1 微生物学实验复习题一、选择题1. 革 兰 氏 染 色 的 关 键 操 作 步 骤 是：A. 结 晶 紫 染 色B. 碘 液 固 定C. 酒 精 脱 色D. 复 染2. 放 线 菌 印 片 染 色 的 关 键 操 作 是：A. 印 片 时 不 能 移 动B. 染 色C. 染 色 后 不 能 吸 干D. A 和 C 3. 高 氏 培 养 基 用 来 培 养：A. 细 菌B. 真 菌C. 放 线 菌4. 肉 汤 培 养 基 用 来 培 养: A. 酵 母 菌B. 霉 菌C. 细 菌5. 无 氮 培 养 基 用 来 培 养: A. 自 生 固 氮 菌。B. 硅 酸 盐 细 菌C. 根 瘤 菌D. A 、B 均 可 培 养E. A 、B、C 均 可 培 养6. 在 使 用 显 微 镜 油 镜 时， 为 了 提 高 分 辨 力， 通 常 在 镜 头 和 盖 玻 片 之间 滴 加: A. 二 甲 苯B. 水C. 香 柏 油7. 常 用 的 消 毒 酒 精 浓 度 为: A. 75% B. 50% C. 90% 8. 用 甲 醛 进 行 空 气 熏 蒸 消 毒 的 用 量 是: A. 20ml/M3B. 6ml/M3C. 1ml/M39. 实 验 室 培 养 基 高 压 蒸 汽 灭 菌 的 工 艺 条 件 是: A. 121 /30min B. 115 /30min C. 130 /30min 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页，共 20 页2 10. 巴 氏 消 毒 的 工 艺 条 件 是: A. 62-63/30min B. 71-72/15min C. A.B. 均 可11. 半 固 体 培 养 基 的 主 要 用 途 是: A. 检 查 细 菌 的 运 动 性B. 检 查 细 菌 的 好 氧 性C. A.B. 两 项12. 半 固 体 培 养 基 的 琼 脂 加 入 量 通 常 是: A. 1% B. 0.5% C. 0.1% 13. 使 用 手 提 式 灭 菌 锅 灭 菌 的 关 键 操 作 是: A. 排 冷 气 彻 底B. 保 温 时 间 适 当C. 灭 菌 完 后 排 气 不 能 太 快D. A-C 14. 目 镜 头 上 的“ K” 字 母 表 示: A. 广 视 野 目 镜B. 惠 更 斯 目 镜C. 补 偿 目 镜15. 目 镜 头 上 的“ P” 字 母 表 示: A. 平 场 目 镜B. 广 视 野 目 镜C. 平 场 补 偿 目 镜16. 物 镜 头 上 的“ PL” 字 母 表 示: A. 正 低 相 差 物 镜B. 正 高 相 差 物 镜C. 负 高 相 差 物 镜17. 物 镜 头 上 的“ UVFL ”字 母 表 示。A. 无 荧 光 物 镜B. 照 相 物 镜C. 相 差 物 镜18. 镜 头 上 标 有“ TC” 字 母 的 镜 头 是: A. 相 差 调 整 望 远 镜B. 摄 影 目 镜C. 相 差 目 镜19. “PA ” 表 示: A. 马 铃 薯 培 养 基B. 高 氏 培 养 基C. 肉 汤 培 养 基20. 无 菌 室 空 气 灭 菌 常 用 方 法 是: A. 甲 醛 熏 蒸B. 紫 外 灯 照 射精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页，共 20 页3 C. 喷 石 炭 酸D. A.B. 并 用21. 干 热 灭 菌 的 关 键 操 作 是: A. 灭 菌 物 不 能 有 水B. 保 温 过 程 中 不 能 开 箱 门C. 降 温 不 能 太 快22. 霉 菌 水 浸 制 片 的 关 键 操 作 是：A. 菌 丝 要 分 散B. 菌 丝 首 先 要 用 50% 的 乙 醇 浸 润C. 盖 盖 玻 片 不 能 有 气 泡D. A-C 23. 加 热 法 染 芽 胞 的 染 料 通 常 是: A. 孔 雀 绿B. 结 晶 紫C. 复 红D. 蕃 红24. 复 红 法 染 鞭 毛 的 关 键 操 作 是: A. 玻 片 干 净B. 染 料 新 鲜C. 菌 体 活 化 适 当D. A 、B、C 25. 镀 银 法 染 鞭 毛 的 关 键 操 作 是: A. 玻 片 干 净B. 染 料 无 沉 淀C. 加 热 适 当D. 菌 体 活 化 适 当E. A-D 26. 进 行 简 单 染 色 使 用 的 染 色 液 通 常 是: A. 复 红B. 蕃 红C. 结 晶 紫D. 孔 雀 绿E. A-D 均 可27. 物 镜 头 上 的“ APO ” 字 母 代 表: A. 消 色 差 物 镜B. 复 消 色 差 物 镜C. 半 消 色 差 物 镜28. 物 镜 头 上 的“ Ach” 字 母 表 示: A. 平 场 物 镜B. 超 平 场 物 镜C. 消 色 差 物 镜29. 物 镜 头 上 的“ NH ”字母 表 示：A. 正 相 差 物 镜B. 负 相 差 物 镜精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页，共 20 页4 C. 负 高 相 差 物 镜30. 物 镜 头 上 的“ 0.17 ” 表 示：A. 要 求 的 盖 玻 片 厚 度B. 要 求 的 载 玻 片 厚 度C. 镜 头 浸 油 的 深 度31. 镜 头 上 标 有“ NFK 字 母 的 镜 头 是：A. 照 相 目 镜B. 荧 光 目 镜C. 相 差 目 镜32. 目 镜 头 上 的“ PK ” 字 母 表 示：A. 平 场 目 镜B. 补 偿 目 镜C. 平 场 补 偿 目 镜33. 物 镜 头 上 的Splan 字 母 表 示: A. 超 平 场 物 镜B. 平 场 物 镜C. 消 色 差 物 镜。34. 物 镜 头 上 的Splan Apo 表 示: A. 超 平 场 复 消 色 差 物 镜B. 超 平 场 半 消 色 差 物 镜C. 超 平 场 物 镜35. 物 镜 头 上 的Plan Apo 表 示: A. 超 平 场 物 镜B. 平 场 物 镜C. 平 场 复 消 色 差 物 镜36. 物 镜 头 上 的Plan 字 母 表 示: A. 平 场 物 镜B. 消 色 差 物 镜C. 超 平 场 物 镜37. 目 镜 头 上 的WF 字 母 表 示: A. 广 视 野 高 眼 点 补 偿 目 镜B. 高 眼 点 目 镜C. 广 视 野 目 镜38. 目 镜 头 上 的SWK 字 母 表 示: A. 超 广 视 野 目 镜B. 高 眼 点 补 偿 目 镜C. 平 场 补 偿 目 镜39. 目 镜 头 上 的WHK 字 母 表 示: A. 超 广 视 野 目 镜B. 广 视 野 高 眼 点 目 镜C. 平 场 补 偿 目 镜40. 物 镜 头 上 的F.L 字 母 表 示: A. 