牡丹江医学院牡丹江医学院机能学教研室机能学教研室机能学机能学释朱暑恐镑咳混绳赘恒鹏川鲤掘肘闭辉钱揩丹戒巾扩哀壁背毖磋掘快卵瓤牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室目的目的 为适应现代素质教育的需要，培养学生科为适应现代素质教育的需要，培养学生科学思维，获取知识、独立开展实际工作、运用学思维，获取知识、独立开展实际工作、运用新技术的能、和创新意识与开拓精神和提高学新技术的能、和创新意识与开拓精神和提高学生学习的主动性与创造性，最终达到提高综合生学习的主动性与创造性，最终达到提高综合素质的目的，有机融合生理、药理和病理生理素质的目的，有机融合生理、药理和病理生理学的实验而新设立的一门新型的独立的实验教学的实验而新设立的一门新型的独立的实验教学课程机能学实验。本门课是我校医学生学课程机能学实验。本门课是我校医学生必修的基础课程之一必修的基础课程之一.语垫肝润吹卷萍司鸦蚜曙拈溜窝塘祈场灾只矣桩愁到阀法植撕师济寄泰堕牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室生理、生理、药理药理、病生病生教学实验教学实验过程过程机能实验学机能实验学实验生理科学实验生理科学或或收陶揩菊兰叫吾森赦捷灸殿津关治仰谆坟擒帅倘闻寨惠捅廷窝篮栗秆诣蛆牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室根据新开课程的特点与要求编写根据新开课程的特点与要求编写率奶磨啤肮扎如硬瀑译晚锻吁夺啦符扬晕娠滇涉跋人枢驻蘸屿忿护瀑域穷牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室基础医学实验室基础医学实验室机机机机能能能能学学学学实实实实验验验验室室室室机能学实验机能学实验机能学实验机能学实验教学课程的实施与准备教学课程的实施与准备教学课程的实施与准备教学课程的实施与准备生生生生化化化化与与与与分分分分子子子子生生生生物物物物学学学学实实实实验验验验室室室室病病病病原原原原生生生生物物物物学学学学实实实实验验验验室室室室计计计计算算算算机机机机实实实实验验验验中中中中心心心心形形形形态态态态学学学学实实实实验验验验室室室室管理管理产搓亚棋卤丁修沂瓜四锅玻晒焚灰需挡赁紧沿枚箱杀臆东九洞黔萤抵跟六牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室网络化多媒体机能学实验室网络化多媒体机能学实验室1234设备设备酒役沟戳瑟印盗刻勒涟度蛆墙畏魏疽像痉级历埃艇甲籽肃掇呕嚣绪傍买悄牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室MS-4000生物机能实验系统生物机能实验系统设备设备是配置在微机上的四通道生物信号采集、放大、是配置在微机上的四通道生物信号采集、放大、显示、示、记录与与处理系理系统, 可同可同时输入入4个生物机能信号，适用于生理、个生物机能信号，适用于生理、药理、毒理和病理等理、毒理和病理等实验。MS-4000MS-4000MS-4000MS-4000计算机生物机能实验系统计算机生物机能实验系统兔够桩挡锻董艘娶嫉浓淬滋睬疗肝沫撩晋戒朴劈摩崔夯肌啥夹海炬钢顽总牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室机能实验室特色机能实验室特色 机能实验学课是一门实验教学课程，专门针对机能实验学课是一门实验教学课程，专门针对学生进行系统、规范的实验技能训练，为学生提学生进行系统、规范的实验技能训练，为学生提供理论联系实际、大胆实际操作和积极思考的机供理论联系实际、大胆实际操作和积极思考的机会。本课程通过对各种生理现象的观察、动物病会。本课程通过对各种生理现象的观察、动物病理模型的制备和药物救治等方法的系统学习，将理模型的制备和药物救治等方法的系统学习，将三门学科知识融会贯通。更加贴近临床实践。三门学科知识融会贯通。更加贴近临床实践。郑丝愤守盛飘幅救懂吵液续醇勤凝嘘帮唱柱齿饯凭肢讶娟雷赎秀歌铬拨赤牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 机能学实验课结合相关学科的理论知识形成机能学实验课结合相关学科的理论知识形成了自身的特色，实验教学是本课程的主要教学形了自身的特色，实验教学是本课程的主要教学形式，并独立开课、单独考核，实验教学内容有基式，并独立开课、单独考核，实验教学内容有基本知识和基本技能训练项目、综合性实验项目和本知识和基本技能训练项目、综合性实验项目和探索性实验设计项目等三类实验项目。通过学习探索性实验设计项目等三类实验项目。通过学习机能学实验课，掌握机能学科实验的基本规律和机能学实验课，掌握机能学科实验的基本规律和基本技能、养成科学的思维方法、提高实际工作基本技能、养成科学的思维方法、提高实际工作的能力，将为进行临床医学实践和医学科学研究的能力，将为进行临床医学实践和医学科学研究打下坚实的基础。打下坚实的基础。烽得液碌彩翼滔座掳瑰贫吹澳映筒羌拄幢滞譬汲诺浴奏系刘辛袋树酵亢抿牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室动物机能学动物机能学 李李 荣荣 教教 授授窿剥键姓憾黔霄琳垄沁绞琼趋夏破裂压幢拯奔坪井播蒂誊裸绍湖砍榔飞膀牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室第一章、绪论第一章、绪论第二章、常用实验动物的基本知识第二章、常用实验动物的基本知识第五章、医学实验设计第五章、医学实验设计第六章、安全实验和毒性实验第六章、安全实验和毒性实验抑秧快剥券烂条虎堪姥梧泌袭纽穿衰踢韭恫近肥晦真鸿壤扯腰床扯备蝴已牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室一、动物实验学概述一、动物实验学概述动物实验学动物实验学 Animal experiment science Animal experiment science 是指在实验室是指在实验室内，通过动物实验进行科学实验研究，还包括各种实内，通过动物实验进行科学实验研究，还包括各种实验技术，实验方法及技术标准的科学。是一门新兴的验技术，实验方法及技术标准的科学。是一门新兴的基础医学实验课程，综合了生理学、病理生理学、药基础医学实验课程，综合了生理学、病理生理学、药理学三门学科的理论知识和实验技能，使它们成为一理学三门学科的理论知识和实验技能，使它们成为一个有机的整体的一门实验课程。个有机的整体的一门实验课程。研究对象研究对象动物动物目的：通过实验教学锻炼和加强学生的基本操作技能，培养目的：通过实验教学锻炼和加强学生的基本操作技能，培养和树立血色怀念感的严谨科学态度，启发和诱导学生和树立血色怀念感的严谨科学态度，启发和诱导学生的科学思维方式，最大程度地调动学生的主观能动性。的科学思维方式，最大程度地调动学生的主观能动性。楔灰瞎上旨揣乘斡铣树藻哟矮襄妻喘合近乌兴作土懦赠馏三唯炸俯尼闽站牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室任务：任务：（1 1）通过各种动物实验观察动物体中的各种生命指征的产）通过各种动物实验观察动物体中的各种生命指征的产生并探讨这些生命指征产的生并滔滔这些生命指征产生生并探讨这些生命指征产的生并滔滔这些生命指征产生的原理，以及动物体在疾病状态写的病理生理过程和药的原理，以及动物体在疾病状态写的病理生理过程和药物处理前后这些生命指标的变化。物处理前后这些生命指标的变化。 （2 2）使学生通过这种综合性实验既能看到实验中的生理现）使学生通过这种综合性实验既能看到实验中的生理现象及其原理，又能看到疾病状态下疾病发生、发展、转象及其原理，又能看到疾病状态下疾病发生、发展、转归的规律以及药物治疗疾病状态的作用机能。归的规律以及药物治疗疾病状态的作用机能。（3 3）机能学实验是整个医学教学中的重要组成部分，是）机能学实验是整个医学教学中的重要组成部分，是“三基三基”培养中必不可少的部分。培养中必不可少的部分。符凶搓喜砍怔仔熟凤会杯颈坪芜超专比吨苛堰橙侵二赤冷妮雀亥熔憋艾澈牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室意义：生理学、药理学和病理生理学都是理论性和实践性较意义：生理学、药理学和病理生理学都是理论性和实践性较强的学科，它们的实验课以动物实验课为主。为了更好强的学科，它们的实验课以动物实验课为主。为了更好地适应教育形势的发展，贯彻地适应教育形势的发展，贯彻“教育要面向现代化、面教育要面向现代化、面向未来向未来”的指示，更好地按照国家教委的指示，更好地按照国家教委“二十一世纪教二十一世纪教学内容和课程体系改革学内容和课程体系改革”的精神，以突出主干课、减少的精神，以突出主干课、减少必修课、丰富选修课、加强实验课为原则，把生理、药必修课、丰富选修课、加强实验课为原则，把生理、药理、病生学科的实验课程精简、综合和提高，统筹安排理、病生学科的实验课程精简、综合和提高，统筹安排而形成机能学，对加强学生实验操作、实验设计和综合而形成机能学，对加强学生实验操作、实验设计和综合分析等方面的能力培养、完善学科间的交叉与渗透，有分析等方面的能力培养、完善学科间的交叉与渗透，有效地发挥人力和物力的作用。效地发挥人力和物力的作用。革宰惊里棕芹烹罢珐姑壤码惮珠肌庶娇骄诚季歼绳瘦捻峭慎义婶粳练弟宁牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室动物实验学的特点：动物实验学的特点：内容的丰富性内容的丰富性通过动物实验探讨机体正常、病理或通过动物实验探讨机体正常、病理或药物干预的情况下，有关的器官的功能变化及其规药物干预的情况下，有关的器官的功能变化及其规律。律。综合性能力提高综合性能力提高同学们通过学生有关理论、操作仪同学们通过学生有关理论、操作仪设备，进行实验（包括经典性、综合性和探索性实设备，进行实验（包括经典性、综合性和探索性实验）、设计实验病例分析，力求使自身综合能力有验）、设计实验病例分析，力求使自身综合能力有明显提高。这些能力包括摄取知识的能力，动手操明显提高。这些能力包括摄取知识的能力，动手操作能力，观察、比较、分析和综合能力，逻辑思维作能力，观察、比较、分析和综合能力，逻辑思维和解决问题的能力，口头和书面表达能力，科学创和解决问题的能力，口头和书面表达能力，科学创新能力新能力 舟即零箩哮产送笛犬否炬促颂整波多递堡骄眶做爹梳肤昨绳逻傻拟凝涡肉牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室动物实验学分类：动物实验学分类：根据教学与科研的需要分为：教学实验和科研实验。根据教学与科研的需要分为：教学实验和科研实验。教学实验教学实验明确教学目的、观察实验反应和结果，分明确教学目的、观察实验反应和结果，分析讨论。析讨论。科研实验科研实验立题前准备、实验设计、实验方法确定、立题前准备、实验设计、实验方法确定、实验动物选择、实验技术、技巧的要求和规定、记实验动物选择、实验技术、技巧的要求和规定、记录、总结，对各项指标、数据进行统计学处理，撰录、总结，对各项指标、数据进行统计学处理，撰写论文。写论文。闻啸联都渭移券政害桩帘竿绊能掀迪绞泛赢卖屠赴蟹嚷斡蹄磐鹤独避怯哪牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室依据时间的长短，可分为：急性实验和慢性实验。依据时间的长短，可分为：急性实验和慢性实验。急性实验急性实验一般是施以致病因素便于观察实验或者在麻醉一般是施以致病因素便于观察实验或者在麻醉的情况下施以手术，将器官暴露、取出，在较短时间内，的情况下施以手术，将器官暴露、取出，在较短时间内，观察细小环节的变化。观察细小环节的变化。 影响因素：由于受麻醉、手术创伤的影响，实验结果影响因素：由于受麻醉、手术创伤的影响，实验结果常不完全真实，需要慢性实验和临床研究校正。常不完全真实，需要慢性实验和临床研究校正。慢性实验慢性实验是在较长时间内施以致病因素，使动物逐渐致是在较长时间内施以致病因素，使动物逐渐致病，或者先在无菌条件下给动物施以手术并待手术创口病，或者先在无菌条件下给动物施以手术并待手术创口愈合后，再进行实验观察。愈合后，再进行实验观察。 有利条件有利条件动物的状况较为接近自然生活条件，能动物的状况较为接近自然生活条件，能较长时间内连续观察，获得较为系统的实验资料，有利较长时间内连续观察，获得较为系统的实验资料，有利于揭露疾病过程中整个生命活动变化的规律或者药物的于揭露疾病过程中整个生命活动变化的规律或者药物的作用。作用。睹舶粥船泉廓枝疏钒腋松烛汾秤搭即佯兹匪咯镭成帛痊屎寥矢随莱琢侵瓣牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室依据实验对象可分为：依据实验对象可分为： 在体实验在体实验呼吸、休克。呼吸、休克。 离体实验离体实验蛙心、消化系统的离体肠管。蛙心、消化系统的离体肠管。 细胞培养细胞培养 1 1）在体实验）在体实验是指整体动物作为实验对象的实验，如在是指整体动物作为实验对象的实验，如在复制疾病的动物模型的基础上观测处理因素的效应。复制疾病的动物模型的基础上观测处理因素的效应。 2 2）离体实验）离体实验是指通过手术把所需要的器官从动物体内是指通过手术把所需要的器官从动物体内取出，再观测处理因素的效应这样一类的实验。优点：离取出，再观测处理因素的效应这样一类的实验。优点：离体实验能排除动物神经体液等因素对实验效应的影响，特体实验能排除动物神经体液等因素对实验效应的影响，特别适合观察药物作用的实验。别适合观察药物作用的实验。 3 3）细胞培养）细胞培养是在培养组织细胞株的基础上观测处理因是在培养组织细胞株的基础上观测处理因素的效应这样一类的实验，它要求的实验条件较多，多用素的效应这样一类的实验，它要求的实验条件较多，多用于科学研究。于科学研究。铣韩驳擎侮雪接希作绎矿抛豆饼茫酿蔷审友菜蒜审蕾莉历抠瘫丽舍针顿虹牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室机能学课程的主要内容及程序分三步：分三步：（一）基本技能训练（一）基本技能训练 一室一室蛙脊髓破坏、蛙心插管蛙脊髓破坏、蛙心插管 4h 蛙坐骨神经腓肠肌标本制备蛙坐骨神经腓肠肌标本制备 二室二室手术器械的认识及操作方法手术器械的认识及操作方法 4h 静脉麻醉、气管切开、神经分离、颈静脉静脉麻醉、气管切开、神经分离、颈静脉 （动脉）插管、股动脉插管（动脉）插管、股动脉插管 三室三室微机基本操作微机基本操作 4h （MS4000多媒体生物信号记录分多媒体生物信号记录分4h析系统）析系统） 四室四室胸腹部手术胸腹部手术 4h 心肺摘出、胆总管插管、离体肠管心肺摘出、胆总管插管、离体肠管 肠管结扎、股动脉插管肠管结扎、股动脉插管哩价诛骚灶乡琳诡暇蒙户滥涣愧冬锭塌知书晤挛排录桶雾纵挺好束桔鳞躁牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室（二）难度较小的综合性实验（二）难度较小的综合性实验 一室一室骨骼肌的单收缩、复合收缩骨骼肌的单收缩、复合收缩 和强直收缩及神经干动作电位和强直收缩及神经干动作电位 4h 二室二室水杨酸钠血浆半衰期水杨酸钠血浆半衰期T1/2测定测定 4h 三室三室急性右心衰竭急性右心衰竭 4h 四室四室消化系统功能调节消化系统功能调节 及药物对肠管的影响及药物对肠管的影响 4h （三）（三）难度较大的综合性实验难度较大的综合性实验 一室一室蛙心灌流及药物对离体蛙心的作用蛙心灌流及药物对离体蛙心的作用4h 二室二室尼可刹米尼可刹米LD50测定测定 4h 三室三室呼吸运动调节呼吸运动调节 与实验性肺水肿的抢救与实验性肺水肿的抢救 4h 四室四室血压的调节与失血性休克的抢救血压的调节与失血性休克的抢救4h 输参钱丁培朱模轧确沽滴杰素伶镰筐情顽构栖数单刺役绷安空杀救小巳迫牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室动物实验学课程的基本要求：动物实验学课程的基本要求： 为了更好地体现教师的主导作用和学生的主体作用，为了更好地体现教师的主导作用和学生的主体作用，老师和同学们都要认真严肃的态度带好和学好机能学老师和同学们都要认真严肃的态度带好和学好机能学这门课程，这里着重谈对同学们的要求。这门课程，这里着重谈对同学们的要求。 （一）、实验前（一）、实验前1 1、认真预习实验指导的有关内容，了解实验目的操作方、认真预习实验指导的有关内容，了解实验目的操作方法及实验操作重点领会实验设计原理。法及实验操作重点领会实验设计原理。2 2、结合该次实验复习或者学习有关的理论。、结合该次实验复习或者学习有关的理论。3 3、做好小组成员的分工，使每位同学都有机会训练基本、做好小组成员的分工，使每位同学都有机会训练基本操作和一起使用。操作和一起使用。4 4、根据观察指标设计记录实验数据的表格。、根据观察指标设计记录实验数据的表格。5 5、根据有关理论，预测实验结果。、根据有关理论，预测实验结果。6 6、着手实验前要检查实验用品（器材和药品是否齐全）、着手实验前要检查实验用品（器材和药品是否齐全）湖蘑增堤郧滇惯墩冶且慎登凿钩乒哗刘壬撑窒婿思变她排正板戳血巢竖愚牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室（二）、实验时（二）、实验时1 1、遵守课堂纪律和实验室守则、遵守课堂纪律和实验室守则2 2、严格按照实习指导的步骤进行操作爱护实验动物器械和、严格按照实习指导的步骤进行操作爱护实验动物器械和要品尽量减少动物损伤和药品器械的损耗，对贵重仪器要要品尽量减少动物损伤和药品器械的损耗，对贵重仪器要倍加爱护，严格遵守操作规程。