第二章第二章 提取分离和鉴定提取分离和鉴定的方法和技术的方法和技术 天然药物化学天然药物化学第一节第一节 提取方法与技术提取方法与技术概念：提取-是指根据天然药物中各种化学成分的溶解性能，选择对有效成分溶解度大而对其他成分溶解度小的溶剂，用适当的方法将所需要的化学成分尽可能完全地从药材组织中溶解提出的过程。提取前的预处理：1、粉碎2、脱脂3、切成小段，薄片或粉碎成粗颗粒4、苷类成分提取，抑制或杀灭酶的活性常用提取方法：水蒸汽水蒸汽蒸馏法蒸馏法溶剂法溶剂法升华法升华法提取方法提取方法第一节第一节 提取方法与技术提取方法与技术一、溶剂提取法：利用天然利用天然药物化学成分在特定溶物化学成分在特定溶剂中中溶解的性溶解的性质，将其从，将其从药材中提取出来。材中提取出来。多数情况下采用溶多数情况下采用溶剂法。法。一、溶剂提取法一、溶剂提取法溶剂提取法的原理：溶溶剂在渗透、在渗透、扩散散作用下，溶作用下，溶剂渗入渗入药材材组织细胞的胞的细胞膜胞膜进入入细胞内部，溶解可溶性的溶胞内部，溶解可溶性的溶质，形成，形成细胞内外溶胞内外溶质的的浓度差，从度差，从而而带动溶溶质做不断往返的运做不断往返的运动，将溶，将溶质渗出渗出细胞膜，直到胞膜，直到细胞内外溶液中胞内外溶液中被溶解的化学成分的被溶解的化学成分的浓度达到平衡，度达到平衡，达到提取所需化学成分的目的。达到提取所需化学成分的目的。溶剂选择的依据-“相似者相溶相似者相溶”原原则一、溶剂提取法一、溶剂提取法常用溶剂：从石油从石油醚至水，以至水，以亲脂性下降脂性下降（亲水性增加）的水性增加）的顺序排列，在文献中溶序排列，在文献中溶剂还常常用英文字母常常用英文字母缩写形式表示。写形式表示。 环己烷石油醚、 苯、 乙醚、 氯仿、乙酸乙酯、 正丁醇、丙酮、 乙醇、甲醇、 水 ether, C6H6，Et2O，CHCl3，EtOAc， n-BuOH，Me2CO，EtOH，eOH，H2O 亲 水 性 增 加 方 向一、溶剂提取法一、溶剂提取法常用溶剂按照极性大小分为三类：1、水：极性最强优点：安全，经济易得缺点：水提取液（尤其是含糖及蛋白质者）易霉变，难以保存，且不易浓缩和滤过。一、溶剂提取法一、溶剂提取法2、亲水性有机溶剂：指甲醇、乙醇、丙酮等极性较大且能与水相互混溶的有机溶剂。优点：提取范围较广，效率较高，提取液易于保存，滤过和回收。缺点：易燃，价格较贵，有些溶剂毒性较大。一、溶剂提取法一、溶剂提取法3、亲脂性有机溶剂：与水不相混溶，具较强选择性，如石油醚，苯，乙醚，氯仿，乙酸乙酯等。优点：提取液易浓缩回收缺点：穿透力较强，需长时间反复提取，毒性大，易燃，价格较贵，设备要求高。一、溶剂提取法一、溶剂提取法比水重的有机溶比水重的有机溶剂：氯仿仿与水分与水分层的有机溶的有机溶剂：环己己烷 正丁醇正丁醇能与水分能与水分层的极性最大的有机溶的极性最大的有机溶剂：正丁醇正丁醇 与水可以以任意比例混溶的有机溶与水可以以任意比例混溶的有机溶剂：丙丙酮 甲醇甲醇极性最大的有机溶极性最大的有机溶剂：甲醇（分子小，穿透性甲醇（分子小，穿透性强，溶，溶剂性能好！）性能好！）极性最小的有机溶极性最小的有机溶剂：环己己烷介介电常数最小的有机溶常数最小的有机溶剂：石油石油醚常用来从水中萃取苷常用来从水中萃取苷类、水溶性生物碱、水溶性生物碱类成分的有机成分的有机溶溶剂：正丁醇正丁醇溶解范溶解范围最广的有机溶最广的有机溶剂：乙醇乙醇一、溶剂提取法一、溶剂提取法溶溶剂选择的原的原则1. 1.