消 色 差 物 镜B. 半 消 色 差 物 镜精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页，共 20 页5 C. 复 消 色 差 物 镜二、判断题1. 无 菌 吸 管 上 端 塞 入 棉 花 是 为 了 过 滤 口 中 的 有 菌 空 气。2. 无 菌 吸 管 上 端 塞 入 棉 花 的 目 的 是 为 了 防 止 菌 液 吸 入 口 中3. 稀 释 平板 测 数时，放线 菌计 数 的标 准 是 选 择 每 皿 中 菌 落数 在30-300 个 之 间 的 稀 释 度 进 行 计 数。4. 稀释平板测数时，细菌计 数的标准是选择 每皿中菌落数在30-300 个 之 间 的 稀 释 度 进 行 计 数。5. 稀 释 平 板 测 数 时， 细 菌，放 线 菌， 真 菌 的 计 数 标 准 是 选 择 每 皿 中菌 落 数 在 30-300 个 的 稀 释 度 进 行 计 数。6. 稀释平板测数时，真菌的 计数标准是选择 每皿中菌落数在10-100 个 的 稀 释 度 进 行 计 数。7. 稀 释 平 板 测 数 时， 细 菌、放 线 菌、真 菌 的 计 数 标 准 是 选 择 每 皿 中菌 落 数 在 10-100 个 的 稀 释 度 进 行 计 数。8. 用 混 菌 法 测 微 生 物 活 菌 数 时，每个 平 皿 中 的 菌 液 加 入 量 是 1ml。9. 用涂抹法测微生物活菌数时，每个平皿中 的菌液加入量是0.1ml 。10. 用 油 镜 镜 检 时 应 将 聚 光 器 升 至 最 高。11. 使 用 高 倍 镜 时, 可 将 聚 光 器 升 至 最 高。12. 为 了 满 足 微 生 物 对 微 量 元 素 的 需 要，配制 培 养 基 所 用 的 水 最好 使 用 自 来 水。13. 稀 释 测 数 用 的 无 菌 水 通 常 是 由 自 来 水 灭 菌 而 成。14. 观 察 根 霉，青 霉 只 需 用 低 倍 镜 观 察 即 可。15. 实 验 室 通 常 使 用 血 球 计 数 板 测 微 生 物 的 总 菌 数。16. 浸 油 的 油 镜 头 可 用 软 的 卫 生 纸 擦 净。17. 为 了 节 省 时 间， 可 直 接 在 染 色 涂 片 上 滴 加 香 柏 油 后, 直 接 用 油镜 观 察。18. 使 用 油 镜 的 正 确 操 作 步 骤 是: （ 1） 低 倍 镜 观 察。（ 2） 高 倍 镜 观 察。（ 3）转出 高 倍 镜 头，滴 加 香 柏 油 后 用 油 镜 观 察。19. 在 擦 拭 显 微 镜 镜 头 时，应向 一 个 方 向 擦 拭。20. 显 微 镜 镜 头 的 放 大 倍 数 越 大，它的 数 值 孔 径 值 越 大，其镜 口 角也 越 大。21. 稀 释 平 板 测 数 通 常 是 采 用 十 倍 稀 释 法。22. 稀 释 平 板 测 数 通 常 采 用 的 是 二 倍 稀 释 法。23. 做 稀 释 平 板 测 数 时，只需 一 支 吸 管 从 头 稀 释 到 尾 即 可。24. 做 稀 释 平 板 测 数 时，每做 一 个 稀 释 度 都 必 须 更 换 一 支 无 菌 吸管。25. 稀 释 平 板 测 数 时，无 论 是 用 混 菌 法，还 是 用 涂 抹 法 , 每 个 平 皿 中的 菌 液 加 入 量 都 是 1ml 。26. 稀 释 平 板 测 数 时，无 论 是 用 混 菌 法，还 是 用 涂 抹 法，每 个 平 皿 中的 菌 液 加 入 量 都 是 0.1ml 。27. 实 验 室 做 固 体 培 养 基 时， 常 加 1.8% 的 琼 脂 作 凝 固 剂， 做 半 固 体 培精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页，共 20 页6 养 基 时, 琼 脂 加 入 量 通 常 是 0.5% 。28. 实 验 室 做 固 体 培 养 基，常加 2% 的 琼 脂 作 凝 固 剂，做半 固 体 培 养基 时，琼脂 加 入 量 通 常 是 1%。29.E. coli经 革 兰 氏 染 色 后， 菌 体 呈 红 色，它是 革 兰 氏 正 反 应 细 菌。30. 在 光 学 显 微 镜 下，根霉 的 孢 子 囊 是 透 明 的。31. 使 用 手 提 灭 菌 锅 灭 菌 后，为了 尽 快 排 除 锅 内 蒸 汽，可直 接 打 开排 气 阀 排 气。32. 所 有 苏 云 金 杆 菌 的 芽 胞 在 菌 体 的 中 央。33. 所 有 真 菌 菌 落 的 表 面 干 燥，呈 绒 毛 状。34. 所 有 放 线 菌 菌 落 表 面 干 燥，呈 粉 粒 状。35. 所 有 细 菌 菌 落 的 表 面 都 是 光 滑 湿 润 状。36. 镜 台 测 微 尺 每 小 格 的 实 际 长 度 是 10 微 米。37. 目 镜 测 微 尺 每 小 格 的 实 际 长 度 是 10 m 。38. 镜 台 测 微 尺 每 小 格 的 实 际 长 度 是 10nm( 纳 米) 。39. 血 球 计 数 板 两 边 的 平 台 比 计 数 区 高 0.1cm 。40. 血 球 计 数 板 两 边 的 平 台 比 计 数 区 高 0.1mm。41. 棉 花 塞 塞 入 试 管 的 长 度 应 为 棉 塞 全 长 的 2/3 。42. 棉 花 塞 入 试 管 的 长 度 应 为 棉 塞 全 长 的 1/2 。43. 摆 斜 面 的 长 度 应 不 超 过 试 管 长 度 的 2/3 。44. 摆 斜 面 的 长 度 应 不 超 过 试 管 长 度 的 1/2 。45. 血 球 计 数 板 计 数 区 的 面 积 是 1 mm2。46. 用 血 球 计 数 板 计 数 时，任数 5 个 大 方 格(80 个 小 格) 的 菌 数 即 可。47. 在 使 用 细 菌 计 数 板 计 数 时，为了 防 止 计 数 偏 大，计数 区 四 周 压线 的 菌 只 能 数 两 边。48. 目 镜 测 微 尺 每 格 的 实 际 长 度 是 未 知 的，需用 长 度 已 知 的 镜 台测 微 尺 校 正。49. 测 微 生 物 的 细 胞 大 小 时, 需 要 校 正 的 是 镜 台 测 微 尺 每 格 的 实际 长 度。50. 测 微 生 物 细 胞 大 小 时，需要 校 正 的 是 目 镜 测 微 尺 每 格 的 实 际长 度。51. 血 球 计 数 板 计 数 区 每 小 格 的 体 积 是 1/4000mm3。52. 血 球 计 数 板 计 数 区 共 有 400 个 小 格，每小 格 的 面 积 是 1/400 cm2。53. 用 分 装 器 将 培 养 基 分 装 试 管 时，应谨 防 培 养 基 沾 染 试 管 口。