘤活性物质，能增强机体免疫力，经常食用可防癌抗癌。美容减肥黑木耳中铁的含量极为丰富，故常吃木耳能养血驻颜，令人肌肤红润，容光焕发，还可防治缺铁性贫血；胡萝卜素进入人体后，转变成维生素A，有润泽皮肤毛发的作用。卵磷脂在体内可使体内脂肪呈液质状态，有利于脂肪在体内完全消耗，带动体内脂肪运动，使脂肪分布合理，形体匀称。纤维素促进肠蠕动，促进脂肪排泄，有利于减肥。金针菇1. 金针菇含有人体必需氨基酸成分较全，其中赖氨酸和精氨酸含量尤其丰富，且含锌量比较高， 对增强智力尤其是对儿童的身高和智力发育有良好的作用，人称“增智菇”；精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页，共 27 页2. 金针菇中还含有一种叫朴菇素的物质，有增强机体对癌细胞的抗御能力，常食金针菇还能降胆固醇，预防肝脏疾病和肠胃道溃疡，增强机体正气，防病健身；3. 金针菇能有效地增强机体的生物活性，促进体内新陈代谢，有利于食物中各种营养素的吸收和利用，对生长发育也大有益处，因而有“增智菇”、“一休菇”的美称；4. 金针菇可抑制血脂升高，降低胆固醇，防治心脑血管疾病；5. 食用金针菇具有抵抗疲劳，抗菌消炎、清除重金属盐类物质、抗肿瘤的作用。6. 经常食用金针菇，不仅可以预防和治疗肝脏病及胃、肠道溃疡，而且也适合高血压患者、肥胖者和中老年人食用，这主要是因为它是一种高钾低钠食品。香菇香菇具有高蛋白、低脂肪、多糖、多种氨基酸和多种维生素的菌类食物。1. 提高机体免疫功能：香菇多糖可提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能，还可促进 T淋巴细胞的产生，并提高T 淋巴细胞的杀伤活性；2. 延缓衰老： 香菇的水提取物对过氧化氢有清除作用，对体内的过氧化氢有一定的消除作用；3. 防癌抗癌：香菇菌盖部分含有双链结构的核糖核酸，进入人体后，会产生具有抗癌作用的干扰素；精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页，共 27 页4. 降血压、降血脂、降胆固醇：香菇中含有嘌呤、胆碱、酪氨酸、氧化酶以及某些核酸物质，能起到降血压、降胆固醇、降血脂的作用，又可预防动脉硬化、肝硬化等疾病。 5. 香菇还对糖尿病、肺结核、传染性肝炎、神经炎等起治疗作用，又可用于消化不良、便秘等。香菇营养成分一览银耳1. 银耳能提高肝脏解毒能力，起保肝作用；银耳对老年慢性支气管炎、肺原性心脏病有一定疗效；2. 银耳富含维生素D，能防止钙的流失，对生长发育十分有益；因富含硒等微量元素，它可以增强机体抗肿瘤的免疫力；3. 银耳富有天然植物性胶质，加上它的滋阴作用，长期服用可以润肤，并有祛除脸部黄褐斑、雀斑的功效；4. 银耳中的有效成分酸性多糖类物质，能增强人体的免疫力，调动淋巴细胞，加强白细胞的吞噬能力，兴奋骨髓造血功能；银耳多糖具有抗肿瘤作用。5. 银耳中的膳食纤维可助胃肠蠕动，减少脂肪吸收，从而达到减肥的效果。 6. 银耳还能增强肿瘤患者对放疗、化疗的耐受力药用价值银耳发醇液，多糖和多糖均能增强巨噬细胞吞噬功能，能提高肌体的非特异性和特异性免疫能力，有助于改善性支气管炎患者的免疫机能低下状态，能提高抗病能力，能防癌。银耳主治肺热咳嗽，肺燥咳嗽，虚痨咳嗽，久咳，喉痒，痰中带血，久咳伤络，肋痛，肺痛，肺萎，月经不调，精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页，共 27 页妇女带症，肺痨，胃炎大便秘结，大便秘结，大便下血，水泻，痢疾，面部黑斑，肿瘤等病症。银耳有强精补肾，滋阴润肺，生津目咳，清润益胃，补气和血，强心壮身，补脑提神，嫩肤美容，延年益寿，抗癌之功效，但银耳的质量尤为重要。14、在哪些研究和应用中能想到利用芽孢的特点？ 高温灭菌（耐热机制、抗逆性）保存（其休眠期极长，芽孢代谢活动基本停止）选择性培养（耐热）（细胞分类、鉴定）芽孢的作用1分类鉴定不同细菌的芽孢具有不同的特点，从形状、 大小、表面特征，直到与菌体的关系等都有不同的表现，因此可以作为分类鉴定的依据或参考。