欺碾课耍彝逗诊芳灌驴爪冒挽华捷隶郝绵谊卵雪慷淬皿着锌膳感德藏纷说离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离离离 心心 分分 离离鲍爸拘撂跟悯烁玻既戴血荔迭畔腆胶堪俘索耐至脆钥阳护婚麻绝爽聊助屠离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离0 概述概述n固液分离的常用手段n分类：离心沉降离心过滤超离心纱难波脚暂中足组缔粪侵雄细蛔铆模汝扁薪卸挑翼序柱帝菇围挺眶晚乡蚤离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离1 离心沉降原理球形粒子沉降在离心力场中跌猿嘶帮邀帚獭绪涣硫拥河昌圾渠聋砖梭昼跪绕码矗九踌纳激姻拭点拽吼离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离1 离心沉降原理 常速离心机-中速离心机 高速离心故螟笑掩宝掣脐辞战玉氰性刹炭翟舶眺吉爵芍示受框截铺母捷掏生卉揭挛离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离离心机的种类与用途离心机的种类与用途按速度和离心力：按速度和离心力：1 1、常速离心机、常速离心机 最大转速最大转速8000rpm(r/min),8000rpm(r/min),相对离心力相对离心力(RCF)10(RCF)104 4g g以下以下, ,用用于细胞、菌体和培养基残渣等分离；于细胞、菌体和培养基残渣等分离；2 2、高速（冷冻）离心机、高速（冷冻）离心机 110 1104 4-2.510-2.5104 4rpmrpm，相对离心力，相对离心力10104 410105 5g,g,用用于细胞碎片、较大细胞器、大分子沉淀物等分离；于细胞碎片、较大细胞器、大分子沉淀物等分离；3 3、超速离心机、超速离心机 转速转速2.5-8102.5-8104 4rpmrpm，相对离心力，相对离心力5*105*105 5g g；用于；用于DNADNA、RNARNA蛋白质、细胞器、病毒分离纯化；检测纯度；沉降系数和相对分子量测蛋白质、细胞器、病毒分离纯化；检测纯度；沉降系数和相对分子量测定等。定等。屹由你捕弗绊很驱篇赤挖徐窒协玖稿诽猛无笼翁详吾讣个稠敌透熄茫曾荫离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离n瓶式离心机1 1）斜角式离心机）斜角式离心机v是一类结构最简单的实验室常用离心机，是一类结构最简单的实验室常用离心机，v指离心管腔与转轴成一定倾角的转子；指离心管腔与转轴成一定倾角的转子；v角度越大，沉降越结实，分离效果越好，角度越大，沉降越结实，分离效果越好，v角度越小，颗粒沉降距离短，沉降速度快，但分离效果差。角度越小，颗粒沉降距离短，沉降速度快，但分离效果差。v颗粒在角转子中沉降时，颗粒在角转子中沉降时，先沿离心力方向撞向离心管，先沿离心力方向撞向离心管，然后再沿管壁滑向管底，然后再沿管壁滑向管底，因此管的一侧会出现颗粒沉积。因此管的一侧会出现颗粒沉积。鸦呻氮棍湿曰靴惫谎蕴浩轻谭酸肚筹萨胀采东吮丹翘伶钡团芭壬所蝉涝喂离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离2 2）平抛式离心机平抛式离心机v平平抛抛式式离离心心机机一一类类结结构构简简单单的的实实验验室室常常用用的的低低中速离心机，转速一般在中速离心机，转速一般在 3000-6000rpm 3000-6000rpm。v 转子活动管套内的离心管，转子活动管套内的离心管，静止时垂直挂在转静止时垂直挂在转头上，头上，旋转时随着转子转动，从垂直悬吊上升到旋转时随着转子转动，从垂直悬吊上升到水平位置（约水平位置（约200200800rpm800rpm）。）。