实验七 出血时间、凝血时间测定血血根本原理根本原理n血液流出血管后很快凝固，凝血过程是一种发生在血浆中由多血液流出血管后很快凝固，凝血过程是一种发生在血浆中由多种凝血因子种凝血因子coaguylation factor参与的连锁化学反响，其结参与的连锁化学反响，其结果是使血液由液体状态转变为凝胶状态。血液凝固过程可分为果是使血液由液体状态转变为凝胶状态。血液凝固过程可分为三个阶段：第一个阶段凝血酶原激活物三个阶段：第一个阶段凝血酶原激活物prothrombin activator形成形成;第二阶段凝血酶第二阶段凝血酶thrombin,thrombase形成；第三阶形成；第三阶段纤维蛋白段纤维蛋白fibrin形成。凝血系统包括内源性仅发生于血形成。凝血系统包括内源性仅发生于血浆中和外源性有存在于组织中的组织因子参与两套凝血浆中和外源性有存在于组织中的组织因子参与两套凝血系统。系统。n出血时间是指从针刺使皮肤毛细血管破裂后，血液从创口内流出血时间是指从针刺使皮肤毛细血管破裂后，血液从创口内流出到自动停止流出所需的一段时间。出血时间是用于检查机体出到自动停止流出所需的一段时间。出血时间是用于检查机体生理止血功能是否恢复正常，即主要用于初步了解毛细血管功生理止血功能是否恢复正常，即主要用于初步了解毛细血管功能及血小板功能是否正常。能及血小板功能是否正常。n凝血时间是指从血液流出体凝血时间是指从血液流出体外时起至血液在体外自动凝外时起至血液在体外自动凝固时止所需的时间。凝血时固时止所需的时间。凝血时间用于检查血液本身的凝血间用于检查血液本身的凝血过程是否正常，而与血小板过程是否正常，而与血小板和毛细血管功能关系较小。和毛细血管功能关系较小。n检测凝血时间的方法有玻片检测凝血时间的方法有玻片法、试管法、和毛细血管法法、试管法、和毛细血管法等，也可借助血液凝固时间等，也可借助血液凝固时间自动测定仪等仪器进行自动自动测定仪等仪器进行自动化检测。化检测。人造血小板人造血小板n人造血小人造血小板下方较板下方较亮处凝聚亮处凝聚起来，形成起来，形成血液凝块血液凝块目的要求：目的要求：n1、学习测定出血时间、凝血时间的方法，、学习测定出血时间、凝血时间的方法，熟悉测定出血时间和凝血时间的意义。熟悉测定出血时间和凝血时间的意义。n2、了解、了解影响影响出血时间、凝血时间的因素。出血时间、凝血时间的因素。实验材料：实验材料：n一次性刺血针，秒表，小滤纸条，一次性刺血针，秒表，小滤纸条，75%酒精棉酒精棉球，碘酒棉球，毛细玻璃管长于球，碘酒棉球，毛细玻璃管长于10cm、内、内径径0.81.2mm，也可以用一次性定量毛细取血，也可以用一次性定量毛细取血管代替，载破片等管代替，载破片等n人人方法与步骤：方法与步骤：n1、出血时间的测定、出血时间的测定n用用75%酒精消毒耳垂或指端后，再酒精消毒耳垂或指端后，再用无菌干棉球擦干。用一次性刺血用无菌干棉球擦干。用一次性刺血针刺皮肤针刺皮肤23mm深，请勿用手挤压深，请勿用手挤压出血部位，让血液自然流出。从出出血部位，让血液自然流出。从出血后开始每隔半分钟用滤纸吸去血血后开始每隔半分钟用滤纸吸去血滴一次不要触及皮肤，直至血滴一次不要触及皮肤，直至血液停止。记录开始出血至停止出血液停止。记录开始出血至停止出血时间间隔。时间间隔。2、凝血时间的测定凝血时间的测定n1毛细管法。常规消毒指尖或耳垂，并刺穿皮肤，毛细管法。常规消毒指尖或耳垂，并刺穿皮肤，让血液自然流出，用消毒棉球吸去第一滴血，用毛细让血液自然流出，用消毒棉球吸去第一滴血，用毛细玻璃管吸取第二滴血，直至血液充满官腔为止，此时玻璃管吸取第二滴血，直至血液充满官腔为止，此时立即记录时间。每隔半分钟折断毛细玻璃管一小段立即记录时间。每隔半分钟折断毛细玻璃管一小段510mm,直至两段玻璃管之间有血丝连接时，表示直至两段玻璃管之间有血丝连接时，表示血液已经凝固，停止计时。血液已经凝固，停止计时。n (2) 玻片法。针刺后，让血液自然下滴，滴到玻片上玻片法。针刺后，让血液自然下滴，滴到玻片上开始计时，其血滴不应小于黄豆粒。然后在室温下自开始计时，其血滴不应小于黄豆粒。然后在室温下自然凝固，每隔半分钟轻挑一次，假设有血丝挑起，即然凝固，每隔半分钟轻挑一次，假设有血丝挑起，即为凝固，停止计时。为凝固，停止计时。n (3) 试管法。取试管法。取1个枯燥的小试管，滴入血液。每隔个枯燥的小试管，滴入血液。每隔15S倾斜试管一次，直到血浆凝固即血浆液面不随倾斜试管一次，直到血浆凝固即血浆液面不随试管倾斜。记录试管内血浆凝固的时间。试管倾斜。记录试管内血浆凝固的时间。本卷须知本卷须知n1、在测定凝血时间时，最好将毛细管两端用在测定凝血时间时，最好将毛细管两端用胶泥封闭，置于胶泥封闭，置于37摄氏度恒温箱中，以保持温摄氏度恒温箱中，以保持温度恒定。度恒定。n2、如出血时间超过如出血时间超过15min，应立即终止实验，应立即终止实验，并进行止血。并进行止血。n3、采血前可进行局部按摩。采血前可进行局部按摩。n4、玻片法测定凝血时间时，温度不可以过高玻片法测定凝血时间时，温度不可以过高过低，血滴不可过过低，血滴不可过小小，挑动不可过求勤。，挑动不可过求勤。n5、试管法测定凝血时间时，血样不要混入气试管法测定凝血时间时，血样不要混入气泡。泡。思考：n分析出血时间与凝血时间分别与哪分析出血时间与凝血时间分别与哪些因素有关？些因素有关？n比较不同凝血时间测定的方法原理比较不同凝血时间测定的方法原理及其优缺点？及其优缺点？