艾滋病梅毒丙肝实验室检测及艾滋病梅毒丙肝实验室检测及影响结果因素分析影响结果因素分析1讲课材料内容提要：内容提要：1.1.艾滋病检测程序、方法应用和注意事项。艾滋病检测程序、方法应用和注意事项。2.2.梅毒检测程序、方法应用和注意事项。梅毒检测程序、方法应用和注意事项。3.3.丙肝检测程序、方法应用和注意事项。丙肝检测程序、方法应用和注意事项。4.4.影响实验室检测结果的因素分析影响实验室检测结果的因素分析2讲课材料艾滋病检测方法艾滋病检测方法常用常用HIVHIV病原学检测方法病原学检测方法: : 1.1. 核酸检测核酸检测（ PCRPCR、病毒载量、病毒载量） 2. 2. 病毒培养分离病毒培养分离 3.3. P24P24抗原检测抗原检测常用常用HIVHIV抗体检测方法抗体检测方法: : 初筛：初筛：1.1.酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法 ELISAELISA：第三代、第四代第三代、第四代 2.2.快速检测快速检测 RTRT：金标、硒标金标、硒标 3.3.简单法简单法 PA: PA: 明胶颗粒凝集明胶颗粒凝集 确证：免疫印迹法确证：免疫印迹法 WB:WB:（Western BlotWestern Blot）、RIBARIBA其他相关检测方法其他相关检测方法: : 免疫功能测定：免疫功能测定：CD4/CD8CD4/CD8检测检测3讲课材料HIVHIV抗体检测目的抗体检测目的1 HIV1 HIV抗体检测可用于诊断、血液筛查、监测等。抗体检测可用于诊断、血液筛查、监测等。2 2 以诊断为目的的检测是为了确定个体以诊断为目的的检测是为了确定个体HIVHIV感染状况，感染状况，包括临床检测、自愿咨询检测、根据特殊需要进行的包括临床检测、自愿咨询检测、根据特殊需要进行的体检等。体检等。3 3 以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIVHIV，包括献血员筛查和原料血浆筛查。，包括献血员筛查和原料血浆筛查。4 4 以监测为目的的检测是为了解不同人群以监测为目的的检测是为了解不同人群HIVHIV感染率感染率及其变化趋势，包括各类高危人群、重点人群和一般及其变化趋势，包括各类高危人群、重点人群和一般人群。人群。4讲课材料1 1 根据目的选择检测方法及检测策略。根据目的选择检测方法及检测策略。2 2 严格遵守实验室严格遵守实验室SOPSOP。3 3 筛查试验阳性，须作确证试验。筛查试验阳性，须作确证试验。4 4 筛查试验阴性，筛查试验阴性， 不应做确证试验。不应做确证试验。5 5 筛查及确证试验阳性均应做好咨询工筛查及确证试验阳性均应做好咨询工作。作。HIVHIV抗体检测的要点抗体检测的要点 5讲课材料样品样品初筛试验初筛试验筛查试剂筛查试剂阳性反应阳性反应阴性反应阴性反应复检试验复检试验原有试剂原有试剂 + +另一不同原理另一不同原理（或厂家或厂家 ）试剂或另外两种试剂或另外两种不同原理不同原理 （或厂家或厂家 ）试剂试剂均阳性反应均阳性反应一阴一阳一阴一阳均阴性反应均阴性反应确证试验确证试验报告阴性报告阴性图图1 1 HIVHIV抗体筛查检测流程抗体筛查检测流程HIVHIV抗体筛查检测流程抗体筛查检测流程6讲课材料初筛试验初筛试验 1 1、HIVHIV抗体检测分为筛查试验（包括初筛和复抗体检测分为筛查试验（包括初筛和复检）和确证试验。检）和确证试验。 2 2、根据检测目的选用符合要求的筛查试剂、根据检测目的选用符合要求的筛查试剂对样品进行初筛检测，对呈阴性反应的样品，对样品进行初筛检测，对呈阴性反应的样品，可出具可出具HIVHIV抗体阴性（抗体阴性（- -）报告；对呈阳性反应）报告；对呈阳性反应的样品，需要进一步做复检试验和确证试验。