11.利利用用乳乳腺腺生生物物反反应应器器能能够够获获得得一一些些重重要要的的医医药药产产品品，如如人人的的血血清清白白蛋蛋白白，这这是是因因为为将人的血清白蛋白基因导入了动物的乳腺细胞中将人的血清白蛋白基因导入了动物的乳腺细胞中（ ）2.应应用用DNA探探针针技技术术，可可以以检检测测转转基基因因抗抗冻冻番番茄茄植植株株中中目目的的基基因因的的存存在在及及其其完完全全表表达达（ ）3.EcoliDNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端（ ）4.基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等（ ）5.目目的的基基因因导导入入植植物物细细胞胞常常用用农农杆杆菌菌转转化化法法；导导入入动动物物细细胞胞常常用用显显微微注注射射技技术术，导导入入微生物细胞常用感受态细胞法微生物细胞常用感受态细胞法（ ）阶段排查回扣阶段排查回扣落实（落实（九九） 基基础需自查需自查26.愈伤组织是外植体通过脱分化和再分化后形成的愈伤组织是外植体通过脱分化和再分化后形成的（ ）7.利用物理法或化学法，可以直接将两个植物细胞进行诱导融合利用物理法或化学法，可以直接将两个植物细胞进行诱导融合（ ）8.B淋淋巴巴细细胞胞和和骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞经经细细胞胞融融合合后后有有三三种种细细胞胞类类型型（若若仅仅考考虑虑两两两两融融合合的的情情况况）（ ）9.植植物物组组织织培培养养的的过过程程主主要要包包括括脱脱分分化化和和再再分分化化两两个个阶阶段段，脱脱分分化化的的结结果果是是形形成成愈愈伤伤组织，再分化的结果是形成根和芽组织，再分化的结果是形成根和芽（ ）10.从卵巢中采集的卵母细胞可直接与获能的精子进行体外受精从卵巢中采集的卵母细胞可直接与获能的精子进行体外受精（ ）11.成熟的精子并不具有受精能力，必须获能后才具备受精能力成熟的精子并不具有受精能力，必须获能后才具备受精能力（ ）12.转入油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中转入油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中（ ）313.目前对转基因生物安全性的争论主要集中在食用安全性和环境安全性上目前对转基因生物安全性的争论主要集中在食用安全性和环境安全性上（ ）14.胚胎干细胞在体外培养条件下具有增殖而不发生分化的特点胚胎干细胞在体外培养条件下具有增殖而不发生分化的特点（ ）15.在对囊胚进行分割时，要将滋养层细胞均等分割在对囊胚进行分割时，要将滋养层细胞均等分割（ ）16.在在胚胚胎胎移移植植中中，对对供供体体母母畜畜要要做做超超数数排排卵卵处处理理，对对供供、受受体体要要做做同同期期发发情情处处理理（ ）17.胚胚胎胎移移植植的的基基本本程程序序：对对供供、受受体体的的选选择择和和处处理理配配种种或或进进行行人人工工授授精精对对胚胚胎胎的收集、检查、培养或保存的收集、检查、培养或保存胚胎移植胚胎移植移植后检查移植后检查（ ）18.“无废弃物农业无废弃物农业”遵循的是物种多样性原理遵循的是物种多样性原理（ ）19.在建设高新农业时，沼气池的建立遵循的是物质循环再生原理在建设高新农业时，沼气池的建立遵循的是物质循环再生原理（ ）4 重点重点再强化再强化1.基因工程重点回眸基因工程重点回眸（1）基因工程常考的）基因工程常考的3种基本工具种基本工具限制性限制性核酸内切酶、核酸内切酶、DNA连接酶和载体。连接酶和载体。（2）基因表达载体的组成）基因表达载体的组成目的目的基因启动子终止子标记基因等。基因启动子终止子标记基因等。