2科研材料由于芽孢独特的产生方式，成为研究形态发生和遗传控制的好材料。3保存菌种芽孢对不良环境有很强的抵抗力，可以保持生命力达数十年之久，在自然界使细菌度过恶劣的环境，在实验室是保存菌种的好材料。4分离菌种芽孢的耐热性有助于芽孢细菌的分离。将含菌悬浮液进行热处理，杀死所有营养细胞，可以筛选出形成芽孢的细菌种类。5生物杀虫有些芽孢细菌在产生芽孢的同时，可以产生一种双锥形的结晶内含物，称为伴孢晶体，这是一种蛋白质毒素，可以杀死某些昆虫（特别是鳞翅目）的幼虫。蛋白质晶体的毒性是有高度专性的，对其他动物与植物完全没有毒性。因此，它们便成为一种理想的生物杀虫剂，这种杀虫剂的生产，并不需将蛋白质分离出来，只需培养大量细菌， 在其形成芽孢并产生晶体时收获、精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 8 页，共 27 页干燥，做成粉剂即可。6. 研究芽孢的意义研究细菌芽孢有着重要的理论和实践意义。芽孢的有无、形态、大小和着生位置等是细菌分类和鉴定中的重要形态学指标；这类菌种芽孢的存在，有利于提高菌种的筛选效率，有利于菌种的长期保藏；是否能杀灭一些代表菌的芽孢是衡量和制定各种消毒灭菌标准的主要依据；许多产芽孢细菌是强致病菌。例如，炭疽芽孢杆菌、肉毒梭菌和破伤风梭菌等；有些产芽孢细菌可伴随产生有用的产物，如抗生素短杆菌肽、杆菌肽等。芽孢可度过不良环境，对干旱和高、 低温都有极强的抵抗力。条件转好时，1 个芽孢可形成1 个细菌细胞。有些细菌的芽孢，在干燥条件下，可保持10多年或更长的时间仍能萌发，有的能忍耐-253 的低温，有的在沸水中煮30小时后仍有生活力，但也有的芽孢在8090下几分钟即死亡。因此，外科手术或注射器的消毒，一定要用高压灭菌。能形成芽孢的细菌为杆菌科中的梭状芽孢杆菌属和芽孢杆菌属的所有种类。此外，还有少数螺旋菌、孤菌和八叠球菌等属的种类。研究芽孢的形成和萌发，具有重要的理论和实践意义。因为有些能形成芽孢的细菌是人体的病原菌。在食品、医药，以及发酵工业都要彻底消灭细菌的芽孢。有些芽孢菌可用来杀灭害虫，如苏云金杆菌、青虫菌、杀螟杆菌等在形成芽孢时，还产生蛋白质伴胞晶体，对鳞翅目昆虫有强大的毒杀作用。因而将这些芽孢杆菌制成杀虫剂，实行以菌治虫，并称之为细菌农药。15. 微生物的命名林奈氏双名法，由二个拉丁字或希腊字或拉丁化了的其它文字组成，一般精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 9 页，共 27 页用斜体表示属名在前，一般用拉丁字名词表示，字首字母大写；种名在后，常用拉丁文形容词表示，全部小写；若所分离的菌株只鉴定到属，而未鉴定到种，可用sp来表示。16. 分类单元及其等级界 亚界门 亚门纲 亚纲目 亚目科 亚科 （族） （亚族）属 亚属种亚种（ 336）17. 微生物的哪些特征可作为分类鉴定的依据？培养特征（最重要的菌落特征：如菌落的形状、大小、颜色、隆起、表面状况、质地、光泽及水溶性色素等）细胞形态（形状、大小、排列）特殊的细胞结构（鞭毛、芽孢、孢子、其他、超微结构）细胞内含物（染色反应、运动性） （343）18.伯杰氏系统细菌学手册是目前进行细菌分类、鉴定的最重要依据，其特点是描述非常详细，包括对细菌各个属种的特征及进行鉴定所需做的实验的具体方法。、工业中常用的霉菌（1）工业上常用的放线菌精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 10 页，共 27 页链霉菌属Streptomyces 生产抗生素、维生素、酶及酶抑制剂诺卡氏菌属Nocardia:生产抗生素，石油脱蜡、烃类发酵，处理含氰废水小单孢菌属Micromonospora : 庆大霉素孢囊链霉菌属Streptosporanium : 多霉素（2） 发酵工业常见常用的霉菌根霉属Rhizopus毛霉属Mucor黑曲霉Aspergillus niger米曲霉Asp. oryzae产黄青霉Penicillium