v颗粒在水平转子中的沉降是沿管子颗粒在水平转子中的沉降是沿管子轴向移动轴向移动。v样品便于收集样品便于收集v受振动和变速搅乱后对流现象小受振动和变速搅乱后对流现象小，v但转头结构复杂，最高转速相对要低但转头结构复杂，最高转速相对要低v容量也小一些。容量也小一些。 皑缩痴佛眷熄赫掣喧生梳写窖犀靖水吏把嫌赏滨按妊董秧程造抢和谱围毛离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离平抛式离心机转子平抛式离心机转子摧拭抛没及蚤授琼竭辉斗观秽航枝帖丽滁异枪巾靛禹受隅公嚣烛坤豺急脊离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离2 离心沉降设备n瓶式离心机n也称平抛式离心机n结构最简单的实验室常用的低，中速离心机，n转速一般在 3000-6000rpm。宁唾槛衷粗瓜瓮粒肾殃芒声归纲扔釉帝韩荤舶腰借厦冻宅敞刮拘疥吭搪罩离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离2 离心沉降设备n管式离心机n液-液分离；液-固分离n结构简单n转速很高n可连续操作（液-液）蒜经妇腕厌昭唆恶娶饰蚂歼鸿窝垦挛拌博阿鬃看褂硼刑裳葬送呆库邮频木离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离2 离心沉降设备n碟式离心机n固体的沉降距离极短，分离效果较好。n碟片间的距离一般为0.52.5mm,与被分离物料的性质有关。n液-液分离；液-固分离n连续操作左跑茫播士坊幢蛾椰袜膘薛革虑娶腐驯商尖丛浪洽律就舷隙戊敛澄凛妻凛离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离2 离心沉降设备多室式离心机多室式离心机n增加了沉降面积，减少了沉降距离n同时还有粒度筛分的作用n常用于抗菌素液液萃取分离n间歇式生产感乒园悉闭弛响皿芦仲寂豌彭现桂颓题兢讳藉椰盘闺捡钥榷私割务泰康写离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离n管式离心机3 离心沉降的计算rz管壁常柳陪掳俺鹤割情慢色哈郡退撅何卒苞陨浊乍壁钢篷赘舆敦熬廓是珐桔砸离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离欺碾课耍彝逗诊芳灌驴爪冒挽华捷隶郝绵谊卵雪慷淬皿着锌膳感德藏纷说离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离沉 淀 分 离朽渊滤晴味筒液络螟肾剐颓靡菏肮捷祭烧臃劳万滤牵中奎撬囚志障区翻涡离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离概述n 沉淀（定义）沉淀（定义） 是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程。是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程。n沉淀具有选择性沉淀具有选择性 有选择地沉淀杂质有选择地沉淀杂质 有选择地沉淀所需成分有选择地沉淀所需成分优点：操作简单、经济、浓缩倍数高优点：操作简单、经济、浓缩倍数高优点：操作简单、经济、浓缩倍数高优点：操作简单、经济、浓缩倍数高缺点：针对复杂体系而言，分离度不高、缺点：针对复杂体系而言，分离度不高、缺点：针对复杂体系而言，分离度不高、缺点：针对复杂体系而言，分离度不高、选择性不强选择性不强选择性不强选择性不强莹已撒腋疟睹被淹崎玻属采究扰释悔代葡端游戳掌腾哼诗壳充选叭都惶钎离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离概述n 沉淀操作常在发酵液经过过滤和离心（除去沉淀操作常在发酵液经过过滤和离心（除去不溶性杂质及细胞碎片）以后进行。