倍加爱护，严格遵守操作规程。3 3、同学之间要密切配合，认真观察实验中出现的现象及时、同学之间要密切配合，认真观察实验中出现的现象及时客观地记录实验数据必要时加上文字注释，不容许擅自修客观地记录实验数据必要时加上文字注释，不容许擅自修改实验数据和凭空臆造，倘若出现与预期结果不同时，要改实验数据和凭空臆造，倘若出现与预期结果不同时，要分析其原因，观察记录过程也就是培养严谨科学态度的过分析其原因，观察记录过程也就是培养严谨科学态度的过程。程。4 4、实验过程要根据实验思考题进行思考问题，培养科学思、实验过程要根据实验思考题进行思考问题，培养科学思维和解决问题的能力。维和解决问题的能力。5 5、保持实验室的安静，不做与实验无关的活动，不谈与实、保持实验室的安静，不做与实验无关的活动，不谈与实验无关的话题。验无关的话题。6 6、注意安全严防触电火灾中毒及被动物咬伤等事故发生，、注意安全严防触电火灾中毒及被动物咬伤等事故发生，万一出现事故，要立即报告迅速处理。万一出现事故，要立即报告迅速处理。7 7、讨论时要主动发言，语言简练言之有理，言之有据。、讨论时要主动发言，语言简练言之有理，言之有据。单估辨绿辅体桂境备时浇层虾驱魂疡埃二昧针酝销澳础王等讳筋钟抨段渡牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室（三）、实验后三）、实验后1 1、清洗擦干实验器械并放回原位，如有损坏和遗失要进行、清洗擦干实验器械并放回原位，如有损坏和遗失要进行登记并寻找或赔偿。登记并寻找或赔偿。2 2、存活的动物、动物尸体、标本及其他废弃物品等要放到、存活的动物、动物尸体、标本及其他废弃物品等要放到指定的地方，不得随意放置。指定的地方，不得随意放置。3 3、值班同学要做好实验室清洁卫生工作，关好门窗水、电、值班同学要做好实验室清洁卫生工作，关好门窗水、电方能离开实验室。方能离开实验室。4 4、整理实验数据，认真地独立地撰写实验报告，按时交给、整理实验数据，认真地独立地撰写实验报告，按时交给老师。老师。跪檀四提俭厚默饲蹲号汕萍汤谤挟墒剂水述悸匪城峦拣循勺龟橡蝗牧娟颖牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室四、实验结果的记录和处理四、实验结果的记录和处理 1 1、实验结果的记录。、实验结果的记录。 实验记录是实验结果的客观反映，也是分析实验结果实验记录是实验结果的客观反映，也是分析实验结果的依据，实验时要仔细观察，即使记录。要做到客观、完的依据，实验时要仔细观察，即使记录。要做到客观、完整、具体、清楚、如刺激的种类、时间、强度、药品的名整、具体、清楚、如刺激的种类、时间、强度、药品的名称。剂量和给药时间。动物或标本对刺激发生反应的表现、称。剂量和给药时间。动物或标本对刺激发生反应的表现、特征、强度与持续时间等。特征、强度与持续时间等。 需指示的是在实验中每次刺激需指示的是在实验中每次刺激或给药前对照。以便与刺激或给药后的变化相比较。或给药前对照。以便与刺激或给药后的变化相比较。 实验时要有耐性，要等前一项实验基本恢复正常后才实验时要有耐性，要等前一项实验基本恢复正常后才可进行下一项实验要控制记录仪器的走纸速度，不使记录可进行下一项实验要控制记录仪器的走纸速度，不使记录的曲线太密而不易辨别和分析，也不要太疏而浪费纸张。的曲线太密而不易辨别和分析，也不要太疏而浪费纸张。同时，还要保持走纸速度前后一致。如实验中必需调整走同时，还要保持走纸速度前后一致。如实验中必需调整走速时一定要注明速度，以便在分析结果时换算成统一标准，速时一定要注明速度，以便在分析结果时换算成统一标准，以防作出错误判断以防作出错误判断。鬼票琳头呼覆及讯卑催磨秆岂逊傈捌趋遁原阑颗祭瀑怒呛疾说什龋戎绦鸭牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 实验中为研究某生理现象变化的规律及特征，需用实验中为研究某生理现象变化的规律及特征，需用科学方法将新观察的记录到的结果转变成可测定性资料，科学方法将新观察的记录到的结果转变成可测定性资料，因此需对实验结果进行整理和分析。首先，要对实验结因此需对实验结果进行整理和分析。首先，要对实验结果的本质进行定性。例如。对引导电位要肯定其是场电果的本质进行定性。例如。对引导电位要肯定其是场电位还是动作电位，是细胞内还是细胞外，其方向是正还位还是动作电位，是细胞内还是细胞外，其方向是正还是负？是否为一种伪变等。凡属定量资料。如：高低、是负？是否为一种伪变等。凡属定量资料。如：高低、长短、快慢、大小等。均应以法定国际计量单位和数值长短、快慢、大小等。均应以法定国际计量单位和数值表达，并根据需要进行统计学处理。有些结果可绘制成表达，并根据需要进行统计学处理。有些结果可绘制成统计表或图形表示。再者如实验结果是一个随时间而变统计表或图形表示。再者如实验结果是一个随时间而变化的过程，则应考虑其速度周期和频率。另外，还要考化的过程，则应考虑其速度周期和频率。另外，还要考虑这种结果在机体何部位产生的它的空间范围。形态大虑这种结果在机体何部位产生的它的空间范围。形态大小和分布等情况以确定现象和结构的关系。小和分布等情况以确定现象和结构的关系。屿扰妆减皖画腕整间僧暑堂糊濒鸟启疲灵篆登智榴找落侈过意骚掣储等眶牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 实验报告是对实验的全面总结。学生通过书写实验报实验报告是对实验的全面总结。学生通过书写实验报告，将掌握书写科学论文的基本格式及绘图制表的方法。告，将掌握书写科学论文的基本格式及绘图制表的方法。为以后撰写科学论文等打下良好的基础；通过对实验资为以后撰写科学论文等打下良好的基础；通过对实验资料全面的总结。将进一步提高分析综合概括问题的能力；料全面的总结。将进一步提高分析综合概括问题的能力；通过复习有关理论或查阅资料，对实验结果作出正确分通过复习有关理论或查阅资料，对实验结果作出正确分析和解释，将有利于培养理论联系实际和应用知识的能析和解释，将有利于培养理论联系实际和应用知识的能力。因此，每次实验结束后，完成实验报告是非常重要力。因此，每次实验结束后，完成实验报告是非常重要的。的。（一）、实验报告写作要求（一）、实验报告写作要求1 1、凡是独立操作的实验，均要求每位学生按照每一实验的、凡是独立操作的实验，均要求每位学生按照每一实验的具体要求认真独立的完成实验报告的书写。具体要求认真独立的完成实验报告的书写。2 2、实眼报告应按规定用统一的标准实验报告纸。写报告应、实眼报告应按规定用统一的标准实验报告纸。写报告应文字简练，条理清楚，观点明确，字迹整洁，并正确使文字简练，条理清楚，观点明确，字迹整洁，并正确使用标点符号。用标点符号。古氢帘植欠贩框伶趴旭蓉瘪磕绥艾河痹仍甄货帅口呐说心妙纫晦藉讥玫锻牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室（二）书写实验报告的具体内容二）书写实验报告的具体内容 1 1、姓名，班级，组别（此内容写在实验报告的封面）、姓名，班级，组别（此内容写在实验报告的封面） 2 2、实验题目（名称）、实验题目（名称） 3 3、实验目的与要求（目的）、实验目的与要求（目的） 4 4、实验方法和步骤、实验方法和步骤包括实验用的动物，主要器材，药包括实验用的动物，主要器材，药品等。品等。 5 5、实验结果、实验结果这是实验报告中最主要的部分，应将实验这是实验报告中最主要的部分，应将实验过程观察到的现象及时、忠实、正确，详细的记录实验结过程观察到的现象及时、忠实、正确，详细的记录实验结果后，根据记录填写实验报告。不可单凭记忆，否则易发果后，根据记录填写实验报告。不可单凭记忆，否则易发生错误和遗漏。生错误和遗漏。 目前，医学论文多采用三线表、直方图、曲线或文字等目前，医学论文多采用三线表、直方图、曲线或文字等方式表达实验结果。同学们要把实验过程获得的数据、曲方式表达实验结果。同学们要把实验过程获得的数据、曲线、文字等原始资料加以整理，填入实验报告的适当位置。线、文字等原始资料加以整理，填入实验报告的适当位置。如用表格方式，就采用三线表。如用表格方式，就采用三线表。洲割后嘘滨队飞健颂哲伤孕胡傅路牢曾神否助倾香剧瞒拷兢灰岩豌平守届牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室6 6、讨论和结论、讨论和结论这是实验报告质量高低的重要部分。这是实验报告质量高低的重要部分。 讨论要从实验结果出发，对实验结果进行科学的分析、讨论要从实验结果出发，对实验结果进行科学的分析、推理。分析要有理有据，推理要符合逻辑。可能的话在分推理。分析要有理有据，推理要符合逻辑。可能的话在分析推理的基础上提出恰如其分的结论。讨论时不应从书本析推理的基础上提出恰如其分的结论。讨论时不应从书本上抄一段理论，对实验结果做一般的解释，更不应抄袭别上抄一段理论，对实验结果做一般的解释，更不应抄袭别人的实验报告。如有参考资料应注明出处。人的实验报告。如有参考资料应注明出处。 出现与理论推倒不符的实验结果时，应寻找原因（是出现与理论推倒不符的实验结果时，应寻找原因（是操作失误？实验误差？个体差异？还是预测的实验结果不操作失误？实验误差？个体差异？还是预测的实验结果不科学？）。不容许擅自改动数据，要在实验和书写实验报科学？）。不容许擅自改动数据，要在实验和书写实验报告过程中培养严谨细致的工作作风和实是求是的科学态度。告过程中培养严谨细致的工作作风和实是求是的科学态度。冕晒衔酗凝缠蚀笛眉询用纺超低晦箕魁高创吊醚沤卖乙匹涯伪袁霉哆韭硼牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室所选的实验动物中一种为啮齿类动物，另一种为非所选的实验动物中一种为啮齿类动物，另一种为非啮齿类动物。啮齿类动物。常用的实验序列是小鼠、大鼠、狗、猴或小型猪。常用的实验序列是小鼠、大鼠、狗、猴或小型猪。沿禾杖祥狼告丽腰能锑肘略杀昏框递潦处予坞桌妄泳梦最路着犬靛需耽坑牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室一一 常用实验动物的生物特性常用实验动物的生物特性（一）蟾蜍（一）蟾蜍 Toad Toad属于两栖纲，无尾目。属于两栖纲，无尾目。1 1、生物学特性、生物学特性蟾蜍蟾蜍(Buf buio gargerizans)(Buf buio gargerizans)属于两栖属于两栖类，无尾目。品种很多。属于两栖类变温动物，皮肤类，无尾目。品种很多。属于两栖类变温动物，皮肤光滑湿润，有腺体无鳞片。幼年生活于水中，用鳃呼光滑湿润，有腺体无鳞片。幼年生活于水中，用鳃呼吸，食物以水中植物为主。蟾蜍经过变态后转入陆栖吸，食物以水中植物为主。蟾蜍经过变态后转入陆栖或半陆栖生活，有不发达的肺，用肺和皮肤呼吸。以或半陆栖生活，有不发达的肺，用肺和皮肤呼吸。以昆虫等幼小动物为食。有五趾形跗肢，适合爬行和跳昆虫等幼小动物为食。有五趾形跗肢，适合爬行和跳跃。心脏有两个心房，一个心室，心房、心室区分不跃。心脏有两个心房，一个心室，心房、心室区分不明显，动静脉血液混合。有冬眠习性。蟾蜍身体背腹明显，动静脉血液混合。有冬眠习性。蟾蜍身体背腹扁平，头呈三角形，左右对称，眼大，突出于头部两扁平，头呈三角形，左右对称，眼大，突出于头部两侧，有上、下眼睑和瞬膜，有鼻、耳等感受器官。幼侧，有上、下眼睑和瞬膜，有鼻、耳等感受器官。幼年为蝌蚪，有尾，变态后尾消失，前肢四趾，后肢五年为蝌蚪，有尾，变态后尾消失，前肢四趾，后肢五趾。蟾蜍无鸣囊，背部皮肤有许多疣状突起毒腺，可趾。蟾蜍无鸣囊，背部皮肤有许多疣状突起毒腺，可分泌蟾蜍毒，以耳后的椭圆形耳腺分泌最多。分泌蟾蜍毒，以耳后的椭圆形耳腺分泌最多。 和捕和捕捉。捉。褐见虚宠喻粟胀煽穗弦栗剩邀园政庶执炭把顺镶鲸獭愤承擦蛤茨曰碉银畜牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室(2)实验应用实验应用 蟾蜍广泛用于生理学科研和教学中。用蟾蜍腓肠肌和蟾蜍广泛用于生理学科研和教学中。用蟾蜍腓肠肌和坐骨神经可观察外周神经及其肌肉的功能，刺激蟾蜍皮坐骨神经可观察外周神经及其肌肉的功能，刺激蟾蜍皮肤观察反射弧，用蟾蜍作脊休克、脊髓反射、微循环等肤观察反射弧，用蟾蜍作脊休克、脊髓反射、微循环等实验。利用蟾蜍离体心脏，研究心脏的生理功能。蟾蜍实验。利用蟾蜍离体心脏，研究心脏的生理功能。蟾蜍还可用于生殖生理、药理学、胚胎发育、免疫学等的研还可用于生殖生理、药理学、胚胎发育、免疫学等的研究。究。幂窄涕翅墨筏奈寇植活拧下流己嫁扛嘎蔽昼甸痈戒盘着择诈笺酵邑穗骂筐牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室（二）兔二）兔RabbitRabbit属哺乳纲。啮齿目。兔科。属哺乳纲。啮齿目。兔科。1 1、生物学特性、生物学特性草食动物，性情温顺，胆小易惊，耳大，草食动物，性情温顺，胆小易惊，耳大，血管清晰。颈部减压神经，交感神经和迷走神经分开。血管清晰。颈部减压神经，交感神经和迷走神经分开。喉部狭窄。喉部狭窄。家兔的正常体温在家兔的正常体温在38385395395C5C。静态。静态时以腹式呼吸为主，每分钟时以腹式呼吸为主，每分钟35563556次。胃常处于排空次。胃常处于排空状态，小肠的吸收功能与人一样。钙磷代谢主要是通状态，小肠的吸收功能与人一样。钙磷代谢主要是通过肾脏。过肾脏。2 2、实验应用、实验应用家兔广泛应用于医学研究中，特别是用于家兔广泛应用于医学研究中，特别是用于科研和教学中。在机能教学实验中，由于兔耳缘静脉科研和教学中。在机能教学实验中，由于兔耳缘静脉浅表，易暴露，是静脉给药的最佳部位。兔的减压神浅表，易暴露，是静脉给药的最佳部位。兔的减压神经在颈部与迷走神经、交感神经分开走行而单独成为经在颈部与迷走神经、交感神经分开走行而单独成为一束，常用于研究减压神经与心血管活动的关系。家一束，常用于研究减压神经与心血管活动的关系。家兔用于心血管反射调节、呼吸运动调节、泌尿功能调兔用于心血管反射调节、呼吸运动调节、泌尿功能调节以及神经放电活动的实验等。此外，家兔还用于免节以及神经放电活动的实验等。此外，家兔还用于免疫学、药理学、毒理学、生殖生理学、眼科以及临床疫学、药理学、毒理学、生殖生理学、眼科以及临床疾病的研究。疾病的研究。脓悸径碌仁挑格葛橱袁化竣沟休沤堤嵌耽刚狗柿芭泽钢耕测醛衬私串李司牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 家兔复制疾病模型与其它实验动物比较有以下特点：家兔复制疾病模型与其它实验动物比较有以下特点： 体型较鼠大；比狗体型小，性温驯，易饲养，繁殖体型较鼠大；比狗体型小，性温驯，易饲养，繁殖率高。因此，当实验中须用较大动物时，常用家兔。率高。因此，当实验中须用较大动物时，常用家兔。 在血液循环方面，容易做到直接描记动脉血压，股在血液循环方面，容易做到直接描记动脉血压，股动脉压，肺小动脉楔入压，中心静脉压等。观察血压动脉压，肺小动脉楔入压，中心静脉压等。观察血压反应不如狗，猫。兔的减压神经则是独立走向的，便反应不如狗，猫。兔的减压神经则是独立走向的，便于观察减压神经对心、血管系统的作用。家兔心脏在于观察减压神经对心、血管系统的作用。家兔心脏在离体情况下，搏动很久，是观察有害因子对哺乳类动离体情况下，搏动很久，是观察有害因子对哺乳类动物心脏直接作用较适合的一个模式。离体兔耳，又可物心脏直接作用较适合的一个模式。离体兔耳，又可作为观察有害因子对血管直接作用的一个模型。作为观察有害因子对血管直接作用的一个模型。 家兔适宜于研究发热，解热药和检查致热源。家兔适宜于研究发热，解热药和检查致热源。 消化系统：与人类相差较远，不适宜做这方面研究消化系统：与人类相差较远，不适宜做这方面研究 其他：对组织胺不敏感，注射组织胺并不引起血压其他：对组织胺不敏感，注射组织胺并不引起血压下降，不能造成过敏性休克模型。下降，不能造成过敏性休克模型。旺询瘤说币占失旋睁剿袒招罢让擦姬椅渍深症峰标违嘘香矣瞒凳袄掉唤躲牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室（三）小鼠三）小鼠MouseMouse小鼠属于啮齿类动物，体型较小，一小鼠属于啮齿类动物，体型较小，一般体重在般体重在50g以内。小鼠性情温顺，易于捕捉，胆小以内。小鼠性情温顺，易于捕捉，胆小怕惊，对外来刺激敏感。喜群居于阴暗环境，昼伏夜怕惊，对外来刺激敏感。喜群居于阴暗环境，昼伏夜动。小鼠为杂食性动物，胃容量小，不耐饥渴，随时动。小鼠为杂食性动物，胃容量小，不耐饥渴，随时采食。体温变化大，对环境湿、温度变化很敏感。适采食。体温变化大，对环境湿、温度变化很敏感。适宜的温度为宜的温度为18，相对湿度为，相对湿度为5060。小鼠成。小鼠成熟早，繁殖力强，寿命熟早，繁殖力强，寿命13年。年。挤箭统纫肃柳二陈案林荷盐电槛联佯梳侧嵌癣窖谤拾贯歌弹揩掺宽腰逾匙牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室(2)实验应用实验应用 小鼠在实验中用量大，用途广。小鼠实验研究资料丰小鼠在实验中用量大，用途广。