溶血磷脂病理生理学综述溶血磷脂病理生理学综述- -应重视乳状液型注射液中溶血磷脂限量的应重视乳状液型注射液中溶血磷脂限量的检查检查溶血磷脂病理学综述目录目录前言乳状液型注射液中溶血磷脂的产生与代谢溶血磷脂的病理生理研究溶血磷脂酸的病理生理研究讨论与结论溶血磷脂病理学综述前言前言v溶血磷脂（lysoph-osphatidylcholine，如LPC、LPE、LPA等等），是由磷脂失去一个脂肪酸基团所形成的磷脂的统称。是普通磷脂被磷脂酶A水解或在pH4.8时由磷脂（PC、PE、PA等）氧化水解生成的一组化合物。 溶血磷脂病理学综述v溶血磷脂对红细胞具有强溶血作用，大剂量溶血磷脂进入人体时，会因短时间内红细胞大量溶解导致人体出现各种出血症状而死亡。v进入人体内的磷脂或外源性磷脂类分子在体内经各种酶作用产生溶血磷脂酸（LPA），LPA会诱导引发多种重大疾病，如缺血性心脏病、动脉粥样硬化、心肌梗死、肾病及肿瘤等。溶血磷脂病理学综述第一节第一节乳状液型注射液中溶血磷脂的产生与代谢乳状液型注射液中溶血磷脂的产生与代谢磷脂因其特有的脂质双分子层结构，故作为注射液乳剂中常用的辅料之一。磷脂因其特有的脂质双分子层结构，故作为注射液乳剂中常用的辅料之一。溶血磷脂病理学综述文献报道，乳状液型注射液在临床使用过程中常见多种不良反应：静脉炎，发热、疼痛、诱发出血、过敏反应及药液外渗（漏）致局部组织炎症或坏死肝功能异常及溶血注射乳剂中辅料大豆磷注射乳剂中辅料大豆磷脂可能是引起其不良反脂可能是引起其不良反应的重要原因之一应的重要原因之一。实验发现脂肪乳类产品在临床实验发现脂肪乳类产品在临床使用存在的不良反应与原辅料使用存在的不良反应与原辅料中带入的杂质有关，并在大剂中带入的杂质有关，并在大剂量、长期使用后果更为严重，量、长期使用后果更为严重，所产生的毒副作用甚至不可逆。所产生的毒副作用甚至不可逆。国外报道狗的亚急性毒性试验国外报道狗的亚急性毒性试验已经发现不同脂肪乳会造成不已经发现不同脂肪乳会造成不同的脏器损害，甚至在试验结同的脏器损害，甚至在试验结束前死亡。束前死亡。 溶血磷脂病理学综述v大量外源性溶血磷脂如溶血磷脂酰胆碱（LPC）、溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰丝胺酸、溶血磷脂酰肌醇等溶血磷脂类分子，进入人体后，也会在机体内溶血磷脂酶D（lysoLPD）的作用下产生溶血磷脂酸LPA。v注射乳剂中辅料大豆磷脂含量超标，会引发溶血等不良反应。这是因为磷脂（PC、PE、PA等）进入人体被磷脂酶A1和A2水解而产生脂肪酸和溶血磷脂。溶血磷脂病理学综述磷脂结构式CH2CH2N+ (CH3) 3 PC CH2CH2N+H3 PE 磷脂酶A1磷脂酶A2磷脂酶D溶血磷脂病理学综述磷脂酶的分布v磷脂酶A1 自然界分布广泛，主要存在于细胞的溶酶体内，此外蛇毒及某些微生物中亦有，可有催化甘油磷脂的第1位酯键断裂，产物为脂肪酸和溶血磷脂2。 v磷脂酶A2 普遍存在于动物各组织细胞膜及线粒体膜，能使甘油磷脂分子中第2位酯键水解，产物为溶血磷脂1及其产物脂肪酸和甘油磷酸胆碱或甘油磷酸乙醇胺等。v磷脂酶D 主要存在于植物，动物脑组织中亦有，催化磷脂分子中磷酸与取代基团(如胆碱等)间的酯键，释放出取代基团。溶血磷脂病理学综述磷脂酶A溶血磷脂酶DPCPCLPCLPCLPALPA溶血磷脂病理学综述乳状液型注射液中LPC产生的其他途径v磷脂的稳定性受pH值和温度的影响较大，只有在pH值为5.2时，磷脂乳化层最稳定，偏酸偏碱条件下，易水解以溶血磷脂乳状液形式存在 。v在乳剂注射液生产工艺中重要的一步为高压灭菌，因而极有可能在生产过程中就有部分磷脂转变为溶血磷脂，从而使乳剂注射液中溶血磷脂的指标超过正常值 溶血磷脂病理学综述v溶血磷脂（lysoph-osphatidylcholine，如LPC、 LPE、LPA等等）可破坏红细胞，使红细胞破裂而发生溶血，已清楚低浓度（210-4M）的溶血磷脂就能使胞膜溶解，更低的浓度则使红细胞的形状发生很大的改变，形成棘皮细胞。