54. 琼 脂 的 熔 化 温 度 是 80 以 上，凝固 温 度 是 45 以 下。55. 琼 脂 的 熔 化 温 度 是 95 以 上，凝固 温 度 是 45 以 下。56. 玻 璃 器 材 洗 净 后 在 急 需 时 可 采 用 高 压 蒸 汽 灭 菌，而不 能 用 干热 灭 菌。57. 细 菌 计 数 板 每 小 格 的 体 积 是 1/20000 mm3。58. 血 球 计 数 板 计 数 区 每 小 格 的 体 积 是 1/4000cm3。59. 无 菌 室 用 甲 醛 熏 蒸 消 毒 后 可 喷 氨 水 以 减 少 甲 醛 的 刺 激。三、填空题1. 霉菌 水浸片的制片程序是 _, _, _, _,_, _。2. 放线菌印片染色的操作程序是 _, _, 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页，共 20 页7 _, _, _, _。3. 固 体 培 养 基 常 用_ 作 凝 固 剂，普通 固 体 培 养 基 的 用 量 一般 为_ ， 半 固 体 培 养 基 的 用 量 一 般 为_。4. 简单染色的操作程序是 _, _, _, _, _, _。5. 使 用 手 提 式 灭 菌 锅 进 行灭 菌 的 操 作 程 序 是_, _, _, _,_, _, _, _, _, _ 。6. 实 验 室 配 制 固 体 培 养 基 的 操 作 程 序 是_ _ 、_、_、_、_、_ _ 、_。7. 有 荚 膜 的 细 菌 用 负 染 色 法 染 色 后, 荚 膜 为_ 色，菌体 为_ 色。8. 细 菌 经 革 兰 氏 染 色 后，革兰 氏 正 反 应 菌 呈_，革兰 氏 负 反 应菌 呈_。9. 细 菌 经 简 单 染 色 后 呈_。10. 显 微 镜 的 光 学 系 统 由_,_,_ 和_ 组 成。11. 显 微 镜 的 机 械 部 分 包 括_ _、_ _、_、_、 _、 _、 _、 _ _、 _等 九 部 分 组 成。12. 高 氏 培 养 基 通 常 用 来 培 养_ ，其 pH 值 为_。13.PA 培 养 基 通 常 用 来 培 养_， 其 pH 值 为_。14. 牛 肉 膏、蛋白 胨 培 养 基 通 常 用 来 培 养_ 菌，其 pH 值 为 _。15. 干 热 灭 菌 的 工 艺 条 件 是_。16. 使 用 显 微 镜 低 倍 镜 观 察 时, 聚 光 器 应 该_， 使 用 显 微 镜 高倍 镜 观 察 时，聚 光 器 应 该_。17. 革 兰 氏 染 色 的 关 键 操 作 是_。18. 显 微 镜 的 放 大 倍 数 越 大，焦深_ ，调焦 应 该_。19. 按 培 养 基 的 形 态 , 可 将 培 养 基 分 为_、_ _、_三 种 类 型。20. 配 制 常 规 培 养 基 时 通 常 用_水。21. 干热灭菌 通常用来灭菌 _ ，培养 基的灭菌通常用_。22. 细 菌 稀 释 测 数 通 常 采 用_ 稀 释 法， 稀 释 用 试 管 无 菌 水 为_ 毫 升。23. 配 制 培 养 基 时 常 用_ 和 _ 调 节 pH 值。24. 按 培 养 基 的 特 殊 用 途, 可 将 培 养 基 分 成 _ 、_、_ 等。25. 选 择 培 养 基 可 用 来 分 离 培 养 我 们 所 需 的 特 殊 微 生 物 类 群，例如 我 们 要 从 土 壤 中 分 离 纤 维 分 解 菌，可 以 利 用 _ 作 唯 一 碳源 来 筛 选 _ ； 要 分 离 产 蛋 白 酶 的 微 生 物， 可 以 利 用 _ 作 唯 一 氮 源 分 离_。26. 革兰氏染色的操作程序是 _, _, _, _, _, _, _, _, _, _, _, _。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页，共 20 页8 27. 培 养 基 是 人 工 配 制 的 适 合 不 同 微 生 物 生 长 繁 殖 或 _ 的营 养 基 质。按营 养 物 质 的 不 同 来 源 可 分 为 _ 、 _、_ 三 大 类。28. 高 倍 镜 头 的 数 值 孔 径 通 常 为_， 放 大 倍 数 为_。29. 油 镜 头 的 数 值 孔 径 通 常 为_， 放 大 倍 数 为_。30. 低 倍 镜 头 的 数 值 孔 径 通 常 是_， 放 大 倍 数 为_。31. 穿 刺 接 种 使 用 的 接 种 工 具 为_， 斜 面 接 种 使 用 的 接 种 工具 为_。32. 进行稀释测数使用的主要器材有 _、 _ 、_、_。33. 用 孔 雀 绿 和 复 红 作 细 菌 芽 胞 染 色 时， 可 使 菌 体 呈_ 色， 使 芽胞 呈_ 色。34. 用 日 光 灯 作 光 源 时, 通 常 用_反 光 镜，用自 然 光 作 光 源 时，通 常 用_ 反 光 镜。35. 无 菌 室 杀 菌 通 常 采 用_ 和 _相 结 合 的 方 法。36. 半 固 体 培 养 基 通 常 用 来 检 查_。37. 摆 试 管 斜 面 的 基 本 操 作 方 法 是_、 _ 、 _ 。38. 不 能 加 热 灭 菌 的 液 体 培 养 基 应 采 用_ 除 菌，通常 用 的 器 皿 有_和_。39. 蓝 细 菌 的 培 养 可 用_ 培 养 基。40. 分 离 酵 母 菌 时 为 了 抑 制 细 菌 的 生 长，通常 用_ 培 养 基。41. 从 土壤 中分 离真 菌 时 , 通 常在 培养基 中加 入_和_ 抑 制 细 菌 的 生 长。42. 测 微 生 物 大 小 使 用 的 主 要 工 具 是 _、_和_ _。43. 进行酵母菌的显微计数使用的主要工具是 _ 和_。44. 进行细菌的显微计数时使用的主要工具是 _ 和_。45. 普通 光 学 显 微 镜 测 酵 母 菌 的 大 小 的 操作 程 序 是 _ _ 、 _ 、 _ 、_ 、_、 _ 、 、 _ 、 _ 。46. 显 微 计 数 的 操 作 程 序是 _、 _ 、_、 _ _、 _ 、_、 _ 、 _ 。47. 荚 膜 染 色 法 的 操 作 程 序是 _、 _ 、_ 、 _ 、 _ 、_ 、 _ 。48. 芽 胞 染 色 的 操 作 程 序是 _、 _ 、_、 _ 、 _ 、_、 _ 、 _ 。49. 芽 胞 染 色 的 关 键 操 作 是_。50. 放 线 菌 印 片 染 色 的 关 键 操 作 是_。51. 用 负 染 色 法 染 荚 膜 的 关 键 操 作 是 _。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 8 页，共 20 页9 52. 摇床 振 荡 培 养 通 常 用 来 培 养_ 微 生 物，享 格 特 的 厌 氧操 作 方 法 通 常 用 来 培 养_菌。