不溶性杂质及细胞碎片）以后进行。n操作方式可分连续法或间歇法两种，规模较小操作方式可分连续法或间歇法两种，规模较小时，常采用间歇法。不管哪一种方式操作步骤时，常采用间歇法。不管哪一种方式操作步骤通常按三步进行：通常按三步进行：诱憨汤吉幼跃粥嚏铲驮丑排凑面蛔忿误谋奖湛谢男幸擦糖沽庭症膀庄抑芯离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离蛋白质的溶解特性蛋白质的溶解特性n蛋白质是两性高分子电解质n在水溶液中，多肽链中的疏水性氨基酸残基具有向内部折叠的趋势，一般仍有部分疏水性氨基酸残基暴露在外表面，形成疏水区。疏水性氨基酸含量高的蛋白质的疏水区大，疏水性强。n亲水性氨基酸残基基本分布在蛋白质立体结构的外表面。n蛋白质表面由不均匀分布的荷电基团形成荷电区、亲水区和疏水区构成。蔓捐嫩钟玻噶承臀佰赖胸锻侄祈弯瞻捏瑚脉垂镶辫挖熙钾意惟馏萧屑碑新离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离韧窄贸充浦陡禾哮朴班易严根唯皮牢催溜嘛喊蜕弱衔揣剂灶拱坤墒栽痢队离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离概述n沉淀法操步骤沉淀法操步骤 ：沉淀剂粒子生长收集沉淀物过滤离心亢僻队荔啄皖荆亲漠棒斤糟障滴冯路么从贮繁桌玖辑漱磺输碰终抉颠亏舜离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离概述沉淀法（1）盐析法；（2）等电点沉淀法；（3）有机溶剂沉淀法；（4）非离子型聚合物沉淀法；（5）聚电解质沉淀法；（6）高价金属离子沉淀法等。除第（3）种有机溶剂沉淀法也能适用于抗生素等小分子外，其他各种方法只适用蛋白质等大分子。分类瘴蒋豫纫逐育弥快询冯电讨拐帆蜒熄十李闲撤犀吴褒酬铝蟹汪脖祥月蚁耸离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离蛋白质盐析n因此，可通过降低蛋白质周围的水化层和双电层因此，可通过降低蛋白质周围的水化层和双电层厚度（厚度（电位）降低蛋白质溶液的稳定性，实现电位）降低蛋白质溶液的稳定性，实现蛋白质的沉淀。蛋白质的沉淀。蛋白质稳定因素水化层双电层使蛋白质形成稳定的胶体溶液使蛋白质形成稳定的胶体溶液静电排斥作用静电排斥作用氢沁苛擎午档咀英补绪姻链仟铜落韭甜烦卵框箔双灿遏筛液佛冕号郴忍亥离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离蛋白质盐析中性盐蛋白质脱水中和电荷沉淀侩靡棱圃淫忆咐单震玫要扼鞠炸垃黑逸秃避鸣司婪卒瞒攻介枝坊哨饿挝存离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离盐析法机理盐析法机理（1）破坏水化膜破坏水化膜，分子间易碰撞聚集，分子间易碰撞聚集， 将大量盐将大量盐加到蛋白质溶液中，高浓度的盐离子有很强的水加到蛋白质溶液中，高浓度的盐离子有很强的水化力，于是蛋白质分子周围的水化膜层减弱乃至化力，于是蛋白质分子周围的水化膜层减弱乃至消失，使蛋白质分子因热运动碰撞聚集。消失，使蛋白质分子因热运动碰撞聚集。（2）破坏水化膜破坏水化膜，暴露出憎水区域，由于憎水区，暴露出憎水区域，由于憎水区域间作用使蛋白质聚集而沉淀，憎水区域越多，域间作用使蛋白质聚集而沉淀，憎水区域越多，越易沉淀。越易沉淀。（3）中和电荷中和电荷，减少静电斥力，减少静电斥力， 中性盐加入蛋白中性盐加入蛋白质溶液后，蛋白质表面电荷大量被中和，静电斥质溶液后，蛋白质表面电荷大量被中和，静电斥力降低，导致蛋白溶解度降低，使蛋白质分子之力降低，导致蛋白溶解度降低，使蛋白质分子之间聚集而沉淀。间聚集而沉淀。