的样品，需要进一步做复检试验和确证试验。 7讲课材料复检试验复检试验 对初筛呈阳性反应的样品，应使用原有试剂和另对初筛呈阳性反应的样品，应使用原有试剂和另外一种不同原理（或厂家）的试剂，或另外两种不同原理外一种不同原理（或厂家）的试剂，或另外两种不同原理或不同厂家的试剂进行复检试验。或不同厂家的试剂进行复检试验。 如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复检必如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复检必须包括一种抗原抗体联合试剂。须包括一种抗原抗体联合试剂。 如两种试剂复检均呈阴性反应，则报告如两种试剂复检均呈阴性反应，则报告HIVHIV抗体抗体阴性（阴性（- -）；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病）；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确证实验室进行确证试验。确证实验室进行确证试验。 如果抗原抗体联合试剂检测呈阳性反应，而抗体如果抗原抗体联合试剂检测呈阳性反应，而抗体试剂检测为阴性反应，则应考虑进行试剂检测为阴性反应，则应考虑进行HIV-1 p24HIV-1 p24抗原或核抗原或核酸检测，必要时进行随访。酸检测，必要时进行随访。8讲课材料确证试验确证试验1 1 确证试剂必须是经国家食品药品监督管理局注确证试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、在有效期内的试剂。册批准、在有效期内的试剂。2 2 确证样品可采用血清、血浆、滤纸干血斑样品。确证样品可采用血清、血浆、滤纸干血斑样品。3 3 确证方法包括免疫印迹试验（确证方法包括免疫印迹试验（WBWB）、条带免疫）、条带免疫试验、放射免疫沉淀试验（试验、放射免疫沉淀试验（RIPARIPA）及免疫荧光试验）及免疫荧光试验（IFAIFA）等。）等。9讲课材料HIVHIV抗体不确定（抗体不确定（） 结合流行病学资料，可以在结合流行病学资料，可以在4 4周后随访检测，如带周后随访检测，如带型没有进展或呈阴性反应，则报告阴性；如随访期间出型没有进展或呈阴性反应，则报告阴性；如随访期间出现阳性反应，则报告阳性；如随访期间带型有进展，但现阳性反应，则报告阳性；如随访期间带型有进展，但不满足阳性标准，应继续随访到不满足阳性标准，应继续随访到8 8周。如带型没有进展周。如带型没有进展或呈阴性反应则报告阴性；满足或呈阴性反应则报告阴性；满足HIVHIV抗体阳性诊断标准抗体阳性诊断标准则报告阳性，不满足阳性判断标准可视情况决定是否继则报告阳性，不满足阳性判断标准可视情况决定是否继续随访。续随访。 随访期间可根据需要，检测病毒核酸或随访期间可根据需要，检测病毒核酸或P24P24抗抗原作为辅助诊断。如果出现原作为辅助诊断。如果出现HIV-2HIV-2型的特异性指示条带，型的特异性指示条带，根据实际情况需用根据实际情况需用HIV-2HIV-2型免疫印迹试剂再做型免疫印迹试剂再做HIV-2HIV-2的抗的抗体确证试验或体确证试验或HIV-2HIV-2核酸检测，以进一步明确核酸检测，以进一步明确HIV-2HIV-2感染感染状态，疑难样品送国家艾滋病参比实验室进一步分析。状态，疑难样品送国家艾滋病参比实验室进一步分析。 