53. 革兰 氏 染 色 反 应 与 细 菌 细 胞壁 的_ 和_有 关。在 革兰 氏 染 色 过 程 中， 当 用 95% 酒 精 处 理 后， 就 放 在 显 微 镜 下 观 察， 革兰 氏 阳 性 菌 呈_ 色，而 革 兰 氏 阴 性 菌 呈_ 色。54. 血 球 计 数 板 与 细 菌 计 数 板 的 主 要 差 别 是_。55. 制 霉 菌 水 浸 片 时 加 棉 兰 染 色 液 可 使 菌 体 呈_色。56.Anabaena azotica的 异 型 胞 通 常 是_ 生， 在 光 学 显 微 镜 下 它 是_ 的， 细 胞 两 端 有 _ 。 它 能 控 制 _ 的 进 入， 保持 异 型 胞 内 _ ，以利 于 _ 。57. 配制培养基时，应注意各种营养物质的配比，特别是_。 一 般 而 言, 当 C : N 5 : 1 时, 有 利 于_；当 C : N 5 : 1 时有利 于_。58. 由 于 各 种 微 生 物 对 某 种 化 合 物 如 抗 生 素、染料 的 敏 感 性 不 同，可 以 利 用 这 一 特 征 来 从 土 壤 中 分 离 出 不 同 类 群 的 微 生 物。如 在培 养 基 中 加 入_ ，会杀 死 或 抑 制_ 的 生 长 而 分 离 出_； 在 培 养 基 中 加 入_ ，有利 于 分 离 到 革 兰 氏 阴 性菌。59. 细 菌 在 革 兰 氏 染 色 过 程 中 , 最 后 用 蕃 红 复 染 因 是 _, _, _。60. 高倍镜下能看到的物象在油镜下看不到往往是由于_ 和_ 引 起。61. 微生物在培养基中生长时，由于其_ 而使培养基_ 发 生 改 变； 所 以 在 配 制 培 养 基 时， 为 维 持 该 条 件 的 相 对恒 定，常在 培 养 基 中 加 入 缓 冲 物 质 如_或_。62. 一般而言, 微生物在含 糖基质上生长，会产_ ，而使_；微 生 物分解 蛋 白 质或氨 基酸 会产_ ，而使_。63. 在 微 生 物 培 养 过 程 中 使 用 的 培 养 皿 首 先 是 被_ 采 用 的，因 此 又 称 培 养 皿 为 _dish 。 _ 在 其 妻 子 的 启 发 下， 将 固 体培 养 基 使 用 的 凝 固 剂 由 明 胶 改 为_。64. 显 微 镜 的 微 动 螺 旋 每 转 一 圈 升 降 距 离 为_。65. 两 个 典 型 的 革 兰 氏 正 反应 细 菌 和革 兰 氏负 反 应 细 菌 经 革兰氏 染 色 后 都 呈阴 性 反 应 往往 是 由 于 _ 和_ 引 起。66. 检查乳品和饮料是否含有 _ 等肠道细菌， 可采用_ 培 养 基， 在 这 种 培 养 基 平 板 上_ 会 形 成 具 有_光 泽 的 紫 黑 色 小 菌 落。67. 细 菌 鞭 毛 经 镀 银 法 染 色 后 呈_ 色。68. 细 菌 鞭 毛 经 李 夫 森 法 染 色 后 呈_ 色。69. 由 于 升 汞(HgCL2) 有 腐 蚀 作 用, 所 以 不 能 用 于_ 消 毒，特 别是_ 制 品。70. 无 氮 培 养 基 通 常 用 来 培 养_ ， 其 氮 源 来 自 _。四、名词解释精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 9 页，共 20 页10 1. 电 子 显 微 镜2. 普 通 光 学 显 微 镜3. 合 成 培 养 基4. 培 养 基5. 天 然 培 养 基6. 半 合 成 培 养 基7. 革 兰 氏 染 色 法。8. 简 单 染 色。9. 稀 释 平 板 计 数 法10. 显 微 直 接 计 数 法11. 巴 氏 消 毒12. 间 歇 灭 菌13. 消 毒14. 灭 菌15. 过 滤 除 菌16. 湿 热 灭 菌17. 干 热 灭 菌18. 选 择 培 养 基19. 加 富 培 养 基20. 鉴 别 培 养 基21. 数 值 孔 径22. 分 辨 力23. 超 净 工 作 台24. 纯 培 养 技 术25. 焦 深26. 暗 视 野 显 微 术27. 荧 光 显 微 术28. 负 相 差29. 正 相 差五、问题1. 试 述 在 普 通 光 学 显 微 镜 下 测 定 微 生 物 细 胞 大 小 的 基 本 方 法。2. 以 测 苏 云 金 杆 菌 工 业 菌 粉 中 的 活 菌 数 为 例， 试 述 稀 释 平 板 计 数的 基 本 方 法。3. 试 述 划 线 分 离 的 操 作 方 法。4. 如 何 检 查 细 菌 的 运 动 性? 5. 简 述 配 制 培 养 基 的 基 本 原 则 : 6. 试 述 配 制 培 养 基 的 基 本 过 程 及 应 该 注 意 的 问 题。7. 试 述 显 微 计 数 的 基 本 方 法。8. 标 本 片 上 的 某 一 物 象，第一 次 看 到 后 如 何 再 次 找 到 它? 9. 试 述 在 光 学 显 微 镜 下 所 看 到 的Anabaena azotica的 主 要 特 征。10. 革 兰 氏 染 色 反 应 的 成 败 关 键 是 什 么 ? 为 什 么 革 兰 氏 染 色 有 十分 重 要 的 理 论 与 实 践 意 义? 11. 如 何 从 土 壤 中 分 离 得 到 一 个 微 生 物 的 纯 培 养 体? 12. 察氏 培 养 基 的 组 成 为: 蔗 糖:30 克, 磷 酸 氢二 钾: 1.0 克, 硝 酸 钠 :2 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 10 页，共 20 页11 克, 硫 酸 镁 0.5 克, 氯 化 钾: 0.5 克, 硫 酸 亚 铁: 0.01 克 , 蒸 馏 水: 1000 ml. 试述: (1) 该 培 养 基 的 C 源, N 源 各 是 什 么 物 质。(2) 除 C 源 和 N 源 外 的 其 它 物 质 起 什 么 作 用: (3) 该 培 养 基 为 什 么 不 加 生 长 因 子? 微生物学实验复习题答案一、选择题1.C 2.D 3.C 4.C 5.D 6.C 7.A 8.B 9.A 10.C 11.C 12.B 13.A 14.C 15.A 16.A 17.A 18.A 19.A 20.D 21.A 22.D 23.A 24.D 25.E 26.A 27.B 28.C 29.C 30.A 31.A 32.C 33.A 34.A 35.C 36.A 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 11 页，共 20 页12 37.C 38.A 39.B 40.B 二、判断题1. 对。2. 错。3. 对。4. 对。5. 错。6. 对。7. 错。8. 对。9. 对。10. 对。11. 