chysogenum 红曲霉属Monascus 木霉属Trichoderma （3）工业上常见常用的酵母 Saccharomyces cerevisiae酿 酒 酵 母Hansenula anomala异常汉逊氏酵母 Candida tropicalis热 带 假 丝 酵 母Candida utilis产朊假丝酵母 Candida lipolytica解脂假丝酵母Geotrichum candidum白地霉 Pachysolen tannophilus管 囊 酵 母Pichia stlpitis树干毕赤酵母Candida shechatae休哈塔假丝酵母(4) 发酵工业常见常用的细菌精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 11 页，共 27 页 Bacillus subtilis枯草芽孢杆菌 Acetobacter aceti醋化醋杆菌 Lactobacillus delbrukii德氏乳杆菌 Steptococcus lactis乳链球菌 Clostridium acetobutylcum 丙酮丁醇梭菌 Corynebacterum pekinese北京棒杆菌 Escherichia coli大肠杆菌 Pseudomonas spp.假单胞菌 Brevibacterium lactofermentum 乳糖发酵短杆菌 Brevibacterium flavum黄色短杆菌 Staphylococcus aureus金黄色葡萄球菌 Corynebacterium crenatum 钝齿棒杆菌 Bacillus licheniformis地衣芽孢杆菌 Bifidobacterium spp. 双歧杆菌1、什么是选择性培养基？试举一例并分析其中的原理。定义见名词解释3 举例见书 92 2、培养基中 C、N含量的正确计算方法： 利用碳氮比？精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 12 页，共 27 页3、扩散、促进扩散、主动运输的特点扩散：被动运输非特异性不与各类分子反应自身结构不变最简单的跨膜运输方式物理学过程不消耗能量动力来自于膜内外的浓度差不能逆梯度运输水促进扩散：被动运输方式不消耗能量不与各类分子反应自身结构不变最简单的跨膜运输方式不能逆梯度运输需要借助于载体主动运输：主要运输方式需要消耗能量可逆梯度运输4、如何增大或降低微生物培养液中氧化还原电位（88）增大：增加通气量（振荡培养，搅拌）提高培养基的氧分压；加入氧化剂降低：加入抗坏血酸硫化氢半胱氨酸谷胱甘肽二硫苏糖醇等还原性物质5、选用和设计培养基的原则和方法1、选择适宜的营养物质2、营养物的浓度及配比合适3、物理、化学条件适宜4、经济节约5、精心设计、试验比较进行生态模拟，研究某种微生物的培养条件；文献查阅，设计特定微生物的培养基配方；试验比较，确定特定微生物的最佳培养条件；精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 13 页，共 27 页6、微生物生长的测定微生物生长及测定微生物数量或生物量的意义：评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死 ) 作用的效果客观地反映微生物生长的规律单位时间里微生物数量或生物量（Biomass）的变化微生物生长的测定：1 个体计数2 群体重量测定3 群体生理指标测定7、细菌的群体生长繁殖 （135）生长曲线 ( 在微生物学中提到的“生长” ，均指群体生长 )：细菌接种到定量的液体培养基中，定时取样测定细胞数量， 以培养时间为横座标，以菌数对数值为纵座标作图， 得到的一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。