欢迎您了解检验科耗材这一新兴行业诊断试剂基础知识诊断试剂基础知识培训培训医疗器械相关法规与规定医疗器械相关法规与规定相关管理规定相关管理规定医疗器械监督管理条例医疗器械监督管理条例20002000年年1 1月月4 4日由国务日由国务院颁布，院颁布，20002000年年4 4月月1 1日开始实施。日开始实施。依据依据医疗器械监督管理条例医疗器械监督管理条例的规定，国家食的规定，国家食品药品监督管理局制定了相关的管理规章，主要品药品监督管理局制定了相关的管理规章，主要有：有：医疗器械生产监督管理办法医疗器械生产监督管理办法、医疗器械经营企业许可证管理办法医疗器械经营企业许可证管理办法、医疗器械注册管理办法医疗器械注册管理办法、医疗器械生产企业质量体系考核办法医疗器械生产企业质量体系考核办法、医疗器械标准管理办法医疗器械标准管理办法医疗器械临床试验规定医疗器械临床试验规定等等。等等。医疗器械分级管理医疗器械分级管理 一类由市局注册。一类由市局注册。二类由省局注册。二类由省局注册。三类由国家局注册三类由国家局注册诊断试剂依据其特点，也分三级管理。诊断试剂依据其特点，也分三级管理。血细胞分析仪配套试剂现按照一类医疗器血细胞分析仪配套试剂现按照一类医疗器械管理械管理许可证管理制度许可证管理制度医疗器械生产企业必须先取得医疗器械生产企业必须先取得医医疗器械生产企业许可证疗器械生产企业许可证让后对要让后对要生产的产品进行注册申请。生产的产品进行注册申请。医疗器械经营企业必须先取得医疗器械经营企业必须先取得医医疗器械经营企业许可证疗器械经营企业许可证才能经营才能经营医疗器械。医疗器械。临床检验与体外诊断试剂基础知识临床检验与体外诊断试剂基础知识临床检验：临床检验： 通过实验室对病人的血液、尿液、排通过实验室对病人的血液、尿液、排泄物、分泌物和脱落细胞等标本进行泄物、分泌物和脱落细胞等标本进行检查，分析，将所获得的结果作为疾检查，分析，将所获得的结果作为疾病诊断、治疗和预后判断的依据。病诊断、治疗和预后判断的依据。 因此，临床检验是医疗卫生工作的侦因此，临床检验是医疗卫生工作的侦察兵。察兵。检验医学检验医学/实验医学实验医学检验医学在国外习惯称为实验医学检验医学在国外习惯称为实验医学（laboratory medicinelaboratory medicine）它是一门涉及范）它是一门涉及范围相当广泛，包括多个专业的交叉学科。围相当广泛，包括多个专业的交叉学科。在现代医学中。检验医学已经远远超出了在现代医学中。检验医学已经远远超出了早先单纯辅助临床诊断的认识范围。随着早先单纯辅助临床诊断的认识范围。随着现代医学的不断发展，临床检验的范围日现代医学的不断发展，临床检验的范围日益广泛，检验的项目也越来越多。各种定益广泛，检验的项目也越来越多。各种定量的检验结果对疾病的诊断、治疗、预后量的检验结果对疾病的诊断、治疗、预后判断和健康评价有着十分重要的价值，正判断和健康评价有着十分重要的价值，正在发挥着越来越大的作用在发挥着越来越大的作用 现代检验医学与检验设备现代检验医学与检验设备检验项目检验项目检验设备检验设备配套试剂配套试剂临床血液学临床血液学血球分析仪血球分析仪（血液分析仪）（血液分析仪）血球试剂血球试剂临床体液检验临床体液检验尿液分析仪尿液分析仪尿试纸条尿试纸条免疫学检验免疫学检验化学发光分析仪化学发光分析仪免疫发光专用试剂盒免疫发光专用试剂盒专用清洗液专用清洗液细胞学检验细胞学检验电子显微镜电子显微镜临床遗传学检验临床遗传学检验微生物学检验微生物学检验微生物分析系统微生物分析系统培养基培养基临床化学检验（包括：电解临床化学检验（包括：电解质、蛋白质、脂肪、糖、各质、蛋白质、脂肪、糖、各种活性酶和各种代谢产物的种活性酶和各种代谢产物的检验）。