错。12. 对。13. 对。14. 错。15. 错。16. 错。17. 错。18. 对。19. 对。20. 对。21. 对。22. 错。23. 错。24. 对。25. 错。26. 错。27. 对。28. 错。29. 错。30. 错。31. 错。32. 错。33. 错。34. 错。35. 错。36. 对。37. 错。38. 错。39. 错。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 12 页，共 20 页13 40. 对。41. 对。42. 错。43. 错。44. 对。45. 对。46. 错。47. 对。48. 对。49. 错。50. 对。51. 对。52. 错。53. 对。54. 错。55. 对。56 对。57. 对。58. 错。59. 对。三、填空题1. 加 一 滴 水 于 载 玻 片 中 央，用解 剖 针 挑 取 菌 丝 少 许, 将 菌 丝 用 50% 的 酒 精 浸 润，将菌 丝 用 蒸 馏 水 水 洗，将菌 丝 放 入 载 玻 片 水 滴 中 并小 心 分 散，盖上 盖 玻 片2. 印 片 , 干 燥 , 固 定 , 复 红 染 色 2-3 分 钟 , 水 洗 , 晾 干3. 洋 菜( 琼 脂) ， 1.5-2.0% ， 0.5% 4. 涂 片，干 燥，固 定，复 红 染 色 1-2 分 钟，水洗，晾 干5. 锅 内 加 水，灭 菌 物 体 装 锅，对 称 上 紧 密 封 螺 帽 将 锅 密 封 ，加 热 升温，排 尽 锅 内 冷 空 气，升 温至 灭 菌 工 艺 条 件 一 般 为 98kpa ， 在 工 艺条 件 下 保 压 计 时一 般 为 30 分 钟 ，到时 间 后 切 断 热 源，降温，出锅6. 照 配 方 称 取 药 品，将药 品 溶 解 在 一 定 量 的 水 中 后 加 热 煮 沸，将琼 脂 按 量 称 取 后 用 水 浸 湿， 将 浸 湿 的 琼 脂 加 入 煮 沸 的 营 养 液 中，待 琼 脂 全 部 融 化 后 调 节 pH 值，补 充 损 失 的 水 分，分 装 培 养 基 入不 同 的 容 器 中7. 无 色，红色8. 紫 色，红色9. 所 染 染 料 的 颜 色10. 反 光 镜 , 聚 光 镜 , 物 镜 , 目 镜11. 镜 座，镜 臂，载 物 台， 转 换 器，镜 筒，推 动 器, 粗 动 螺 旋 , 微 动螺 旋，聚 光 镜 升 降 螺 旋12. 放 线 菌， 7.5-8.0 13. 真 菌， 5-6 14. 细 菌、 6.8-7.2 15.160-170 /2h 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 13 页，共 20 页14 16. 降 低，适 当 升 高17. 酒 精 脱 色18. 越 小，越 小 心19. 液 体，固 体，半 固 体20. 自 来21. 玻 璃 器 材，高压 蒸 汽 灭 菌22.10 倍 , 9 23.1 mol NaOH 、 1 mol HCL 24. 选 择 培 养 基，加 富 培 养 基，鉴 别 培 养 基25. 纤 维 素，纤 维 分 解 菌，酪 蛋 白，蛋 白 分 解 菌26. 涂 片，干 燥 ，固 定， 结 晶 紫 染 色 1 分 钟，水 洗, 碘 液 媒 染 1 分 钟，水 洗， 95% 的 乙 醇 脱 色 25 秒，水 洗 ，蕃 红 复 染 3-5 分 钟，水 洗，晾 干27. 积 累 代 谢 产 物，天 然 培 养 基，合 成 培 养 基, ，半 合 成 培 养 基28.0.65 ， 40x 29.1.25 ， 100x 或 90x 30.0.25 ， 10x 或 8x 31. 接 种 针，接 种 环32. 酒 精 灯， 1ml 无 菌 吸 管， 9ml 试 管 装 无 菌 水， 9cm 的 无 菌 平 皿33. 红 色，绿 色34. 平 面，凹 面35. 紫 外 灯 照 射，喷 洒 化 学 药 剂( 如 酚) 36. 细 菌 的 运 动 性37. 将 摆 斜 面 用 特 制 木 条 放 在 桌 面 上，将 装 有 固 体 培 养 基 的 试管 趁 热 放 在 特 制木 条 上 摆 成 斜 面，斜 面 长 度 不 得 超 过 试 管 长度 的 1/2 ，将 试 管 棉 塞 部 分 用 灭 菌 报 纸 盖 上，以 防 空 气 中 微 生物 落 到 棉 塞 上 引 起 污 染38. 过 滤 法，蔡 氏 细 菌 过 滤 器 ，滤 膜39. 无 氮40. 酸 性41. 孟 加 拉 红，链 霉 素42. 显 微 镜，镜 台 测 微 尺，目 镜 测 微 尺43. 显 微 镜血 球 计 数 板 。44. 显 微 镜细 菌 计 数 板 。45. 将 镜 台 测 微 尺 置 载 物 台 上，调焦 找 到 台 尺，在低 倍 镜 下 校 正 目镜 测 微 尺 每 格 的 长，在高 倍 镜 下 校 正 目 镜 测 微 尺 每 格 的 长，去掉台 尺 换 上 待 测 样 本 片，在高 倍 镜 下 测 出 十 个 酵 母 菌 宽和 长 的 格数， 将 校 正 值 乘 入，算 出 十 个 酵 母 菌 的 平 均 宽 和 平 均 长，以 平 均 宽Xm 平均 长 Ym 表 示 酵 母 菌 的 大 小。46. 将 待 测 菌 进 行 适 当 的 稀 释， 将 计 数 板 置 于 载 物 台 上 , 在 低 倍 镜下 找 到 计 数 区, 将 菌 液 加 到 计 数 区 上, 调 焦 看 到 菌 体, 按 五 点 取 样法 计 数 五 个 大方 格 的 菌数, 计 算 每 小 格 的 含 菌 数，计算 出 单 位 体积( 如 每 ml) 中 的 含 菌 数。47. 涂 片，风干，加复 红 染 色 3-5 分 钟，水洗，晾干，加墨 素 涂 抹， 风 干。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 14 页，共 20 页15 48. 涂 片， 干 燥，固 定，孔 雀 绿 加 热 染 色 15 分 钟，水洗，复 红 染 色2-3 分 钟，水 洗，晾 干。49. 孔 雀 绿 加 热 染 色 适 当50. 印 片 时 不 能 移 动51. 涂 抹 墨 素 要 薄52. 好 气 ，专 性 厌 氧53. 结 构，组 成，紫， 无54. 前 者 计 数 区 的 深 度 是 后 者 的 五 倍55. 浅 兰56. 间 生，透 明 ，极 节 ，氧 气 ，低 氧 分 压 ，固 定 分 子 氮57.C:N 比 ( 碳 氮 比 ) ，菌 体 生 长，积 累 代 谢 产 物58. 青 霉 素 ( 链 霉 素) ，细 菌 和 放 线 菌，真 菌，结 晶 紫59.G-细 菌 经 结 晶 紫 染 色、碘液 媒 染、酒 精 脱 色 后，菌体 紫 色 脱 去，故 需 用 蕃 红 复 染，这样 在 光 镜 下 才 能 见 到 红 色 的 菌 体。