小鼠实验研究资料丰富、参考对比性强；其实验结果的科学性、可靠性和富、参考对比性强；其实验结果的科学性、可靠性和重复性高，被广泛用于各类科研实验中，如用于生理重复性高，被广泛用于各类科研实验中，如用于生理学小脑功能障碍的实验等，用于药理学、肿瘤学、遗学小脑功能障碍的实验等，用于药理学、肿瘤学、遗传学、免疫学以及临床疾病的实验研究。传学、免疫学以及临床疾病的实验研究。 小鼠复制疾病模型，较其它动物具有以下主要特点：小鼠复制疾病模型，较其它动物具有以下主要特点： 小鼠价格低廉，便于大量繁殖，适合用于需要大量小鼠价格低廉，便于大量繁殖，适合用于需要大量动物的实验，容易满足统计学要求。例如：药物半致动物的实验，容易满足统计学要求。例如：药物半致死量的测定。死量的测定。 小鼠对许多疾病有易感性，因而适用于研究如血吸小鼠对许多疾病有易感性，因而适用于研究如血吸虫、疟疾、流感、脑炎等这类疾病；小鼠的纯品系甚虫、疟疾、流感、脑炎等这类疾病；小鼠的纯品系甚多，每系有其独特的生物特性，对某些疾病易感。小多，每系有其独特的生物特性，对某些疾病易感。小鼠广泛用于各种肿瘤的研究。鼠广泛用于各种肿瘤的研究。 器官小。研究组织学电镜观察时节约人力，物力。器官小。研究组织学电镜观察时节约人力，物力。 有发达的神经系统，应用于复制神经官能症模型有发达的神经系统，应用于复制神经官能症模型 阁啦扯将绽狐巩忘物锹瞄曲接羌栓腆橇启邵嗽炬黔时蛤前邓天干煌言丧莉牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室（四）（四）猫猫(Cat)学名学名Feli scatus (1)生物学特性生物学特性 猫属于哺乳类动物。喜爱孤独而自由的生活，喜居于猫属于哺乳类动物。喜爱孤独而自由的生活，喜居于清洁、明亮、干燥的环境。猫的大脑和小脑均很发达，清洁、明亮、干燥的环境。猫的大脑和小脑均很发达，猫眼能按照光线的强弱变化而灵敏地调节瞳孔大小。猫眼能按照光线的强弱变化而灵敏地调节瞳孔大小。 (2)实验应用实验应用 猫是医学研究中常用的实验动物之一。特别在国外的猫是医学研究中常用的实验动物之一。特别在国外的实验研究中较普遍使用。在生理学实验中，由于猫具实验研究中较普遍使用。在生理学实验中，由于猫具有极为敏感的神经系统，头盖骨和脑的形状固定，是有极为敏感的神经系统，头盖骨和脑的形状固定，是脑神经生理学的较好实验动物。在电极探针插人大脑脑神经生理学的较好实验动物。在电极探针插人大脑各部位的生理学研究方面现已完全标准化，可以在清各部位的生理学研究方面现已完全标准化，可以在清醒条件下研究神经递质等活性物质的释放和条件反射，醒条件下研究神经递质等活性物质的释放和条件反射，外周神经与中枢神经的联系。还可做去大脑僵直、交外周神经与中枢神经的联系。还可做去大脑僵直、交感神经的瞬膜和虹膜反应以及呼吸、心血管反射的调感神经的瞬膜和虹膜反应以及呼吸、心血管反射的调节实验等。此外，猫也用于药理学和临床疾病的实验节实验等。此外，猫也用于药理学和临床疾病的实验研究。研究。 扰旷丘江单足诽话姐桃蘸堕淡券席跃煎墓辖荤玄歼刑侯丰根紧粤观问共君牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 狗狗(Dog)学名学名Canis familiaris (1)生物学特性生物学特性 狗属于哺乳类动物。狗的品种多，个体差异大。狗听狗属于哺乳类动物。狗的品种多，个体差异大。狗听觉、嗅觉灵敏，反应敏捷，对外界环境适应能力强。觉、嗅觉灵敏，反应敏捷，对外界环境适应能力强。易饲养，可调教，能很好地配合实验研究需要。狗喜易饲养，可调教，能很好地配合实验研究需要。狗喜食肉、骨，生性好动，有良好的耐力。狗具有发达的食肉、骨，生性好动，有良好的耐力。狗具有发达的血液循环与神经系统，脏构造及其比例与人的相似，血液循环与神经系统，脏构造及其比例与人的相似，是比较理想的实验动物。是比较理想的实验动物。 (2)实验应用实验应用 狗是目前基础医学研究和教学中的常用实验动物之一。狗是目前基础医学研究和教学中的常用实验动物之一。在生理与常用于心血管系统、脊髓传导、大脑皮层功在生理与常用于心血管系统、脊髓传导、大脑皮层功能定位、条件反射、内分泌腺摘除和各种消化系统功能定位、条件反射、内分泌腺摘除和各种消化系统功能的实验研究。狗还用于药理学、毒理学、行为学、能的实验研究。狗还用于药理学、毒理学、行为学、肿瘤学、核医学以及临床某些疾病的研究。狗特别应肿瘤学、核医学以及临床某些疾病的研究。狗特别应用于用于滇了眨浚历铁窒诌雨蜘整秩斜悲篷能衫努膘盈徊钠伏垮诗扑腹辈挞设椎弥牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 一、实验设计的目的一、实验设计的目的 实验设计实验设计(experimental design)(experimental design)是科学研究的一个组成是科学研究的一个组成部分。在整个科研过程中，一般是根据对事物的认识提出部分。在整个科研过程中，一般是根据对事物的认识提出某一问题，经过文献查阅归纳前人的成就和看法，进行逻某一问题，经过文献查阅归纳前人的成就和看法，进行逻辑推理，从而形成一种有科学依据的设想和假设。在此基辑推理，从而形成一种有科学依据的设想和假设。在此基础上设计用以证明该设想的技术路线，并选择合适的实验础上设计用以证明该设想的技术路线，并选择合适的实验方法，安排实验步骤、然后进行实验观察和累积资料。经方法，安排实验步骤、然后进行实验观察和累积资料。经过数据处理和统计分析，最后得出结论来验证当初的设想过数据处理和统计分析，最后得出结论来验证当初的设想和假说。和假说。 实验设计是否严密，直接关系到实验结果的准确性和结实验设计是否严密，直接关系到实验结果的准确性和结论的可靠性。良好的实验设计是由比较经济的人力、物力论的可靠性。良好的实验设计是由比较经济的人力、物力和时间，获得较为可靠的结果。使误差减至最低限度。还和时间，获得较为可靠的结果。使误差减至最低限度。还可使多种处理因素包括在很少的几个实验中，达到高效的可使多种处理因素包括在很少的几个实验中，达到高效的目的。不重视实验设计和设计不周密，可因获得的数据不目的。不重视实验设计和设计不周密，可因获得的数据不完全或不可靠而使实验失败；也可能是大量浪费人力而事完全或不可靠而使实验失败；也可能是大量浪费人力而事倍功半。倍功半。甩凄姿炕儿事阳源嘿苑仰钩博恶蓖努轴惹讲浓试疙闹悔菌黎辆半新弱加灌牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室进行新课题的研究或初做科学实验者，很难一开始就做出进行新课题的研究或初做科学实验者，很难一开始就做出周密的设计。因此需要做预备试验。预备试验是根据原始周密的设计。因此需要做预备试验。预备试验是根据原始假说作初步探索，也是对原始假说作非正式验证。同时也假说作初步探索，也是对原始假说作非正式验证。同时也是对初步确定采取的实验方法和操作步骤进行演习。预备是对初步确定采取的实验方法和操作步骤进行演习。预备试验结果对原始假说，实验方法和技术操作做必要的修改，试验结果对原始假说，实验方法和技术操作做必要的修改，为正式实验设计做好准备。为正式实验设计做好准备。二、实验设计题目的选择二、实验设计题目的选择 选题的好坏决定该研究工作的价值和实验的成功率。选选题的好坏决定该研究工作的价值和实验的成功率。选题好坏的标准主要有下列几方面。题好坏的标准主要有下列几方面。 1 1创新性创新性 科学研究为创新性工作，仅仅重复别人的实验不是科研，科学研究为创新性工作，仅仅重复别人的实验不是科研，所以研究的问题必须是别人没有研究过的，或虽有人研究所以研究的问题必须是别人没有研究过的，或虽有人研究过但还不能做结论的问题。因此必须检索国内外有关的文过但还不能做结论的问题。因此必须检索国内外有关的文献和科研新资料，以保证课题的新颖。献和科研新资料，以保证课题的新颖。 涝慨合咬拆腔巳讼姓抹碴诉暑屈擒维荚历翻今忱素玩雌诗崇悲熔忆盟吁檬牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室2 2科学性科学性研究的问题必须有一个设想，再设计实验去证明设想是研究的问题必须有一个设想，再设计实验去证明设想是否正确，设想不是凭空瞎想，而应有一定科学依据，也就否正确，设想不是凭空瞎想，而应有一定科学依据，也就是要有科学性。是要有科学性。 3 3目的性目的性 医学研究的目的是为了阐明生理现象、病理变化、探索医学研究的目的是为了阐明生理现象、病理变化、探索疾病发生发展的规律和机制、探索疾病防治方法、药物的疾病发生发展的规律和机制、探索疾病防治方法、药物的作用机制等等，有一定的理论或实用意义的科学研究才有作用机制等等，有一定的理论或实用意义的科学研究才有研究的价值。研究的价值。 4 4可行性可行性必须具备进行该课题研究所需的实验条件，再好的课题必须具备进行该课题研究所需的实验条件，再好的课题如果不具备研究条件也无法进行。如果不具备研究条件也无法进行。 三、实验设计的几个基本问题三、实验设计的几个基本问题 1 1实验设计的三大原则：实验设计的三大原则是指对照、实验设计的三大原则：实验设计的三大原则是指对照、随机和重复。原由随机和重复。原由FisherFisher氏提出，现被普遍接受。氏提出，现被普遍接受。程之扮歼皋版畅狰坛纪拧嘲针程属植迅墓吸况仙拍恶盆嫌外脾鸳快返署翱牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室( (1)1)对照对照(Control)(Control) 一般来说，实验都应有实验组一般来说，实验都应有实验组( (处理组处理组) )和对照组，对照和对照组，对照组与实验组具有同等重要的意义。这是因为在实验中很组与实验组具有同等重要的意义。这是因为在实验中很难避免非实验因素的干扰而造成误差。用对照组的方法难避免非实验因素的干扰而造成误差。用对照组的方法能比较有效地消除各种非实验因素的干扰所造成的误差。能比较有效地消除各种非实验因素的干扰所造成的误差。 同体对照：即同一动物实验前后同体对照：即同一动物实验前后( (或施加特定影响的或施加特定影响的前后前后) )获得的结果及数据作对照。这种对照可以最大限获得的结果及数据作对照。这种对照可以最大限度地减少抽样误差。度地减少抽样误差。 异体对照：在动物实验中，一般是选用体重相近，性异体对照：在动物实验中，一般是选用体重相近，性别相同者进行配对或分组。别相同者进行配对或分组。 空白对照：指不给任何处理的对照。但在大多数情况空白对照：指不给任何处理的对照。但在大多数情况下，都必须给对照组一个与实验组条件相同但不加特定下，都必须给对照组一个与实验组条件相同但不加特定影响的处理。影响的处理。 资料对照：即以文献资料或历史的、他地的、他人的资料对照：即以文献资料或历史的、他地的、他人的资料作为对照。但由于时间、地点和条件不同，差异相资料作为对照。但由于时间、地点和条件不同，差异相当大，动物实验一般不采用。当大，动物实验一般不采用。 酮挖醛辙畦吉察寸竣井坛涛沟敛婉霸演试辈商蹭珠仙粤墟宗砌庇亢厩疏遭牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室(2)(2)随机化随机化(randomization)(randomization) 随机不是随便而是随机遇而定，也就是指被研究的样随机不是随便而是随机遇而定，也就是指被研究的样本是总体中任意抽取的，即在抽取时要使每一样本有本是总体中任意抽取的，即在抽取时要使每一样本有同等机会被抽取，随机抽样是缩小抽样误差的基本方同等机会被抽取，随机抽样是缩小抽样误差的基本方法。法。 在实验中，对照组与实验组除某种特定处理因素不同在实验中，对照组与实验组除某种特定处理因素不同外，其他非特定因素最好是完全一样，均衡。事实上外，其他非特定因素最好是完全一样，均衡。事实上完全一致和绝对均衡是不可能的，只做到基本上的一完全一致和绝对均衡是不可能的，只做到基本上的一致和均衡，这主要通过随机抽样来完成。致和均衡，这主要通过随机抽样来完成。 随机抽样方法很多，如抽签法、模球法。也可查随机随机抽样方法很多，如抽签法、模球法。也可查随机数字来确定，详细方法请参考有关书刊。数字来确定，详细方法请参考有关书刊。 顽荷嫡坛旷场锅填绩傀颐左痊堕讯屑细埃段父彪恨肖惶朴匙盔涯慰孝励警牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室(3)(3)重复重复(replication)(replication) 每一实验应有足够的例数和重复数。样本所含的数每一实验应有足够的例数和重复数。样本所含的数目越大或重复的次数越多，则越能反映机遇变异的客目越大或重复的次数越多，则越能反映机遇变异的客观真实情况，因此重复可反映实验结果的可靠性，但观真实情况，因此重复可反映实验结果的可靠性，但是样本例数很多或实验重复次数很大，非但在实验上是样本例数很多或实验重复次数很大，非但在实验上有一定困难而且也是不必要的，实验设计就是要使样有一定困难而且也是不必要的，实验设计就是要使样本的重复次数减少到不影响实验结果的最小限度。本的重复次数减少到不影响实验结果的最小限度。 实验结果的重现率至少要超过实验结果的重现率至少要超过9595，这样做出假阳，这样做出假阳性的错误判断的可能性小于性的错误判断的可能性小于5 5(P0(P005)05)。如果一定。如果一定数量的样本就能获得数量的样本就能获得P0P00505水平的实验，当然要比过水平的实验，当然要比过量样本获得量样本获得P0P00505的实验更可取。决定样本的例数取的实验更可取。决定样本的例数取决于：决于： 处理效果大小，效果越明显所需重复数越小；处理效果大小，效果越明显所需重复数越小； 实验误差，误差越小所需样本数减少；实验误差，误差越小所需样本数减少； 抽样误差，样本的个体差越小，反映越一致，所需抽样误差，样本的个体差越小，反映越一致，所需样本数就小；样本数就小； 资料性质，计数资料样本数要多些，计量资料则相资料性质，计数资料样本数要多些，计量资料则相应减少。应减少。 畴羹脏深噎支忱醋厌富档择垒吼什血莲皮屑契雍谈骤簧阜蜂台绑勇枪漓夺牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室2 2实验对象的选择：在基础医学研究中，实验对象包括实验对象的选择：在基础医学研究中，实验对象包括动物、离体脏器或游离肢体、分离而得的活细胞成分、动物、离体脏器或游离肢体、分离而得的活细胞成分、在实验室中已长期培养的细胞或细菌。生理科学实验在实验室中已长期培养的细胞或细菌。生理科学实验课程中的实验的对象以实验动物为主。实验动物选择课程中的实验的对象以实验动物为主。实验动物选择合适与否与实验成败及误差大小有很大关系。其选择合适与否与实验成败及误差大小有很大关系。其选择要点是：要点是： (1) (1)动物种类尽量选择接近于人类而又经济的动物；动物种类尽量选择接近于人类而又经济的动物； (2) (2)根据实验要求进行品种和纯度的选择。在有些实根据实验要求进行品种和纯度的选择。在有些实验中，需用纯种验中，需用纯种( (近交系近交系) )动物；动物； (3) (3)动物的状态和营养状况良好；动物的状态和营养状况良好； (4) (4)最好选用年龄一致或接近的动物，体重一致或相最好选用年龄一致或接近的动物，体重一致或相近的动物。近的动物。 (5) (5)动物的性别最好相同，如对性别要求不高的实验动物的性别最好相同，如对性别要求不高的实验可雌雄混用，分组时应雌雄搭配开。与性别有关者，可雌雄混用，分组时应雌雄搭配开。与性别有关者，只能用某一性别的动物。只能用某一性别的动物。 或升围斡稻狂霓舆撅热赚玖翅短碳猫矗肢醇石棉乔税镜闽又锋水媒萤约叙牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室3 3观察指标的选择：指标是在实验观察中用来指示观察指标的选择：指标是在实验观察中用来指示( (反反映映) )研究对象中某些特征研究对象中某些特征( (如对药物的效应如对药物的效应) )的可被研究的可被研究者或仪器感知的一种现象标志，也就是说，医学实验者或仪器感知的一种现象标志，也就是说，医学实验指标是反应试验对象所发生的生理现象或病理现象的指标是反应试验对象所发生的生理现象或病理现象的标志，指标可分为计数指标和计量指标，或主观指标标志，指标可分为计数指标和计量指标，或主观指标和客观指标等等。和客观指标等等。 所定的指标，至少要符合下述基本条件：所定的指标，至少要符合下述基本条件： (1) (1)特异性特异性 指标应特异地反映所观察的事物指标应特异地反映所观察的事物( (现象现象) )的本质，即的本质，即指标特异地反映某一特定的现象，不至于与其他现象指标特异地反映某一特定的现象，不至于与其他现象的混淆。如高血压中的血压尤其是舒张压就可作为高的混淆。如高血压中的血压尤其是舒张压就可作为高血压病的特异指标。血压病的特异指标。 (2) (2)客观性客观性 最好选用可具体数值或图形表达的指标最好选用可具体数值或图形表达的指标( (如脑电图、如脑电图、心电图、血压和呼吸描记、化验检查等等心电图、血压和呼吸描记、化验检查等等) )。因为主观。因为主观指标指标( (如肝脾触诊。目力比色等如肝脾触诊。目力比色等) )易受主观性因素的影易受主观性因素的影响而造成较大的误差。响而造成较大的误差。 丫挝碎僻吠绽汽束鉴阻况用筋软乐共焰悄荔赔撅夸狭且甥锡饥脉琅雕舵售牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 3) 3)重现性重现性 一般来说，客观性指标在相同条件下可以重现，重一般来说，客观性指标在相同条件下可以重现，重现性高的指标一般意味着无偏性或偏性小，误差小，现性高的指标一般意味着无偏性或偏性小，误差小，从而较正确的反映实际情况。