检验）。半自动、全自动半自动、全自动生化分析仪生化分析仪生化试剂盒生化试剂盒清洗液清洗液体外诊断试剂的概念体外诊断试剂的概念体外诊断试剂是临床实验室（化验室）体外诊断试剂是临床实验室（化验室）用于检验临床标本（血液、尿液等）用于检验临床标本（血液、尿液等）的试剂，试剂在实验内使用，与人体的试剂，试剂在实验内使用，与人体不直接接触，所以是不直接接触，所以是“体外诊断体外诊断”试试剂。在临床上也有剂。在临床上也有“体内诊断体内诊断”试剂，试剂，在管理上按照药品的规定执行。在管理上按照药品的规定执行。按照最新的体外诊断试剂分类目录，按照最新的体外诊断试剂分类目录，体外诊断试剂分为九大类近体外诊断试剂分为九大类近800800余种，余种， 体外诊断试剂的分类 临床血液学和体液学检验试剂临床血液学和体液学检验试剂临床化学检验试剂临床化学检验试剂临床免疫学检验试剂临床免疫学检验试剂微生物学检验试剂微生物学检验试剂组织细胞学检验试剂组织细胞学检验试剂变态反应、自身免疫诊断试剂变态反应、自身免疫诊断试剂遗传性疾病检验试剂遗传性疾病检验试剂分子生物学检验试剂分子生物学检验试剂其他检验试剂其他检验试剂临床血液学检验试剂临床血液学检验试剂临床血液学检验主要是指血常规检验，临床血液学检验主要是指血常规检验，其主要的检验项目是：白细胞计数分其主要的检验项目是：白细胞计数分类（类（WBCWBC）、红细胞计数（）、红细胞计数（RBCRBC）、血）、血小板计数（小板计数（PLTPLT）和血红蛋白测定）和血红蛋白测定（HGBHGB）等，）等， “临床血液学检验试剂临床血液学检验试剂”在实际工作在实际工作中也称为中也称为“血细胞分析仪配套试剂血细胞分析仪配套试剂”，俗称：，俗称：“血球试剂血球试剂”。这是本公司。这是本公司的主要产品之一。的主要产品之一。血液的基础知识血液的基础知识血液是由血细胞和血浆两部分组成的红色血液是由血细胞和血浆两部分组成的红色粘稠混悬液。粘稠混悬液。PHPH为为7.35-7.457.35-7.45；比重为；比重为0.050-1.0600.050-1.060，相对粘度，相对粘度4-54-5，渗透压，渗透压300mOsm/kg300mOsm/kg，离体后数分钟即自行凝固。，离体后数分钟即自行凝固。正常成人血量占人体重的正常成人血量占人体重的7-9%7-9%，即，即60-60-80ml/kg80ml/kg体重。成人平均血量体重。成人平均血量5L5L左右。其中左右。其中血浆占血浆占55%55%，血细胞占，血细胞占45%45%。血细胞包括红细胞、白细胞和血小板血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。血液组成血液血细胞血浆血浆组成血浆脂肪电解质代谢产物水蛋白质血细胞组成血细胞红细胞 白细胞 血小板白细胞分类白细胞淋巴细胞粒细胞中性粒细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞单核细胞血细胞基础知识血细胞基础知识 红细胞红细胞红细胞（简称红细胞（简称RBCRBC）平均直径）平均直径7.27.2微米，微米，无细胞核无细胞核是血液中数量最多的有型成分，在正是血液中数量最多的有型成分，在正常情况下，几乎占血容量的常情况下，几乎占血容量的1/21/2。