10讲课材料HIV-2HIV-2抗体阳性抗体阳性出现出现HIV-2HIV-2型特异性指示带的样品：如果同时型特异性指示带的样品：如果同时呈呈HIV-1HIV-1抗体阳性反应，报告抗体阳性反应，报告HIV-1HIV-1抗体阳性，抗体阳性，不推荐进一步做不推荐进一步做HIV-2HIV-2抗体确证试验；如果同抗体确证试验；如果同时呈时呈HIV-1HIV-1抗体不确定或阴性反应，需用抗体不确定或阴性反应，需用HIV-2HIV-2型确证试剂再做型确证试剂再做HIV-2HIV-2的抗体确证试验。的抗体确证试验。同时符合以下二条标准，即出现至少同时符合以下二条标准，即出现至少2 2条条envenv带带（gp36gp36和和gp140/ gp105gp140/ gp105），和试剂盒提供的阳），和试剂盒提供的阳性判定标准，可判为性判定标准，可判为HIV-2HIV-2抗体阳性。抗体阳性。11讲课材料孕产妇新生儿检测孕产妇新生儿检测12讲课材料艾滋病快速检测试验（艾滋病快速检测试验（RTRT）是在是在ELISAELISA基础上发展起来的一种检测技术，基础上发展起来的一种检测技术，它用胶体金或硒标记抗原、抗体后以层析方法它用胶体金或硒标记抗原、抗体后以层析方法进行检测。进行检测。突出优点为快速、试剂便于保存、检测不需要突出优点为快速、试剂便于保存、检测不需要特殊设备并可以单份检测特殊设备并可以单份检测 ，比较适用于基层，比较适用于基层医疗单位和标本初筛。医疗单位和标本初筛。挑战：进一步提高检测灵敏度和特异性，实现挑战：进一步提高检测灵敏度和特异性，实现检测多元化，进行定量和半定量检测胶体金纸检测多元化，进行定量和半定量检测胶体金纸条将会更加广泛地应用于各个领域。条将会更加广泛地应用于各个领域。13讲课材料 快速试剂使用中存在的问题快速试剂使用中存在的问题快速检测只是初筛检测，存在较高的假阳性率和假阴快速检测只是初筛检测，存在较高的假阳性率和假阴性率；性率；技术上属于主观判读，不具备标准化条件；技术上属于主观判读，不具备标准化条件；快速检测的质量控制问题目前没有有效方法；快速检测的质量控制问题目前没有有效方法；价格是常规技术的价格是常规技术的5 5倍。行政经费政策不支持，个人支倍。行政经费政策不支持，个人支付价位高；付价位高；存在较大的批间误差，加上不属于政策规定项目，风存在较大的批间误差，加上不属于政策规定项目，风险较大，基层医疗卫生单位不愿意承担责任。险较大，基层医疗卫生单位不愿意承担责任。担心敏感性不够高，不敢出阴性报告；担心敏感性不够高，不敢出阴性报告；14讲课材料HIV-1HIV-1抗原检测的抗原检测的用途：用途：1 HIV-11 HIV-1感染窗口期、感染窗口期、HIVHIV抗体不确定或抗体不确定或HIV-1HIV-1阳性母亲所生婴儿的鉴别诊断。阳性母亲所生婴儿的鉴别诊断。2 2 第四代第四代HIVHIV检测试剂的阳性结果的辅助诊断。检测试剂的阳性结果的辅助诊断。3 3 监测病程进展或抗病毒治疗效果。监测病程进展或抗病毒治疗效果。4 HIV4 HIV分离培养，病毒复制状况的监测。分离培养，病毒复制状况的监测。 15讲课材料HIV-1HIV-1抗原检测方法和结果报告抗原检测方法和结果报告方法：方法：ELISAELISA，有定量检测。，有定量检测。结果报告和解释：结果报告和解释： HIV-1 P24HIV-1 P24抗原筛选试验有反应的标本必须经过中和抗原筛选试验有反应的标本必须经过中和试验确证以后才能判断阳性或阴性。试验确证以后才能判断阳性或阴性。 HIV-1 P24HIV-1 P24抗原阳性仅作为抗原阳性仅作为HIVHIV感染的辅助诊断依据，感染的辅助诊断依据，不能据此确诊。不能据此确诊。 HIV-1 P24HIV-1 P24抗原阴性结果不能排除抗原阴性结果不能排除HIVHIV感染。感染。 监测病程进展或抗病毒治疗效果应进行监测病程进展或抗病毒治疗效果应进行HIV-1 P24HIV-1 P24抗抗原的定量检测。