疾病动物模型的复制疾病动物模型的复制 瘫夯樊奠紊脂壬杂樟勉迂池姑筹诌船俩缺冗怖你慢聂里爆爵扫苇赤憋步穴动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用定义：定义：定义：定义：是生物医学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物是生物医学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物是生物医学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物是生物医学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物实验对象和材料。使用动物模型是现代科技中一种便于认识生实验对象和材料。使用动物模型是现代科技中一种便于认识生实验对象和材料。使用动物模型是现代科技中一种便于认识生实验对象和材料。使用动物模型是现代科技中一种便于认识生命科学客观规律的实验方法和手段。人类疾病的动物模型的研命科学客观规律的实验方法和手段。人类疾病的动物模型的研命科学客观规律的实验方法和手段。人类疾病的动物模型的研命科学客观规律的实验方法和手段。人类疾病的动物模型的研究，实质上是比较医学的应用科学。究，实质上是比较医学的应用科学。究，实质上是比较医学的应用科学。究，实质上是比较医学的应用科学。碱搜戌展化凡氮陈崭叙级妹嘉厨啥坏夷梳个焙珐窍幼剥青与谬唯揪房省骚动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用 在生物医学研究中应用动物模型是利用不同种类动物之间在生物医学研究中应用动物模型是利用不同种类动物之间在生物医学研究中应用动物模型是利用不同种类动物之间在生物医学研究中应用动物模型是利用不同种类动物之间生物学现象的一致性。例如，我们希望测试在一种动物中存在生物学现象的一致性。例如，我们希望测试在一种动物中存在生物学现象的一致性。例如，我们希望测试在一种动物中存在生物学现象的一致性。例如，我们希望测试在一种动物中存在的某个系统，将获得的知识外推到另一种动物，而模拟的目标的某个系统，将获得的知识外推到另一种动物，而模拟的目标的某个系统，将获得的知识外推到另一种动物，而模拟的目标的某个系统，将获得的知识外推到另一种动物，而模拟的目标通常为人类。通常为人类。通常为人类。通常为人类。研究的焦点不是所用动物的情况，而是这一动物研究的焦点不是所用动物的情况，而是这一动物研究的焦点不是所用动物的情况，而是这一动物研究的焦点不是所用动物的情况，而是这一动物生理学表现针对我们人类或其他动物种类的类推。因此，在这生理学表现针对我们人类或其他动物种类的类推。因此，在这生理学表现针对我们人类或其他动物种类的类推。因此，在这生理学表现针对我们人类或其他动物种类的类推。因此，在这种情况下称种情况下称种情况下称种情况下称“ “人类模型人类模型人类模型人类模型” ”将会更正确。将会更正确。将会更正确。将会更正确。荆恭额疮惭世抛镊楞系玖魏荔躯酒舷补柯羡至憾屠掘崭棉拇劳埃胡驶弓限动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用动物模型的优点动物模型的优点uu避免了在人体进行实验所带来的风险，如增加痛苦避免了在人体进行实验所带来的风险，如增加痛苦避免了在人体进行实验所带来的风险，如增加痛苦避免了在人体进行实验所带来的风险，如增加痛苦uu平时见不到的疾病可在动物身上复制出，如急性放射病及平时见不到的疾病可在动物身上复制出，如急性放射病及平时见不到的疾病可在动物身上复制出，如急性放射病及平时见不到的疾病可在动物身上复制出，如急性放射病及 烧伤和冻伤等烧伤和冻伤等烧伤和冻伤等烧伤和冻伤等uu可以克服人类某些疾病潜伏期长、病程长和发病率低的缺点可以克服人类某些疾病潜伏期长、病程长和发病率低的缺点可以克服人类某些疾病潜伏期长、病程长和发病率低的缺点可以克服人类某些疾病潜伏期长、病程长和发病率低的缺点uu可以严格控制实验条件，增强实验材料的可比性可以严格控制实验条件，增强实验材料的可比性可以严格控制实验条件，增强实验材料的可比性可以严格控制实验条件，增强实验材料的可比性uu又助于更全面认识疾病的本质又助于更全面认识疾病的本质又助于更全面认识疾病的本质又助于更全面认识疾病的本质封添肠逗糙蒂彤榨铜冻凰也欣创黄沤因贰暗印咖臆旗坤螟旷野伶延足整总动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用动物模型设计原则：动物模型设计原则：动物模型设计原则：动物模型设计原则：相似性：复制模型应尽可能近似人类疾病，最好能找到与相似性：复制模型应尽可能近似人类疾病，最好能找到与相似性：复制模型应尽可能近似人类疾病，最好能找到与相似性：复制模型应尽可能近似人类疾病，最好能找到与人类疾病相同的动物自发性疾病。