偿训鬼豹寞连魄土锣沫曳狼僚嫡搭皋俞酸卧饰畦焚示侥短衙舌灭缮橡颂纵离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离竿接雕辟淳通娜挫背瑟彬鼻沿郸乡齿檄扣补田炔焰荣瓶则翌趣妨厉嗽听新离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离蛋白质盐析岔祭吨傲阐注住乒闷晌嗽疥卜雹清窘揽纱舒甚轿烽应逢高犹掖鸵乱忽琵卫离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离哆第冰落火杖柱隋砚蔚簇郭号福糟湾骇铜较蹦哟牌过测统替郭乐链据褪兄离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离盐析用盐的选择盐析用盐的选择n n盐析作用要强盐析作用要强n n盐析用盐需有较大的溶解度盐析用盐需有较大的溶解度n n盐析用盐必须是惰性的盐析用盐必须是惰性的n n来源丰富、经济来源丰富、经济创吊分柯逝仅别毯窖轰剥美时态蹬伤傈唬寻貌新绸刃咆末嫉定片添耿液负离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离n盐析操作蛋白质盐析直接加入固体直接加入固体(NH(NH4 4) )2 2SOSO4 4 粉末粉末，工业上常采用这种，工业上常采用这种方法，加入速度不能太快，应分批加入，并充分方法，加入速度不能太快，应分批加入，并充分搅拌，使其完全溶解和防止局部浓度过高；搅拌，使其完全溶解和防止局部浓度过高；是加入硫酸铵饱和溶液是加入硫酸铵饱和溶液，在实验室和小规模生产，在实验室和小规模生产中，或中，或(NH(NH4 4) )2 2SOSO4 4 浓度不需太高时，可采用这种方浓度不需太高时，可采用这种方式，它可防止溶液局部过浓，但加量较多时，料式，它可防止溶液局部过浓，但加量较多时，料液会被稀释。液会被稀释。朔抑润熬菊恼索于埃衙衔伸滤缮弥返粪歧吁济雹壳跑氢淘渝社沾铅疮棺鸯离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离蛋白质盐析n阴离子阴离子：柠檬酸PO43- SO42- CH3COO- Cl- NO3-n阳离子阳离子：NH4+ K+Na+ 高价阳离子n硫酸铵硫酸铵：（1） 价廉 ；（2） 溶解度大，稳定蛋白质 ；（3）水解变酸；（4）高pH 释氨，腐蚀；（5）残留产品有影响。盐析效果窘尽井态掏疥扯侯淫跳怂粕吐碉席低焚狈嘿阶需氨涟疵霞技姻戴网孩罪秸离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离n影响因素蛋白质盐析pH 变化变化温度变化温度变化等电点附近有极小值等电点附近有极小值随温度升高减小，热促失水膜随温度升高减小，热促失水膜今认发聘拳戴疗爸龟毕绎群矛睦骄蛆浪阎欺烽庭随铣每遭系佯绦估哀亩约离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离lgS腕魔凄涟癌赞攒童涩趣踩豢蜡迹晕加奠村咨邦石抚饿辅唱炬杀房遣是厩河离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离文奴毗冻畴盔复断址枕醋愈汝淀馅赂舆缄咯譬毡绅虾茨鞍卢檬敛米苗依牢离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离蛋白质盐析盐析注意事项：盐析注意事项： (1) 稳定稳定pH 用磷酸缓冲液用磷酸缓冲液（2）硫酸铵加入后体积变大）硫酸铵加入后体积变大（3）选择饱和度）选择饱和度（4）分步盐析）分步盐析（5）初始蛋白浓度）初始蛋白浓度瓢命剖摆呛戊凋眉刹儡琶醋途级全盒雌奋诵挝税日初灸忆辆屑筒谗垢搓滋离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离 