主要成分是血红蛋白，约占。主要成分是血红蛋白，约占34%34%。其。其主要生理作用是携带氧气至全身各个主要生理作用是携带氧气至全身各个组织，并协同维持酸碱平衡。组织，并协同维持酸碱平衡。红细胞形状红细胞形状血细胞基础知识血细胞基础知识 白细胞白细胞白细胞（简称白细胞（简称WBCWBC）呈球形，有细胞核）呈球形，有细胞核直径直径7-257-25微米，微米，生理作用：是机体抵抗病原微生物等生理作用：是机体抵抗病原微生物等异物入侵的主要防线，由形态各异的异物入侵的主要防线，由形态各异的粒细胞、单核细胞和淋巴细胞组成。粒细胞、单核细胞和淋巴细胞组成。根据细胞核结构不同分为：粒细胞、根据细胞核结构不同分为：粒细胞、单核细胞和淋巴细胞单核细胞和淋巴细胞 白细胞形状白细胞形状粒细胞特征中性粒中性粒细胞细胞嗜酸性粒嗜酸性粒细胞细胞嗜碱性粒嗜碱性粒细胞细胞直径直径10-1510-15微微米，正常情况米，正常情况约占白细胞的约占白细胞的50-70%50-70%，是吞，是吞噬病原微生物噬病原微生物的主要细胞。的主要细胞。直径直径13-1513-15微微米。其细胞核米。其细胞核有碱性组蛋白，有碱性组蛋白，能结合酸性染能结合酸性染料，因此得名。料，因此得名。直径直径10 -1210 -12微微米。其细胞内米。其细胞内包含有肝素包含有肝素（酸性粘多糖）（酸性粘多糖）对碱性染料有对碱性染料有亲和力，故此亲和力，故此得名。得名。 血细胞特征红细红细胞胞血小血小板板中性中性粒粒嗜酸嗜酸嗜碱嗜碱淋巴淋巴细胞细胞单核单核细胞细胞体积体积mm7.27.2最小、最小、不规不规则则10-10-151513-13-151510-10-12126 615-15-2525核核无无无无有有有有有有有有有有正常正常数量数量WBCWBC的的10001000倍倍WBCWBC20-20-6060倍倍50-50-70%70%0.5-0.5-5%5%0-1%0-1%20-20-40%40%3-8%3-8%血细胞分析仪基础知识血细胞分析仪基础知识阻抗法血细胞分析仪工作的原理阻抗法血细胞分析仪工作的原理 ：细胞与等渗电解质（稀释液）相比为细胞与等渗电解质（稀释液）相比为不良导体，其电阻值大于稀释液的电不良导体，其电阻值大于稀释液的电阻值（电导率小于稀释液），当红细阻值（电导率小于稀释液），当红细胞通过检测器小孔管微孔感受区时，胞通过检测器小孔管微孔感受区时，检测器内外电极之间的恒流源电路上检测器内外电极之间的恒流源电路上电阻值瞬间增大，造成两极之间的电电阻值瞬间增大，造成两极之间的电压的变化，产生一个电压脉冲信号，压的变化，产生一个电压脉冲信号，进行一次计数。进行一次计数。国产：迈瑞五分类分析仪国产：迈瑞五分类分析仪日本光电五分类分析仪日本光电五分类分析仪美国雅培三分类美国雅培三分类电阻抗工作原理电阻抗工作原理电阻抗工作原理电阻值又同细胞体积成正比，血细电阻值又同细胞体积成正比，血细胞体积越大，电压变化越大，到甄胞体积越大，电压变化越大，到甄别器上的脉冲幅度也就越大。通过别器上的脉冲幅度也就越大。通过对大小不同的血细胞产生的脉冲信对大小不同的血细胞产生的脉冲信号分别送入仪器内的电脑进行分析，号分别送入仪器内的电脑进行分析，将细胞进行分类将细胞进行分类 阻抗法分类，不能识别细胞。阻抗法分类，不能识别细胞。