一条典型的生长曲线至少可以分为迟缓期：原因：调整代谢特点：分裂迟缓、代谢活跃对数期：原因：以最大的速率生长和分裂特点：数量速增稳定期：原因：条件限制特点：代谢大量积累，生长速率为零衰亡期：原因：代谢活性降低，衰老细胞自溶特点：死亡细菌速增精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 14 页，共 27 页Ps:(1) 延滞期 (停滞期、调整期 ) 特点： a. 生长速率常数为零； b. 细胞形态变大或增大； c. 细胞内 RNA 尤其是 rRNA含量增高，原生质呈嗜碱性。 d. 合成代谢活跃； e. 对外界不良条件的反应敏感。(2) 对数期 特点：此时菌体细胞生长的速率常数R最大，分裂快，代时短，细胞进行平衡生长，菌体内酶系活跃，代谢旺盛，菌体数目以几何级数增加，群体的形态与生理特征最一致，抗不良环境的能力强。稳定期特点：a. 生长速率常数为零； b. 菌体产量达到最高； c. 活菌数相对稳定；d. 细胞开始贮存贮藏物；e. 芽孢在这个时期形成；f. 有些微生物在此时形成次生代谢产物。8、在生产实践中缩短迟缓期的常用手段？延长稳定期常用的措施？（135）缩短迟缓期： 1 通过遗传方法改变特性使迟缓期缩短 2利用对数生长期的细胞作为种子 3尽量使用接种前后使用的培养基组成不要相差太大 4适当扩大接种量延长稳定期：补充营养、取走代谢产物、调节pH及温度、搅拌震荡、通氧9、评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死) 作用的效果；（155）1、抗微生物剂（或分为消毒剂和防腐剂，见14） ：抑菌剂：抑制微生物生长，但不能杀死他们精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 15 页，共 27 页杀菌剂：能杀死生物细胞，不能使细胞裂解溶菌剂：能通过裂解的方式杀死细胞，将这类物质加到生长的细胞悬液里会导致细胞数量或细胞悬液的混浊度降低。2、抗代谢物（见14）3、抗生素 ; 由某些生物合成或半合成的一类次级代谢产物或衍生物，能通过抑制细菌细胞壁合成、皮坏细胞质膜、作用域呼吸链以干扰氧化磷酸化、抑制蛋白质和核算合成等方式抑制微生物生长或杀死微生物的化合物。10、微生物生长的测定方法（152） ：1 计数法：直接计数（不能区分死的和活的、不适合运动型）：平板计数间接计数：测 OD （光密度）2 重量法3 生理指标法：包括呼吸强度、耗氧量、酶活性、生物热11、在微生物学的培养、发酵等方面的研究过程中，你能想到哪些方面可以用到膜过滤技术？牛奶脱脂、果汁浓缩、黄酒纯化、白酒陈化、啤酒除菌、味精提纯、蔗糠脱色、氨基酸浓缩、酱油除菌，医疗针剂水、输液水、洗瓶水、外科手术洗洁水的制备。1 过滤 2提纯 3筛选 4浓缩 5透析 6 分离12、通过哪些手段和方法能够达到控制微生物生长和繁殖的目的？（154）精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 16 页，共 27 页化学因素 1 抗微生物剂 2 抗代谢物 3 抗生素物理因素 1 高温灭菌 2 辐射作用 3 过滤作用4 高渗作用 5 干燥 6 超声波13、影响微生物增代时间（代时）的因素：菌种、营养成分、营养物浓度、温度（132）14、化学物质的抗微生物能力的测定（154） ：抗微生物剂 ：一类能杀死微生物或抑制微生物生长的化学物质消毒剂 ：用来杀死非生物材料上的微生物碘液、氯气、酚化合物、HgCl2、CuSO4 防腐剂 ：有杀死微生物或抑制微生物生长的能力，对于动物或人体的组织无毒害作用，可用作外用抗微生物药物有机汞、碘液、六六粉、3% 过氧化氢溶液、70% 乙醇石炭酸系数 ：一定时间内被药剂能杀死细胞（一般为伤寒沙门氏菌）的最高稀释度和达到同效的石炭酸的最高稀释度的比率抗代谢物 ：生长因子的结构类似物可干扰机体的正常代谢以达到抑制微生物生长的目的15、抗性菌株特点（ 157） ：细胞质膜通透性改变；药物作用靶改变；合成了修饰抗生素的酶；抗性菌株发生遗传变异精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 17 页，共 27 页16、耐药菌代谢可能有哪些改变（7 点） ：1、 绕过受抑制的反应，形成补偿代谢途径2、 积聚与抑制体相拮据的代谢产物3、 增加受抑制酶数17、避免出现细菌的耐药性的措施（157） ：第一次使用的药物剂量要足；避免在一个时期或长期多次使用同种抗生素；不同的抗生素（或与其他药物）混合使用；对现有抗生素进行改造；筛选新的更有效的抗生素；开发使用天然药物和极端环境下的微生物18、利用加压蒸汽对培养基进行灭菌时，常带来哪些不利影响？