1. 关于酶的练习题例：镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的例：镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列的改变碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列的改变必须使用的酶是必须使用的酶是( )( )A. A. 解旋酶解旋酶 B. DNAB. DNA连接酶连接酶C. C. 限制性内切酶限制性内切酶 D. RNAD. RNA聚合酶聚合酶答案：答案：C C解析：一个解析：一个DNADNA分子中有多个基因，而控制合成镰刀型细胞贫血症血分子中有多个基因，而控制合成镰刀型细胞贫血症血红蛋白的基因只是红蛋白的基因只是DNADNA分子中的一个基因，若要检测其碱基序列，必分子中的一个基因，若要检测其碱基序列，必须将其从须将其从DNADNA分子中切下来，而这个过程则需要限制酶。分子中切下来，而这个过程则需要限制酶。答案答案A A：解旋酶用于：解旋酶用于DNADNA分子复制分子复制 B B：DNADNA连接酶用于目的基因和连接酶用于目的基因和 运载体的结合运载体的结合 D D：RNARNA聚合酶用于聚合酶用于RNARNA的复制的复制12.(2008)2.(2008)已知某种限制性内切酶在一线性已知某种限制性内切酶在一线性DNADNA分子上有分子上有3 3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNADNA分子在分子在3 3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a a、b b、c c、d d四种四种不同长度的不同长度的DNADNA片段。现有多个上述线性片段。现有多个上述线性DNADNA分子，若在分子，若在每个每个DNADNA分子上至少有一个酶切位点被该酶切断，则理论分子上至少有一个酶切位点被该酶切断，则理论上讲，经该酶酶切后，这些线性上讲，经该酶酶切后，这些线性DNADNA分子最多能产生长度分子最多能产生长度不同的不同的DNADNA片段种类数是片段种类数是A.3 B.4 C.9 D.12C23.限制性内切酶能识别特定的限制性内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切，不同的限制性内切酶可以对序列并进行剪切，不同的限制性内切酶可以对不同的核苷酸序列进行剪切。现以三种不同的限制性内切酶对长度为不同的核苷酸序列进行剪切。现以三种不同的限制性内切酶对长度为8kb大小的大小的DNA进行剪切后，用凝胶电脉分离各核酸片断，实验结果如图所示。进行剪切后，用凝胶电脉分离各核酸片断，实验结果如图所示。请问：三种不同的限制性内切酶在此请问：三种不同的限制性内切酶在此DNA片断上相应切点的位置是（片断上相应切点的位置是（）C34 4、( (高考试题：高考试题：20072007广东生物广东生物)7.)7.现有一长度为现有一长度为10001000碱基对碱基对(by(by）的）的DNADNA分子，用限制性核分子，用限制性核酸内切酶酸内切酶EcoR1EcoR1酶切后得到的酶切后得到的DNADNA分子仍是分子仍是1000 by1000 by，用，用Kpn1Kpn1单独酶切得到单独酶切得到400 by400 by和和600 by600 by两种长度的两种长度的DNADNA分子，用分子，用EcoRI,KpnlEcoRI,Kpnl同时酶切后得到同时酶切后得到200 by200 by和和600 by600 by两种长度的两种长度的DNADNA分子。分子。该该DNADNA分子的酶切图谱正确的是分子的酶切图谱正确的是【答案答案】D D42. 获取目的的基因技术例：如果所需要的目的基因的序列完全不知，或例：如果所需要的目的基因的序列完全不知，或只知道目的基因的一段，或想从一种生物体内获只知道目的基因的一段，或想从一种生物体内获得很多基因，选用下列方法可以获得目的基因的得很多基因，选用下列方法可以获得目的基因的是是( )( )A. A. 