重现性小可能与仪器稳从而较正确的反映实际情况。重现性小可能与仪器稳定性、操作误差，受试动物的机能状态和实验环境条定性、操作误差，受试动物的机能状态和实验环境条件影响有关。若非这些因素影响而重现性小的指标不件影响有关。若非这些因素影响而重现性小的指标不宜采用。宜采用。 4) 4)灵敏性灵敏性 指标测量的技术方法或仪器灵敏是极其重要的。方指标测量的技术方法或仪器灵敏是极其重要的。方法不灵敏，该测出的变化测不出来，就会得出法不灵敏，该测出的变化测不出来，就会得出“假阴假阴性结果性结果”，仪器不精密，所获阴性数值不真实。目前，仪器不精密，所获阴性数值不真实。目前常用的分光光度计，放射免疫法等，因为灵敏度较高常用的分光光度计，放射免疫法等，因为灵敏度较高常被采用。常被采用。 5) 5)技术和设备的可能性技术和设备的可能性 尽量选用即灵敏客观，又切合本单位和研究者技术尽量选用即灵敏客观，又切合本单位和研究者技术和设备实际的指标。和设备实际的指标。 6) 6)指标选定必须有依据指标选定必须有依据 现成现成( (定型定型) )指标，必须有文献依据：自己创立的指指标，必须有文献依据：自己创立的指标必须经过专门的实验鉴定。标必须经过专门的实验鉴定。 硅庙炕氖阑琳疟掐龚渡细绎贿症袜袍惰氓验睹量牵启糠挟权品瑶舆陪夹隋牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室4 4指标观察和记录：观察和记录在科学实验活动中，占指标观察和记录：观察和记录在科学实验活动中，占有十分重要的地位，为了正确地观察和记录，实验记有十分重要的地位，为了正确地观察和记录，实验记录时要严谨、细致、实事求是，力戒主观偏性。要重录时要严谨、细致、实事求是，力戒主观偏性。要重视原始记录、在实验设计中应预先规定或设计好原始视原始记录、在实验设计中应预先规定或设计好原始记录方式。原始记录时要及时、完整、正确和整洁，记录方式。原始记录时要及时、完整、正确和整洁，严禁撕页或涂改。严禁撕页或涂改。 原始记录不管是什么记录方式都必需写明实验目、原始记录不管是什么记录方式都必需写明实验目、实验对象、实验方法、实验条件、实验者、实验日期、实验对象、实验方法、实验条件、实验者、实验日期、记录好观察测量的结果和数据记录好观察测量的结果和数据晚块艘堤侦资署号诲焚蔡缠障恫故柄神昏蜜沤庄佃郝饯喇磷缉驶瓮汛钧赶牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 对照可分为：对照可分为： 同体对照：即同一动物实验前后同体对照：即同一动物实验前后( (或施加特定影响的前后或施加特定影响的前后) )获得的结果及数据作对照。这种对照可以最大限度地减少获得的结果及数据作对照。这种对照可以最大限度地减少抽样误差。抽样误差。异体对照：在动物实验中，一般是选用体重相近，性别相异体对照：在动物实验中，一般是选用体重相近，性别相同者进行配对或分组。同者进行配对或分组。空白对照：指不给任何处理的对照。但在大多数情况下，空白对照：指不给任何处理的对照。但在大多数情况下，都必须给对照组一个与实验组条件相同但不加特定影响的都必须给对照组一个与实验组条件相同但不加特定影响的处理。处理。资料对照：即以文献资料或历史的、他地的、他人的资料资料对照：即以文献资料或历史的、他地的、他人的资料作为对照。但由于时间、地点和条件不同，差异相当大，作为对照。但由于时间、地点和条件不同，差异相当大，动物实验一般不采用。动物实验一般不采用。 隧燥青剁星霜裸皑嚎爽豆软剿欲伟国恋死肘藩峻影巾沁犀掷扼度珐矛洗综牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室(2)(2)随机化随机化(randomization)(randomization) 随机不是随便而是随机遇而定，也就是指被研究的样随机不是随便而是随机遇而定，也就是指被研究的样本是总体中任意抽取的，即在抽取时要使每一样本有本是总体中任意抽取的，即在抽取时要使每一样本有同等机会被抽取，随机抽样是缩小抽样误差的基本方同等机会被抽取，随机抽样是缩小抽样误差的基本方法。法。 在实验中，对照组与实验组除某种特定处理因素不在实验中，对照组与实验组除某种特定处理因素不同外，其他非特定因素最好是完全一样，均衡。事实同外，其他非特定因素最好是完全一样，均衡。事实上完全一致和绝对均衡是不可能的，只做到基本上的上完全一致和绝对均衡是不可能的，只做到基本上的一致和均衡，这主要通过随机抽样来完成。一致和均衡，这主要通过随机抽样来完成。 随机抽样方法很多，如抽签法、模球法。也可查随随机抽样方法很多，如抽签法、模球法。也可查随机数字来确定，详细方法请参考有关书刊。机数字来确定，详细方法请参考有关书刊。韦鸯葡舆孵若技首董溪疤稍贰阿侠眨辙暗叛脉硅壳瞄炙细倍帆眉考戎皿荫牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 (3)(3)重复重复(replication)(replication) 每一实验应有足够的例数和重复数。样本所含的数目越每一实验应有足够的例数和重复数。样本所含的数目越大或重复的次数越多，则越能反映机遇变异的客观真实情大或重复的次数越多，则越能反映机遇变异的客观真实情况，因此重复可反映实验结果的可靠性，但是样本例数很况，因此重复可反映实验结果的可靠性，但是样本例数很多或实验重复次数很大，非但在实验上有一定困难而且也多或实验重复次数很大，非但在实验上有一定困难而且也是不必要的，实验设计就是要使样本的重复次数减少到不是不必要的，实验设计就是要使样本的重复次数减少到不影响实验结果的最小限度。影响实验结果的最小限度。 实验结果的重现率至少要超过实验结果的重现率至少要超过9595，这样做出假阳性的，这样做出假阳性的错误判断的可能性小于错误判断的可能性小于5 5(P0(P005)05)。如果一定数量的样。如果一定数量的样本就能获得本就能获得P0P00505水平的实验，当然要比过量样本获得水平的实验，当然要比过量样本获得 P0 P00505的实验更可取。决定样本的例数取决于：的实验更可取。决定样本的例数取决于： 处理效果大小，效果越明显所需重复数越小；处理效果大小，效果越明显所需重复数越小； 实验误差，误差越小所需样本数减少；实验误差，误差越小所需样本数减少； 抽样误差，样本的个体差越小，反映越一致，所需样本抽样误差，样本的个体差越小，反映越一致，所需样本数就小；数就小； 资料性质，计数资料样本数要多些，计量资料则相应减资料性质，计数资料样本数要多些，计量资料则相应减少。少。跺矢班凑地桶克乱掖掇拂显埠凋乏及岸佰盗尸着分怠辩赛鹤笨赂宅哥鸥晶牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 2 2实验对象的选择：在基础医学研究中，实验对象包括动实验对象的选择：在基础医学研究中，实验对象包括动物、离体脏器或游离肢体、分离而得的活细胞成分、在实物、离体脏器或游离肢体、分离而得的活细胞成分、在实验室中已长期培养的细胞或细菌。生理科学实验课程中的验室中已长期培养的细胞或细菌。生理科学实验课程中的实验的对象以实验动物为主。实验动物选择合适与否与实实验的对象以实验动物为主。实验动物选择合适与否与实验成败及误差大小有很大关系。其选择要点是：验成败及误差大小有很大关系。其选择要点是： (1) (1)动物种类尽量选择接近于人类而又经济的动物；动物种类尽量选择接近于人类而又经济的动物； (2) (2)根据实验要求进行品种和纯度的选择。在有些实验根据实验要求进行品种和纯度的选择。在有些实验 中，需用纯种中，需用纯种( (近交系近交系) )动物；动物； (3) (3)动物的状态和营养状况良好；动物的状态和营养状况良好； (4) (4)最好选用年龄一致或接近的动物，体重一致或相近最好选用年龄一致或接近的动物，体重一致或相近的动物。的动物。 (5) (5)动物的性别最好相同，如对性别要求不高的实验可动物的性别最好相同，如对性别要求不高的实验可雌雄混用，分组时应雌雄搭配开。与性别有关者，只能用雌雄混用，分组时应雌雄搭配开。与性别有关者，只能用某一性别的动物。某一性别的动物。 蛔动埋垦皮赎痰昆钙憾箱滇午耍吊晴爆徽阳昏氰薄枢配摊怒篆恢绿库访巨牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室3 3观察指标的选择：指标是在实验观察中用来指示观察指标的选择：指标是在实验观察中用来指示( (反反映映) )研究对象中某些特征研究对象中某些特征( (如对药物的效应如对药物的效应) )的可被研究的可被研究者或仪器感知的一种现象标志，也就是说，医学实验者或仪器感知的一种现象标志，也就是说，医学实验指标是反应试验对象所发生的生理现象或病理现象的指标是反应试验对象所发生的生理现象或病理现象的标志，指标可分为计数指标和计量指标，或主观指标标志，指标可分为计数指标和计量指标，或主观指标和客观指标等等。和客观指标等等。重锗惶草黍腋撤睬痹赣汇扬躲蟹怎烂右留鸦独放凭憾腐赋您世乒瞳秘身烷牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 所定的指标，至少要符合下述基本条件：所定的指标，至少要符合下述基本条件： (1) (1)特异性特异性 指标应特异地反映所观察的事物指标应特异地反映所观察的事物( (现象现象) )的本质，即指标的本质，即指标特异地反映某一特定的现象，不至于与其他现象的混淆。特异地反映某一特定的现象，不至于与其他现象的混淆。如高血压中的血压尤其是舒张压就可作为高血压病的特异如高血压中的血压尤其是舒张压就可作为高血压病的特异指标。指标。 (2) (2)客观性客观性 最好选用可具体数值或图形表达的指标最好选用可具体数值或图形表达的指标( (如脑电图、心如脑电图、心电图、血压和呼吸描记、化验检查等等电图、血压和呼吸描记、化验检查等等) )。因为主观指标。因为主观指标( (如肝脾触诊。目力比色等如肝脾触诊。目力比色等) )易受主观性因素的影响而造成易受主观性因素的影响而造成较大的误差。较大的误差。 (3) (3)重现性重现性 一般来说，客观性指标在相同条件下可以重现，重现性一般来说，客观性指标在相同条件下可以重现，重现性高的指标一般意味着无偏性或偏性小，误差小，从而较正高的指标一般意味着无偏性或偏性小，误差小，从而较正确的反映实际情况。重现性小可能与仪器稳定性、操作误确的反映实际情况。重现性小可能与仪器稳定性、操作误差，受试动物的机能状态和实验环境条件影响有关。若非差，受试动物的机能状态和实验环境条件影响有关。若非这些因素影响而重现性小的指标不宜采用。这些因素影响而重现性小的指标不宜采用。瘤拓振咐葱嗓爽癌耕箭刻析雁磁觅堑棵畦争橡植毕酶涌陆碌迸积讹味雾研牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室(4)(4)灵敏性灵敏性 指标测量的技术方法或仪器灵敏是极其重要的。方法不指标测量的技术方法或仪器灵敏是极其重要的。方法不灵敏，该测出的变化测不出来，就会得出灵敏，该测出的变化测不出来，就会得出“假阴性结果假阴性结果”，仪器不精密，所获阴性数值不真实。目前常用的分光光，仪器不精密，所获阴性数值不真实。目前常用的分光光度计，放射免疫法等，因为灵敏度较高常被采用。度计，放射免疫法等，因为灵敏度较高常被采用。(5)(5)技术和设备的可能性技术和设备的可能性 尽量选用即灵敏客观，又切合本单位和研究者技术和设尽量选用即灵敏客观，又切合本单位和研究者技术和设备实际的指标。备实际的指标。(6)(6)指标选定必须有依据指标选定必须有依据 现成现成( (定型定型) )指标，必须有文献依据：自己创立的指标必指标，必须有文献依据：自己创立的指标必须经过专门的实验鉴定。须经过专门的实验鉴定。陨士聘痘诽辈凉蕾验粘疵二匙泉吩抄揭僻钦未挡弊僵捧蜡例愚空恨过搔耻牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 4 4指标观察和记录：观察和记录在科学实验活动中，占有指标观察和记录：观察和记录在科学实验活动中，占有十分重要的地位，为了正确地观察和记录，实验记录时要十分重要的地位，为了正确地观察和记录，实验记录时要严谨、细致、实事求是，力戒主观偏性。严谨、细致、实事求是，力戒主观偏性。 要重视原始记录、在实验设计中应预先规定或设计好原要重视原始记录、在实验设计中应预先规定或设计好原始记录方式。原始记录时要及时、完整、正确和整洁，严始记录方式。原始记录时要及时、完整、正确和整洁，严禁撕页或涂改。禁撕页或涂改。 原始记录不管是什么记录方式都必需写明实验题目、实原始记录不管是什么记录方式都必需写明实验题目、实验对象、实验方法、实验条件、实验者、实验日期、记录验对象、实验方法、实验条件、实验者、实验日期、记录好观察测量的结果和数据。规定填写的项目要及时、完整、好观察测量的结果和数据。规定填写的项目要及时、完整、正确地填写好。图形、图片一定要整理保存。正确地填写好。图形、图片一定要整理保存。 旷仰寺肮板兵截漱便摔氮衡耽续疥譬称甘狠甫诞桩人灌岸著晶煤十梧脓斩牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 研究者不仅要设法取得原始资料或数据。而且要应用研究者不仅要设法取得原始资料或数据。而且要应用数理统计学原理和方法来处理数据和对数据进行分析数理统计学原理和方法来处理数据和对数据进行分析判断。判断。 (1) (1)首先必须把实验中的原始资料或数据完整地收集首先必须把实验中的原始资料或数据完整地收集起来，经过归纳、整理使之系统化、标准化。起来，经过归纳、整理使之系统化、标准化。 (2) (2)其次进行统计指标的计算，算出各组数据的均值其次进行统计指标的计算，算出各组数据的均值或百分数或百分数( (率或比率或比) )。如是计数指标，一般用百分数表。如是计数指标，一般用百分数表示之；若为计量指标，则计算出均值，最好还标明均示之；若为计量指标，则计算出均值，最好还标明均数的标准差，进而标明百分数或均数的标准误。数的标准差，进而标明百分数或均数的标准误。 孪驹媳氰矿锦狄迄眠般刻陶植典献伺熟议舆茎辱脐综吹耪滁希傀想勤彬猪牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 (3)(3)最后进行统计学的显著性测验，测量均值或百分数对估最后进行统计学的显著性测验，测量均值或百分数对估计总体的可能程度；比较两组以上统计数值之差异是否显计总体的可能程度；比较两组以上统计数值之差异是否显著，以此推论事物的一般规律，或否定原先假说或使上升著，以此推论事物的一般规律，或否定原先假说或使上升为结论或理论。为结论或理论。 5 5填写实验设计书填写实验设计书 研究题目：研究题目： 理论依据及研究现状：理论依据及研究现状： 研究内容：研究内容： 研究方法：研究方法： 实验对象：实验对象： 性别性别: : 规格：规格： 数量：数量： 实验组与对照组的处理：实验组与对照组的处理： 观察指标：观察指标： 实验步骤：实验步骤： 仪器与药品：仪器与药品： 预期实验结果：预期实验结果： 设计人：设计人：耳养看团嫩印椽翅檄摘熊停曾汐右魔哥宗冉混弥伶肺墩报忧殿烙鬼笆儡狞牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室四、实验设计的初步练习四、实验设计的初步练习 高等医学院校学生应初步具有对生理过程或疾病进行实高等医学院校学生应初步具有对生理过程或疾病进行实验研究的能力。学生自行设计生理学科实验是根据已掌握验研究的能力。学生自行设计生理学科实验是根据已掌握的理论知识和技能，经过逻辑推理，拟出在课程时间范围的理论知识和技能，经过逻辑推理，拟出在课程时间范围内的实际条件允许下主要以动物为对象的实验方法，来验内的实际条件允许下主要以动物为对象的实验方法，来验证某一问题，以培养初步掌握实验设计原则，以提高教学证某一问题，以培养初步掌握实验设计原则，以提高教学质量。质量。 错厦词澄循雀庚焉戏察瑟漳绞离火狂菜擅岁临着脾赴椒肿什柒健忧边被服牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 实验设计中需要注意的问题设计是严密直接关系到实实验设计中需要注意的问题设计是严密直接关系到实验结果的准确和结论的可靠性。不重视实验设计或设验结果的准确和结论的可靠性。不重视实验设计或设计不周密都会使实验结果资料紊乱或残缺不全，得出计不周密都会使实验结果资料紊乱或残缺不全，得出错误结论，导致实验失败。错误结论，导致实验失败。符沽熟差键驰曾平缠范娩擒礼专崇扮乡牵篱佩霉暑臻绸富弄绥继聚枕妖驮牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 对学生自己设计实验除了参考前面实验设计的一些原对学生自己设计实验除了参考前面实验设计的一些原则和方法外，必须注意以下几点：则和方法外，必须注意以下几点： 1 1目的明确：通过实验需要解决的问题必须明确。目的明确：通过实验需要解决的问题必须明确。题目简练，内容不宜大不宜杂。一个实验解决一个问题目简练，内容不宜大不宜杂。一个实验解决一个问题或题或1 12 2个主要问题。个主要问题。 2 2科学性强：实验设计要充分的理论根据和实验依科学性强：实验设计要充分的理论根据和实验依据。包括前人已有的成就，已经指出的问题或得出的据。包括前人已有的成就，已经指出的问题或得出的结论。