应如何避免？（P176178 ，周德庆）高温的有害影响：形成沉淀物（有机物：如多肽类沉淀、无机物：如磷酸盐碳酸盐等沉淀） 破坏营养， 提高色泽（褐变：产生氨基糖焦糖或黑色素、毒变）改变培养基的pH（一般为降低）降低培养基浓度防止法：（1）采用特殊加热灭菌法对易破坏的含糖培养基进行灭菌时，应将糖液与其他成分分别灭菌，灭菌后再合并。含钙、铁离子的培养基应与磷酸盐成分分别灭菌， 就不易形成磷酸盐的沉淀。 含有易被高温破坏成分的培养基，应低压灭菌或间歇灭菌。大规模发酵中，可采用连续加压蒸汽灭菌法。（2）过滤除菌法：用于某些不耐热的成分。缺点是无法滤除液体中的病精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 18 页，共 27 页毒和噬菌体。（3）可加螯合物以防止金属离子发生沉淀、按配方中的成分逐一按序加入并使之溶解，可防止沉淀、可用气体灭菌剂对个别成分进行灭菌处理，再混入已灭过菌的其他培养基成分中。19、曲的构成与功能？（ P171，周德庆）固体基质：提供营养源、有利疏松通气、赋予曲的外形菌体（菌丝、孢子或细胞） ：可用作种子代谢产物：外酶类：可用作粗酶制剂其他：如柠檬酸、赤霉素和抗生素等20、次级代谢（ 129）是指微生物在一定生长时期，以次级代谢产物为前体， 合成一些的与微生物生命活动无明确功能的物质过程的产物初级代谢（ 129）微生物从外界吸收各种营养物质，通过分解代谢和合成代谢， 生成维持生命活动的物质和能量的过程初级代谢与次级代谢的关系（129）初级代谢的关键性中间产物往往是次级代谢的前体；次级代谢一般在菌体对数生长后期或稳定期间进行，但会受到条件的影响； 某些催化次级代谢的酶的专一性不高；次级代谢产物的合成，因菌株的不同而异，但与分类地位无精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 19 页，共 27 页关；质粒与次级代谢的关系密切，控制着多种抗生素的合成21、研究病毒学的意义病毒学的研究极大地丰富了微生物学乃至现代生物学的理论与技术，同时，病毒学的研究有效地控制和消灭人及有益生物的病毒危害，利用病毒对有害生物，特别是害虫进行生物防治，保人类健康和人类经济活动及人类赖以生存的环境，发展以基因工程为中心的生物高新技术产业22、病毒的特点（ 163）病毒，无细胞结构，由DNA 或 RNA和蛋白质外壳、荚膜组成，无限增值，无生命迹象，建构简单。绝对的细胞内几升23、病毒的培养：二元培养物法噬菌体细菌培养物：培养液 细菌培养液变清亮营养琼脂平板细菌平板成为残迹平板若是噬菌体标本经过适当稀释再接种细菌平板，经过一定时间培养，在细菌菌苔上可形成圆形局部透明区域，即噬斑（plague ） 。如同对细菌计数一样，形成的噬菌斑也可用于对噬菌体的数目进行估算。24、病毒复制过程 / 噬菌体复制（繁殖）的三个阶段（177）精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 20 页，共 27 页1、吸附 2 、 侵入 3 、脱壳 4 、病毒大分子的合成 5 、装配与释放25、质粒（ plasmid ） ；质粒的检测方法 （211）质粒是一种独立于染色体外，能进行自主复制的细胞质的遗传因子，主要存在于各种微生物细胞中。检测方法：超离心或琼脂糖凝胶电泳。致育因子 (Fertility factor，F因子，附加体 )（212）F因子能以游离状态和与染色体相结合的状态（Hfr ）存在于细胞中。 