实验实验2 2蛋白质的性质实验蛋白质的性质实验一、蛋白质等电点的测定一、蛋白质等电点的测定1.实验目的实验目的了解蛋白质的两性解离性质了解蛋白质的两性解离性质学习测定蛋白质等电点的一种方法学习测定蛋白质等电点的一种方法2.预期得到的结果及达到的训练效果预期得到的结果及达到的训练效果学会观察化学反应现象并解释现象学会观察化学反应现象并解释现象学会正确使用移液管学会正确使用移液管学习使用涡旋混合器学习使用涡旋混合器进一步学习实验报告书写的规范和原则：忠于实验本身而不是进一步学习实验报告书写的规范和原则：忠于实验本身而不是忠于课本；正确、精确使用科学的描述语言；加强深入、透彻忠于课本；正确、精确使用科学的描述语言；加强深入、透彻地分析讨论结果地分析讨论结果（三）蛋白质的沉淀类型：（三）蛋白质的沉淀类型：1.可逆沉淀：此时蛋白质分子的结构尚未发生显著变化，除去引起沉淀的因素后，蛋白质的沉淀仍能溶解于原来的溶剂中，并保持其天然性质而不变性。2.不可逆沉淀：此时蛋白质分子内部结构发生重大改变，蛋白质常变性而沉淀，不再溶于原来溶剂中。 蛋白质变性后，有时由于维持溶液稳定的条件仍然存蛋白质变性后，有时由于维持溶液稳定的条件仍然存在（如电荷），蛋白质并不析出。因此变性蛋白质并在（如电荷），蛋白质并不析出。因此变性蛋白质并不一定都表现为沉淀，而沉淀的蛋白质也未必都已变不一定都表现为沉淀，而沉淀的蛋白质也未必都已变性。性。几种沉淀蛋白质的方法几种沉淀蛋白质的方法1.蛋白质的盐析2.重金属离子沉淀蛋白质3.有机酸沉淀蛋白质4.有机溶剂沉淀蛋白质5.变性蛋白质的溶解性酪蛋白等酪蛋白等电点点测定定试管号蒸馏水（mL）0.01 mol/L蜡酸（mL）0. 1 mol/L蜡酸(mL)1. 0 mol/L蜡酸(mL)14.20.3-24.35-0.1534.0-0.543.7-0.8乙醇引起的乙醇引起的变性与沉淀性与沉淀 试剂 （mL）管号5%卵清蛋白质溶液0.1mol/L氢氧化钠溶液0.1mol/L盐酸溶液95%乙醇PH4.7缓冲溶液10.50.50.520.50.50.530.50.50.5振摇混匀后，观察各管有何变化。放置片刻向各管内加入水4毫升，然后在第2，3号管中各加一滴甲基红，再分别用0.1mol/L 醋酸溶液及0.05mol/L碳酸钠溶液中和之。观察各管颜色的变化和沉淀的生成。每管再加0.1mol/L盐酸溶液数滴，观察沉淀的再溶解 思考思考l蛋白质的等电点和沉淀反应都有什么实用意义？l蛋白质分子的水化层是如何形成的？