60. 玻 片 置 反，菌 体 着 色 太 浅61. 新 陈 代 谢， pH 值，碳 酸 盐(CaCO3) ，磷 酸 盐62. 酸， pH 下 降, 碱， pH 上 升63.Petri， Petri， Hesse ，琼 脂。64.0.1毫 米65. 酒 精 脱 色 时 间 过 长 ，菌 体 培 养 时 间 太 长66. 大 肠 杆 菌(E.Coli) ，伊 红- 美 兰，大 肠 杆 菌(E.Coli) ，金 属67. 褐68. 红69. 金 属 器 皿 ，铝70. 自 生 固 氮 菌，空气 中 的 N2。四、名词解释1. 电 子 显微 镜 是 利 用 电 子 波 波 长 短，分 辨 力 高 的 特 点 以 电 子 流代 替 光 学 显 微 镜 的 光 束 使 物 体 放 大 成 象 的 超 显 微 镜 检 装 置。2. 用 自 然 光 或 者 灯 光 作 光 源 镜 检 物 体 的 显 微 镜 。3. 由 化 学 成 分 已 知 的 营 养 物 质 配 制 而 成 的 培 养 基。4. 人 工 配 制 的 供 微 生 物 生 长 繁 殖 并 积 累 代 谢 产 物 的 一 种 营 养 基质。5. 由 化 学成 分 不完 全 清 楚的 天 然 物 质 如马 铃 薯, 麸 皮 等 配制 而成 的 培 养 基。6. 由 化 学 成 分 已 知 的 化 学 物 质 和 化 学 成 分 不 完 全 清 楚 的 天 然 物质 配 制 而 成 的 培 养 基。7. 革 兰 氏染 色 是细 菌 的 一种 鉴 别 染 色 法，细菌 首 先 用 结 晶紫 染色，再 用 碘 液 固 定，然 后 用 95% 的 酒 精 脱 色, 最 后 用 蕃 红 复 染。凡 是 菌体 初 染 的 结 晶紫 被 酒 精脱 去 了 紫 色 后，又被 蕃 红 复 染 成 红 色 的细 菌 称 为 革 兰氏 负 反 应细 菌；凡是 菌 体 初 染 的 紫 色 不 能 被 酒 精脱 色，也不 能 被 蕃 红 复 染 成 红 色 的 细 菌 称 为 革 兰 氏 正 反 应 细 菌。8. 用 单 一 染 料 使 微 生 物 细 胞 染 上 所 用 染 料 颜 色 的 染 色 方 法。9. 将 一 定 量 的 样 品 经 十 倍 稀 释 后， 用 平 板 培 养 最 后 三 个 稀 释 度 的样 品 稀 释 液。待菌 落 长 出 后，计数 出 某 一 稀 释 度 的 菌 落 数 后 再 乘精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 15 页，共 20 页16 以 稀 释 倍 数，即 为 样 品 中 的 含 菌 数。10. 利 用 血 球 计 数 板 或 细 菌计 数 板 在显 微 镜下 测 计 出 每 小 格的微 生 物 细 胞 数 量 后，再 换 算 出 单 位 体 积 中 微 生 物 细 胞 总 数 的 测数 方 法。11. 巴 氏 消 毒 是 法 国 微 生 物 学 家 巴 斯 德 发 明 的 一 种 消 毒 方 法。是在 62-63 的 条 件 下， 保 温 半 小 时 杀 死 微 生 物 的 营 养 体 ( 主 要 是 病原 菌) 的 方 法。12. 利 用 100 的 温 度 杀 死 微 生 物 的 营 养 体. 每 次 1 小 时 连 续 三 天，中 间 的 空 隙时 间 让 未 杀死 的 芽 胞 萌 发 成 营 养 体，在下 一 次 100 的 温 度 下 被 杀 死。 如 此 反 复 两 次 可 将 培 养 基 的 微 生 物( 包 括 芽 胞 ) 全 部 杀 死。该方 法 适 用 于 没 有 高 压 灭 菌 器 的 地 方 进 行 灭 菌 处 理。13. 只 杀 死 微 生 物 的 营 养 体 ( 主 要 是 病 原 菌 ) ， 而 不 能 杀 死 微 生 物的 芽 胞 的 除 菌 方 法。14. 利 用 物 理 或 化 学 方 法 杀死 所 有 微生 物 包括 细 菌 的 芽 胞 的除菌 方 法 称 为 灭 菌。15. 利 用 一 定 孔 径 的 滤 膜 阻止 微 生 物的 通 过而 除 去 溶 液 中 或者空 气 中 微 生 物 的 除 菌 方 法。16. 利 用 热 的 蒸 汽 杀 死 微 生 物 的 灭 菌 方 法。湿热 灭 菌 又 分 常 压 蒸汽 灭 菌 和 加 压 蒸 汽 灭 菌。17. 利用干热 空气杀死微 生物的方法。其灭菌工 艺条件通常为160-170 /2h 。18. 根 据 使 用 的 目 的，控制 培 养 基 的 组 成 成 分，使之 有 利 于 某 种 微生 物 的 生 长 而限 制 其 它微 生 物 的 生 长，从而 能 从 自 然 界 混 杂 的群 体 中 分 离 出某 一 种 单一 的 微 生 物。如无 氮 培 养 基 用 来 分 离 土壤 中 的 自 生 固 氮 菌。19. 在 基 本 培 养 基 中 加 入 血 清，动植 物 组 织 液 或 者 其 它 生 长 因 子而 配 制 出 来 的 营 养 特 别 丰 富 的 培 养 基。20. 根 据 微 生 物 的 代 谢 特 点，通过 指 示 剂 的 显 色 反 应，用以 鉴 别 不同 微 生 物 的 培 养 基。21. 数 值 孔 径 是 判 断 物 镜 和 聚 光 镜 性 能 的 重 要 指 标，通常 用 N.A 表示。 N.A = n.sin/2( n 为 介 质 折 光 率，为镜 口 角) 。22. 分 辨 力 是 指 显 微 镜 能 够分 辨 出 的物 体 两点 间 最 小 距 离 的能力。它与 波 长 及 物 镜 的 数 值 孔 径 有 关。23. 利 用 过 滤 除 菌 的 原 理 而 设 计 出 来 的 一 种 无 菌 操 作 工 作 台，鼓风 机 鼓 出 的 空 气通 过 孔径 很 小 的薄 膜 将 空 气 中的 微 生物 过 滤后 变 成 无 菌 空 气 吹 向 操 作 台，可防 止 周 围 有 菌 空 气 流 入，能保 证操 作 台 始 终 保 持 无 菌 状 态，便于 无 菌 操 作。24. 纯 培 养 技 术 是 培 养 某 个 单 一 微 生 物 的 方 法。包括 培 养 基 的 制作 与 灭 菌。单一 微 生 物 的 分 离 与 纯 化, 和 无 菌 操 作 接 种 技 术。25. 焦 深 是 指 清 晰 的 目 的 象的 上 面 和下 面 所看 见 的 物 象 之 间的距 离。它与 放 大 倍 数 成 反 比，即放 大 倍 数 越 大, 焦 深 越 小。26. 利 用 暗 视 野 聚 光 器 能 阻 止 光 线 直 接 照 射 标 本，而 使 光 线 斜 射在 标 本 上。在显 微 镜 中 见 到 黑 暗 视 野 中 明 亮 物 象 的 镜 检 技 术。