直接从含有目的基因的生物体内获取直接从含有目的基因的生物体内获取B. B. 构建基因文库构建基因文库C. C. 利用利用PCRPCR技术扩增技术扩增D. D. 通过通过DNADNA合成仪用化学方法直接人工合成合成仪用化学方法直接人工合成答案：答案：B B解析：若目的基因序列完全不知，或只知道基因序列的一段，就无法解析：若目的基因序列完全不知，或只知道基因序列的一段，就无法利用利用A A、C C、D D三项所述方法获得，而只能采用构建基因文库的方法获三项所述方法获得，而只能采用构建基因文库的方法获取目的基因。取目的基因。55Ti质粒上有质粒上有TDNA，这种，这种DNA可以可以转移到受体细胞，并且整合到受体细转移到受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的胞染色体的DNA上。这种质粒存在于上。这种质粒存在于()A大肠杆菌大肠杆菌B农杆菌农杆菌C酵母菌酵母菌D苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌B76基因与载体结合所需的条件有基因与载体结合所需的条件有()同一种限制酶同一种限制酶具有某些标记基因具有某些标记基因的质粒的质粒RNA聚合酶聚合酶目的基因目的基因DNA连接酶连接酶四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸ATPABC DB87关于关于DNA重组技术基本工具的说法正确的重组技术基本工具的说法正确的是是()ADNA连接酶只能连接双链连接酶只能连接双链DNA片段互补片段互补的黏性末端的黏性末端B细菌细胞中含有的限制酶不能对自身细菌细胞中含有的限制酶不能对自身DNA进行剪切进行剪切C限制酶切割限制酶切割DNA后一定能产生黏性末端后一定能产生黏性末端D天然的质粒就可以用来作为载体天然的质粒就可以用来作为载体B98、苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉、苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花植株后是否已表达，从生物个体水花植株后是否已表达，从生物个体水平进行检测的方法平进行检测的方法()A是否有抗药性是否有抗药性B是否有相应的抗虫性状是否有相应的抗虫性状C是否能检测至标记基因是否能检测至标记基因D是否能分离到目的基因是否能分离到目的基因B109、如果科学家通过转基因工程，成功地、如果科学家通过转基因工程，成功地把一名女性血友病患者的造血细胞进把一名女性血友病患者的造血细胞进行改造，使其凝血功能恢复正常。那行改造，使其凝血功能恢复正常。那么，她后来所生的儿子中：（么，她后来所生的儿子中：（）A全部正常全部正常B一半正常一半正常C全部有病全部有病D不能确定不能确定C1110101010、我我我我国国国国科科科科学学学学工工工工作作作作者者者者经经经经研研研研究究究究发发发发现现现现一一一一种种种种生生生生活活活活在在在在棉棉棉棉铃铃铃铃虫虫虫虫消消消消化化化化道道道道内内内内的的的的苏苏苏苏云云云云金金金金芽芽芽芽孢孢孢孢杆杆杆杆菌菌菌菌能能能能分分分分泌泌泌泌一一一一种种种种毒毒毒毒蛋蛋蛋蛋白白白白使使使使棉棉棉棉铃铃铃铃虫虫虫虫致致致致死死死死，而而而而此此此此毒毒毒毒蛋蛋蛋蛋白白白白对对对对人人人人畜畜畜畜无无无无害害害害。通通通通过过过过科科科科技技技技攻攻攻攻关关关关，我我我我国国国国科科科科工工工工作作作作者者者者已已已已成成成成功功功功地地地地将将将将该该该该毒毒毒毒蛋蛋蛋蛋白白白白基基基基因因因因导导导导人人人人棉棉棉棉花花花花植植植植株株株株体体体体内内内内并并并并实实实实现现现现了了了了表表表表达达达达。