F质粒在大肠杆菌的接合作用中起作用，当Hfr 菌株上的 F因子通过重组回复成自主状态时有时可将其相邻的染色体基因一起切割下来，成为携带某一染色体基因的F因子。抗性质粒（抗性因子、 R质粒） （212）带有 R质粒的细菌对集中抗生素或其他药物（氯霉素、链霉素、磺胺、氨苄青霉素、卡那霉素）呈抗性。许多R质粒能使宿主细胞对许多金属离子呈现抗性（砷、银、钴、汞等）代谢质粒（ Metabolic plasmid） （213）代谢质粒上携带能降解某些基质的酶的基因，含有这类质粒的细菌 （假单胞菌）能将复杂的有机化合物（尤其是有毒化合物）降解成能被其作为碳源和能源利精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 21 页，共 27 页用的简单形式，也成为降解质粒。26、基因突变一个基因内部遗传结构或DNA 序列的任何改变，包括一对或少数几对碱基的缺失、插入或置换，而导致的遗传变化。 （215）27、营养缺陷型是微生物遗传学研究中重要的选择标记和育种的重要手段，在选择培养基（一般为基本培养基）上不生长，是一种负选择标记营养缺陷型实验步骤 （219）将待分离突变株的原始菌株以合适的稀释度涂布到野生型菌株和突变株均能生长的主平板上，经培养后形成单菌落 经过一消毒的“印章”讲平板的菌落分别原位转移到与院平板相同营养成分的平板 a 以及不含缺陷型所需要的营养因子的平板b 经培养后对照观察两平板上形成的菌落，如果在a 上生长在 b 上不长，则为所需分离的突变型在 a 上挑取 b 上不长的相应位置的单菌落， 并进一步在完全培养基上划线分离纯化。营养缺陷型的表示方法（218）它的基因型常用所需要营养物的前三个英文小写斜体字母表示，例如hisC、 lacZ其中的 C、 Z表示同一表型中不同基因的突变。 形影的表型则用HisC精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 22 页，共 27 页和 LacZ 表示。28、细菌素和抗生素的区别（213）细菌素抗生素 1抑制或杀死近缘甚至同种不同株的细菌较广的抗菌谱 2通过核糖体合成多肽一般是次级代谢物 3结构基因或相关基因一般位于质粒或转座子上一般无直接结构基因相关酶的基因多在染色体上29、抗药性突变型特点、表示方法（219）抗药性突变是由于基因突变使菌株对某种或某几种药物，特别是抗生素，产生抗性的一种突变型。这类突变类型常用所抗药物的前三个小写斜体英文字母加上“r ”表示，如strr和 strs分别表示对链霉素的抗性和敏感性。 再加有相应抗生素的平板上，只有抗性突变才能生长。所以很容易分离的到。30、试述用 Ames法检验致癌剂的理论依据、方法概要和优点（222）许多化学诱变剂能够引起动物和人的癌症，利用细菌突变能检测环境镇南关存在的致癌物质是一种简便、快速、灵敏的方法。利用书伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型菌株的回复突变性能来进行实验，它在不含组氨酸的培养基中不能（或极少）生长，如果回复突变率因某种化学诱变剂的作用而增加，则这种化学药物具有致癌性。 Ames试验的准确率达80%90% 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 23 页，共 27 页31、回复突变突变体失去的野生型性状，可以通过第二次突变得到恢复（222）32、细菌的三种水平基因转移形式（224）细菌的接合作用： 通过细胞的直接接触而产生的遗传信息的转移和重组过程（225）细菌的转导：由病毒介导的细胞间进行遗传交换的一种方式（227）遗传转化：同源或异源的游离DNA 分子（质粒和染色体DNA ）被自然或人工感受态细胞摄取，并得到表达的水平方向的基因转移过程。33、局限性转导与普遍性转导的主要区别（229）被转导的基因共价地与噬菌体DNA 连接，与噬菌体 DNA 一起进行复制、 包装以及被导入受体细胞中。 