白细胞计数分类白细胞计数分类白细胞计数时，通过溶血剂的作用白细胞计数时，通过溶血剂的作用将红细胞全部溶解。由于溶血剂的将红细胞全部溶解。由于溶血剂的特殊作用，淋巴细胞体积不变，中特殊作用，淋巴细胞体积不变，中性粒细胞体积变大，而嗜酸、嗜碱性粒细胞体积变大，而嗜酸、嗜碱单核细胞体积变小，处于两者之间，单核细胞体积变小，处于两者之间，当经溶血剂作用的白细胞通过检测当经溶血剂作用的白细胞通过检测小孔时，仪器对通过小孔的白细胞小孔时，仪器对通过小孔的白细胞按其体积大小的不同进行分类按其体积大小的不同进行分类 三分类白细胞分类直方图三分类白细胞分类直方图 体积体积数数量量小细胞群（淋巴细胞小细胞群（淋巴细胞）大细胞群（中性粒细胞大细胞群（中性粒细胞）中中值值细细胞胞（单核（单核）红细胞直方图红细胞直方图体积体积非正态分布图非正态分布图数量数量血小板直方图非正态分布图非正态分布图体积体积数量数量血红蛋白测定血红蛋白测定经稀释液稀释后的血细胞悬液，通过溶血剂的作经稀释液稀释后的血细胞悬液，通过溶血剂的作用，红细胞溶解并稀释出血红蛋白，后者与溶血用，红细胞溶解并稀释出血红蛋白，后者与溶血剂中的专用成分结合，形成有色血红蛋白衍生物，剂中的专用成分结合，形成有色血红蛋白衍生物，在特定的波长（在特定的波长（530-550nm）下进行比色，经仪）下进行比色，经仪器自动计算显示血红蛋白的浓度。器自动计算显示血红蛋白的浓度。各种不同系列的血细胞分析配套溶血剂化学配方各种不同系列的血细胞分析配套溶血剂化学配方不同，形成的血红蛋白衍生物亦不尽相同，但其不同，形成的血红蛋白衍生物亦不尽相同，但其血红蛋白衍生物的最大吸收波长均在血红蛋白衍生物的最大吸收波长均在540nm左右。左右。这是因为，国际临床化学（这是因为，国际临床化学（IFCC）委员会推荐的）委员会推荐的氰化高铁法氰化高铁法HiCN的最大吸收峰在的最大吸收峰在540nm，仪器校，仪器校正必须用国际推荐的正必须用国际推荐的HICN为标准。为标准。血红蛋白测定原理血红蛋白测定原理光源测定液测定液滤光片滤光片信号放大器信号放大器光电管光电管计算显示结果计算显示结果五分类原理五分类原理五分类血细胞分析仪工作原理五分类血细胞分析仪工作原理电阻抗法电阻抗法(V)(V)：对血细胞计数和体积：对血细胞计数和体积测量。测量。电磁波技术电磁波技术(C)(C)：测定核浆比例及细：测定核浆比例及细胞内部质粒的大小和密度进行分类。胞内部质粒的大小和密度进行分类。激光散射技术激光散射技术(S)(S)：可以依据细胞表：可以依据细胞表面光散射的特点对细胞进行分类。面光散射的特点对细胞进行分类。荧光染色技术：根据细胞核对荧光染荧光染色技术：根据细胞核对荧光染料结合的程度不同进行分类（发展趋料结合的程度不同进行分类（发展趋势）势）五分类鞘流原理五分类鞘流原理鞘流液样品流偏振光检测激光束常用仪器及型号常用仪器及型号品牌系列品牌系列三分类型号三分类型号五分类型号五分类型号库尔特系列库尔特系列COULTERJTDIFFStks/gens Maxm H750 亚培系列亚培系列ABBOTT CD-1200/1400/1600/1700/1800CD-3200CD-3000/3500/3700麦道尼克麦道尼克 MEDONIC CA-530/570/620常用仪器及型号品牌系列品牌系列三分类型号三分类型号五分类型号五分类型号希森美康希森美康SYSMEXF-820K4500KX-21SF3000SE9000XS-800XS-1000TX-1800/2000XE-2100光电系列光电系列Nihon