第二节第二节溶血磷脂的病理生理研究溶血磷脂的病理生理研究v溶血磷脂导致溶血后，能使毛细血管通透性增加而引起出血，使组织释放组织胺、组织胺、5-5-羟色胺、肾上腺羟色胺、肾上腺素、缓动素素、缓动素等等，间接影响心血管及神经系统的功能并刺激发热中枢产生药物热。v在大剂量溶血磷脂进入人体时，还会因短时间内红细胞大量溶解，导致人体出现各种出血症状如呕血、便血、尿血、皮下出血等导致死亡。溶血磷脂病理学综述v日本长崎大学的科学家通过动物实验发现，吗啡和抗炎药物等无法抑制的慢性疼痛（也称为神经性疼痛，由神经受伤、疼痛感觉过敏引起，包括由癌症引起的疼痛、腰痛，患带状疱疹后的疼痛等）由溶血磷脂所致。 溶血磷脂病理学综述第二节第二节溶血磷脂酸的病理生理研究溶血磷脂酸的病理生理研究v乳剂中大量溶血磷脂进入体内不仅易发生上述溶血、静脉炎等不良反应外，还将对人体产生其他病理影响，其中主要作用形式为LPA。vLPA不仅是磷脂代谢过程中的中间产物，而且还是一种细胞间信使。它对细胞的增殖、生长、分化及功能有极其重要的生物学意义，被认为是细胞增殖、迁移及存活的强有力的诱导剂，可诱导引发多种重大疾病。缺血性心脏病 动脉粥样硬化心肌梗死肾病及肿瘤等溶血磷脂病理学综述LPA与缺血性心脏病 LPA 血小板激活 血小板聚集 动脉血栓 血小板应答 大量释放LPA 血液凝固 血管异常收缩 加重血栓形成加重血栓形成加重心肌缺血加重心肌缺血溶血磷脂病理学综述LPA与脑血管疾病vLPA具有明显的剂量信赖性的神经毒性作用，可诱导内源性ROS（活性氧簇）形成而发生氧化应激导致神经元凋亡。有研究表明LPA有破坏细胞膜磷脂层的特性。vLPA能引起海马神经元凋亡并通过血脑屏障进入中枢神经系统，作用于种类细胞，产生不同的病变效应：Tau蛋白异常磷酸化以及脑内皮细胞紧密连接通透性增加，使原来被阻隔在血脑屏障外的血液成分进入中枢神经系统，改变脑内微环境，长期生存在这种异常环境中的脑组织会发生各种病变，导致包括高血压、缺血性脑血管病、Alzheimer病和血管性痴呆等多种疾病。v如果患者的LDL浓度很高，此时注射的药物中如含有大量溶血磷脂（在体内转变成LPA（修饰LDL），则易使血管内皮损伤，启动AS斑块的形成，则会增大缺血性脑血管病的危险。 溶血磷脂病理学综述LPA与肾脏疾病v肾小球的系膜细胞增生是许多形式的肾脏疾病进展的主要特征，研究显示LPA与内皮素、血管紧张素一样具有生长因子活性，能激活MAPK（促分裂素原活化蛋白激酶 ，可促进血管内皮细胞增殖和新血管生成 ），引起系膜增殖，引发肾小球疾病。 溶血磷脂病理学综述LPA与肿瘤vLPA与卵巢癌的发生发展有关。LPA可引起癌细胞增殖。Sawada等试验发现，当LPA浓度与腹水中相似时(115 txmmoL)，可刺激卵巢癌细胞生长；通过黏着斑的形成而诱导卵巢癌细胞迁移，有助于癌的浸润和转移。So等研究认为，LPA还能通过促白细胞介素8(IL一8)表达促进卵巢癌细胞浸润转移。溶血磷脂病理学综述第三节第三节讨论与结论讨论与结论v综上所述，由于溶血磷脂的强致溶血性和对机体潜在的损害，在制备注射用乳剂时对产品进行“溶血”等安全性指标的检测显得尤为重要，中国国家药典委员会在网站发布国药典化发 2007 4 号 “注射剂质量标准提高工作会议纪要”（2007.1.10），公布的首批拟提高质量标准的注射液品种中榄香烯注射液亦被要求增加“其他（溶血与凝聚、异常毒性、过敏试验、有关物质）”等的检测项目，标志着我国药监部门对该产品存在溶血风险的重视。中华人民共和国药典附录I B关于注射剂检查项下未见溶血磷脂的检查项目及检查法，因此为提升注射乳剂的安全性、有效性、稳定性及使用依从性，乳状液型注射液药品生产厂家应重视溶血磷脂项目的检测。溶血磷脂病理学综述谢谢大家谢谢大家溶血磷脂病理学综述溶血磷脂病理学综述