人巨细胞病毒pp65抗原检测监测免疫抑制病人的CMV感染人巨细胞病毒pp65抗原检测* * 人巨细胞病毒（人巨细胞病毒（CMVCMV）感染甚为普遍）感染甚为普遍* * 人巨细胞病毒（人巨细胞病毒（CMVCMV）感染是免疫功能低下者的常见机会）感染是免疫功能低下者的常见机会感染感染* * 器官移植后活动性器官移植后活动性HCMVHCMV感染率为感染率为20-70%20-70%，如发生，如发生CMVCMV肺炎，肺炎，死亡率可达死亡率可达80-90%80-90%* CMV* CMV还有抑制机体免疫功能的作用，还有抑制机体免疫功能的作用，CMVCMV感染可增加真菌感染可增加真菌和其他机会感染发生率，和其他机会感染发生率，* * 还可能造成异基因移植物的损害。还可能造成异基因移植物的损害。* * 目前对器官移植后目前对器官移植后CMVCMV病的重点是预防，包括预防性抗病病的重点是预防，包括预防性抗病毒或针对毒或针对CMVCMV亚临床感染亚临床感染(Preemptive)(Preemptive)抗病毒治疗治疗抗病毒治疗治疗。人巨细胞病毒pp65抗原检测* * 早期检测活动性早期检测活动性HCMVHCMV感染是感染是pre-emptivepre-emptive治疗的前治疗的前提条件提条件* * CMVCMV常常规规病病毒毒培培养养(CCC)(CCC)往往往往需需4 4周周才才能能获获阳阳性性结结果果, ,对对早早期期 诊断帮助不大诊断帮助不大* * CMVCMV特特异异性性抗抗体体IgMIgM，在在严严重重免免疫疫抑抑制制患患者者可可不不出出现现或或延延迟迟出现。出现。* * 人人巨巨细细胞胞病病毒毒pp65pp65白白细细胞胞抗抗原原血血症症较较特特异异性性抗抗体体IgMIgM阳阳性性早出现早出现3030天天1 1。优点是可定量检测，。优点是可定量检测，5 5小时内可出结果。小时内可出结果。人巨细胞病毒pp65抗原检测 研究目的研究目的 了了解解HCMVpp65HCMVpp65抗抗原原检检测测在在免免疫疫功功能能低低下下者者临临床床HCMVHCMV疾病疾病预测或早期诊断预测或早期诊断中的价值。中的价值。 了了解解HCMVpp65HCMVpp65抗抗原原检检测测在在监监测测疾疾病病活活动动性性和和指指导导CMVCMV“ “亚临床感染抗病毒亚临床感染抗病毒”治疗中的价值。治疗中的价值。 应应用用HCMVpp65HCMVpp65抗抗原原检检测测分分析析免免疫疫抑抑制制病病人人CMVCMV感染的感染的危险因素危险因素人巨细胞病毒pp65抗原检测 试验原理试验原理 用免疫荧光标记的单克隆抗体检测用免疫荧光标记的单克隆抗体检测CMVCMV的低基质磷蛋的低基质磷蛋白白 pp65pp65。 pp65pp65的特点的特点 * * CMVCMV病毒复制的早期蛋白，它出现于病毒感染的早病毒复制的早期蛋白，它出现于病毒感染的早期，在细胞感染后期，在细胞感染后3 34 4小时即开始出现小时即开始出现 * * 是是CMVCMV病毒含量最丰富的蛋白病毒含量最丰富的蛋白 * * 其功能是将病毒的其功能是将病毒的DNADNA锚定在受感染细胞的核膜上锚定在受感染细胞的核膜上 * * 在胞浆的高尔基体内合成在胞浆的高尔基体内合成, ,然后运回核内。然后运回核内。 人巨细胞病毒pp65抗原检测 CMV PP65CMV PP65抗原血症检测抗原血症检测（一（一) )分离白细胞及制片分离白细胞及制片( (二二) ) 固定和打孔固定和打孔( (三三) ) 免疫荧光染色免疫荧光染色( (四四) )、读片和结果判断、读片和结果判断人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测试验结果人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测讨论讨论 一一pp65pp65抗原血症检测抗原血症检测 直接检测病毒蛋白的方法不受机体免疫功直接检测病毒蛋白的方法不受机体免疫功能的响，在检测免疫抑制病人的能的响，在检测免疫抑制病人的CMVCMV活动性感活动性感染时尤其有用染时尤其有用. . 