对有效成分溶解度大，有效成分溶解度大，对杂质溶解度小；溶解度小；2.2.惰性，不与目惰性，不与目标成分反成分反应，即使反，即使反应也属也属于可逆性的；于可逆性的；3.3.经济安全、后安全、后续操作容易操作容易进行，如：行，如：过滤、浓缩等。等。一、溶剂提取法一、溶剂提取法溶剂选择与被提取化学成分对照表溶剂选择与被提取化学成分对照表选择的溶剂选择的溶剂被提取成分被提取成分石油醚石油醚脱脂（脂类、色素、萜类等）脱脂（脂类、色素、萜类等）苯、乙醚、氯仿、乙酸乙苯、乙醚、氯仿、乙酸乙酯酯甾类、萜和挥发油、生物碱、甾类、萜和挥发油、生物碱、各种苷元各种苷元正丁醇正丁醇苷苷乙醇、甲醇乙醇、甲醇蛋白、多糖以外的各类成分蛋白、多糖以外的各类成分水水苷、生物碱盐、鞣质、氨基酸、苷、生物碱盐、鞣质、氨基酸、蛋白、糖蛋白、糖一、溶剂提取法一、溶剂提取法煎煮法：煎煮法： 适用范适用范围：有效成分能溶于水且不易被水、有效成分能溶于水且不易被水、热破坏。破坏。 操作方法：操作方法：将粉碎好的将粉碎好的药材装入合适容器内，加入适量水，材装入合适容器内，加入适量水，加加热煮沸一定煮沸一定时间，并注意不断，并注意不断补充失去的水分，然后充失去的水分，然后倾出提取液，再加入新出提取液，再加入新鲜的水煎煮两次，并可适当的水煎煮两次，并可适当缩短煎煮短煎煮的的时间。注意事注意事项： 1. 1.注意使用温火煎煮；如果水蒸注意使用温火煎煮；如果水蒸发过多，多，应适当适当补充水；充水； 2.2.容器用玻璃、搪瓷等器皿，不要用容器用玻璃、搪瓷等器皿，不要用铁器。器。 3.3.所提取物所提取物质为原生苷原生苷类时应先破坏先破坏酶的活性。的活性。一、溶剂提取法一、溶剂提取法浸浸渍法（浸泡法）法（浸泡法） 适用范适用范围：遇遇热易破坏及含多糖物易破坏及含多糖物质较多的多的药材。材。 操作方法：操作方法：将将药材装入合适的容器，加入适量溶材装入合适的容器，加入适量溶剂，通常以，通常以浸浸过药面面为度，浸泡一定度，浸泡一定时间，并，并经常常搅拌，拌，倾出浸泡液，出浸泡液，再加入新再加入新鲜溶溶剂浸泡两次，浸泡两次，时间可适当可适当缩短。短。 注意事注意事项：1. 1.一般是以水、醇或稀醇一般是以水、醇或稀醇为溶溶剂时采用此法，使用其他有机溶采用此法，使用其他有机溶剂时也可采用，但也可采用，但应注意安全；注意安全；2.2.药材提取前材提取前应预先粉碎，先粉碎，药材粉碎度材粉碎度应合适，太粗提取不完合适，太粗提取不完全，太全，太细不易不易过滤。3.3.溶溶剂应以浸以浸过药面面为宜。宜。4.4.浸泡浸泡过程中程中应经常常搅拌。拌。5.5.所需溶所需溶剂量、浸量、浸渍时间以及浸以及浸渍次数均无次数均无统一一规定，原定，原则上上以提取完全以提取完全为准准则。一般所需溶。一般所需溶剂量量约1010倍量左右，浸倍量左右，浸渍时间以第一次以第一次为最最长，一般，一般为1212小小时或更或更长以后可以适当以后可以适当缩短。短。 一、溶剂提取法一、溶剂提取法渗漉法渗漉法 适用范适用范围：遇遇热易破坏成分的提取易破坏成分的提取操作操作过程程1. 1.浸浸润：将：将药材粗粉用适量溶材粗粉用适量溶剂充分充分润胀。2.2.装筒：将装筒：将润胀好的好的药材装入渗漉筒，并材装入渗漉筒，并轻轻压平。平。3.3.浸浸渍：打开下口，从上方：打开下口，从上方轻轻加入溶加入溶剂，至高出，至高出药面几个厘米，收集下口滴出的溶液，关面几个厘米，收集下口滴出的溶液，关闭下口下口活塞，加盖，浸活塞，加盖，浸渍一定一定时间。