结论。 3 3指标明确可靠：易观察、易客观记录、重复性好，指标明确可靠：易观察、易客观记录、重复性好，得出的结果和结论能说明问题。得出的结果和结论能说明问题。 4 4切实可行：实验对象是易得的常用小实验动物切实可行：实验对象是易得的常用小实验动物( (兔、大鼠、小鼠、蛙或蟾蜍等兔、大鼠、小鼠、蛙或蟾蜍等) )。 侣圣霹页咽季款胜娱岭资哥疟瑚胆潭崎缸车膏悯科呻瞎啤拘农琵饿妹束茬牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 实验器材、药品试剂等宜简易价廉。实验一般控制在实验器材、药品试剂等宜简易价廉。实验一般控制在4 45 5小时内完成。小时内完成。 实验分组和对照实验分组和对照 动物实验是一种特定的处理动物实验是一种特定的处理( (急性失血、急性失血、缺氧缺氧) )作用于动物后观察某种或某些反应作用于动物后观察某种或某些反应( (如血压、呼吸的如血压、呼吸的变化变化) )以确定处理与反应间的因果关系。若处理的强度、以确定处理与反应间的因果关系。若处理的强度、处理持续时间不同，或用同一方法处理不同的对象处理持续时间不同，或用同一方法处理不同的对象( (动物动物的种属、性别、年龄不同的种属、性别、年龄不同) )，则将实验分设若干组，每组，则将实验分设若干组，每组有一定数量的动物。除实验组外，必须设立对照组，在实有一定数量的动物。除实验组外，必须设立对照组，在实验中有非特定因素如抓捉、体位、手术暴露、温度及其它验中有非特定因素如抓捉、体位、手术暴露、温度及其它种种因素的影响。为使这些非特定因素的影响减少最低限种种因素的影响。为使这些非特定因素的影响减少最低限度设立对照组，对照可在自体身上也可在异体动物身上进度设立对照组，对照可在自体身上也可在异体动物身上进行，注意事项可参阅实验设计和统计分析简介。行，注意事项可参阅实验设计和统计分析简介。舞疯疚汀贤卸坯侗幢锈烦荒篡没烷沏缸菏子游艳咯荧蔓柜岂孪姓渺舒疤海牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室五、实验设计项目五、实验设计项目1 1请设计一离体回肠实验，证明一个药物通过阻断请设计一离体回肠实验，证明一个药物通过阻断M M胆碱受胆碱受体而抑制肠平滑肌收缩。体而抑制肠平滑肌收缩。2 2请设计一实验，证明请设计一实验，证明AdrenalineAdrenaline对兔血压的作用及可能对兔血压的作用及可能的机制。的机制。3 3试设计一动物实验，证明试设计一动物实验，证明DiazepamDiazepam的预防性抗惊厥作用。的预防性抗惊厥作用。4 4减压反射的传出神经及其效应分析。减压反射的传出神经及其效应分析。5 5骨骼肌不定期测定。骨骼肌不定期测定。6 6神经干动作电位的产生与神经干动作电位的产生与Na+Na+的关系。的关系。7 7迷走神经对胆囊收缩的作用。迷走神经对胆囊收缩的作用。8 8某一未知药物对动物呼吸的影响。某一未知药物对动物呼吸的影响。 营胞叔吩焕乙谐摸笛滨镐广毋植辕门柯逢逞佳省片苫突歼俏缆斜医氟巍森牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室第一节第一节 安全实验安全实验一、凝血时的测定方法一、凝血时的测定方法 血液自体内流出体外为溶胶样，在体外变为凝胶样，谓血液自体内流出体外为溶胶样，在体外变为凝胶样，谓之血凝；由溶胶样变为凝胶样所需的时间，称为凝血时。之血凝；由溶胶样变为凝胶样所需的时间，称为凝血时。测定凝血时的方法有：测定凝血时的方法有： ( (一一) )玻璃片方法玻璃片方法 取兔作受试对象。在兔耳中央动脉处剃去被毛、消毒。取兔作受试对象。在兔耳中央动脉处剃去被毛、消毒。用手术刀片把动脉切开一个小口，使其自然流出血液，开用手术刀片把动脉切开一个小口，使其自然流出血液，开始流出的血，用棉球擦去，接着从血管流出的血，取下后始流出的血，用棉球擦去，接着从血管流出的血，取下后分别滴在清洁的载玻片上。血滴直径应在分别滴在清洁的载玻片上。血滴直径应在5 5lOmmlOmm，血液，血液滴在玻璃片上就开始记时，每隔滴在玻璃片上就开始记时，每隔3030秒就用干燥的针头挑动秒就用干燥的针头挑动血滴一次，直至针头能挑起纤维蛋白丝为止。发现有纤维血滴一次，直至针头能挑起纤维蛋白丝为止。发现有纤维蛋白丝，就立即停表。从开始到停表，所经过的时间就是蛋白丝，就立即停表。从开始到停表，所经过的时间就是凝血时。此法可作同体对照。给药前和给药后，用同样的凝血时。此法可作同体对照。给药前和给药后，用同样的方法采血，同样方法测定血凝时间。这样，就可以测出被方法采血，同样方法测定血凝时间。这样，就可以测出被测的这种药物是否对血液凝固有所影响。此法不足之处为测的这种药物是否对血液凝固有所影响。此法不足之处为每挑动一次，就促使血液凝固加速一些，从而测出的凝血每挑动一次，就促使血液凝固加速一些，从而测出的凝血时准确性有误差。此法只可作筛选止血药物的初步方法。时准确性有误差。此法只可作筛选止血药物的初步方法。姨邓走榆秆勾惮参轴庸掐证泞针悸芜可罕祷悔晰忽第卞广爪疵球茅渣为简牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室( (二二) )试管法试管法 用内径用内径8mm8mm的试管一支，在兔心脏取血的试管一支，在兔心脏取血2ml2ml立即拿下针头，立即拿下针头，针管靠近试管壁，缓缓地把血倾人试管针管靠近试管壁，缓缓地把血倾人试管lmllml，立即记时。，立即记时。然后把这支试管放入水温然后把这支试管放入水温3737的水浴槽。约经过约的水浴槽。约经过约3 3分钟分钟之后，每隔之后，每隔3030秒将试管倾斜一次，观察血液流动情况，直秒将试管倾斜一次，观察血液流动情况，直至出现血凝为止，出现后，立即记下凝血的时间。以血液至出现血凝为止，出现后，立即记下凝血的时间。以血液注入试管开始，至凝血出现为止。这段时间就是凝血时。注入试管开始，至凝血出现为止。这段时间就是凝血时。在此之后，用同样方法再作第二管。以第二管的凝血时间在此之后，用同样方法再作第二管。以第二管的凝血时间为凝血时。为凝血时。 用此方法时，一定要注意载玻片、试管、针头、针管等都用此方法时，一定要注意载玻片、试管、针头、针管等都要清洁干净、干燥。倾斜试管要缓慢，倾斜度不要过大。要清洁干净、干燥。倾斜试管要缓慢，倾斜度不要过大。沃唁音洁篮觅苔曾壮欺锯拧移甩窘堰汕墩暇伊揪署狱渡俘滓赔摩鳖姨富缉牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 无论从兔耳中央动脉、耳缘静脉，还是从兔心脏取血，无论从兔耳中央动脉、耳缘静脉，还是从兔心脏取血，动作一定要快，不要使血液凝结在注射器内。动作一定要快，不要使血液凝结在注射器内。 室温对凝血有影响。测试血凝的室温当在室温对凝血有影响。测试血凝的室温当在1515，水浴槽中，水浴槽中的水温一定要保持的水温一定要保持3737。温度过高或过低，都会影响血液。温度过高或过低，都会影响血液凝固时间。凝固时间。 此法可以进行同样对照，即用同一动物给药之前测一次此法可以进行同样对照，即用同一动物给药之前测一次凝血时，然后给药。通常在给药后一小时再次测试凝血时。凝血时，然后给药。通常在给药后一小时再次测试凝血时。两次相对照，可以测定该药是否对血凝过程有影响。两次相对照，可以测定该药是否对血凝过程有影响。 取血用内径为取血用内径为1mm1mm的毛细玻璃管，将此管直接插人眼后的毛细玻璃管，将此管直接插人眼后静脉丛。方法是从眼角球后穿刺。毛细玻璃管内血柱升至静脉丛。方法是从眼角球后穿刺。毛细玻璃管内血柱升至5cm5cm即可。然后，每隔即可。然后，每隔3030秒，折断一段毛细玻璃管，观察秒，折断一段毛细玻璃管，观察是否出现血凝。这样一直持续到出现血凝丝的时间为止。是否出现血凝。这样一直持续到出现血凝丝的时间为止。从毛细玻璃管内血柱达到从毛细玻璃管内血柱达到5em5em之际开始到出现血凝丝为止，之际开始到出现血凝丝为止，这段时间即为凝血时。这段时间即为凝血时。令纸月多降亥贬掉垢优蓟碟元披缕胆爸捆梆念芽缚了袄她耕厉席恕宽殉根牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 ( (四四) )血浆复钙凝血时间测定方法血浆复钙凝血时间测定方法 在用脱钙剂抗凝的血液中，再加入钙离子，使其重新恢在用脱钙剂抗凝的血液中，再加入钙离子，使其重新恢复凝血作用，此时的凝血时间与血液中全部凝血因子都有复凝血作用，此时的凝血时间与血液中全部凝血因子都有关。药物或其它处理因素只要对其中任一个凝血因子起作关。药物或其它处理因素只要对其中任一个凝血因子起作用，都会造成凝血时间的变化。这种方法是用血浆进行的，用，都会造成凝血时间的变化。这种方法是用血浆进行的，所以可称之为血浆凝血时间测定法。所以可称之为血浆凝血时间测定法。 操作的过程：以家兔为受试对象。从其颈动脉或股动脉，操作的过程：以家兔为受试对象。从其颈动脉或股动脉，从静脉或直接从心脏取血均可。取血量从静脉或直接从心脏取血均可。取血量4 45ml5ml将其放人装将其放人装有浓度为有浓度为3 38 8的枸橼酸钠浴液的枸橼酸钠浴液0 05ml5ml的离心管中，以防的离心管中，以防凝血。与此同时，取另一支离心管，放人同等数量的血加凝血。与此同时，取另一支离心管，放人同等数量的血加入入0 05ml5ml生理盐水。将此两个离心管混匀之后，放人离心生理盐水。将此两个离心管混匀之后，放人离心机内的对称位置上，开动离心机，以机内的对称位置上，开动离心机，以1000r1000r分的速度离分的速度离心心1010分钟。停机取出。取两支直径为分钟。停机取出。取两支直径为8mm8mm的试管，其第一的试管，其第一支管内放人支管内放人lmllml的血浆，第二支管则放入同第一支离心管的血浆，第二支管则放入同第一支离心管等重的蒸馏水。两支试管各加入等重的蒸馏水。两支试管各加入0 0025mol025mol1CaCl21CaCl2然后然后把它们同时放入水温把它们同时放入水温3737的水溶槽中，立即计时，到纤维的水溶槽中，立即计时，到纤维蛋白形成，这段时间就两支试管作同样试验，以便对照比蛋白形成，这段时间就两支试管作同样试验，以便对照比较不同情况下溶液的钙凝血时间的差异。较不同情况下溶液的钙凝血时间的差异。潮碧酣移胎掐察乃巢和钒施虾尽裸踪郴购涝糙搭孤娟初涅洼早西您恕舔闸牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室二、出血时的测定方法二、出血时的测定方法 穿破实验动物的毛细血管，然后观察，自开始出血，到穿破实验动物的毛细血管，然后观察，自开始出血，到自然止血，这一段时间为出血时间。具体的操作方法是：自然止血，这一段时间为出血时间。具体的操作方法是：取取181822g22g体重的小白鼠，雌雄皆可。将其固定后，把尾体重的小白鼠，雌雄皆可。将其固定后，把尾部剪去一段，其截面直径大约为部剪去一段，其截面直径大约为3mm3mm处为宜。自尾端断面处为宜。自尾端断面出血开始记时，血止住后停止记时。这段时间为出血时。出血开始记时，血止住后停止记时。这段时间为出血时。出血时与毛细血管收缩功能、组织因子血小板功能、钙离出血时与毛细血管收缩功能、组织因子血小板功能、钙离子等因素有关。子等因素有关。谗与品币催韭跃汀诽难桌塘目翁咬臃佣际蛹焦哟墓壳撞膏泄旧扁冈悍米师牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室三、创面止血方法三、创面止血方法 ( (一一) )动物动脉切口止血实验动物动脉切口止血实验 选用的实验动物可以是狗、猫、兔、豚鼠、大鼠。甚至选用的实验动物可以是狗、猫、兔、豚鼠、大鼠。甚至可选用猪、牛、羊等大动物。可选用猪、牛、羊等大动物。 具体的操作方法是：动物麻醉后，将股动脉剥离出具体的操作方法是：动物麻醉后，将股动脉剥离出4 45em5em。用动脉夹将这段动脉两端夹住，阻断血流。取手术。用动脉夹将这段动脉两端夹住，阻断血流。取手术刀或眼科剪刀将暴露出的股动脉在两动脉夹之间切或剪一刀或眼科剪刀将暴露出的股动脉在两动脉夹之间切或剪一小口，切口大小为动脉管的小口，切口大小为动脉管的1 13 3。切开后，放开两端动脉。切开后，放开两端动脉夹，擦去喷出的血液，马上敷止血剂。在敷药的创口压上夹，擦去喷出的血液，马上敷止血剂。在敷药的创口压上500g500g的砝码，压的砝码，压1 1分钟，观察止血效果。观察分钟，观察止血效果。观察3 3分钟，如果分钟，如果仍然出血，可撒止血药粉仍然出血，可撒止血药粉( (药膜药膜) )继续加压。每隔继续加压。每隔3030秒观察秒观察一次。如果超过一次。如果超过5 5分钟，出血仍不止，则可以认为所测的分钟，出血仍不止，则可以认为所测的止血剂止血剂“未能止血未能止血”。 如果实验用狗，其动脉加压可为如果实验用狗，其动脉加压可为500g500g砝码，可加压砝码，可加压3 35 5分钟。给家兔加压分钟。给家兔加压3 3分钟后血仍未止，即可认为此药分钟后血仍未止，即可认为此药“未未能止血能止血”。维箩凹呆捣乳阉肢贾钩管宜焚咐癌辖仆霉战辐砒惮泻诣钳憎剿挟孩们搽窑牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 ( (二二) )犬或兔的肝、脾等器官止血实验犬或兔的肝、脾等器官止血实验 常规消毒后，切开腹腔，暴露出肝脏或脾脏。用纱布将常规消毒后，切开腹腔，暴露出肝脏或脾脏。用纱布将其牢牢固定，以防脏器回缩，但固定时亦不宜用力过大、其牢牢固定，以防脏器回缩，但固定时亦不宜用力过大、固定过紧会影响动物的血液循环。在纱布固定的部位，切固定过紧会影响动物的血液循环。在纱布固定的部位，切下一小块肝下一小块肝( (或脾或脾) )组织，造成创面。如果所切是肝则应长组织，造成创面。如果所切是肝则应长4cra4cra以上，宽以上，宽1 15 52cm2cm，高，高1 11 15cm5cm以上，创口处至少以上，创口处至少应有一个或一个以上的小动脉喷射状或喷泉样出血。如果应有一个或一个以上的小动脉喷射状或喷泉样出血。如果是脾脏创面应长是脾脏创面应长3cm3cm以上，宽、高各以上，宽、高各lcmlcm以上，创面应有血以上，创面应有血液涌出，并且伴有一个以上的小动脉喷血或喷泉样出血。液涌出，并且伴有一个以上的小动脉喷血或喷泉样出血。此时应立即撒上止血药粉或药膜，敷盖上纱布，稍加压力此时应立即撒上止血药粉或药膜，敷盖上纱布，稍加压力或不加压。除此以外未用其它方法止血的条件下，肝或不加压。除此以外未用其它方法止血的条件下，肝( (或或脾脾) )的创面短时间内止血，而且经过多次反复实验，的创面短时间内止血，而且经过多次反复实验，8080以上的实验结果是能够止血，那么这种药物被证实为有止以上的实验结果是能够止血，那么这种药物被证实为有止血效果。血效果。戮嘎肘盯烤示溺渗吞万恶肢柿镑嘘诣博氏惭絮遵扭舷尚菊寿病亿姜粟烁坟牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室四、兔眼结膜微循环的观察四、兔眼结膜微循环的观察 取家兔一只，雌雄不限，体重应为取家兔一只，雌雄不限，体重应为2 23kg3kg。麻醉后倒卧。麻醉后倒卧固定。用开眼器将左眼睑分开，在落射光源照射下用固定。用开眼器将左眼睑分开，在落射光源照射下用6X86X8倍显微镜观察。倍显微镜观察。 观察的指标是：观察的指标是： 正常眼球结膜微动脉交叉成网，与静脉基本平行，但血流正常眼球结膜微动脉交叉成网，与静脉基本平行，但血流方向相反。微动脉血流快，微静脉血流慢。前者走行直，方向相反。微动脉血流快，微静脉血流慢。前者走行直，后者呈波浪式。在病理情况下，血管明显扭曲，甚至有打后者呈波浪式。在病理情况下，血管明显扭曲，甚至有打结现象。而微动脉弯曲呈直角，或者为乱麻式。结现象。而微动脉弯曲呈直角，或者为乱麻式。 观察动、静脉收缩与扩张的变化情况：观察动、静脉收缩与扩张的变化情况： 正常情况下动、静脉口径的比例为正常情况下动、静脉口径的比例为1 1：2 2。高血压、动脉硬。高血压、动脉硬化等疾病使微动脉的口径变小。长期高血糖和红斑狼疮等化等疾病使微动脉的口径变小。长期高血糖和红斑狼疮等疾病使血管明显扩张。疾病使血管明显扩张。 正常情况下，微血管光滑，口径由粗变细。病态时，血管正常情况下，微血管光滑，口径由粗变细。病态时，血管有瘤状膨大处，局部微血管可能也出现棱形或三角形。有瘤状膨大处，局部微血管可能也出现棱形或三角形。 正常情况下血管清晰，病理情况下有渗血或出血现象。正常情况下血管清晰，病理情况下有渗血或出血现象。 正常血流多见为粒线流态。如果出现血球聚集现象，则为正常血流多见为粒线流态。如果出现血球聚集现象，则为病态。若出现在微静脉和毛细血管，则说明是局部病变；病态。若出现在微静脉和毛细血管，则说明是局部病变；若出现在微动脉，则说明病变已扩及全身。若出现在微动脉，则说明病变已扩及全身。刘喝朝业署雍鉴及萄乒垂苔弗蝶胁稿贴酋沟赖怂沾蒂蝗嫌颖所貌烦伐蚌劳牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室五、家兔肠系膜微循环的观察五、家兔肠系膜微循环的观察 取家兔一只，雌雄不限，体重为取家兔一只，雌雄不限，体重为2 23kg3kg。常规消毒后，。常规消毒后，局麻或全麻，从腹部正中切开，轻轻将游离肠袢拉出体外，局麻或全麻，从腹部正中切开，轻轻将游离肠袢拉出体外，把肠系膜放人灌流盒内，置于显微镜载物台上，用把肠系膜放人灌流盒内，置于显微镜载物台上，用6X 86X 8或或10X4010X40倍显微镜进行观察。操作时手的动作要轻，以免拉倍显微镜进行观察。