其检出率明显高于血清学方法其检出率明显高于血清学方法 特点为快速（手工操作特点为快速（手工操作4-54-5小时）、敏感小时）、敏感性高（活动性感染性高（活动性感染80-90%80-90%，CMVCMV病病99-100%99-100%）和较高的特异性（和较高的特异性（77-95%77-95%）、可以定量测试）、可以定量测试 用其指导治疗明显降低了死亡率用其指导治疗明显降低了死亡率 人巨细胞病毒pp65抗原检测 在骨髓移植中，可在发病早期诊断，亚临床感染在骨髓移植中，可在发病早期诊断，亚临床感染的检出率偏低，应寻求更好的预测方法，或调整诊断的检出率偏低，应寻求更好的预测方法，或调整诊断标准标准 不能检测新毒株和抗原决定簇有变异的毒株不能检测新毒株和抗原决定簇有变异的毒株 治疗后抗原血症转阴的病人少部分会复发，应结治疗后抗原血症转阴的病人少部分会复发，应结合更好的监控疗效的方法合更好的监控疗效的方法人巨细胞病毒pp65抗原检测一一PP65PP65检检测测在在监监测测骨骨髓髓移移植植后后CMVCMV感感染染中中的的应用应用1 1早期诊断早期诊断* * 骨骨髓髓移移植植后后早早期期用用IGMIGM来来诊诊断断CMVCMV感感染染将将贻误治疗贻误治疗* * pp65pp65抗抗原原检检测测可可用用于于早早期期诊诊断断，甚甚至至预预测发病测发病* * 如如果果能能在在骨骨髓髓重重建建的的早早期期检检测测到到对对CMVCMV的的细细胞胞免免疫疫或或体体液液免免疫疫异异常常或或抑抑制制则则能能更更准准确地预测确地预测CMVCMV感染。感染。人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测 PP65 PP65检测在监测骨髓移植后检测在监测骨髓移植后CMVCMV感染中的应用感染中的应用 2 2 骨髓移植后CMVCMV感染的危险因素感染的危险因素 CD34CD34细胞分选细胞分选 GVHD(FK506)GVHD(FK506)TBITBI合并其他病原体感染合并其他病原体感染人巨细胞病毒pp65抗原检测PP65PP65检测在监测骨髓移植后检测在监测骨髓移植后CMVCMV感染中的应用感染中的应用3 3 治疗时间治疗时间 细胞数多者和少者症状性感染的发病率是相近的细胞数多者和少者症状性感染的发病率是相近的 9090的症状性感染首次阳性抗原血症的的症状性感染首次阳性抗原血症的PP65PP65阳性阳性细胞数细胞数 1010 2/2 由于病例数少，无法进行COXS比例危险性分析.人巨细胞病毒pp65抗原检测PP65PP65在监测自身免疫病病人在监测自身免疫病病人CMVCMV感染中的应用感染中的应用 发热的自身免疫病病人出现发热的自身免疫病病人出现CMVCMV感染发病率和死亡率均感染发病率和死亡率均很高，很高，CMVCMV感染可能是重要的致病原感染可能是重要的致病原 较之白细胞减少机体免疫状态异常和这种异常未被有效较之白细胞减少机体免疫状态异常和这种异常未被有效控制，可能是病毒活动性复制的更主要的原因控制，可能是病毒活动性复制的更主要的原因 阳性细胞数多少可以帮助判断和预测阳性细胞数多少可以帮助判断和预测CMVCMV症状性感染症状性感染 CMVCMV特异性特异性IgMIgM的的阳性检出率非常低，阳性检出率非常低，人巨细胞病毒pp65抗原检测 CMVCMV感染的危险因素感染的危险因素 CMVCMV感染组感染组DRIDRI评分大多评分大多2020 合并细菌或感染合并细菌或感染 病程长、未正规治疗的狼疮病程长、未正规治疗的狼疮人巨细胞病毒pp65抗原检测三三 PP65PP65检检测测在在监监测测血血液液肿肿瘤瘤化化疗疗后后和和再障病人中再障病人中CMVCMV感染中的应用感染中的应用 发热的血液肿瘤化疗后和再障病出现发热的血液肿瘤化疗后和再障病出现CMVCMV感染发病率感染发病率和死亡率均很高和死亡率均很高幼稚细胞多，分化程度低，无抗病毒作用或病毒幼稚细胞多，分化程度低，无抗病毒作用或病毒 作用很弱，可能是病毒活动性复制的更主要的原作用很弱，可能是病毒活动性复制的更主要的原因因 CMVCMV特异性特异性IgMIgM的的阳性检出率非常低阳性检出率非常低 合并细菌或其他感染者合并细菌或其他感染者CMVCMV感染率高，感染可由多感染率高，感染可由多种炎症因子触发种炎症因子触发人巨细胞病毒pp65抗原检测结论 人人巨巨细细胞胞病病毒毒pp65pp65白白细细胞胞抗抗原原血血症症检检测测可可作作为为免免疫疫功功能能低低下下者者活活动动性性CMVCMV感感染染或或HCMVHCMV疾疾病的预测指标病的预测指标 骨骨髓髓移移植植后后或或激激素素冲冲击击/ /化化疗疗后后发发热热患患者者PP65PP65抗抗原原血血症症出出现现开开始始抗抗病病毒毒治治疗疗可可明明显显降降低死亡率。低死亡率。 CMVCMV感染与多种临床危险因素有关感染与多种临床危险因素有关人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测人巨细胞病毒pp65抗原检测