4.4.渗漉：打开下口活塞，以一定速度开始渗漉，收渗漉：打开下口活塞，以一定速度开始渗漉，收集渗漉液，并始集渗漉液，并始终保持保持药材上部有一定量溶材上部有一定量溶剂。 一、溶剂提取法一、溶剂提取法渗漉法渗漉法注意事注意事项： 1. 1.一般是以水、醇或一般是以水、醇或烯醇醇为溶溶剂时采用此法，使用其他有机采用此法，使用其他有机溶溶剂时也可采用，但也可采用，但应注意安全。注意安全。2.2.药材粉碎度材粉碎度应合适，一般合适，一般为10102020目，太粗提取不完全，目，太粗提取不完全，太太细易堵塞。易堵塞。3.3.药材装入渗漉筒前要充分材装入渗漉筒前要充分润湿溶湿溶涨，但又不能有，但又不能有过量溶量溶剂。4.4.加入溶加入溶剂前，一定要先打开下口排除筒内气泡。前，一定要先打开下口排除筒内气泡。 5.5.加溶加溶剂时一定要一定要轻轻加入至高出加入至高出药面几个厘米。面几个厘米。 6.6.开始渗漉后，要始开始渗漉后，要始终保持溶保持溶剂高出高出药面。面。7.7.渗渗滤速度可控制在生速度可控制在生药量的百分之一左右（量的百分之一左右（ml/minml/min）或每）或每小小时流出量流出量为渗渗滤筒容筒容积的的1/241/241/481/48。 一、溶剂提取法一、溶剂提取法回流提取法回流提取法 适用范适用范围：脂溶性、脂溶性、对热稳定的成分定的成分 操作方法：操作方法：将粉碎好的将粉碎好的药材装入材装入圆底底烧瓶内，加瓶内，加入适量溶入适量溶剂，接上冷凝管，通入冷却水，水浴加，接上冷凝管，通入冷却水，水浴加热回流。回流。注意事注意事项：1. 1.一般以低沸点的有机溶一般以低沸点的有机溶剂提取提取时使用此法。使用此法。 2.2.注意使用水浴加注意使用水浴加热，并接通冷凝水；，并接通冷凝水；3.3.溶溶剂加入量加入量为烧瓶容瓶容积的的1/21/22/3；4.4.热不不稳定成分不宜用此法。定成分不宜用此法。一、溶剂提取法一、溶剂提取法回流提取法回流提取法一、溶剂提取法一、溶剂提取法连续回流提取法（索氏提取）：回流提取法（索氏提取）： 适用范适用范围：遇遇热稳定，脂溶性成分，定，脂溶性成分，药量少量少时 操作方法：操作方法：1. 1.将将药材粗粉包入材粗粉包入滤纸中，加入索氏提取器内，注意中，加入索氏提取器内，注意药面高度不能超面高度不能超过虹吸管；虹吸管； 2.2.将提取用溶将提取用溶剂倒入倒入烧瓶内，搭好装置，并开始加瓶内，搭好装置，并开始加热回流提取。回流提取。 原理：原理： 当当烧瓶内的溶瓶内的溶剂受受热汽化后汽化后进入冷凝器，入冷凝器，遇冷凝遇冷凝结为液体，回滴到提取器内，起到温浸液体，回滴到提取器内，起到温浸药材材的作用。当提取器内的溶的作用。当提取器内的溶剂超超过虹吸管上端虹吸管上端时，全，全部浸泡液部浸泡液则吸入吸入烧瓶中，如此反复多次至提取完全。瓶中，如此反复多次至提取完全。一、溶剂提取法一、溶剂提取法连续回流提取装置连续回流提取装置连续回流提取法连续回流提取法（索氏提取）：（索氏提取）：一、溶剂提取法一、溶剂提取法连续回流提取法（索氏提取）：回流提取法（索氏提取）： 注意事注意事项： 1. 1.一般是以醇或其他有机溶一般是以醇或其他有机溶剂为溶溶剂时使用此法。使用此法。2.2.提取器内的提取器内的药面高度不得超面高度不得超过虹吸管的高度。虹吸管的高度。3.3.包裹包裹药材用材用滤纸筒筒应注意不要有注意不要有缝隙，以防隙，以防药材材溢出堵塞虹吸管。溢出堵塞虹吸管。4.4.