由由由由于于于于棉棉棉棉铃铃铃铃虫虫虫虫吃吃吃吃了了了了新新新新品品品品种种种种“转转转转基基基基因因因因抗抗抗抗虫虫虫虫棉棉棉棉”植植植植株株株株后后后后就就就就会会会会死死死死亡亡亡亡，所所所所以以以以该该该该棉棉棉棉花花花花新新新新品品品品种种种种在在在在近近近近年年年年推推推推广广广广后后后后，已已已已收到了很好的经济效益，请据以上所给材料回答下列问题：收到了很好的经济效益，请据以上所给材料回答下列问题：收到了很好的经济效益，请据以上所给材料回答下列问题：收到了很好的经济效益，请据以上所给材料回答下列问题：(1)(1)(1)(1)害虫抗药性的增强是害虫抗药性的增强是害虫抗药性的增强是害虫抗药性的增强是 的结果的结果的结果的结果(2(2(2(2） “转转转转基基基基因因因因”抗抗抗抗虫虫虫虫棉棉棉棉新新新新品品品品种种种种的的的的培培培培育育育育应应应应用用用用了了了了 新新新新技术技术技术技术(3)(3)(3)(3)在培育新基因抗虫棉新品种过程中，所用的基因的在培育新基因抗虫棉新品种过程中，所用的基因的在培育新基因抗虫棉新品种过程中，所用的基因的在培育新基因抗虫棉新品种过程中，所用的基因的“剪刀剪刀剪刀剪刀”是是是是 ，基因的，基因的，基因的，基因的“针线针线针线针线”是是是是 ，基因的，基因的，基因的，基因的“运载工具运载工具运载工具运载工具”是是是是 (5)“(5)“(5)“(5)“转基因抗虫棉转基因抗虫棉转基因抗虫棉转基因抗虫棉”抗害虫的遗传信息传递过程可以表示为抗害虫的遗传信息传递过程可以表示为抗害虫的遗传信息传递过程可以表示为抗害虫的遗传信息传递过程可以表示为 (6)(6)(6)(6)该科技成果在环保上的重要作用是该科技成果在环保上的重要作用是该科技成果在环保上的重要作用是该科技成果在环保上的重要作用是 自然选择自然选择基因工程基因工程( (或或DNADNA重组重组技术技术) ) 限制酶限制酶DNADNA连接酶；连接酶；运载体运载体抗虫基因抗虫基因 mRNA mRNA 毒蛋白毒蛋白减少农药对环境的污染，保护了生态环境减少农药对环境的污染，保护了生态环境1211、番番茄茄在在运运输输和和贮贮藏藏过过程程中中，由由于于过过早早成成熟熟而而易易腐腐烂烂，应应用用基基因因工工程程技技术术，通通过过抑抑制制某某种种促促进进果果实实成成熟熟激激素素的的合合成成能能力力，可可使使番番茄茄贮贮藏藏时时间间延延长长，培培育育成成耐耐贮贮藏藏的的番番茄茄新新品品种种，这这种种转转基基因因番番茄已于茄已于1953年在美国上市，请回答：年在美国上市，请回答：(1)在在培培育育转转基基因因番番茄茄的的基基因因操操作作中中，所所用用的的基基因因的的“剪剪刀刀”是是，基基因因的的“针针线线”是是,基因的基因的“运输工具运输工具”是是(2)与与杂杂交交育育种种、诱诱变变育育种种相相比比，通通过过基基因因工工程程来培育新品种的主要优点是来培育新品种的主要优点是限制酶限制酶DNA连接酶连接酶运载体运载体 目目的的性性强强，育育种种周周期短；克服远缘杂交不亲和的障碍期短；克服远缘杂交不亲和的障碍1312121212、（20052005 江江江江苏苏苏苏生生生生物物物物 3838）(9(9分分分分) )在在在在植植植植物物物物基基基基因因因因工工工工程程程程中中中中，用用用用土土土土壤壤壤壤农农农农杆杆杆杆菌菌菌菌中中中中的的的的TiTi质质质质粒粒粒粒作作作作为为为为运运运运载载载载体体体体把把把把目目目目的的的的基基基基因因因因重重重重组组组组人人人人TiTi质质质质粒粒粒粒上上上上的的的的T-DNAT-DNA片段中，再将重组的片段中，再将重组的片段中，再将重组的片段中，再将重组的T-DNAT-DNA插入植物细胞的染色体插入植物细胞的染色体插入植物细胞的染色体插入植物细胞的染色体DNADNA中。中。中。中。 (1)(1)科科科科学学学学家家家家在在在在进进进进行行行行上上上上述述述述基基基基因因因因操操操操作作作作时时时时，要要要要用用用用同同同同一一一一种种种种 分分分分别别别别切切切切割割割割质质质质粒粒粒粒和和和和目目目目的的的的基基基基因因因因，质质质质粒粒粒粒的的的的黏黏黏黏性性性性末末末末端端端端与与与与目目目目的的的的基基基基因因因因DNADNA片片片片段段段段的的的的黏黏黏黏性末端就可通过性末端就可通过性末端就可通过性末端就可通过而黏合。而黏合。而黏合。而黏合。 (2)(2)将将将将携携携携带带带带抗抗抗抗除除除除草草草草剂剂剂剂基基基基因因因因的的的的重重重重组组组组TiTi质质质质粒粒粒粒导导导导入入入入二二二二倍倍倍倍体体体体油油油油菜菜菜菜细细细细胞胞胞胞，经经经经培培培培养养养养、筛筛筛筛选选选选获获获获得得得得一一一一株株株株有有有有抗抗抗抗除除除除草草草草剂剂剂剂特特特特性性性性的的的的转转转转基基基基因因因因植植植植株株株株。经经经经分分分分析析析析，该该该该植植植植株株株株含含含含有有有有一一一一个个个个携携携携带带带带目目目目的的的的基基基基因因因因的的的的T-DNAT-DNA片片片片段段段段，因因因因此此此此可可可可以以以以把把把把它它它它看看看看作作作作是是是是杂杂杂杂合合合合子子子子。理理理理论论论论上上上上，在在在在该该该该转转转转基基基基因因因因植植植植株株株株自自自自交交交交F1F1代代代代中中中中，仍仍仍仍具具具具有有有有抗抗抗抗除除除除草草草草剂剂剂剂特性的植株占总数的特性的植株占总数的特性的植株占总数的特性的植株占总数的，原因是，原因是，原因是，原因是 (3)(3)种种种种植植植植上上上上述述述述转转转转基基基基因因因因油油油油菜菜菜菜，它它它它所所所所携携携携带带带带的的的的目目目目的的的的基基基基因因因因可可可可以以以以通通通通过过过过花花花花粉粉粉粉传传传传递递递递给给给给近近近近缘缘缘缘物物物物种种种种，造造造造成成成成“ “基基基基因因因因污污污污染染染染” ”。如如如如果果果果把把把把目目目目的的的的基基基基因因因因导导导导人人人人叶叶叶叶绿绿绿绿体体体体DNADNA中，就可以避免中，就可以避免中，就可以避免中，就可以避免“ “基因污染基因污染基因污染基因污染” ”，原因是，原因是，原因是，原因是 限制酶限制酶3/4雌雌雄雄配配子子各各有有12含含抗抗除除草草剂剂基基因因；受受精精时时，雌雌雄配于随机结合雄配于随机结合。 叶叶绿绿体体遗遗传传表表现现为为母母系系遗遗传传，目目的的基基因因不不会会通过花粉传递并在下一代中显现出来通过花粉传递并在下一代中显现出来。碱基互补配对碱基互补配对1413131313（12121212分）某质粒上有分）某质粒上有分）某质粒上有分）某质粒上有SalSalSalSal、HinHinHinHindddd、BamBamBamBamH IH IH IH I三三三三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。的过程如图所示，请回答下列问题。的过程如图所示，请回答下列问题。的过程如图所示，请回答下列问题。15将含有目的基因的DNA与质粒分别用Sal I酶切，酶切产物用_催化连接后，两个DNA片段的连接结果有 种。DNA连接酶连接酶316在构建重组质粒时，应选用在构建重组质粒时，应选用_两种酶对两种酶对进行切割，以进行切割，以保证重组保证重组DNA序列的唯一性。序列的唯一性。Sal、Hind质粒和含抗盐基因的质粒和含抗盐基因的DNADNA某质粒上有某质粒上有SalSal、HinHindd、BamBamH IH I三种限制酶切割位点三种限制酶切割位点17为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加入培养基中加入，理由是，理由是。氨苄青霉素氨苄青霉素重组质粒中含抗氨苄青霉素基因而抗四环素基因被破坏重组质粒中含抗氨苄青霉素基因而抗四环素基因被破坏18将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用植株需要用技术，愈伤组织技术，愈伤组织经经进而形成完整植株，此过程进而形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加除营养物质外还必须向培养基中添加。植物组织培养植物组织培养植物激素植物激素细胞增殖和分化细胞增殖和分化（生长调节剂（生长调节剂或或生长素和细胞分裂素）生长素和细胞分裂素）191414、应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。、应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。