原的定量检测。16讲课材料HIVHIV核酸检测核酸检测的意义的意义1 1 早期诊断：婴幼儿或成人有急性早期诊断：婴幼儿或成人有急性HIVHIV感染综合症或流行感染综合症或流行病学史，且不同时间的两次病学史，且不同时间的两次HIVHIV核酸检测结果均为阳性，核酸检测结果均为阳性，即可诊断。使用多样品集合的方法，即可诊断。使用多样品集合的方法，HIVHIV抗体阴性的高危抗体阴性的高危人群样品进行集合核酸检测，及时发现窗口期感染。人群样品进行集合核酸检测，及时发现窗口期感染。2 2 疑难样本的辅助诊断：帮助提供疑难样本的辅助诊断：帮助提供HIVHIV感染早期或终末期感染早期或终末期的证据。的证据。3 3 遗传变异监测：用于遗传变异监测：用于HIV-1HIV-1和和HIV-2HIV-2感染的鉴别诊断、感染的鉴别诊断、HIVHIV感染传播链的分析、感染传播链的分析、HIVHIV基因亚型和重组病毒的鉴定和基因亚型和重组病毒的鉴定和分析以及人群分析以及人群HIVHIV遗传变异趋势的监测。遗传变异趋势的监测。4 4 耐药性监测：了解耐药性病毒株流行的态势和指导临耐药性监测：了解耐药性病毒株流行的态势和指导临床医生判断抗病毒治疗效果和修改抗病毒治疗方案。床医生判断抗病毒治疗效果和修改抗病毒治疗方案。5 5 病程监控及预测：有助于确定疾病发展的阶段，以确病程监控及预测：有助于确定疾病发展的阶段，以确定相应的治疗方案。定相应的治疗方案。6 6 指导抗病毒治疗及疗效判定指导抗病毒治疗及疗效判定17讲课材料艾滋病感染产妇所生儿童艾滋病感染产妇所生儿童HIVHIV感染早期诊断检测流程感染早期诊断检测流程 18讲课材料HIV-1HIV-1耐药检测耐药检测 1 1 耐药监测耐药监测用于用于HIV-1HIV-1感染人群和抗病毒治疗人群。用于新近感染感染人群和抗病毒治疗人群。用于新近感染人群的耐药性监测，了解耐药毒株流行的情况；用于人群的耐药性监测，了解耐药毒株流行的情况；用于治疗前人群的监测，指导制定一线抗病毒治疗方案；治疗前人群的监测，指导制定一线抗病毒治疗方案；用于抗病毒治疗人群的耐药性监测，进行用于抗病毒治疗人群的耐药性监测，进行HIV-1HIV-1耐药发耐药发生、发展趋势以及影响因素的分析，指导和完善大规生、发展趋势以及影响因素的分析，指导和完善大规模公共卫生模式抗病毒治疗的程序，以及制定二线治模公共卫生模式抗病毒治疗的程序，以及制定二线治疗方案。疗方案。.2 .2 耐药检测耐药检测用于个体患者的耐药检测。在抗病毒治疗前进行耐药用于个体患者的耐药检测。在抗病毒治疗前进行耐药检测，可指导临床医生制定抗病毒治疗方案，保证抗检测，可指导临床医生制定抗病毒治疗方案，保证抗病毒治疗的效果；在抗病毒治疗过程中进行耐药检测，病毒治疗的效果；在抗病毒治疗过程中进行耐药检测，可指导临床医生分析治疗失败的原因，并制定补救治可指导临床医生分析治疗失败的原因，并制定补救治疗方案。疗方案。19讲课材料梅毒实验室检测梅毒实验室检测病原体检测病原体检测 暗视野显微镜检查暗视野显微镜检查 镀银染色镀银染色 荧光抗梅毒螺旋体单克隆抗体法荧光抗梅毒螺旋体单克隆抗体法血清学检测血清学检测 非梅毒螺旋体抗原血清试验（非特异性试验）非梅毒螺旋体抗原血清试验（非特异性试验） 梅毒螺旋体抗原血清试验（特异性试验）梅毒螺旋体抗原血清试验（特异性试验）20讲课材料病原体检测病原体检测暗视野显微镜检查暗视野显微镜检查 螺旋状，纤细、白色、螺旋状，纤细、白色、有折光的。有折光的。长约为两个红细胞，有长约为两个红细胞，有6-126-12个螺旋。个螺旋。具有旋转、蛇行及伸缩具有旋转、蛇行及伸缩等等3 3种特征性的运动方种特征性的运动方式。式。 