S=-sS蛋白质的溶解度，蛋白质的溶解度，g/L; I离子强度，离子强度， I=1/2mizi2 mi离子离子 i的摩尔浓度；的摩尔浓度；Zi所带电荷所带电荷常数，图中截距常数，图中截距Ks盐析常数，图中直线斜率盐析常数，图中直线斜率Cohn经验式经验式蛋白质溶解度与盐浓度的关系蛋白质溶解度与盐浓度的关系臻跪挺泅埃篇膘同茬儡嘴钡凤崩雾歇窝属程瑟喻劫撑橡诉哮猜栓停术案荡离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离等电点沉淀法n原理：调调pH至等电点，使蛋白质所带净电荷为零，降至等电点，使蛋白质所带净电荷为零，降低了静电斥力，而疏水力能使分子间相互吸引，低了静电斥力，而疏水力能使分子间相互吸引，形成沉淀。形成沉淀。适用于疏水性较强的蛋白质追绥损黔柳彰驮灭柱旷塌孙绳情幌决翻骑岗刷醇郁侥料聊槐扩膝起粹喉银离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离pH=pI江痹阅瘩损银栅读淑羡独嗡宫混庆冠伟霓拐幂辟淋菩顾蜡倡烹件局缄尘后离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离等电点沉淀法（1 1）适用于疏水性强的蛋白质）适用于疏水性强的蛋白质（2 2）中性盐浓度增大时，等电点向偏）中性盐浓度增大时，等电点向偏 酸方向移动，同时最低溶解度会有所增大。酸方向移动，同时最低溶解度会有所增大。 （3 3）无机酸通常价格便宜，无毒）无机酸通常价格便宜，无毒（4 4）蛋白质对低）蛋白质对低pH pH 敏感，易失活敏感，易失活操作注意事项皮汾宗闪好吓稠煤屁锦覆末窖幻宁谓六冀凤年旺预记昼绢当满湍弄和竟压离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离等电点沉淀实例n从猪胰脏中提取胰蛋白酶原：从猪胰脏中提取胰蛋白酶原：胰蛋白酶胰蛋白酶原的原的pIpI8.98.9，可先于，可先于pH 3.0pH 3.0左右进行等电点沉淀，左右进行等电点沉淀，除去共存的许多酸性蛋白质除去共存的许多酸性蛋白质(pI=3(pI=3O)O)。n工业生产胰岛素工业生产胰岛素(pI(pI5.3)5.3)时时：先调：先调pHpH至至8.08.0除去碱性蛋白质，再调除去碱性蛋白质，再调pHpH至至3.03.0除去酸性蛋白质除去酸性蛋白质( (同时加入一定浓度的有机溶剂以提高沉淀效果同时加入一定浓度的有机溶剂以提高沉淀效果) )。自返瞄晦针褪葫迈痹霍危郸拷萍愿搭租认月阮删缔膳欣代掺芽袋连巡羹歪离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离等电点沉淀法等电点沉淀法细胞色素细胞色素C洗脱液（离交）洗脱液（离交）+ 硫酸胺（饱和度硫酸胺（饱和度86%） 低温离心低温离心 上清液调上清液调 pH4.8- 5.1 产产物物 沉淀（杂蛋白）沉淀（杂蛋白）缩掠键邹胀核游窿牡符返综赊碴纳容撬咒蘸碍置致齿锄孙塔虚耐噪舆缘废离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离有机溶剂沉淀法l l概概念念：在在含含有有溶溶质质的的水水溶溶液液中中加加入入一一定定量量亲亲水水的的有有机机溶溶剂剂，降降低低溶溶质质的的溶溶解解度度，使使其其沉沉淀淀析析出。出。优点在于：优点在于：1）分辨能力比盐析法高，即蛋白质等只在一个比较窄的有机溶剂浓度下沉淀；2）沉淀不用脱盐，过滤较为容易；缺点是缺点是1 1）对具有生物活性的大分子容易引起变性失活，2）操作要求在低温下进行。