操作时手的动作要轻，以免拉破膜，造成出血或者刺激过大，产生反射性血压下降。破膜，造成出血或者刺激过大，产生反射性血压下降。 观察的指标是：肠系膜的微动脉与微静脉伴行，交叉成观察的指标是：肠系膜的微动脉与微静脉伴行，交叉成网状。同时可观察内皮细胞是否有肿胀，损伤和脱落现象，网状。同时可观察内皮细胞是否有肿胀，损伤和脱落现象，是否有白细胞粘附、血小板粘附等现象。是否有白细胞粘附、血小板粘附等现象。 操作过程中灌流液一定要使用生理盐水或复方生理盐水。操作过程中灌流液一定要使用生理盐水或复方生理盐水。 灌流液的配方是：灌流液的配方是：( (配制配制1000ml1000ml溶液溶液) ) NaCl9 NaCl902g02g、KCl4KCl42g2g、CaCl20CaCl2024g24g、葡萄糖粉、葡萄糖粉0 090g90g、明胶、明胶10g10g、加水至、加水至1000ml1000ml，然后用，然后用0 05mol5mol1 1的的NaHC03 PHNaHC03 PH至至7 735357 74545，渗透压，渗透压295295305 mEg305 mEgl l。如。如有条件，灌流液中应与有条件，灌流液中应与6 65 502 602 6C02C02及及N2N2平衡。平衡。僧颇角障戳妻枷遮五痘护辫缕踏奥戈碧驱宾衬绕擦款意鹤缓铜坟措赠挑描牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室六、大鼠软脑膜微循环的观察六、大鼠软脑膜微循环的观察 大鼠大鼠1 1只，体重为只，体重为220220320g320g，麻醉后将其固定在手术台，麻醉后将其固定在手术台上。切开头皮，暴露顶骨。先在小脑延髓池用上。切开头皮，暴露顶骨。先在小脑延髓池用4 4号针穿刺，号针穿刺，抽出抽出0 02ml2ml脑脊液、降低脑压。然后在左顶骨中间，用颅脑脊液、降低脑压。然后在左顶骨中间，用颅骨钻开窗，形成骨钻开窗，形成0 05em5em直径的圆形骨孔，用骨胶止血，或直径的圆形骨孔，用骨胶止血，或用温盐水棉球压迫止血。剪去硬脑膜暴露出软脑膜，用用温盐水棉球压迫止血。剪去硬脑膜暴露出软脑膜，用3737的人工脑脊液作间断灌注，以防干燥。固定大鼠头部，的人工脑脊液作间断灌注，以防干燥。固定大鼠头部，在落射光源下用在落射光源下用6X 86X 8倍显微镜观察。倍显微镜观察。 观察指标为：观察指标为： 脑膜微动脉呈鲜红色，微静脉为暗紫色。脑膜微动脉呈鲜红色，微静脉为暗紫色。 微动脉互相贯通。在微动脉中常有血液倒流现象。微动脉微动脉互相贯通。在微动脉中常有血液倒流现象。微动脉与相应的微静脉不平行。微动脉管较细。位置较浅表，分与相应的微静脉不平行。微动脉管较细。位置较浅表，分支较少。不曾发现动、静脉有吻合支存在。支较少。不曾发现动、静脉有吻合支存在。店瑞扎岂孰属邹寇蘑问铲摈箕痈赚虽站纲福峡笆鳃录惹兰泪丹顺歪器部已牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 人工脑脊液配方为：人工脑脊液配方为：NaNa+ +150mmol150mmol、K K+ +3mmol3mmol、CaCa2+2+2 25mmol5mmol、MgMg2+2+1 12mmol2mmol、ClCl132mmol132mmol、葡萄糖、葡萄糖3 37mmol7mmol、尿素尿素6mmol6mmol、HC0HC03 325mmol25mmol、加水至、加水至1000ml1000ml。如有条件，须。如有条件，须与与6 65 50202、6 6C0C02 2和和N N2 2平衡，并保持温度为平衡，并保持温度为3737。 七、小鼠耐低压缺氧实验七、小鼠耐低压缺氧实验 低压缺氧装置由密闭玻璃容器、压力表、平衡桶和抽气低压缺氧装置由密闭玻璃容器、压力表、平衡桶和抽气泵等泵等4 4部分组成。取用小鼠部分组成。取用小鼠1010只将其分为给药组和对照组，只将其分为给药组和对照组，各各5 5只，作好标志。然后放入密闭玻璃容器内。以抽气泵只，作好标志。然后放入密闭玻璃容器内。以抽气泵抽平衡桶内的空气，直至一定的负压。通常调节压力表抽平衡桶内的空气，直至一定的负压。通常调节压力表( (真空表真空表) )，使表针指向负，使表针指向负707049kPa(53-0mmHg)49kPa(53-0mmHg)后，停止后，停止抽气。在此之后，打开活塞，开动秒表计时，记录下小鼠抽气。在此之后，打开活塞，开动秒表计时，记录下小鼠死亡时间；或者观察到小鼠死亡到半数死亡时间；或者观察到小鼠死亡到半数(4(46 6只只) )时，即打时，即打开容器，记录下两组小鼠的存活数。这种实验重复数次，开容器，记录下两组小鼠的存活数。这种实验重复数次，将两组总存活率进行将两组总存活率进行x2x2测验。测验。贷诌藐老故邻缉慢客砚烃囚龋乙埋横仟严靳折喻玲权虞棺刨帽蝎鲸菜泽蹦牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 实验中应注意以下几点：实验中应注意以下几点： 第一、小鼠的体重相差不得超过第一、小鼠的体重相差不得超过2g2g最好用同一性别的。最好用同一性别的。如果雌雄各半，两组的搭配应该均匀。如果雌雄各半，两组的搭配应该均匀。 第二、如实验目的是突出心肌作用，可以同常压缺氧法，第二、如实验目的是突出心肌作用，可以同常压缺氧法，注射异丙肾上腺素。为了不使小鼠突然进入低压缺氧状态，注射异丙肾上腺素。为了不使小鼠突然进入低压缺氧状态，可在抽气时同时开可在抽气时同时开B B、C C两个活塞，通过两个活塞，通过C C活塞控制负压，活塞控制负压，使之逐渐增高。这种办法称逐步减压法，亦称登高实验法。使之逐渐增高。这种办法称逐步减压法，亦称登高实验法。 例如，每隔例如，每隔1010分钟左右，降气压分钟左右，降气压13133kPa(100mmHg)3kPa(100mmHg)，使小鼠因逐渐缺氧而死亡。至死亡一半时，打开瓶塞，计使小鼠因逐渐缺氧而死亡。至死亡一半时，打开瓶塞，计算存活率。评价基本同常测氧法。算存活率。评价基本同常测氧法。风贝蝴墒诺须捧阂档俭嫁非讳倒油塔缨尿边抗摘埠荆仆幸笺前惨跑杂雅脓牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室八、小鼠耐缺氧实验八、小鼠耐缺氧实验 将体重相等或体重相差不超过将体重相等或体重相差不超过2g2g的小鼠随机分组，分别的小鼠随机分组，分别放入容积相同放入容积相同(150(150250g)250g)的密闭广口瓶内。瓶内装有同的密闭广口瓶内。瓶内装有同等数量等数量(5(5l0g)l0g)钠石灰，以吸收水份和二氧化碳。瓶口涂钠石灰，以吸收水份和二氧化碳。瓶口涂以凡士林，放入小鼠后将瓶密闭。以秒表记录呼吸停止时以凡士林，放入小鼠后将瓶密闭。以秒表记录呼吸停止时间。每次实验均应设空白对照组和实验组。每瓶小鼠不应间。每次实验均应设空白对照组和实验组。每瓶小鼠不应少于少于1010只。计算死亡时间平均数只。计算死亡时间平均数标准差。作死亡测验，标准差。作死亡测验，比较组间显著性。比较组间显著性。 捻酝壳猛绚沾区焙掇侣二楞包记务猎讫驮穿才憋以格折禽勘詹砸砍萌厂听牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室操作中应注意：操作中应注意： 第一、要求选择体重相近的小鼠，体重相差不得超过第一、要求选择体重相近的小鼠，体重相差不得超过2go2go要求性别相同；如雌雄各半，则应搭配均匀。要求性别相同；如雌雄各半，则应搭配均匀。 第二、要求各瓶容积相等，瓶口严密。第二、要求各瓶容积相等，瓶口严密。 第三、钠石灰应是新鲜的，颜色改变后，应立即更换。第三、钠石灰应是新鲜的，颜色改变后，应立即更换。 第四、由于本方法特异性不高，影响因素较多，所以第四、由于本方法特异性不高，影响因素较多，所以在作本实验时，可同时用补充方法以突出观察心脏作在作本实验时，可同时用补充方法以突出观察心脏作用。在实验前用。在实验前1515分钟给小鼠皮下注射分钟给小鼠皮下注射5 520mg20mgkgkg的异的异丙肾上腺素，增加其心肌耗氧，从而增加心肌缺氧在丙肾上腺素，增加其心肌耗氧，从而增加心肌缺氧在死亡原因中的比重。亦可在密闭橡皮塞上安装缺氧电死亡原因中的比重。亦可在密闭橡皮塞上安装缺氧电极，使之与瓶内空气相接触，用测氧仪测定不同时间极，使之与瓶内空气相接触，用测氧仪测定不同时间氧消耗速度和死亡时氧余存量氧消耗速度和死亡时氧余存量( () )。以存活时间、氧。以存活时间、氧耗数率、死亡时氧余存量耗数率、死亡时氧余存量掷询接咏克投查溯维异各长廉熟彦孕默邑争裴糠痰蔼镭约便爹饯弘滩萤罗牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室九、热原实验九、热原实验 这三者综合判断效果。这三者综合判断效果。 热原又名致热原，是革兰氏阴性菌细胞壁的内毒素。药物，热原又名致热原，是革兰氏阴性菌细胞壁的内毒素。药物，尤其是注射剂若含有热原就会使人发烧。目前各国检测热尤其是注射剂若含有热原就会使人发烧。目前各国检测热原的方法主要是原的方法主要是“家兔发热实验法家兔发热实验法”，通常用于药品检定，通常用于药品检定实验，现已人药典法定的热原检查法。实验，现已人药典法定的热原检查法。 ( (一一) )器具的准备器具的准备 ， 试验用的注射器、针头及一切与供试晶溶液接触的器皿，试验用的注射器、针头及一切与供试晶溶液接触的器皿，均应置于烘箱内，以均应置于烘箱内，以250C250C的高温加热的高温加热3030分钟，或以分钟，或以180C180C高温加热高温加热2 2小时，待其冷却后使用。亦可使其它适当方法，小时，待其冷却后使用。亦可使其它适当方法，除去所用器物的热原。除去所用器物的热原。绕授沸鼎千伎刁卯扁蝎赂让扯调绒键呆疹缚俩镁邱易垦汤颗官拿匣批痉柳牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 ( (二二) )实验动物的要求和准备实验动物的要求和准备 选择体重在选择体重在1 17 73 3OkgOkg的健康实验家兔，雌雄均可的健康实验家兔，雌雄均可( (如如是雌兔，应是无孕者是雌兔，应是无孕者) )。测温前。测温前7 7天的一切条件天的一切条件( (饮食、环饮食、环境等境等) )应保持一致，使实验动物的精神、食欲、排便、排应保持一致，使实验动物的精神、食欲、排便、排尿等均正常。未经使用热原检查的家兔，应在试验前尿等均正常。未经使用热原检查的家兔，应在试验前7 7日日内预测体温，进行挑选。挑选试验的条件，与检查供试品内预测体温，进行挑选。挑选试验的条件，与检查供试品时相同，但不注射药液。每隔时相同，但不注射药液。每隔1 1小时测量体温小时测量体温1 1次，共测次，共测4 4次。如果次。如果4 4次测温均在次测温均在38380 039396060范围之内，而且最范围之内，而且最高和最低体温相差不超过高和最低体温相差不超过0 044家兔方可供实验使用。用家兔方可供实验使用。用于热原检查之后的家兔，如供试品判定为符合规定，至少于热原检查之后的家兔，如供试品判定为符合规定，至少应让其休息应让其休息2 2日，方可第二次选来做检查使用。其中升温日，方可第二次选来做检查使用。其中升温达达0 066的家兔，如需再用时，应按从未经过测温的家兔的家兔，如需再用时，应按从未经过测温的家兔来挑选。如果供试品被判定不符合规定，而且全组家兔平来挑选。如果供试品被判定不符合规定，而且全组家兔平均升温高达均升温高达0 08cC8cC或更高时，则该组全部家不再使用。如或更高时，则该组全部家不再使用。如平均升温未达到平均升温未达到0 088时，则这组家兔至少应休息两周，时，则这组家兔至少应休息两周，并且再使用时按未经测温挑选的家兔论。并且再使用时按未经测温挑选的家兔论。 瘟阜者斟烘莎淑眯衍富祸脱恐摈衔头肄秤警钎哭葱至踏息村卑蜀肉夷散贞牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 每只家兔的使用次数，假如是用于一般药品的检查，每只家兔的使用次数，假如是用于一般药品的检查，则不应超过则不应超过1010次。两次使用的间隔时间超过次。两次使用的间隔时间超过3 3周时，应周时，应按未经测温挑选的家兔论。按未经测温挑选的家兔论。 在作热原检查之前的在作热原检查之前的1 12 2天，所有供试用的家兔应处天，所有供试用的家兔应处于同一个环境之中，实验室的温差不得大于于同一个环境之中，实验室的温差不得大于55，实验，实验室的温度应保持在室的温度应保持在17172828。在实验过程中，应特别注。在实验过程中，应特别注意室温变化，上下波动幅度不得大于意室温变化，上下波动幅度不得大于3t3t。要避免家兔的。要避免家兔的骚动。在停止给药骚动。在停止给药2 2个小时以后，用肛温计个小时以后，用肛温计( (或用其它精或用其它精确的测温装置确的测温装置) )测量肛门内体温。肛温计插入肛门的深测量肛门内体温。肛温计插入肛门的深度应各兔相同；通常为度应各兔相同；通常为6cm6cm左右，每隔左右，每隔30306060分钟，即分钟，即测量体温测量体温1 1次。通常测次。通常测2 23 3次。最后两次所测体温之差次。最后两次所测体温之差不得超过不得超过0 022。以此两次体温的平均值作为该免的正。以此两次体温的平均值作为该免的正常体温。当日使用的家兔，其正常体温应在常体温。当日使用的家兔，其正常体温应在3838OO，3 3只家兔之中有只家兔之中有1 1只的体温升高只的体温升高0 066或或0 066以上，或以上，或者者3 3只家兔的体温升高度数虽都低于只家兔的体温升高度数虽都低于0 066，但它们体，但它们体温升高的总度数却达到温升高的总度数却达到1 144或以上时，则应另取或以上时，则应另取5 5只只家兔进行复试。其检查方法同上。家兔进行复试。其检查方法同上。贫跳元田潜傈格崩艇釉顺孔巷疆咐薪夕书课祟堑代穆亚闻马个致噎掸沃雀牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室( (三三) )检查方法检查方法 取用适当的家兔取用适当的家兔3 3只，测定其正常体温后只，测定其正常体温后1515分钟之内，自分钟之内，自其耳缘静脉注入规定的剂量的供试品溶液，此时的溶液必其耳缘静脉注入规定的剂量的供试品溶液，此时的溶液必须已温热到须已温热到3838。在此之后，每隔。在此之后，每隔1 1小时便按前法测其体小时便按前法测其体温温1 1次，先后共测次，先后共测3 3次。次。3 3次体温中最高的次体温中最高的1 1次减去正常体温，次减去正常体温，得出该家兔体温的增高度数，以此指标来综合判断实验结得出该家兔体温的增高度数，以此指标来综合判断实验结果。可用乌拉坦果。可用乌拉坦( (氨基甲酸乙酯氨基甲酸乙酯) )腹腔麻醉，分离气管，用腹腔麻醉，分离气管，用动脉夹阻塞气管，然后用心电第动脉夹阻塞气管，然后用心电第导联观察心脏停跳时间，导联观察心脏停跳时间，作为死亡指标。作为死亡指标。芭箕墅掂舶盂系扭摇甸尽糕胺脏汲滥塘米层匡邮黍唬才俄嫩盈馈坟灼碧攫牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室( (四四) )结果判定结果判定 1 1初试初试3 3只家兔的体温升高均在只家兔的体温升高均在0 066以下，它们以下，它们体温升高的总度数在体温升高的总度数在1.4C1.4C时，应认为供试品符合规定。时，应认为供试品符合规定。 2 2如果如果3 3只家兔中仅有只家兔中仅有1 1只体温升高超过只体温升高超过0 066或或0 0。66以上，或者以上，或者3 3只家兔体温升高均低于只家兔体温升高均低于0 06cc6cc，但升，但升高总度数达高总度数达1 144或或1 144以上，则应另取以上，则应另取5 5只家免复只家免复试。如果在复试时，试。如果在复试时，5 5只家兔中体温升高只家兔中体温升高0 06cC6cC或或0 06C6C以上的家兔数仅有以上的家兔数仅有1 1只，并且初试和复试的只，并且初试和复试的8 8只家兔只家兔的体温升高总度数不超过的体温升高总度数不超过3 355，则可认为复试的供，则可认为复试的供试品符合规定。试品符合规定。 精矾饭崭骏滞橙采镑款誉丑尘怨节病邱乔多感链涟障荷蹭拆冯灸熬搀结澡牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室3 3如果初试的如果初试的3 3只家兔当中，体温升高只家兔当中，体温升高0 066或或0 066以上的家兔数超过以上的家兔数超过1 1只，或者复试的只，或者复试的5 5只家兔当中，体只家兔当中，体温升高温升高0 066或或0 066以上的家兔数超过以上的家兔数超过1 1只，或者初只，或者初试和复试的试和复试的8 8只家兔的体温升高总度数超过只家兔的体温升高总度数超过3.53.5，则，则应认为供试品不符合规定。应认为供试品不符合规定。 4 4如果供试品是放射性药物，而测试的如果供试品是放射性药物，而测试的3 3只家兔体只家兔体温升高总度数在温升高总度数在1 144以下，其中体温升高以下，其中体温升高0 066或或0 066以上的家兔仅有以上的家兔仅有1 1只，则可以认为供试品符合热只，则可以认为供试品符合热原检查规定，否则，均应认为供试品不符合热原检查原检查规定，否则，均应认为供试品不符合热原检查规定。规定。做叶演豪舔苦气召毕粉频许么筐攘惰贿饵趣巧骆悼棱些咎佯眉戈鼎屋喝搪牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室十、局部刺激性试验十、局部刺激性试验 有些中草药或制剂因含有杂质较多，对人体组织有刺激性，有些中草药或制剂因含有杂质较多，对人体组织有刺激性，严重者可能引起炎症、水肿、组织变化或坏死，对用药的严重者可能引起炎症、水肿、组织变化或坏死，对用药的局部刺激尤其巨大。