21讲课材料病原体检测病原体检测镀银染色检查镀银染色检查方法方法: : 涂片干燥涂片干燥 固定固定 洗涤洗涤 媒染媒染 银染银染 镜检镜检 可见到染成棕褐色的梅毒螺旋体。可见到染成棕褐色的梅毒螺旋体。22讲课材料病原体检测病原体检测直接荧光法直接荧光法 FITCFITC荧光素标记的抗梅毒螺旋体单克隆抗体与样本中荧光素标记的抗梅毒螺旋体单克隆抗体与样本中的梅毒螺旋体结合，在荧光显微镜下，可见到发黄绿色荧的梅毒螺旋体结合，在荧光显微镜下，可见到发黄绿色荧光的梅毒螺旋体。光的梅毒螺旋体。23讲课材料病原体检测病原体检测具有快速、方便、易操作的特点。具有快速、方便、易操作的特点。是诊断早期现症梅毒的最好方法。是诊断早期现症梅毒的最好方法。未见到梅毒螺旋体，不能排除罹患梅毒，可让患者复查及未见到梅毒螺旋体，不能排除罹患梅毒，可让患者复查及进行血清学检查。进行血清学检查。24讲课材料血清学检测血清学检测非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验 性病研究实验室试验（性病研究实验室试验（VDRLVDRL） 不加热血清反应素试验（不加热血清反应素试验（USRUSR） 快速血浆反应素环状卡片试验（快速血浆反应素环状卡片试验（RPRRPR、TRUSTTRUST）梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验 荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABSFTA-ABS） 梅毒螺旋体血球凝集试验（梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHATPHA） 梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPATPPA） 梅毒螺旋体抗体酶联免疫试验（梅毒螺旋体抗体酶联免疫试验（TP-ELISATP-ELISA） 梅毒螺旋体快速诊断试验（梅毒螺旋体快速诊断试验（TP-RTTP-RT）25讲课材料非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验以心磷脂、卵磷脂、胆固醇为抗原以心磷脂、卵磷脂、胆固醇为抗原, ,检测抗类脂质抗体（反检测抗类脂质抗体（反应素），主要是应素），主要是IgMIgM和和IgGIgG混合体。混合体。方法简单、快速、价格低廉、敏感性和特异性较好，适用方法简单、快速、价格低廉、敏感性和特异性较好，适用于大量人群的筛查。于大量人群的筛查。治疗后血清滴度可下降并转为阴性，可作为疗效观察、判治疗后血清滴度可下降并转为阴性，可作为疗效观察、判愈、复发或再感染指征。愈、复发或再感染指征。梅毒治疗后部份病人存在血清固定现象。梅毒治疗后部份病人存在血清固定现象。用于鉴别先天梅毒与被动反应素血症。用于鉴别先天梅毒与被动反应素血症。VDRLVDRL试验主要用于神经梅毒的脑脊液检查。试验主要用于神经梅毒的脑脊液检查。艾滋病人合并感染梅毒，血清试验呈阴性。艾滋病人合并感染梅毒，血清试验呈阴性。存在一定的假阳性。存在一定的假阳性。不同试验的结果没有可比性。不同试验的结果没有可比性。26讲课材料前带现象前带现象指非梅毒螺旋体抗原血清试验中，有时血清中存在高浓指非梅毒螺旋体抗原血清试验中，有时血清中存在高浓度的抗体时出现的弱阳性或阴性反应的结果，而临床上度的抗体时出现的弱阳性或阴性反应的结果，而临床上又象二期梅毒。又象二期梅毒。将血清稀释后再进行试验，出现阳性的结果。将血清稀释后再进行试验，出现阳性的结果。有前带现象的病人在临床治疗中应注意有前带现象的病人在临床治疗中应注意“贾赫氏反应贾赫氏反应”。