如大鼠自发性高血压、小人类疾病相同的动物自发性疾病。如大鼠自发性高血压、小人类疾病相同的动物自发性疾病。如大鼠自发性高血压、小人类疾病相同的动物自发性疾病。如大鼠自发性高血压、小型猪自发性冠状动脉粥样硬化。型猪自发性冠状动脉粥样硬化。型猪自发性冠状动脉粥样硬化。型猪自发性冠状动脉粥样硬化。重复性：理想的模型应是可重复、可标准化的。应尽量选重复性：理想的模型应是可重复、可标准化的。应尽量选重复性：理想的模型应是可重复、可标准化的。应尽量选重复性：理想的模型应是可重复、可标准化的。应尽量选用标准化用标准化用标准化用标准化LALALALA、标准化实验设施、标准化饲养管理、标准化实、标准化实验设施、标准化饲养管理、标准化实、标准化实验设施、标准化饲养管理、标准化实、标准化实验设施、标准化饲养管理、标准化实验操作。验操作。验操作。验操作。引肩僚钉褂实升苗茅禁轿挑蓉紧题缺掠甚焊瞥篷弃颊撩咽阎蔬湍菏碉补家动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用可靠性：复制模型应特异地、可靠地反映该种疾病或某种可靠性：复制模型应特异地、可靠地反映该种疾病或某种可靠性：复制模型应特异地、可靠地反映该种疾病或某种可靠性：复制模型应特异地、可靠地反映该种疾病或某种 机能、代谢、结构变化，同时应具备该种疾病的主要症状和机能、代谢、结构变化，同时应具备该种疾病的主要症状和机能、代谢、结构变化，同时应具备该种疾病的主要症状和机能、代谢、结构变化，同时应具备该种疾病的主要症状和体征，并经受一系列检测得以证实。体征，并经受一系列检测得以证实。体征，并经受一系列检测得以证实。体征，并经受一系列检测得以证实。适用性和可控性：复制模型应尽量考虑今后临床能应用和适用性和可控性：复制模型应尽量考虑今后临床能应用和适用性和可控性：复制模型应尽量考虑今后临床能应用和适用性和可控性：复制模型应尽量考虑今后临床能应用和便于控制其疾病的发展，以利于开展研究工作。便于控制其疾病的发展，以利于开展研究工作。便于控制其疾病的发展，以利于开展研究工作。便于控制其疾病的发展，以利于开展研究工作。易行性和经济性易行性和经济性易行性和经济性易行性和经济性：满足实验需求的前提下尽量使用低成本满足实验需求的前提下尽量使用低成本满足实验需求的前提下尽量使用低成本满足实验需求的前提下尽量使用低成本实验动物，实验技术方法可行实验动物，实验技术方法可行实验动物，实验技术方法可行实验动物，实验技术方法可行瘴为截梅女廖澡匹蝶埠窑撵泄身翠岛扭憋欣胺遮币垢孪营拴伐唆助缉粥淀动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用医学动物模型的分类医学动物模型的分类u按产生原因分类按产生原因分类按产生原因分类按产生原因分类诱发性动物疾病模型：诱发性动物疾病模型：诱发性动物疾病模型：诱发性动物疾病模型：是指通过使用物理、化学、生物等致病是指通过使用物理、化学、生物等致病是指通过使用物理、化学、生物等致病是指通过使用物理、化学、生物等致病手段，人为地造成动物组织、器官或全身形成人类疾病动物模手段，人为地造成动物组织、器官或全身形成人类疾病动物模手段，人为地造成动物组织、器官或全身形成人类疾病动物模手段，人为地造成动物组织、器官或全身形成人类疾病动物模型，在功能、代谢、形态结构等方面有所改变，即人为地诱发型，在功能、代谢、形态结构等方面有所改变，即人为地诱发型，在功能、代谢、形态结构等方面有所改变，即人为地诱发型，在功能、代谢、形态结构等方面有所改变，即人为地诱发动物产生类似人类疾病模型。动物产生类似人类疾病模型。动物产生类似人类疾病模型。动物产生类似人类疾病模型。主要用途：药理学、毒理学、免疫学、肿瘤和传染病等。主要用途：药理学、毒理学、免疫学、肿瘤和传染病等。主要用途：药理学、毒理学、免疫学、肿瘤和传染病等。主要用途：药理学、毒理学、免疫学、肿瘤和传染病等。