类脂粒类脂粒和和易染颗粒易染颗粒染色法染色法一、一、 实验材料实验材料v实验菌株实验菌株: 从从SBR(Sequencing Barch Reactor Activated Sludge Process)反应器，经过反应器，经过1个月的个月的厌氧好氧交替驯化，形成除磷能力很强的聚厌氧好氧交替驯化，形成除磷能力很强的聚磷菌群。磷菌群。类脂粒染色原理类脂粒染色原理v细胞内含脂类储藏物的细菌。细胞内含脂类储藏物的细菌。PHA聚羟基脂聚羟基脂肪酸酯肪酸酯 ，在，在C/N高的高的环境中更易形成，用革境中更易形成，用革兰氏染色不能使氏染色不能使这类物物质着色，被着色，被误认为是是空胞。若用脂溶性染料染色，可将其与空胞。若用脂溶性染料染色，可将其与细胞胞内的空胞区内的空胞区别。类脂粒染色药品类脂粒染色药品v1）类脂粒染色液：类脂粒染色液：v染色液：染色液：0.3%苏丹黑染液苏丹黑染液0.3g苏丹黑，溶于苏丹黑，溶于100ml的的75%酒精酒精;v褪色剂褪色剂:二甲苯二甲苯;v复染剂：复染剂：0.5%番红染液。番红染液。操作步骤操作步骤v1.制片：涂片-干燥-固定；v2.初染：在制片上滴0.3%苏丹黑苏丹黑染液，染10min，水洗，吸干；v3.脱色：用二甲苯二甲苯冲洗涂片至无黑色素洗脱；v4.复染：用0.5%番红番红复染1-2min，水洗，吸干。v5.镜检：类脂类呈蓝黑色类脂类呈蓝黑色，菌体其他部分呈红菌体其他部分呈红色；色；易染颗粒染色v易染颗粒是细菌储藏的物质；主要是多聚磷酸盐，随着菌龄的增加而变大，易被蓝色燃料染色，而呈红色或紫色不呈现蓝色，故名易染颗粒，如用吕氏美兰单染5min，易染颗粒呈深蓝色，菌体呈淡蓝色，也称Albert易染颗粒染色法。易染颗粒染色药品v甲液：甲苯胺蓝0.15gv乙液：碘 2.0g，孔雀绿0.2g，KI3.0g，冰醋酸1ml溶于300ml，95%酒精。易染颗粒染色步骤v1、滴甲液于涂片上染色5min，倾去；v2、滴加乙液冲去甲液，再染1min，水洗。v3、吸干、镜检。v4、易染颗粒呈黑色易染颗粒呈黑色，菌体呈绿色或浅绿色菌体呈绿色或浅绿色。类脂粒实验报告v描述厌氧末期和好氧末期，2种方法获得的染色结果。（两种时期都颜色是什么？聚磷菌体多少？）