27讲课材料血清固定（耐血清性）血清固定（耐血清性）指经抗梅毒治疗后，非梅毒螺旋体抗原血清试验在一定时指经抗梅毒治疗后，非梅毒螺旋体抗原血清试验在一定时期内不阴转，而保持低滴度阳性（期内不阴转，而保持低滴度阳性（1 1：4 4以内）的反应。以内）的反应。早期的血清固定常与治疗量不足或不规则治疗、复发、再早期的血清固定常与治疗量不足或不规则治疗、复发、再感染或有神经系统梅毒等因素有关。感染或有神经系统梅毒等因素有关。晚期血清固定与梅毒的类型及开始治疗的时间早晚有关。晚期血清固定与梅毒的类型及开始治疗的时间早晚有关。对于这种病人，在经过详细的检查，特别是在除外神经、对于这种病人，在经过详细的检查，特别是在除外神经、心脏与其他内脏梅毒后，应停止治疗，作定期随访。心脏与其他内脏梅毒后，应停止治疗，作定期随访。28讲课材料梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验方法方法原理原理优点优点缺点缺点FTA-FTA-ABS ABS 完整形态的梅毒螺旋体作为完整形态的梅毒螺旋体作为抗原抗原, ,吸收过的梅毒患者血清吸收过的梅毒患者血清荧光素标记的抗人荧光素标记的抗人IgIg。阳性。阳性可见苹果绿色荧光的螺旋体可见苹果绿色荧光的螺旋体 最敏感最敏感特异性高特异性高“金标准金标准操作繁琐操作繁琐技术要求高技术要求高TPHA TPHA 超声裂解的梅毒螺旋体致敏超声裂解的梅毒螺旋体致敏红细胞，产生肉眼可见的凝红细胞，产生肉眼可见的凝集反应集反应 敏感性好敏感性好操作简单操作简单红细胞易产红细胞易产生非特异性生非特异性凝集凝集TPPATPPA原理与原理与TPHATPHA相同，以人工合相同，以人工合成的惰性明胶作为载体成的惰性明胶作为载体试剂稳定试剂稳定结果清晰结果清晰 早期梅毒敏早期梅毒敏感性低于感性低于FTA-ABS FTA-ABS TP-TP-ELISAELISA超声裂解或重组的梅毒螺旋超声裂解或重组的梅毒螺旋体抗原，双抗原夹心法体抗原，双抗原夹心法 价格较低价格较低大样本，大样本，自动化自动化 厂家间敏感厂家间敏感性和特异性性和特异性差异较大差异较大 TP-RTTP-RT双抗原夹心法，胶体金标记双抗原夹心法，胶体金标记免疫层析或免疫渗滤试验免疫层析或免疫渗滤试验 简便快速简便快速无需仪器无需仪器敏感性特异敏感性特异性有待评估性有待评估 29讲课材料梅毒血清学试验的假阳性反应梅毒血清学试验的假阳性反应非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验感染因素感染因素肺结核肺结核病毒性肝炎病毒性肝炎肺炎球菌性肺炎肺炎球菌性肺炎亚急性细菌性心内膜炎亚急性细菌性心内膜炎传染性单核细胞增多症传染性单核细胞增多症水痘、麻疹、钩端螺旋体病水痘、麻疹、钩端螺旋体病麻风麻风传染性单核细胞增多症传染性单核细胞增多症麻风麻风莱姆病莱姆病疟疾疟疾非感染因素非感染因素自身免疫性疾病（系统性红斑自身免疫性疾病（系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、干燥狼疮、类风湿性关节炎、干燥综合征等）综合征等）毒品成瘾者毒品成瘾者肝硬化肝硬化衰老衰老甲状腺炎甲状腺炎系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮30讲课材料梅毒血清学试验假阳性反应的对策梅毒血清学试验假阳性反应的对策技术性假阳性反应技术性假阳性反应 由于标本的保存不当（如细菌污染或由于标本的保存不当（如细菌污染或溶血）、试剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成，溶血）、试剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成，可通过重复试验来排除。