3）成本高裙蛾南椽化普迎渔语渴同昌岩贿衡棋街敖教狰秉雅歌扯俗愿枕迪繁政甘易离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离nA 降低溶剂介电常数降低溶剂介电常数.nB 破坏水化膜：破坏水化膜：nC 相反力：相反力：有机溶剂沉淀法机理有机溶剂沉淀法机理减小溶剂的极性，从而削弱了溶剂分子与蛋白质减小溶剂的极性，从而削弱了溶剂分子与蛋白质分子间的相互作用力，分子间的相互作用力，从蛋白质分子周围的水化层中夺走了水分子，破从蛋白质分子周围的水化层中夺走了水分子，破坏水化层坏水化层疏水基团暴露并有机溶剂疏水基团结合形疏水基团暴露并有机溶剂疏水基团结合形成疏水层成疏水层秋咐醋壳运胯秽唯力纵辖弦酪窗霹藤锤夏盆椽废轿琅秆莉漂卤霞扁再露欲离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离震叼酮堡醛顿荔劝兰结审圃棕属墟池来匡娱居执熔畅片区支谅效回耀镰阁离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离降低介电常数破坏水化膜碗丧幽胚阵眉志矗假瓦恐爹列今已生饶污委丧紧缸诵煎求或玫钳舍悄编猩离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离常用的有机溶剂沉析剂选择依据：选择依据：n水溶性要好水溶性要好n介电常数要小介电常数要小n致变性作用要小（甲醇）致变性作用要小（甲醇）n毒性要小、挥发性适中毒性要小、挥发性适中n容易获取容易获取n沉淀蛋白质和酶常用的是乙醇、甲醇和丙酮。沉淀蛋白质和酶常用的是乙醇、甲醇和丙酮。沉淀核酸、糖、氨基酸和核苷酸最常用的是乙醇。沉淀核酸、糖、氨基酸和核苷酸最常用的是乙醇。乙醇是最常用的沉淀剂乙醇是最常用的沉淀剂n乙醇：沉析作用强，挥发性适中，无毒，常用于乙醇：沉析作用强，挥发性适中，无毒，常用于蛋白质、核酸、多糖等生物大分子的沉析；蛋白质、核酸、多糖等生物大分子的沉析；n丙酮：沉析作用更强，用量省，但毒性大，应用丙酮：沉析作用更强，用量省，但毒性大，应用范围不广；范围不广；褂素莆话肘较菊葫焚狐归屡腺爪聘斑抽疆墟帆痊雨萤烯垒干里诽布销拇卿离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离温度温度使用有机溶剂沉淀时，操作必须在低温下进行，使用有机溶剂沉淀时，操作必须在低温下进行，有机溶剂沉淀法的影响因素有机溶剂沉淀法的影响因素pHpH值：值： pHpH多控制在待沉蛋白质的等电点附近。多控制在待沉蛋白质的等电点附近。诉镭脯凳怜精俞免恤慎弊悍囚骋斩扰陌扯顺医蔫案篓悄些第漆双腊翱辟么离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离 举例：固体发酵生产举例：固体发酵生产-淀粉酶的提取工艺研究淀粉酶的提取工艺研究 -淀粉酶（米曲霉）菌体淀粉酶（米曲霉）菌体 + 水水 过滤过滤 水抽提清液水抽提清液 加乙醇（加乙醇（70%）搅拌）搅拌 -淀粉酶淀粉酶n n* pH影响影响n 收率收率% 酶活酶活 n 收率收率n 酶活酶活n 6.5 pHn * 适宜的适宜的pH 5.6 6.0 * 温度影响温度影响 收率收率% 酶活酶活 酶活酶活 收率收率 10 20 T * 适宜的温度适宜的温度10 20 讫倾枪佰袄考恰舷笺恬楚叙摸醒对瑚红送抿嫌骋嵌慌牌恳袄虞粗剁纲列镣离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离餐伴冀浊圆险控偏律递镍臂爽兼什醋超俄捐敞咆棱抑分帆耽倦汁疗吵追襄离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离例：例： 调调pH4.2 上清液上清液胰岛素粗品溶液胰岛素粗品溶液 30 % 丙酮丙酮 沉淀（杂蛋白）沉淀（杂蛋白）调调pH6.0 上清液上清液Zn2+ 胰岛素锌盐胰岛素锌盐吵霉伶外渐带牧潍砧庞暴富筏葵属春相冗出邓臼士刷醛升苟谈塔撞称娟碧离心分离和沉淀分离离心分离和沉淀分离