拟南芥泛素化课件Stillwatersrundeep.流静水深流静水深,人静心深人静心深Wherethereislife,thereishope。有生命必有希望。有生命必有希望蛋白质的修饰包含甲基化，磷酸化，乙酰化，泛素化等，各种修饰在基因表达转录和翻译过程中发挥重要作用， 本次讲泛素化在拟南芥脱落酸调控中的作用。首先了解和下面要讲到的几个名词泛素化；泛素化是对特异的靶蛋白进行泛素修饰的过程。在蛋白质分子一个位点上结合单个或多个泛素残基的现象。自泛素化：指本身含有结合泛素分子的能力，进行降解。这里特指KEG蛋白自降解过程KEGKEG基因：拟南芥的一段功能基因，翻基因：拟南芥的一段功能基因，翻译出译出KEGKEG蛋白，此蛋白包含泛素化酶蛋白，此蛋白包含泛素化酶E3E3连连接酶和激酶域。接酶和激酶域。KEG E3连接酶：协助泛素分子中间体结合到靶蛋白，降解靶蛋白作用。ABI5：ABA的转录因子，在体内高表达时，会抑制种子的萌发和集体的生长。 ABA;ABA;脱落酸，指能引起芽休眠、脱落酸，指能引起芽休眠、叶子脱落和抑制生长等生理作用叶子脱落和抑制生长等生理作用的的植物激素植物激素。 一，KEG基因： keg-1(KEG基因的双隐性突变体)，不产生KEG蛋白。keg-1/35S:HA-KEG；有HA标记基因的单显杂合体，能产生KEG蛋白。keg-1/35S:HA-KEGAA：有HA标记基因的单显杂合体，但不能产生完整功能的KEG蛋白，KEG基因部分区域被改变（29-cys,31-his,变成了Ala）。KEG基因与ABI5关系ABI5抗体杂交实验，检测ABI5表达量高低，keg-1(KEG基因的双隐性突变体)，不产生KEG蛋白，ABI5含量+keg-1/35S:HA-KEG；有HA标记基因的单显杂合体，能产生KEG蛋白， ABI5含量+keg-1/35S:HA-KEGAA；产生无活性的KEG蛋白， ABI5含量+ 通过许多其他实验证实：KEG蛋白中E3连接酶具有靶向连接ABI5泛素化作用，使之被26S蛋白酶体降解。使具有抑制植物生长发育的ABI5含量的降低，植物能生长。即KEG正常表达，降解ABI5含量，解除生长抑制，能生长。KEG基因与ABA以及通过其他实验证实：1.KEG过量表达，对ABA作用就失敏2. KEG基因表达与泛素化作用蛋白酶体抑制剂MG132.抑制26S蛋白酶体对KEG蛋白降解。STAU激酶抑制剂，抑制KEG蛋白自泛素化。（所用的类型都为keg-1/35:HA-KEG）总结KEG与ABI5,ABA关系