可通过重复试验来排除。生物学假阳性反应生物学假阳性反应 是由于患者有其他疾病或生理状态发是由于患者有其他疾病或生理状态发生变化，使梅毒血清试验出现阳性。非梅毒螺旋体抗原的生变化，使梅毒血清试验出现阳性。非梅毒螺旋体抗原的血清学试验可做血清学试验可做FTA-ABSFTA-ABS、TPHATPHA（TPPATPPA）等确证试验进行）等确证试验进行排除。梅毒螺旋体抗原的血清学试验时应对病人进行全面排除。梅毒螺旋体抗原的血清学试验时应对病人进行全面检查、密切随访。检查、密切随访。31讲课材料梅毒血清学试验结果梅毒血清学试验结果USRUSRRPRRPRVDRLVDRLTPHATPHATPPATPPAFTA-ABSFTA-ABS 意意 义义 - - - -排除梅毒排除梅毒一期梅毒的早期一期梅毒的早期艾滋病患者合并梅毒艾滋病患者合并梅毒 + + + +现症梅毒（梅毒孕妇所生婴儿除外）现症梅毒（梅毒孕妇所生婴儿除外） + + - -生物学假阳性生物学假阳性 - - + +早期梅毒经治疗后早期梅毒经治疗后32讲课材料梅毒血清学试验结果梅毒血清学试验结果 非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验 ( (确证是否为现症病人确证是否为现症病人) ) 互为确证互为确证 梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验 ( (确证是否为感染者确证是否为感染者) )33讲课材料胎传梅毒的实验诊断方法胎传梅毒的实验诊断方法早期先天梅毒早期先天梅毒 暗视野检查：胎盘、脐带、鼻分泌物、皮肤黏膜。暗视野检查：胎盘、脐带、鼻分泌物、皮肤黏膜。 血清学检查血清学检查晚期先天梅毒晚期先天梅毒 血清学检查血清学检查34讲课材料胎传梅毒的实验诊断胎传梅毒的实验诊断暗视野检查梅毒螺旋体阳性。暗视野检查梅毒螺旋体阳性。患儿非梅毒螺旋体血清抗体滴度持续上升。患儿非梅毒螺旋体血清抗体滴度持续上升。患儿非梅毒螺旋体血清学定量试验结果比母亲高患儿非梅毒螺旋体血清学定量试验结果比母亲高4 4倍。倍。患儿检出患儿检出19S-IgM19S-IgM抗体。抗体。35讲课材料神经梅毒的实验室诊断神经梅毒的实验室诊断梅毒血清学检查阳性。梅毒血清学检查阳性。脑脊液细胞计数蛋白质测定结果异常。脑脊液细胞计数蛋白质测定结果异常。脑脊液脑脊液VDRLVDRL试验阳性。试验阳性。脑脊液检测到脑脊液检测到IgMIgM抗体。抗体。36讲课材料丙肝实验室检测丙肝实验室检测抗-HCV检测HCV 抗原检测定量HCV RNA检测HCV基因型和亚型检测37讲课材料HCV-RNAHCV-RNA检测检测1.HCV RNAHCV RNA测定定性套式测定定性套式PCR.PCR.2.HCV RNA2.HCV RNA定量方法包括定量方法包括DNADNA探针技术、竞争探针技术、竞争PCRPCR法、荧光定量法等，法、荧光定量法等， 3.3.定量测定有助于了解病毒复制程度、抗病毒治定量测定有助于了解病毒复制程度、抗病毒治疗的选择及疗效评估等。疗的选择及疗效评估等。4.4.对对HCV RNAHCV RNA尚可进行基因分型，方法包括序列尚可进行基因分型，方法包括序列测定、测定、PCRPCR、酶切、探针杂交等。、酶切、探针杂交等。 