、应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。、应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：请据图回答下列问题：请据图回答下列问题：请据图回答下列问题：（1 1）在培育转人生长激素基因牛过程中，）在培育转人生长激素基因牛过程中，过程需要的工过程需要的工具酶是具酶是 ，过程常用的方法是过程常用的方法是 。目目的的基基因因人的生长人的生长激素基因激素基因转人生长激素基因牛转人生长激素基因牛无限增殖调控无限增殖调控基因（基因（prGprG）导入导入筛选筛选体外培养体外培养单克隆抗体单克隆抗体棉花受体细胞棉花受体细胞抗虫棉抗虫棉抗虫基因抗虫基因重组重组TiTi质粒质粒受精卵受精卵检测检测v拓展练习限制酶、限制酶、DNA连接酶连接酶显微注射法显微注射法20（2 2 2 2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有因的首端必须含有因的首端必须含有因的首端必须含有 。过程培养到桑椹胚或过程培养到桑椹胚或过程培养到桑椹胚或过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用囊胚阶段，可以采用囊胚阶段，可以采用囊胚阶段，可以采用 技术，培育出多头技术，培育出多头技术，培育出多头技术，培育出多头相同的转基因犊牛。相同的转基因犊牛。相同的转基因犊牛。相同的转基因犊牛。启动子启动子目目的的基基因因人的生长人的生长激素基因激素基因转人生长激素基因牛转人生长激素基因牛无限增殖调控无限增殖调控基因（基因（prGprG）导入导入筛选筛选体外培养体外培养单克隆抗体单克隆抗体棉花受体细胞棉花受体细胞抗虫棉抗虫棉抗虫基因抗虫基因重组重组TiTi质粒质粒受精卵受精卵检测检测胚胎分割和胚胎移植胚胎分割和胚胎移植21（3 3）prGprG能激发细胞不断分裂，通过基因工能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，程导入该调控基因来制备单克隆抗体，最可能是最可能是 细胞，细胞，代表的细胞具有代表的细胞具有 的特点。的特点。目目的的基基因因人的生长人的生长激素基因激素基因转人生长激素基因牛转人生长激素基因牛无限增殖调控无限增殖调控基因（基因（prGprG）导入导入筛选筛选体外培养体外培养单克隆抗体单克隆抗体棉花受体细胞棉花受体细胞抗虫棉抗虫棉抗虫基因抗虫基因重组重组TiTi质粒质粒受精卵受精卵检测检测效应效应B B既能无限增殖又能产生特异性抗体既能无限增殖又能产生特异性抗体22（4 4）在抗虫棉培育过程中，）在抗虫棉培育过程中，过程中的受体过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是细胞相比较，其优点是 ，过程采用过程采用的技术是的技术是 。目目的的基基因因人的生长人的生长激素基因激素基因转人生长激素基因牛转人生长激素基因牛无限增殖调控无限增殖调控基因（基因（prGprG）导入导入筛选筛选体外培养体外培养单克隆抗体单克隆抗体棉花受体细胞棉花受体细胞抗虫棉抗虫棉抗虫基因抗虫基因重组重组TiTi质粒质粒受精卵受精卵检测检测全能性高全能性高植物组织培养植物组织培养234. 蛋白质工程例：蛋白质工程中，需要直接操作的对象是( )A. 氨基酸结构 B. 蛋白质的空间结构C. 基因结构 D. 肽链结构答案：C解析：蛋白质工程目标是对蛋白质进行分子设计，但因为基因决定蛋白质，因此归根到底还需对相应的基因进行设计。2415、科科学学家家将将干干扰扰素素基基因因进进行行定定点点突突变变导导入入大大肠肠杆杆菌菌表表达达，使使干干扰扰素素第第17位位的的半半胱胱氨氨酸酸改改变变成成丝丝氨氨酸酸，结结果果大大大大提提高高干干扰扰素素的的抗抗病病性性活活性性，并并且且提高了储存稳定性，该生物技术为（提高了储存稳定性，该生物技术为（）A.基因工程基因工程B.蛋白质工程蛋白质工程C.基因突变基因突变D.细胞工程细胞工程B25