（3）基因工程的四大操作程序）基因工程的四大操作程序目的基因的获取（三大方法）目的基因的获取（三大方法）a.从基因文库中获取。从基因文库中获取。b.利用利用PCR技术扩增：其实质是在体外对目的基因进行大量复制。技术扩增：其实质是在体外对目的基因进行大量复制。c.用化学方法人工合成。用化学方法人工合成。5基因表达载体的构建（此为基因表达载体的构建（此为“核心步骤核心步骤”）将目的基因导入受体细胞（将目的基因导入受体细胞（“三大方法三大方法”）a.导入植物细胞导入植物细胞农杆菌转化法（花粉管通道法、基因枪法）。农杆菌转化法（花粉管通道法、基因枪法）。b.导入动物细胞导入动物细胞显微注射法（导入受精卵）。显微注射法（导入受精卵）。c.导入微生物细胞导入微生物细胞使用使用Ca2处理细胞。处理细胞。目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定DNA分子杂交分子杂交分子杂交分子杂交抗原抗原-抗体杂交抗体杂交抗性实验抗性实验是否出现了杂交带是否出现了杂交带抗性是否存在抗性是否存在62.细胞工程重点再现细胞工程重点再现（1）植物体细胞杂交的关键）植物体细胞杂交的关键酶解法酶解法用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。促融剂促融剂聚乙二醇。聚乙二醇。杂种细胞的形成标志杂种细胞的形成标志新细胞壁的形成。新细胞壁的形成。培养杂种植株的技术培养杂种植株的技术植物组织培养。植物组织培养。培养成功的原理培养成功的原理细胞全能性细胞全能性。7（2）动物细胞培养的特殊条件）动物细胞培养的特殊条件胰胰蛋蛋白白酶酶的的两两次次使使用用：首首先先用用胰胰蛋蛋白白酶酶处处理理动动物物的的器器官官或或组组织织，以以制制备备单单细细胞胞悬悬液；培养过程中发生接触抑制时，同样要用胰蛋白酶使细胞分散开。液；培养过程中发生接触抑制时，同样要用胰蛋白酶使细胞分散开。避避免免杂杂菌菌污污染染的的措措施施：培培养养液液及及培培养养用用具具灭灭菌菌处处理理，加加入入一一定定量量的的抗抗生生素素，定定期期更换培养液。更换培养液。83.胚胎工程再强化胚胎工程再强化（1）胚胎的早期培养的培养液与动物细胞培养液成分的区别）胚胎的早期培养的培养液与动物细胞培养液成分的区别项目项目动物胚胎培养液动物胚胎培养液动物细胞培养液动物细胞培养液盐类盐类无机盐、有机盐无机盐、有机盐无机盐、微量元素无机盐、微量元素营养物质营养物质氨基酸、核苷酸氨基酸、核苷酸糖、氨基酸糖、氨基酸调节物质调节物质维生素、激素维生素、激素促生长因子促生长因子特有成分特有成分血清血清血清、血浆血清、血浆胚胚胎胎的的早早期期培培养养与与动动物物细细胞胞培培养养所所用用的的培培养养液液类类似似，但但是是二二者者所所依依据据的的原原理理和和培培养目的不同。养目的不同。9（2）必须关注的几个易错点：）必须关注的几个易错点：区别受精的标志及可移植时期区别受精的标志及可移植时期a.受精的标志：在卵细胞膜和透明带的间隙看到两个极体。受精的标志：在卵细胞膜和透明带的间隙看到两个极体。b.可以移植或分割的阶段：桑椹胚和囊胚。可以移植或分割的阶段：桑椹胚和囊胚。胚胎移植过程中的不同胚胎移植过程中的不同a.两次使用激素：第一次对供、受体进行同期发情处理；第二次用于供体的超数排卵。两次使用激素：第一次对供、受体进行同期发情处理；第二次用于供体的超数排卵。b.两次检查：第一次对收集的胚胎进行检查；第二次对受体是否妊娠进行检查。两次检查：第一次对收集的胚胎进行检查；第二次对受体是否妊娠进行检查。同期发情处理与超数排卵同期发情处理与超数排卵胚胚胎胎工工程程流流程程图图中中的的同同期期发发情情对对象象为为同同种种供供体体母母畜畜和和受受体体母母畜畜，超超数数排排卵卵对对象象为为供供体体母畜。母畜。