38讲课材料4 4影响实验室检测的因素分析影响实验室检测的因素分析每一个生物学实验都有可能得出假阳性或假阴每一个生物学实验都有可能得出假阳性或假阴性的结果性的结果生物学实验的准确性用以下三种参数来描述生物学实验的准确性用以下三种参数来描述: : 敏感性敏感性 特异性特异性 （阴、阳性）预示值（阴、阳性）预示值 应考虑人群感染率应考虑人群感染率39讲课材料4.14.1检测结果准确性的计算检测结果准确性的计算检测结果检测结果真实的状态真实的状态合计合计感染感染未感染未感染阳性阳性A AB BA+BA+B阴性阴性C CD DC+DC+D合计合计A+CA+CB+DB+DA+B+C+DA+B+C+DA= A= 感染，检测阳性结果感染，检测阳性结果( (真阳性真阳性) )B= B= 未感染，检测阳性结果未感染，检测阳性结果( (假阳性假阳性) )C= C= 感染，检测阴性结果感染，检测阴性结果( (假阴性假阴性) )D= D= 未感染，检测阴性结果未感染，检测阴性结果( (真阴性真阴性) )A+C = A+C = 真正感染真正感染HIVHIV的总人数的总人数B+D = B+D = 真正未感染真正未感染HIVHIV的总人数的总人数40讲课材料4.24.2敏感性与阳性预示值敏感性与阳性预示值 实验实验能够准确发现真实病例的能力。高敏感能够准确发现真实病例的能力。高敏感性的实验很少给出假阴性的结果。高敏感性的实性的实验很少给出假阴性的结果。高敏感性的实验通常用于绝对需要极少的假阴性结果的情况，验通常用于绝对需要极少的假阴性结果的情况，例如献血检测。例如献血检测。 敏感性敏感性Sen = A/Sen = A/（A+CA+C）100%100% 阳性预示值阳性预示值PPV = A/(A+B) PPV = A/(A+B) 100% 100% 41讲课材料4.34.3特异性与阴性预示值特异性与阴性预示值实验能够准确定义实验能够准确定义“真实的非病例真实的非病例”的能力。的能力。高特异性实验很少给出假阳性的结果，高特高特异性实验很少给出假阳性的结果，高特异性的实验通常用于绝对需要极少的假阳性异性的实验通常用于绝对需要极少的假阳性结果的情况，例如临床诊断个体结果的情况，例如临床诊断个体HIVHIV感染。感染。 特异性特异性Spe = D/(B+D) Spe = D/(B+D) 100%100% 阴性预示值阴性预示值NPV = D/(C+D) NPV = D/(C+D) 100%100%42讲课材料感染率感染率ELISA1ELISA2WBPPVNPVPPVNPVPPVNPV10%91.6791.6799.88899.8885%83.9083.9099.94799.94799.8099.8099.89599.89599.99899.99899.89599.8951%50.0050.0099.99099.9900.7%40.8640.8699.99299.99298.5698.5699.98699.98699.98099.98099.985 99.985 0.1%9.029.0299.99899.9984.44.4影响实验室检测结果举例说明影响实验室检测结果举例说明HBVHCVHIV梅毒梅毒43讲课材料4.54.5实验室检测中应注意的问题实验室检测中应注意的问题 1. 1.针对感染不同时期选用不同的检测手段针对感染不同时期选用不同的检测手段 2.2.试剂的敏感性和特异性可以衡量它的优劣，但试剂的敏感性和特异性可以衡量它的优劣，但并不能决定一个测定结果正确与否的可能性大小，并不能决定一个测定结果正确与否的可能性大小，后者是由测定的预示值决定的。一个测定的阳性后者是由测定的预示值决定的。一个测定的阳性或阴性预示值，即这个阳性或阴性的结果是真阳或阴性预示值，即这个阳性或阴性的结果是真阳性或真阴性的可能性。这除与所用试剂的优劣有性或真阴性的可能性。这除与所用试剂的优劣有关系外，取决于测定人群患病率的高低关系外，取决于测定人群患病率的高低44讲课材料 谢谢！谢谢！45讲课材料