局限性转导颗粒携带特殊的染色体片段并将固定的个别基因导入受体，故称为局限性转导。34、自然转化必要条件 （229） ：受体细胞处于感受态、外源DNA 人工转化手段 （231） ：CaCl2 、电穿孔法精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 24 页，共 27 页转导模型（ 228）35、感受态细胞 （283）理化方法诱导细胞，使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。36、基因组测序 （234）测定待测生物基因的所有碱基排列顺序，并对遗传信息进行研究分析37、PCR 的原理、方法、用途（270）PCR 是一种体外快速扩增特定DNA 序列的技术原理： 需要一对寡聚核苷酸作为引物，把各自所要扩增靶DNA片段两条链的末端互补。一个循环后，新合成的DNA又可作为下一个循环的模板进行复制，重复下三个动作， DNA 片段呈指数增长。方法： 1、变性 ，高温变性，双链被解成单链2、退火，反应系统降温使引物与模板DNA 两端的碱基配对精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 25 页，共 27 页3、 延伸，DNA 聚合酶使引物 3端向前延伸， 合成与模板互补的DNA新链用途： 1 基因的扩增、制备DNA 探针、定为诱变、 DNA 测序 2临床医学传染病的检测、遗传病的诊断、对癌基因的分析3 在法医上鉴别个体、判定亲缘关系38、什么叫基因工程？试图示并简述其基本过程（265）定义： 把分离到的或合成的基因经过改造，插入到载体中，然后导入宿主细胞内，使其扩增和表达，从而获得大量基因产物或产生生物新的性状过程：1 基因的分离与合成2 外源基因与载体DNA 的体外重组 3 重组 DNA 导入受体细胞4 目的克隆的筛选与鉴定5 控制外源基因的表达附加题一 、发酵工业中微生物受到噬菌体污染后会出现哪些现象？防治噬菌体的污染有哪些措施？附加题二 、什么是效价？什么叫噬菌斑？简述测定噬菌体效价的双层平板法？（P71 ，周德庆）效价：每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数，又称噬菌斑形成单位数或感染中心数。噬菌斑 ：在涂布有敏感宿主细胞的固体培养基表面，若接种上相应噬菌体的稀释液，其中每一噬菌体粒子由于先侵染和裂解一个细胞，然后以此为中心，再反复侵染和裂解周围大量的细胞，就在菌苔上形成一个具有一定形状、大小、边缘和透明度的噬菌斑，可用于纯种分离和计数。双层平板法 ：底层平板（ 2% 琼脂培养基 78mL ） 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 26 页，共 27 页 上层培养基（ 1% 琼脂培养基 3mL ） 37，10 余 h, 计数噬菌斑上层平板 宿主菌悬液（对数期菌液0.2mL） 混匀 噬菌体试样（合适稀释液0.1mL） 预先分别配制含2% 和 1% 琼脂的底层培养基和上层培养基。先用底层在培养皿上浇一层平板，凝固后，把预先融化冰冷却到45C 以下，加有较浓的敏感宿主和一定体积待测噬菌体样品的上层培养基，摇匀，立即倒在底层上铺平待凝，37下保温。经 10余 h 后即可对噬菌斑计数、思考题一 、 请设计一实验来决定在一种特定的细菌中发生的遗传转移过程是转化、转导还是接合？说明每一种的预期结果246 设想有下列条件和材料可以利用：合适的突变株和选择培养基；DNas （一种降解裸露 DNA 分子的酶）；2 种滤板：一种能够持留细菌和细菌病毒，但不能持留游离的DNA 分子；另一种滤板只能持留细菌；一种可以插入滤板使其分隔成2 个空间的玻璃容器思考题二 、根据突变的光复活修复作用、原理，你认为在进行紫外线诱变处理时，应注意什么？为了使被诱变的细胞能均匀地受到紫外线照射，你讲如何做？精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 27 页，共 27 页