27. 以 紫 外 光 作 光 源 的 显 微 镜 检 技 术。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 16 页，共 20 页17 28. 在 黑 暗 视 野 中 看 到 明 亮 物 体 的 相 差 镜 检 技 术。29. 在 明 亮 视 野 中 看 到 黑 暗 物 体 的 相 差 镜 检 技 术。五、问题1. 测 定 微 生 物 细 胞 的 大 小 主 要 使 用 目 镜 测 微 尺。其方 法 如 下: （1）先用 长 度 已 知 的 镜 台 测 微 尺 校 正 目 镜 测 微 尺。校正 的方 法是让 台尺 与目尺 重叠, 看 台尺 的 X 格正好 与目尺 的 Y 格重叠，然后 用计 算 目 尺 每 格 的 长 . 分 别 校 正 目 镜 测 微 尺 在 低 倍 镜, 高 倍 镜 及 油 镜 下 每 格 所 代 表 的实 际 长 度。（2）将 待 测 微 生 物 制 成 水 浸 片 或 染 色 涂 片 置 载 物 台 上， 调 焦 找 到微 生 物 后 用 目 镜 测 微 尺 测 量 其 宽 几 格，长几 格, 然 后 乘 上 相 应 放大 倍 数 下 的 校 正 值。（ 3）一 般 测 10 个 微 生 物，然 后 以平 均 值 表 示。（4） 若 是 酵 母、 细 菌 等 单 细 胞 微 生 物, 通 常 测 其 宽 和 长， 然 后 以平 均 宽平 均 长 表 示, 单 位 为 m 。2. 答：（1）测数 前 先 准 备 好 测 数 用 的 1ml 无 菌 吸 管,9cm 无 菌 平 皿，9ml 试 管 无 菌 水 和 牛 肉 膏 蛋 白 胨 琼 脂 培 养 基。（2） 称 取 10 克 工 业 菌 粉 加 入 90ml 无 菌 水 中 置 摇 床 上 或 用 手 振荡 20-30分钟，让 菌 体 分 散。（3） 将上 述 振 荡 过的 菌 液 按无 菌 操 作 法进 行 十倍 稀 释直到 10-8。（4） 取 9cm 无 菌 平 板 皿 9 套 用 记 号 笔 在 平 皿 底 编 号， 10-8编 3 套， 10-7编 3 套， 10-6编 3 套。（5）用 1 支 1ml 的 无 菌 吸 管，取 1ml 10-8的 稀 释 菌 液 放 入 编 号10-8的 平 皿 中，如 此 将 三 个 重 复 做 完。 同 法 取 10-7稀 释 菌 液 放 入三 个 编 号 为 10-7平 皿 中。 同 法 取 10-6稀 释 菌 液 放 入 三 个 编 号 为 10-6 平 皿 中.( 均 要 按 无 菌 操 作 法 做) 。（6） 将 牛 肉 膏 蛋 白 胨 琼 脂 培 养 基 熔 化 冷 至 45-50 后，在酒精 灯 火 焰 边 按 无 菌 操 作 法 倒 入 上 述 9 套 平 皿 中，每个 加 入 量大 约 15-20ml ，边加 边 摇 动 平 皿, ，使培 养 基 与 菌 液 充 分 混 匀。（7） 待 培 养 基 凝 固 后, 将 平 板 倒 过 来， 置 28-30 下 培 养 48 小 时后 计 数。3. 答：（ 1） 取 9ml 无 菌 平 皿 一 套 在 火 焰 旁 按 无 菌 操 作 法 倒 人 15-20 ml 营 养 琼 脂，让其 冷 凝 成 平 板。（2）左手 拿 上 述 平 板, 右 手 拿 接 种 环 在 火 焰 上 灭 菌 后 沾 取原 始 分 离 物 在 平 板 上 平 行 划 线 三 条。（3）将接 种 环 在 火 焰 上 灭 菌, 左 手 平 板 转 动 大 约 70 度，用灭菌 接 种 环 通 过 第 一 次 划 线 的 地 方 作 二 次 划 线，亦划 三 条。（4）同上 法 再 作 第 三 次, ，第 四 次 划 线。（5）盖上 平 板 盖，将平 板 倒 过 来 置 28-30 下 培 养 2-4 天 后 观察 结 果。划的 好 应 在 第 四 次 划 线 处 出 现 单 个 菌 落。注: 本 答 案 也 可 画 图 说 明。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 17 页，共 20 页18 4. 检 查 细 菌 的 运 动 性 有 两 种 方 法: （1）镜检 法将 待 检 样 品 制 成 菌 悬 液, 滴 一 点 菌 液 于 一 盖 玻 片上，取一 凹窝 载 玻 片，将凹 窝 对 准 菌 悬 液 盖 在 盖 玻 片 上，然后 将 盖 玻 片 和 载玻 片 一 起 翻 转，让 菌 悬 液 在 凹 窝 上 的 盖 玻 片 下。 然 后 在 显 微 镜 下观 察， 观 察 应 找 悬 液 的 边 缘， 因 细 菌 为 了 更 多 地 接 触 空 气， 总 向 水滴 的 边 缘 运 动。观察 时 要 注 意 将 细 菌 的 运 动 与 分 子 的 布 朗 运 动区 别 开。（2）半固 体 穿 刺 法将 待 检 细 菌 穿 刺 接 种 在 半 固 体 试 管 培 养 基 中 , 若 细 菌 仅沿 穿 刺 线 生 长, 说 明 细 菌 不 运 动。 若 细 菌 沿 穿 刺 线 向 周 围 扩 散 生长, 说 明 细 菌 有 运 动 性。5. 培 养 基是 人 工 配 制 的 供 不 同 微 生 物 生 长 繁 殖，或 用 于 积 累 代谢 产 物 的 营 养 基 质。所 以 配 制 培 养 基 时 应 注 意 以 下 原 则：（1） 根 据 微 生 物 的 不 同 选 用 不 同 的 培 养 基， 以 满 足 微 生 物 对营 养 物 的 需 要。如 自 养 型 微 生 物 所 要 求 营 养 较 简 单， 而 异 养 型 微生 物 营 养 要 求 较 复 杂。 培 养 细 菌， 放 线 菌， 真 菌 等 各 有 不 同 的 培 养基。（2） 注 意 各 种 营 养 物 质 的 浓 度 与 配 比。 微 生 物 生 长 所 需 要 的营 养 物 质 往 往在 适 当 时才 生 长 良 好。浓度 大 往 往 会 抑 制 微 生 物的 生 长。 如 糖 类，各 种 重 金 属 盐 类 如 果 浓 度 太 高， 也会影 响 微 生 物的 生长。同时各种 营养物 质的 浓 度比也应 注意，特别是 C/N 比。（3）注 意 将 培 养 基 的 pH 值 控 制 在 一 定 范 围 内。 为 了 防 止 因 微生 物 生 长 繁殖 或 积 累 代谢 产 物 后 影 响 培 养 基 pH 值，常在 其 中 加入 磷 酸 盐，碳酸 盐，以维 持 培 养 基 pH 值 的 相 对 恒 定。（4）同 时 还应 考 虑培 养 基的 氧化 还 原电 位 及 原 材 料的 经济 、易购 和 来 源 广 泛 的 原 则。6. 制 培 养 基 的 基 本 过 程 是: （1）按 培 养 基 的 配 方 称 取 各 种 药 品，用 量 太 少 的 药 品 应 配 制成 溶 液 后 再 取 一 定 量 加 入。