提取溶液内提取溶液内应加入沸石。加入沸石。一、溶剂提取法一、溶剂提取法超声法超声法 适用范适用范围：适用于任何提取溶适用于任何提取溶剂。 操作方法：操作方法：将粉碎好的将粉碎好的药材放于合适的容器内，加材放于合适的容器内，加入提取用溶入提取用溶剂，放入超声，放入超声仪内，超声提取一定内，超声提取一定时间。然后然后倾出提取液，再加入新出提取液，再加入新鲜溶溶剂超声提取两次，并超声提取两次，并可适当可适当缩短提取短提取时间。 注意事注意事项： 1. 1.当使用有机溶当使用有机溶剂时，应注意不要太密注意不要太密闭，以防塞子因，以防塞子因内内压太高而冲出。太高而冲出。 2.2.超声次数和超声次数和时间因因药材不同而异，至提取完全材不同而异，至提取完全为止。止。时间一般可以一般可以为每次每次10103030分分钟，次数，次数3 3次左右。次左右。 一、溶剂提取法一、溶剂提取法升华法升华法 原理：利用某些具有升利用某些具有升华性性质的化合物遇的化合物遇热汽汽化上升，遇冷后又凝固的性化上升，遇冷后又凝固的性质从从药材中提取材中提取该类成分。成分。 适用范围：具有升具有升华性性质，而且化学，而且化学结构遇构遇热稳定、不易被破坏的化合物定、不易被破坏的化合物 二、其他提取方法二、其他提取方法优点：对于具有升于具有升华性性质，而且化学，而且化学结构遇构遇热稳定、不易被破坏的化合物，定、不易被破坏的化合物，该方法具方法具有特异性高，所得化学成分有特异性高，所得化学成分较纯的的优点。点。例如：茶叶中提取咖啡因。例如：茶叶中提取咖啡因。 缺点：应用范用范围窄，窄，对于不具有升于不具有升华性性质，或化学或化学结构遇构遇热不不稳定、易被破坏的化合定、易被破坏的化合物，物，该方法不适用。方法不适用。二、其他提取方法二、其他提取方法常压升华装置常压升华装置 减压升华装置减压升华装置 操作方法：常压升华，减压升华操作方法：常压升华，减压升华二、其他提取方法二、其他提取方法水蒸汽蒸馏法：原理：利用某些利用某些挥发性成分能随水蒸气蒸性成分能随水蒸气蒸发的性的性质，从，从药材中提取材中提取该类化学成分。化学成分。 适用范围：能随水蒸气蒸能随水蒸气蒸发而且化学而且化学结构构遇遇热稳定、不易被破坏的的定、不易被破坏的的挥发油、小分油、小分子生物碱（麻黄碱、烟碱、子生物碱（麻黄碱、烟碱、槟榔碱等）或榔碱等）或酚酚类（牡丹酚等）化合物。（牡丹酚等）化合物。 二、其他提取方法二、其他提取方法水蒸汽蒸馏法：优点：对于具有于具有挥发性，而且化学性，而且化学结构遇构遇热稳定、不易被破坏的化合物，定、不易被破坏的化合物，该方法具方法具有特异性高，所得化学成分有特异性高，所得化学成分较纯的的优点。点。 缺点：适用范适用范围窄，窄，对于不具有于不具有挥发性，性，或化学或化学结构遇构遇热不不稳定、易被破坏的化合定、易被破坏的化合物，物，该方法不适用。方法不适用。二、其他提取方法二、其他提取方法水蒸汽蒸馏法：二、其他提取方法二、其他提取方法小结小结提取提取方法方法溶剂溶剂提取法提取法水蒸气水蒸气蒸馏法蒸馏法升华法升华法溶剂溶剂操作操作方法方法水：极性最强水：极性最强亲水性有机溶剂：亲水性有机溶剂：甲醇、乙醇、丙酮甲醇、乙醇、丙酮亲脂性有机溶剂：石油醚，亲脂性有机溶剂：石油醚，苯，乙醚，氯仿，乙酸乙酯苯，乙醚，氯仿，乙酸乙酯煎煮法煎煮法浸渍法浸渍法渗漉法渗漉法回流提取法回流提取法连续回流提取法连续回流提取法超声提取法超声提取法Thank youThank you