因此，应根据使用情况进行刺激性实局部刺激尤其巨大。因此，应根据使用情况进行刺激性实验，以便掌握该药物的特点，为选择给药途径提供依据，验，以便掌握该药物的特点，为选择给药途径提供依据，或者据以采取适当的措施，减少或或者据以采取适当的措施，减少或 消除该药物的刺激性。实验方法如下：消除该药物的刺激性。实验方法如下： (一一)兔角膜法兔角膜法 取家兔取家兔2只。试验前先检查眼结膜血管，角膜透明度及眼只。试验前先检查眼结膜血管，角膜透明度及眼分泌物等。选用一切正常的家兔供试。把被试药物用氯化分泌物等。选用一切正常的家兔供试。把被试药物用氯化钠调节至接近等渗。取药液钠调节至接近等渗。取药液2滴滴(00501m1)滴入左滴入左眼结膜囊中，让其停留眼结膜囊中，让其停留2分钟；右眼滴人同量的生理盐水分钟；右眼滴人同量的生理盐水作为对照。观察作为对照。观察1至数小时，必要时，须观察到作用消失至数小时，必要时，须观察到作用消失为止。为止。 托允帖桩燃喻搅傈兑南穗弥韵客帖先差搓帝什崖字盒署叮剐阵耳袄诺菩吝牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室(二二)兔耳皮下注射法兔耳皮下注射法 取家兔取家兔23只，将两耳中部的被毛剪光，在左耳中部只，将两耳中部的被毛剪光，在左耳中部皮下注射被试药液皮下注射被试药液0.lml右耳中部皮下注射生理盐水右耳中部皮下注射生理盐水01ml。注射时应避开小血管。然后，观察注射局部。注射时应避开小血管。然后，观察注射局部有无红肿，充血等受刺激现象。如每只家兔的受药耳有无红肿，充血等受刺激现象。如每只家兔的受药耳与对照耳比较，均有较重的红肿和充血现象，这说明与对照耳比较，均有较重的红肿和充血现象，这说明该物有刺激作用。还可以测量注药部位充血的直径，该物有刺激作用。还可以测量注药部位充血的直径，以比较各药物的刺激性大小。以比较各药物的刺激性大小。 本实验应一直观察到作用完全消失为止。同时，还应本实验应一直观察到作用完全消失为止。同时，还应该注意局部药物吸收情况，有无结或坏死现象。该注意局部药物吸收情况，有无结或坏死现象。粟旷吸住澡俄参狸拷炉睦湖屡姓基筏半呻槛计庙斟雌踢墅葫罩衙脚聊度帖牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 (三三)腿肌注射法腿肌注射法 可供试验的动物有家兔、大鼠、小鼠。将被试药物可供试验的动物有家兔、大鼠、小鼠。将被试药物1ml，分别注射人家兔左、右后臀部股四头肌部位分别注射人家兔左、右后臀部股四头肌部位(如系小鼠则如系小鼠则注射注射01ml；大鼠注射；大鼠注射02ml左右左右)。24小时后小时后(必要必要时，待时，待23天后天后)将动物处死，切开注射部位肌肉，观察将动物处死，切开注射部位肌肉，观察有无充血、水肿、变性或坏死等现象，必要时要取出小块有无充血、水肿、变性或坏死等现象，必要时要取出小块组织，作病理切片。组织，作病理切片。 (四四)结果判定标志结果判定标志 无刺激，以无刺激，以“”表示；表示； 极轻度刺激，以极轻度刺激，以“”表示；表示； 轻度刺激，以轻度刺激，以“+”表示；表示； 中度刺激，以中度刺激，以“+”表示；表示； 重度刺激，以重度刺激，以“+表示；。表示；。 严重度刺激，以严重度刺激，以“+”表示；表示； 极严重度刺激，以极严重度刺激，以“+”表示表示猛研杠颜依世象记言秽碳貌拾侮乘瓤岳措拾扔丰寿诡懂鲍竣歌沾宗靴应虑牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室十一、溶血实验十一、溶血实验 某些中药注射剂，由于含有皂甙或由于其它物理、化学某些中药注射剂，由于含有皂甙或由于其它物理、化学与生物学方面的原因，注入血液内以后，可能产生溶血作与生物学方面的原因，注入血液内以后，可能产生溶血作用。也有些注射剂中含有少量鞣质等杂质，注入局部后会用。也有些注射剂中含有少量鞣质等杂质，注入局部后会引起胀痛；注入血液后可引起血球凝集，造成血液循环机引起胀痛；注入血液后可引起血球凝集，造成血液循环机能障碍等不良反应。因此，在使用这类注射剂，尤其是供能障碍等不良反应。因此，在使用这类注射剂，尤其是供静脉注射用的中草药注射剂之前，必须作溶血试验。一般静脉注射用的中草药注射剂之前，必须作溶血试验。一般说来，肌肉注射剂由于剂量相对少些，肌肉注射后能逐渐说来，肌肉注射剂由于剂量相对少些，肌肉注射后能逐渐吸收，逐渐被血液稀释，影响不致太大。操作过程如下：吸收，逐渐被血液稀释，影响不致太大。操作过程如下： 炭捞窝芜砧盲婶诛摆锡操疮况孝贾虱父吁楞狙惧乘忽譬恕焙嘉粳腹豺替铰牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室( (一一) )配制血液悬浮液配制血液悬浮液 取兔血取兔血( (或羊血、犬血或羊血、犬血)5)5lOmllOml，放入洁净干燥的小烧，放入洁净干燥的小烧杯中，用竹管或玻璃棒搅拌出去纤维蛋白。然后加入杯中，用竹管或玻璃棒搅拌出去纤维蛋白。然后加入生理盐水生理盐水5 5lOmllOml，摇晃均匀，离心，倾倒出上层清液。，摇晃均匀，离心，倾倒出上层清液。如此反复数次，直至上层清液不再是红色为止。量取如此反复数次，直至上层清液不再是红色为止。量取血球。加生理盐水稀释成血球。加生理盐水稀释成2 2的悬浮液，供试验用。的悬浮液，供试验用。钱匣亿绿拽抒坑姚睡跃硕乘趾流铭恭除谍侨啸藐煮原朱拿恕那郝擦截对祝牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 (二二)测试方法测试方法 取试管取试管6只，编号，按下列顺序加入各种溶液：只，编号，按下列顺序加入各种溶液： 表表 药品的溶血试验药品的溶血试验 试管编号试管编号123456实验药液实验药液（ml）生理盐水生理盐水（ml）2%（ml）疵信哀澜苟瓤倪油戒骄哪焰隅睡尚雄垮仅幢驰擎抱窑仍控毗坤彦脓霉亢叔牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室第第6试管为对照管。将各管溶液轻轻摇匀，置于试管为对照管。将各管溶液轻轻摇匀，置于37恒温恒温箱中箱中(或或2527室温中室温中)观察并记录观察并记录12、1、2、3小时的结果。如溶液变清并染红色，即表示溶血。必小时的结果。如溶液变清并染红色，即表示溶血。必要时，可用显微镜观察红血细胞是否破裂。如要时，可用显微镜观察红血细胞是否破裂。如03ml药液在半小时内引起溶血者，即不宜作注射用。最好药液在半小时内引起溶血者，即不宜作注射用。最好的是的是03ml药液在药液在3小时内不引起溶血。小时内不引起溶血。 如有血细胞凝集的现象，可按下法进一步判定，即凝如有血细胞凝集的现象，可按下法进一步判定，即凝集物在试管振摇后均匀分散，或将凝集物放在载玻片集物在试管振摇后均匀分散，或将凝集物放在载玻片上，在波动边缘滴上上，在波动边缘滴上2滴生理盐水，在显微镜下观察。滴生理盐水，在显微镜下观察。如凝集红细胞能被冲散者，称为假凝集，此供试品可如凝集红细胞能被冲散者，称为假凝集，此供试品可临床应用。如凝集物不能被摇散或在玻璃斤上小板临床应用。如凝集物不能被摇散或在玻璃斤上小板VBI者，称为真凝集，其制品不宜临床使用。者，称为真凝集，其制品不宜临床使用。辊绚尉驴究氦倡纵莽桅乡把硼憋贤掩锄赖庆妻益寡傣羽劈诊墟奈泳明悔朋牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 十二、过敏实验十二、过敏实验 过敏，多数是机体对药物的变态反应，可强烈地表现于机体过敏，多数是机体对药物的变态反应，可强烈地表现于机体的各个系统，引起血管神经水肿、红斑、皮疹等，严重者的各个系统，引起血管神经水肿、红斑、皮疹等，严重者胸闷气短，血压下降，甚至休克或死亡。通常含异性蛋白胸闷气短，血压下降，甚至休克或死亡。通常含异性蛋白质的注射剂易引起过敏反应。必须按具体情况决定，是否质的注射剂易引起过敏反应。必须按具体情况决定，是否要作过敏实验。具体作法如下：取豚鼠要作过敏实验。具体作法如下：取豚鼠6只，体重只，体重250350g，最好是雄性。已做过敏实验的豚鼠不得再用作此，最好是雄性。已做过敏实验的豚鼠不得再用作此项实验。间日腹腔注射项实验。间日腹腔注射03ml的药液的药液(应取用没有附加剂应取用没有附加剂的原药液的原药液)连续连续3次。将实验豚鼠分为两组。第一次注射后，次。将实验豚鼠分为两组。第一次注射后，过过14天和天和21天再注射第二、三次。可由耳缘静脉或股静天再注射第二、三次。可由耳缘静脉或股静脉注射供试药液脉注射供试药液12ml。注射后。注射后15分钟，观察有无过敏分钟，观察有无过敏反应，如蜷缩、竖毛、呼吸困难，甚至死亡。如注射后反应，如蜷缩、竖毛、呼吸困难，甚至死亡。如注射后15分钟内无上述症状，则可认为过敏实验阴性。如仅有个别分钟内无上述症状，则可认为过敏实验阴性。如仅有个别症状，不易判断时，应重作实验。症状，不易判断时，应重作实验。俐贞键警摄完界玉淡违钻嘎于兢隧咕簿蜀筹骨改俱鸡筷份蹈嫩呜献愉壤骂牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室第二节第二节 毒性试验毒性试验 新药新药( (中西药制剂中西药制剂) )研制过程中，为保证用药安全，在临研制过程中，为保证用药安全，在临床试用前，应进行系统的药物毒性试验。通过毒性试验，床试用前，应进行系统的药物毒性试验。通过毒性试验，可全面了解新药的毒性和副作用，中毒和致死量等，为临可全面了解新药的毒性和副作用，中毒和致死量等，为临床试用提供参考和依据。床试用提供参考和依据。 根据新药用药次数或周期，药物性质或应用特点，可进根据新药用药次数或周期，药物性质或应用特点，可进行急性毒性和长期毒性试验等。行急性毒性和长期毒性试验等。一、急性毒性试验一、急性毒性试验 ( (一一) )小鼠或大鼠急性毒性试验小鼠或大鼠急性毒性试验 1 1半数致死量半数致死量(LD5o)(LD5o)的测定的测定 目的：观察受试物一次给予动物后，所产生的毒性反应和目的：观察受试物一次给予动物后，所产生的毒性反应和死亡情况。死亡情况。 动物分组和剂量动物分组和剂量 动物：一般用小白鼠动物：一般用小白鼠6 68 8周龄，体重周龄，体重181822g22g，同次试验，同次试验体重相差不超过体重相差不超过2g82g8周龄，体重周龄，体重120120150g150g同次试验体重相同次试验体重相差不超过差不超过10g10g。 受试物：溶于水的做成溶液，不溶于水的做成混悬液。受试物：溶于水的做成溶液，不溶于水的做成混悬液。虑蹋常谓悦奄滦别肛窑她兴僻惭盅畜砸辊侥睡宇疆席椿扭摹蒙滴裙拢指脚牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 试验方法试验方法 剂量：一般选用剂量：一般选用3 35 5个剂量，各剂量间剂根据受试物情况个剂量，各剂量间剂根据受试物情况和预试结果而定。和预试结果而定。大白鼠大白鼠6 6 给药途径：应与临床试验的途径相一致。口服药物应灌给药途径：应与临床试验的途径相一致。口服药物应灌胃给药，水溶性好的药物应测定静脉给药的急性毒性。胃给药，水溶性好的药物应测定静脉给药的急性毒性。 绐药容积：小白鼠禁食绐药容积：小白鼠禁食(12(121616小时小时) )，不禁水。按体重，不禁水。按体重计算：灌胃不超过计算：灌胃不超过0 04ml4ml10g10g体重：静脉内、腹腔内和体重：静脉内、腹腔内和皮下，不超过皮下，不超过0 05ml5ml只。只。 大白鼠禁食大白鼠禁食(12(121616小时小时) )，不禁水。灌胃不超过，不禁水。灌胃不超过3mi3mi只；腹腔只；腹腔1 15ml5ml只：静脉和皮下测定只：静脉和皮下测定LD50LD50：将动物按体：将动物按体重随机分组，每组至少重随机分组，每组至少1010只，雌雄各半。给受试物后，立只，雌雄各半。给受试物后，立即观察动物反应情况，每天观察一次，连续观察七天。逐即观察动物反应情况，每天观察一次，连续观察七天。逐天详细记录动物毒性反应情况及死亡分布，并用适当统计天详细记录动物毒性反应情况及死亡分布，并用适当统计方法方法( (简化机率单位法，寇氏法等简化机率单位法，寇氏法等) )计算出计算出LD5oLD5o值及值及9595可可信限。列表表示。信限。列表表示。 迄所化蔑遭厄舌汕针嘱半捞跨花赞杠蔓邱卤芭胚抽汗银圈朝皇胯哦乓仪展牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室实验资料按下表列出，用适当的统计方法计算实验资料按下表列出，用适当的统计方法计算LD5oLD5o值值 表表LD50LD50统计表统计表受试物剂量受试物剂量 对数剂量对数剂量 动物数动物数 死亡动物数死亡动物数 死亡率死亡率 机率单位机率单位 LD50 LD50及可信限及可信限 （mg/kgmg/kg） （x x） （只）（只） （只）（只） （% %） （Y Y）靡苦畴珠县纠塑翻用吗匹兢祈级赏怒惋绘冶秧淳踞播馋鼻上炸耸仿春缅悼牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室观察毒性反应：给受试物后应严密观察反应情况，并记观察毒性反应：给受试物后应严密观察反应情况，并记录动物的外观，行为活动，精神状态，食欲录动物的外观，行为活动，精神状态，食欲( (饲料消耗饲料消耗量量) )，大、小便及其颜色、被毛、肤色、呼吸、鼻、眼、，大、小便及其颜色、被毛、肤色、呼吸、鼻、眼、口腔有无异常分泌物，体重变化以及死亡等情况。死口腔有无异常分泌物，体重变化以及死亡等情况。死亡动物应及时进行尸检，发现病变器官应做病理组织亡动物应及时进行尸检，发现病变器官应做病理组织学检查。学检查。 若发现中毒反应或死亡率与动物的性别明显相关时，若发现中毒反应或死亡率与动物的性别明显相关时，则应选择性别敏感的动物进行复试。则应选择性别敏感的动物进行复试。 试验报告和结果评价试验报告和结果评价 应详细具体，包括试验日期，动物的规格、性别、数应详细具体，包括试验日期，动物的规格、性别、数量、受试物来源及含量，试验方法。量、受试物来源及含量，试验方法。LD50LD50值及其值及其9595可信限，以及各剂量组的死亡率，或最大耐受量的值可信限，以及各剂量组的死亡率，或最大耐受量的值及其相当于临床剂量的倍数。详细报告实验过程中动及其相当于临床剂量的倍数。详细报告实验过程中动物出现的中毒表现及致死症状，综合评价受试物毒性物出现的中毒表现及致死症状，综合评价受试物毒性大大轰涉慰急簇豌抛碱瞎呈战潍忱厘匡金酉玄舅澡肤馆辞牙志操涯整忠噬宰匣牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室2 2最大耐受量最大耐受量(MTD)(MTD)的测定的测定 目的：当受试物目的：当受试物( (如中药制剂如中药制剂) )毒性较低，测不出毒性较低，测不出LD5oLD5o时，时，可以做一次或一日最大耐受量测定，也可反映受试物的毒可以做一次或一日最大耐受量测定，也可反映受试物的毒性情况。性情况。 方法：受试物可用临床试验的给药途径，以动物能耐受方法：受试物可用临床试验的给药途径，以动物能耐受的最大浓度、最大容积的剂量，一次或一日内的最大浓度、最大容积的剂量，一次或一日内2 23 3次给予次给予动物动物( (小白鼠至少小白鼠至少2020只雌雄各半只雌雄各半) )。连续观察七天，记录动。连续观察七天，记录动物反应情况，以不产生死亡的最大剂量为最大耐受量。计物反应情况，以不产生死亡的最大剂量为最大耐受量。计算出总给予药量算出总给予药量g gkg(kg(中药制剂相当于生药量中药制剂相当于生药量g gkg)kg)表示，表示，推算出相当于临床用药量的倍数。推算出相当于临床用药量的倍数。 测定最大耐受量，同样也应严密观察动物毒性反应情况，测定最大耐受量，同样也应严密观察动物毒性反应情况，要求与观察单次给药的毒性应相同。要求与观察单次给药的毒性应相同。卜邱舅轰呸透诉忠吻范绚忿碉蒲舱侥罚娠链曝调旨绞窝孔魔捧芒冰萄隅甥牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室( (二二) )狗的急性毒性试验狗的急性毒性试验 目的：测定单次给以受试物的近似致死量目的：测定单次给以受试物的近似致死量(ALD)(ALD)最大耐受最大耐受量量(MTD)(MTD)和急性中毒表现。和急性中毒表现。 受试物：应写明名称、批号、来源、纯度、质量规格、保受试物：应写明名称、批号、来源、纯度、质量规格、保存条件、配制方法。存条件、配制方法。 给药途径：同临床用药途径，用等容量不等浓度给药法。给药途径：同临床用药途径，用等容量不等浓度给药法。 动物：动物：6 6只，雌雄不限，实验前需观察只，雌雄不限，实验前需观察1 1周，择体重相近的周，择体重相近的成年健康动物进行试验。成年健康动物进行试验。 试验方法：估计可能的毒性范围。根据小动物的毒性试试验方法：估计可能的毒性范围。根据小动物的毒性试验，药物的化学结构和其它有关资料，估计可能引起中毒验，药物的化学结构和其它有关资料，估计可能引起中毒和死亡的剂量范围。按和死亡的剂量范围。按5050递增法，设计出含递增法，设计出含10102020个剂个剂量序列表。根据估计，由剂量序列表中找出可能的致死剂量序列表。