kohdren MEK-6318/6118K/8118KMEK-7222KMEK-8222K常用仪器及型号品牌系列品牌系列三分类型号三分类型号五分类型号五分类型号迈瑞迈瑞mandray BC-2000BC-2200/BC=2300/BC-2800/BC-3000BC-1800BC-5500拜耳拜耳BAYER ADVIA 80/120 常用仪器及型号品牌系列品牌系列三分类型号三分类型号五分类型号五分类型号ABX 系列系列Micros 60 PENTRA 60/805DIFF 宝利泰宝利泰 BOTESTURITEST3000BT2100 无无特康特康 TEK-5000/3600 无无血球试剂血球试剂的成套性仪器级别仪器级别试试 剂剂二分类二分类稀释液；溶血剂；稀释液；溶血剂； 清洗液清洗液三分类三分类稀释液；溶血剂；稀释液；溶血剂； 清洗液清洗液五分类五分类稀释液；鞘液；染色液稀释液；鞘液；染色液 多种溶血剂；清洗液多种溶血剂；清洗液稀释液稀释液对血液进行等渗稀释对血液进行等渗稀释保持细胞的体积保持细胞的体积维持导电值维持导电值溶血剂溶血剂溶剂红细胞，血小板溶剂红细胞，血小板保持白细胞一定的体积保持白细胞一定的体积测定血红蛋白测定血红蛋白与红细胞，血小板测定无关与红细胞，血小板测定无关鞘鞘 液液根据鞘流原理进行细胞计数根据鞘流原理进行细胞计数染色液染色液对白细胞核进行染色，主对白细胞核进行染色，主要是荧光染色。要是荧光染色。用于白细胞分类用于白细胞分类清洗液清洗液主要对仪器管路和检测部进行主要对仪器管路和检测部进行清洗清洗冲洗液：标本做完后冲洗，对冲洗液：标本做完后冲洗，对结果有影响结果有影响关机清洗液：关机后存于管路关机清洗液：关机后存于管路中，对检测结果无影响。中，对检测结果无影响。质质 量量 评评 价价相关概念1、准确度准确度是指测定结果与实际结果的偏差程度，用相对误差表示，如血液的实际血红蛋白（HGB）是135克/L，测定结果是132克/L。则：相对误差=（测定值-实际值）实际值 100%=(132-135)135100% =2.22%质质 量量 评评 价价2、精密度是指对样品重复测定，其测定结果的一致程度用标准差标准差表示计算公式 SD= 也可以以电子表格EXCEL可以作统计计算，其函数是： STDEV相关的行业标准相关的行业标准稀释液准确性指标稀释液准确性指标白细胞计数白细胞计数WBC10%红细胞计数红细胞计数RBC 5%血红蛋白测定血红蛋白测定HGB 5%血小板计数血小板计数PLT 15%红细胞平均体积红细胞平均体积MCV 5%相关的行业标准相关的行业标准溶血剂准确性指标溶血剂准确性指标白细胞计数白细胞计数WBC10%血红蛋白测定血红蛋白测定HGB 5%大细胞分类结果大细胞分类结果 5%小细胞分类结果小细胞分类结果 8%相关的行业标准相关的行业标准与原装试剂对比测定结果应符合：与原装试剂对比测定结果应符合： 原装测定平均值原装测定平均值2SD之内之内相关的行业标准相关的行业标准空白值空白值： 稀释液稀释液 溶血剂溶血剂WBC 0.310E9 0.310E9 RBC 0.0510E12HGB 2g/L 2g/LPLT 1010E9质量评价质量评价1、准确度要高，相对偏差小2、精密度要高，标准差SD小或变异系数CV值小3 空白值低4、分类率高5、堵孔现象。从实际工作的情况看，这是最重要的。