（2） 将 各 种 药 品 加 水 溶 解，通常 是 加 所 需 水 量 的 一 半。（3）若 配 固 体 培 养 基，按 2% 的 用 量 称 取 琼 脂， 用 水 将 琼 脂 浸湿 一 下，用 手 挤 去 琼 脂 中 过 多 的 水 分，加入 2 的 溶 液 中。（4） 加 热 至 琼 脂 全 部 溶 解，并补 足 所 需 的 全 部 水 量。（5） 用 1mol NaOH 和 1mol HCL 调 节 pH 至 要 求 值。（6） 用 分 装 器 将 培 养 基 分 装 入 试 管 或 三 角 瓶 中，塞上 棉塞并 包 扎，灭 菌 后 备 用。 注 意 事 项: （1） 过 程 中，在加 热 熔 化 琼 脂 时，要不 断 搅 拌，以防 糊 底。（2）分装 时 不 要 让 培 养 基 沾 染 试 管 口 或 瓶 口，以防 培 养 过 程中 容 易 污 染 杂 菌。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 18 页，共 20 页19 7. 显 微 计 数 通 常 用 来 测 微 生 物 单 细 胞 的 数 量， 大 一 点 的 细 胞 如 酵母 菌 用 血 球 计 数 板，小一 点 的 细 胞 如 细 菌 用 细 菌 计 数 板。该测 数方 法 不 能 区 别 死 活 细 胞，测出 的 是 微 生 物 总 的 细 胞 数 量。（1） 血 球 计 数 板 和 细 菌 计 数 板 构 造 相 似，计 数 区 的 面 积 都 是1mm2，两 者 的 差 别 在 于 血 球 计 数 板 的 深 度 为 0.1mm。细 菌 计 数 板的 深 度 为 0.02mm。无论 是 血 球 计 数 板 还 是 细菌 计 数 板 计 数 区都 划 为 25 个 大 方 格， 每 个 大 方 格 又 划 为 16 个 小 格。 所 以 每 小 格的 体 积 为 1/4000 mm3或 1/20000mm3。（2） 计 数 时, 先 在 显 微 镜 下 找 到 计 数 区， 然 后 将 菌 液 稀 释 到 适当 浓 度，取 少 量 菌 液 滴 在 计 数 区 上 盖 上 特 制 盖 玻 片 ，亦 可 先 盖 盖玻 片。然后 用 吸 管 将 菌 液 从 计 数 板 上 的 沟 里 加 入。靠菌 液 的 表 面张 力 充 满 计 数 区。（3）计数 时 采 取 五 点 取 样 法 数 数，即四 角 各 取 一 个 大 方 格 ，再 在 中 央 取 一个 大 方 格。计数 时 大 方 格 四 周 压 线 的 细 胞 只 数 两边，以防 增 加 数 量。（4）将 5 个大 方 格 的菌 数加起 来 除 以 80 得 出 每 个 小 格 的 菌 数，再乘 以 4000 即 为 1mm3的 菌 数，再乘 上 1000 即 为 1ml 的 菌 数，乘上 稀 释 倍 数 即 为 样 品 含 菌 数。8. 做 到 这 一 点， 首 先 取 决 于 显 微 镜 的 好 坏， 若 显 微 镜 上 的 推 动 器 带有 纵 横 标 尺，很容 易 做 到 这 一 点。首先 记 住 标 本 片 放 到 推 动 器 上的 方 向，然 后 记 下观 察 某一 物 体时 推 动 器 上 的 纵 横 标 尺 的数字。如纵 3 ，横 4 。当 标 本 片 拿 下 来 后，若要 重 复 观 察 原 来 的 物 象，只要 按 原 方向 将 标 本 片 荚在 推 动 器上，将推 动 器 推 动 到 第 一 次 观 察 该 物 体的 纵，横标 尺 数 字 纵 3 ，横 4 ，即可 看 到 第 一 次 观 察 过 的 物 体。9.Anabaena azotica的 主 要 特 征 是: （1）菌体 为 丝 状 体，营养 细 胞 为 绿 色，藻丝 不 扭 曲。（2）该菌 有 异 型 胞, 异 型 胞 间 生，无色 透 明，两端 有 极 点。（3）厚壁 孢 子 无 色、大、两端 无 极 点。10. 答： 通 过 革 兰 氏 染 色，可 把 几 乎 所 有 的 细 菌 都 分 成 G和 G菌 两大 类 细 菌，在 细 胞 结 构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态 和药 物 敏 感 性 等 方 面 都 呈 现 出 明 显 的 差 异。因此，任何 细 菌 只 要 通过 革 兰 氏 染 色，即可 提 供 不 少 重 要 的 生 物 学 特 性 方 面 的 信 息。革 兰 氏 染 色 反 应 的 成 败 关 键 是: （1）菌龄:12-24 小 时 的 纯 培 养 物。（2） 革 兰 氏 染 色 操 作 时， 要 严 格 控 制 酒 精 脱 色 时 间 ， 菌 液 涂布 均 匀 而 薄 。（3）养基 的 组 成。11. 首 先 要 根 据 分 离 对 象选 择 适 宜的 培 养 基。若要 分 离 真菌 应 选用 马 丁- 孟 加 拉 红 选 择 培 养 基；若要 分 离 细 菌 应 选 用 牛 肉 膏 蛋 白胨 培 养 基；若要 分 离 放 线 菌 应 选 用 高 氏 培 养 基。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 19 页，共 20 页20 土 样 采 回 来 后，用常 规 的 十 倍 稀 释 分 离 法 进 行 稀 释 分 离，若 分 离 细 菌，一般 稀 至 10-8, 若 分 离 放 线 菌, 一 般 稀 至 10-6；若分 离 真菌，一 般 稀 至 10-4。 取 最 后 三 个 稀 释 度 倒 平 板 获 得 单 个 菌 落。将 平 板上 出 现 的 单 菌 落 转 接 斜 面 培 养，同 时 镜 检 菌 体 的 纯 度，若 不 纯，应将 培 养 的 单 菌 落 斜 面 再 次进 行 稀 释 分 离。倒 平 板 获 得 单 菌 落，转接 斜 面 培 养，同时 镜 检 菌 体 的 纯 度。反复 几 次 直 到 得 到 菌 体 单 一的 单 菌 落 方 可 认 为 是 某 一 微 生 物 的 纯 培 养 体。12. （1）该培 养 基 的 C 源 物 质 是 蔗 糖， N 源 物 质 是 硝 酸 钠。（2）磷 酸 氢 二 钾、硫酸 镁、氯化 钾、 硫 酸 亚 铁 为 该 培 养 基 提 供 矿质 营 养。蒸馏 水 提 供 水 分。（3） 该 培 养 基 培 养 的 微 生 物 在 培 养 基 上 能 合 成 自 身 所 需 的 全部 生 长 因 子，故无 需 添 加 生 长 因 素, 该 培 养 基 所 培 养 的 微 生 物 为野 生 型。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 20 页，共 20 页