根据估计，由剂量序列表中找出可能的致死剂量范围，在此范围内，每间隔一个剂量给一只动物，测出量范围，在此范围内，每间隔一个剂量给一只动物，测出最低致死剂量和最高非致死剂量，然后用二者之间的剂量最低致死剂量和最高非致死剂量，然后用二者之间的剂量给一只动物，此剂量即为所要求的近似致死剂量给一只动物，此剂量即为所要求的近似致死剂量。 悸策杯吃奄出蝉笺肠聪焙鸦袍闲氓唐弧坐咯霉谬给胸寨娶令僧豫年登街察牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室观察记录：仔细观察记录各动物的中毒表现，毒性持续观察记录：仔细观察记录各动物的中毒表现，毒性持续和消失时间，特点和死亡时间，未发现中毒表现的最和消失时间，特点和死亡时间，未发现中毒表现的最高剂量为最大耐受量。高剂量为最大耐受量。给药后观察给药后观察1414天，当天给药后持续观察天，当天给药后持续观察3030分钟，第分钟，第1 1、4 4小时再观察一次，以后每天观察一次。中毒死亡或中小时再观察一次，以后每天观察一次。中毒死亡或中毒表现明显者，需作大体解剖检查。毒表现明显者，需作大体解剖检查。报告内容：近似致死剂量，最大耐受量，中毒表现和尸报告内容：近似致死剂量，最大耐受量，中毒表现和尸解结果。解结果。 沿惹眶潞今婿捍蓬惠阔悍漆屉崭扯愈轩本恼儡匀蔬锹仇邢谎凋呜兵速值番牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室二、长期毒性试验二、长期毒性试验( (二二) )大鼠的长期毒性试验大鼠的长期毒性试验目的：观察连续重复给予受试物对大鼠所产生的毒性反应，目的：观察连续重复给予受试物对大鼠所产生的毒性反应，首先出现的症状和严重程毒副反应的靶器官及其恢复和首先出现的症状和严重程毒副反应的靶器官及其恢复和发展情况。确定无毒反应剂量，为拟定人用安全剂量提发展情况。确定无毒反应剂量，为拟定人用安全剂量提供供动物：健康大白鼠，每组至少动物：健康大白鼠，每组至少2020只。如试验周期为三个月只。如试验周期为三个月以上，应根据需要增加数量至每组以上，应根据需要增加数量至每组30304040只，体重差异只，体重差异应不超过平均体重的应不超过平均体重的2020。试验期在三个月之内，用。试验期在三个月之内，用6 68 8周龄周龄大鼠：超过三个月，宜用大鼠：超过三个月，宜用6 6周龄大鼠。雌雄各半，随机分周龄大鼠。雌雄各半，随机分组，每笼不超过组，每笼不超过5 5只，雌雄分笼饲养。试验前至少观察只，雌雄分笼饲养。试验前至少观察一周，记录食量和体重等。一周，记录食量和体重等。 俞颧粤浸岂唉宾蛮受游润萎厨仑吱曾杖杯煮够松洪凋摆疾豌酥发晕座渝毕牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室剂量和分组：一般设三个剂量组和一个对照组。高剂量组剂量和分组：一般设三个剂量组和一个对照组。高剂量组原则上要求使动物产生明显的或严重的毒性反应，或个原则上要求使动物产生明显的或严重的毒性反应，或个别动物死亡。中剂量组应相当于药效学试验的高剂量。别动物死亡。中剂量组应相当于药效学试验的高剂量。低剂量组略高于动物的有效剂量而不出现毒性反应。低剂量组略高于动物的有效剂量而不出现毒性反应。 如果急性毒性试验结果毒性很低如果急性毒性试验结果毒性很低( (如中药制如中药制) )，测不出，测不出LD50LD50，也未见明显的毒性反应，可设高、低两个剂量组。，也未见明显的毒性反应，可设高、低两个剂量组。高剂量组一般为拟用于临床剂量高剂量组一般为拟用于临床剂量5050倍以上并应高于药效倍以上并应高于药效学试验之高剂量。学试验之高剂量。 对照组的设置：如受试物为提取物对照组的设置：如受试物为提取物( (如浸膏如浸膏) )，对照物，对照物可考虑用常水；如含溶媒，对照物为溶媒；如含赋形剂，可考虑用常水；如含溶媒，对照物为溶媒；如含赋形剂，则对照物用赋形剂。如溶媒或赋形剂可能产生毒性时，则对照物用赋形剂。如溶媒或赋形剂可能产生毒性时，则应另加一空白对照组则应另加一空白对照组( (常水常水) )。烛纯抖兼归葛囚陈泰霖彰轩端回翼酸褂隋鸿酥吩荒树爱牙域呜焚卑朵珍忧牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室给药途径：应与推荐临床的途径一致。口服药物应经口给药。给药途径：应与推荐临床的途径一致。口服药物应经口给药。临床用药途径为静脉注射时，可用其它适宜的注射途径代临床用药途径为静脉注射时，可用其它适宜的注射途径代替。替。 口服药，大鼠一般用灌胃法，也可将受试物混在饲料，水口服药，大鼠一般用灌胃法，也可将受试物混在饲料，水中给予，但每只动物分笼饲养，采取适当措施，保证每只中给予，但每只动物分笼饲养，采取适当措施，保证每只动物按规定剂量在一定时限内服入。动物按规定剂量在一定时限内服入。 受试物最好是每周受试物最好是每周7天连续给予，如试验周期在天连续给予，如试验周期在90天以上，天以上，可考虑每周给药可考虑每周给药6天，每天定时给药。天，每天定时给药。 给药容量一般为给药容量一般为12rnllOOg体重，每周可根据体重情体重，每周可根据体重情况调整给药量，但总量不宜超过况调整给药量，但总量不宜超过5ml鼠次。各剂量组鼠次。各剂量组用不等浓度等容量给药。用不等浓度等容量给药。 试验同期：若临床用药周期试验同期：若临床用药周期在在1周以内者，长毒试验应为周以内者，长毒试验应为2周；周；2周以内者，应为周以内者，应为4周；周；4周以上者，长期毒性试验的给药期一般为临床试验用药周以上者，长期毒性试验的给药期一般为临床试验用药期的两倍以上。期的两倍以上。炸弟依诅磊喜伞状振魂降孤福肝臃历胯学湍妄根绩微况瞄玻鹿点验鲤葱园牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 检查项目：检查项目： 一般观察：进食量、体重、外观体征和行为活动、粪便一般观察：进食量、体重、外观体征和行为活动、粪便性状等，发现有中毒反应的动物应取出单笼饲养，重点观性状等，发现有中毒反应的动物应取出单笼饲养，重点观察。发现死亡或濒死动物，应及时尸检。察。发现死亡或濒死动物，应及时尸检。 血液学指标：红细胞或网织红细胞计数，血红蛋白，白血液学指标：红细胞或网织红细胞计数，血红蛋白，白细胞计数，血小板计数，凝血时间。细胞计数，血小板计数，凝血时间。 血液生化学指标：天门冬氨酸氨基转换酶血液生化学指标：天门冬氨酸氨基转换酶(AST)(AST)、丙氨、丙氨酸氨基转换酶酸氨基转换酶(ALT)(ALT)、碱性磷酸酶、碱性磷酸酶(AIJ)(AIJ)、尿素氮、尿素氮(BUN)(BUN)、总蛋白总蛋白(TP)(TP)、白蛋白、白蛋白(ALB)(ALB)，血糖，血糖(GLU)(GLU)、总胆红素、总胆红素(T-(T- BIL) BIL)、肌酐、肌酐(Grea)(Grea)、总胆固醇、总胆固醇(T-CH0)(T-CH0)。 系统尸解：应全面细致，发现异常器官，应重点进行病系统尸解：应全面细致，发现异常器官，应重点进行病理组织学检查。理组织学检查。 葛向而抡醇乔园谴山撰纺铆拳裹拄毅碑吟秆握恍园随线烦疙年钻巨海诵欠牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室脏器称重和脏器系数：剖解后取出心、肝、脾、肺、肾、脏器称重和脏器系数：剖解后取出心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状腺、睾丸、卵巢、子宫、前列腺。肾上腺、甲状腺、睾丸、卵巢、子宫、前列腺。 病理组织学检查：高剂量组，对照组动物及尸检发病理组织学检查：高剂量组，对照组动物及尸检发现异常器官，检查要详细。其它剂量组可取材保存。现异常器官，检查要详细。其它剂量组可取材保存。在高剂量组发现有异常病变时，才进行检查。根据药在高剂量组发现有异常病变时，才进行检查。根据药物的选择作用特点和可能的靶器官，应增减检查相应物的选择作用特点和可能的靶器官，应增减检查相应的脏器，如：心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状腺、的脏器，如：心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状腺、垂体、前列腺、胸腺、睾丸垂体、前列腺、胸腺、睾丸( (连附睾连附睾) )，卵巢、子宫、，卵巢、子宫、胃、十二指肠、回肠、结肠、胰腺、膀胱、淋巴结、胃、十二指肠、回肠、结肠、胰腺、膀胱、淋巴结、脑、脊髓、胸骨脑、脊髓、胸骨( (骨和骨髓骨和骨髓) )、视神经、视神经骋钎访带荔琅彩桓廉窝皂赞僵栓塞忍鼠画禁仗果迈缝炮遇混置煤腮双耍妓牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 可逆性观察：最后一次给药后可逆性观察：最后一次给药后2424小时，每组活杀部分动物小时，每组活杀部分动物(2(23 31 12)2)，检测各项指标，余下动物停药，继续观察，检测各项指标，余下动物停药，继续观察2 24 4周。周。2424小时后的病理学检查发现有异常变化，应将余小时后的病理学检查发现有异常变化，应将余下动物活杀剖检，重点观察毒性反应器官，以了解毒性反下动物活杀剖检，重点观察毒性反应器官，以了解毒性反应的可逆程度和可能出现的迟缓性毒性。应的可逆程度和可能出现的迟缓性毒性。 结果评价：所获得的实验结果应进行统计处理，根据实验结果评价：所获得的实验结果应进行统计处理，根据实验目的，结合所观察到的毒性表现作恰如其分的评价。目的，结合所观察到的毒性表现作恰如其分的评价。馏块贿赚粕羞驴硫街祥衰犯钉浦轰译赃晚荆狙辅酣志荆概态添颇爽雀橙翌牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室( (二二) )狗的长期毒性试验狗的长期毒性试验 目的：观察连续重复给予受试物对狗所产生的毒性反应，目的：观察连续重复给予受试物对狗所产生的毒性反应，首先出现的症状和严重程度，提供毒副反应的靶器官及其首先出现的症状和严重程度，提供毒副反应的靶器官及其恢复和发展情况，确定无毒反应剂量，为拟定人用安全剂恢复和发展情况，确定无毒反应剂量，为拟定人用安全剂量提供参考。量提供参考。 动物：一般首选动物：一般首选BeagleBeagle狗，应写明供应单位，生产合格狗，应写明供应单位，生产合格证号。根据试验周期的长短，选用证号。根据试验周期的长短，选用4 41212月龄。也可用杂月龄。也可用杂种狗，采用性成熟青年犬，其年龄应不超过种狗，采用性成熟青年犬，其年龄应不超过5 5年为宜。年为宜。 饲养管理：饲料写明供应单位、提供配方及成分含量、饲养管理：饲料写明供应单位、提供配方及成分含量、动物实验合格证号、动物室内温度、湿度、光照和通风条动物实验合格证号、动物室内温度、湿度、光照和通风条件。动物应单笼饲养，定量喂食，件。动物应单笼饲养，定量喂食，BeagleBeagle狗实验前至少驯狗实验前至少驯养养1 1周，杂种狗应先检疫，驱虫，需观察周，杂种狗应先检疫，驱虫，需观察3 3周。试验前应测周。试验前应测心电心电(导联导联ECG)ECG)，并作血液学和血液生化学分析，择其，并作血液学和血液生化学分析，择其正常、健康、雌性无孕者作为受试动物，每组动物正常、健康、雌性无孕者作为受试动物，每组动物4 46 6只，只，雌雄各半，随机分组。记录试验前一周的食量及体重。雌雄各半，随机分组。记录试验前一周的食量及体重。疲挽禽慕泛曝汐伙嗽掘版倡绰捣垃陵干涅普林悠帐果侵殃圃病许哲硕墓鸳牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室受试物应写明名称、批号、来源、纯度、规格、保存条件及受试物应写明名称、批号、来源、纯度、规格、保存条件及配制方法。配制方法。 剂量和分组：一般设剂量和分组：一般设2 23 3个剂量组和一个对照组。剂量个剂量组和一个对照组。剂量一般用一般用g(g(或或mg)mg)kgkg或单位或单位kgkg表示。低剂量应高于临床表示。低剂量应高于临床试验人用日最高剂量或按体表面积折算的动物药效学有效试验人用日最高剂量或按体表面积折算的动物药效学有效剂量，低剂量组不应出现毒性反应，属基本安全剂量。高剂量，低剂量组不应出现毒性反应，属基本安全剂量。高剂量原则上应使动物产生明显的或严重的毒性反应，或个剂量原则上应使动物产生明显的或严重的毒性反应，或个别动物死亡。在高、低两个剂量之间按等比关系再设置一别动物死亡。在高、低两个剂量之间按等比关系再设置一个中剂量，此剂量应使动物产生轻微的或中等程度的毒性个中剂量，此剂量应使动物产生轻微的或中等程度的毒性反应。反应。 对照组不给受试物，仅给等容量的溶媒或赋形剂。如这对照组不给受试物，仅给等容量的溶媒或赋形剂。如这些成分可能有毒性时，应另加一组空白对照。些成分可能有毒性时，应另加一组空白对照。 限度试验：如从中药提取单体或有效部位经小鼠急性毒限度试验：如从中药提取单体或有效部位经小鼠急性毒性口服给药剂量大于性口服给药剂量大于5g5gkgkg或注射给药剂量大于或注射给药剂量大于2g2gkgkg仍仍不出现毒性反应和死亡，或仅个别动物有毒性反应时，可不出现毒性反应和死亡，或仅个别动物有毒性反应时，可考虑只做一个高于临床拟用剂量考虑只做一个高于临床拟用剂量5050倍的剂量。倍的剂量。央柯锹含措棕休赢险累鹏檀摄佐页槽民鞘嵌滋乃梁北凹驮满液披潮腆究瑚牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 给药途径：受试物的给药途径与临床用药一致。口眼途径每天于给药途径：受试物的给药途径与临床用药一致。口眼途径每天于喂食前定时给予。若将受试物混入饲料或水中给予，每狗应分喂食前定时给予。若将受试物混入饲料或水中给予，每狗应分笼饲养，并采取严格有效措施，以保证每只狗按定量在一定时笼饲养，并采取严格有效措施，以保证每只狗按定量在一定时限内服完。经静脉，肌肉或皮下途径，其注射部位可于四肢或限内服完。经静脉，肌肉或皮下途径，其注射部位可于四肢或臀部等处交替进行。臀部等处交替进行。 受试物连续给予，最好是每周给予受试物连续给予，最好是每周给予7 7天。如试验周期为天。如试验周期为9090天天以上时，可考虑采用每周给以上时，可考虑采用每周给6 6天，每天给药时间应相同，并按天，每天给药时间应相同，并按每周体重变化调整给药量，按等容量不等浓度配制药物。每周体重变化调整给药量，按等容量不等浓度配制药物。 兔碟彩圃器椽滤匪蹄肪酮蔚杰厩墨挡费胚饱咕昨岿渡能赘掇爹盾洒热钞碧牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室试验周期：若临床用药周期在试验周期：若临床用药周期在1 1周以内者，长毒试验为周以内者，长毒试验为2 2周；周；2 2周以内者，应为周以内者，应为4 4周；周；4 4周以上者，长期毒性试验周以上者，长期毒性试验的给药期为临床试验用药期的两倍以上。的给药期为临床试验用药期的两倍以上。 检查项目：一般观察：如行为活动、恶心呕吐、流检查项目：一般观察：如行为活动、恶心呕吐、流涎、尿、便和食量消耗、体重变化等。心电检查：涎、尿、便和食量消耗、体重变化等。心电检查：导联导联ECGECG。 血液学指标：红细胞或网织红细胞计数，血红蛋白，血液学指标：红细胞或网织红细胞计数，血红蛋白，白细胞总数及其分类，血小板和凝血时间。白细胞总数及其分类，血小板和凝血时间。 血液生化学：血液生化学：天门冬氨酸氨基转换酶天门冬氨酸氨基转换酶(AST)(AST)、丙氨酸丙氨酸氨基转换酶氨基转换酶(ALT)(ALT)、碱性磷酸酶碱性磷酸酶(AIJ)(AIJ)、尿素氮、尿素氮(BUN)(BUN)、肌酐肌酐(Grea)(Grea)、总蛋白、总蛋白(TP)(TP)、白蛋白、白蛋白(ALB)(ALB)、血糖、血糖(GLU)(GLU)、总胆红素总胆红素(T-BIL)(T-BIL)、总胆固醇、总胆固醇(T-CHO)(T-CHO)。 尿液分析：一般常规。尿液分析：一般常规。锅坛懂酝附机劲略僻封祟募竣呐猴未伞矢沉络诅绒秤再庐欺眼紊辽挟纫该牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室 大体尸解和病理组织学检查：同大鼠长毒试验。大体尸解和病理组织学检查：同大鼠长毒试验。 可逆性观察：一般状况和症状，每天观察一次。每周称量可逆性观察：一般状况和症状，每天观察一次。每周称量体重和食量。试验周期在体重和食量。试验周期在3 3个月以内的，一般在给药前进个月以内的，一般在给药前进行一次全面的检查，包括心电图，血液学和血液生化学等行一次全面的检查，包括心电图，血液学和血液生化学等各项指标。在给药结束后和可逆性观察结束后，再分别进各项指标。在给药结束后和可逆性观察结束后，再分别进行上述各项指标的检测，并活杀动物作大体尸解和病理组行上述各项指标的检测，并活杀动物作大体尸解和病理组织学检查。如试验周期在织学检查。如试验周期在3 3个月以上的，可在给药中期再个月以上的，可在给药中期再进行进行1 12 2次心电图学检查、血液学和血液系列化学检查。次心电图学检查、血液学和血液系列化学检查。对有异常的指标可酌情增加测定次数，但抽血量和频度以对有异常的指标可酌情增加测定次数，但抽血量和频度以不影响动物健康为度。不影响动物健康为度。 对濒死或中毒死亡动物应及时检查。对濒死或中毒死亡动物应及时检查。 结果评价：所获得的实验结果应进行统计处理。根据实结果评价：所获得的实验结果应进行统计处理。根据实验目的，结合所观察到的毒性表现进行恰如其分的评价。验目的，结合所观察到的毒性表现进行恰如其分的评价。哮赠匝擂卖硷添蝉靛婪胀哺锦铂令桂喻抖恼涛已犯攘噪忆涣碗木愚娶录馆牡丹江医学院机能学教研室牡丹江医学院机能学教研室