庄阵弯鬼疹椒座圃挟铡饱参井茵冰还玫脓甲委殷得躺育跨豁铜嚣程馁移巍动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用优优优优 点：点：点：点：制作方法简便，实验条件比较简单，其他因素容易制作方法简便，实验条件比较简单，其他因素容易制作方法简便，实验条件比较简单，其他因素容易制作方法简便，实验条件比较简单，其他因素容易控制，短时间内可复制大量的动物模型控制，短时间内可复制大量的动物模型控制，短时间内可复制大量的动物模型控制，短时间内可复制大量的动物模型不足之处：不足之处：不足之处：不足之处：诱发的与自然产生的在某些方面有所不同。而且诱发的与自然产生的在某些方面有所不同。而且诱发的与自然产生的在某些方面有所不同。而且诱发的与自然产生的在某些方面有所不同。而且有些人类疾病不能用人工方法诱发出来，有它的局限性。有些人类疾病不能用人工方法诱发出来，有它的局限性。有些人类疾病不能用人工方法诱发出来，有它的局限性。有些人类疾病不能用人工方法诱发出来，有它的局限性。脓侮孪苟筷诞糟哮刽录释牧磷嘴舶妓串演诗聂氓聋宗迸素禁瘴涧派襟那兜动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用特别提示特别提示特别提示特别提示 大多数诱发性疾病模型是部分性或同形性模型，因为即大多数诱发性疾病模型是部分性或同形性模型，因为即大多数诱发性疾病模型是部分性或同形性模型，因为即大多数诱发性疾病模型是部分性或同形性模型，因为即使以相同的致病因素作用于动物，所获结果通常与人类对使以相同的致病因素作用于动物，所获结果通常与人类对使以相同的致病因素作用于动物，所获结果通常与人类对使以相同的致病因素作用于动物，所获结果通常与人类对应的疾病也不尽相同。几乎没有诱发性疾病模型能够完全应的疾病也不尽相同。几乎没有诱发性疾病模型能够完全应的疾病也不尽相同。几乎没有诱发性疾病模型能够完全应的疾病也不尽相同。几乎没有诱发性疾病模型能够完全模拟人类相应疾病的病因、病程和病理。模拟人类相应疾病的病因、病程和病理。模拟人类相应疾病的病因、病程和病理。模拟人类相应疾病的病因、病程和病理。 诱发性疾病模型的关键是诱发性疾病（或异常）的病诱发性疾病模型的关键是诱发性疾病（或异常）的病诱发性疾病模型的关键是诱发性疾病（或异常）的病诱发性疾病模型的关键是诱发性疾病（或异常）的病理和结果与模拟人类疾病的情况相似。人类理和结果与模拟人类疾病的情况相似。人类理和结果与模拟人类疾病的情况相似。人类理和结果与模拟人类疾病的情况相似。人类SARSSARSSARSSARS冠状病毒冠状病毒冠状病毒冠状病毒可以致恒河猴发病，但是其病变严重程度要明显轻，疾病可以致恒河猴发病，但是其病变严重程度要明显轻，疾病可以致恒河猴发病，但是其病变严重程度要明显轻，疾病可以致恒河猴发病，但是其病变严重程度要明显轻，疾病的结局也显然不同。的结局也显然不同。的结局也显然不同。的结局也显然不同。典幸颖徒毫蹿闭俐墓危桑钮啄城涝谭踩绥辛柞偏肛聂富亡滦函帆疯莆忱愉动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用 药物性糖尿病模型药物性糖尿病模型药物性糖尿病模型药物性糖尿病模型链脲佐菌素链脲佐菌素链脲佐菌素链脲佐菌素STZSTZ 诱发性动脉粥样硬化模型诱发性动脉粥样硬化模型诱发性动脉粥样硬化模型诱发性动脉粥样硬化模型高脂饲料诱导高脂饲料诱导高脂饲料诱导高脂饲料诱导 豚鼠支气管痉挛模型豚鼠支气管痉挛模型豚鼠支气管痉挛模型豚鼠支气管痉挛模型 组胺诱导组胺诱导组胺诱导组胺诱导诺毖决孕虞肺把辰入信鸭爵扰吊溅耐送慎凭耐悍喉论芋到牢哲梅询狱危凤动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用自发性动物模型：自发性动物模型：自发性动物模型：自发性动物模型：指不加任何人工诱发，在自然条件下动物指不加任何人工诱发，在自然条件下动物指不加任何人工诱发，在自然条件下动物指不加任何人工诱发，在自然条件下动物自然产生的疾病，或者由于基因突变的异常表现通过遗传育自然产生的疾病，或者由于基因突变的异常表现通过遗传育自然产生的疾病，或者由于基因突变的异常表现通过遗传育自然产生的疾病，或者由于基因突变的异常表现通过遗传育种保留下来的动物疾病模型。其中包括近交系的肿瘤疾病模种保留下来的动物疾病模型。其中包括近交系的肿瘤疾病模种保留下来的动物疾病模型。其中包括近交系的肿瘤疾病模种保留下来的动物疾病模型。其中包括近交系的肿瘤疾病模型和突变系的遗传性疾病模型。突变系的遗传性疾病很多，型和突变系的遗传性疾病模型。突变系的遗传性疾病很多，型和突变系的遗传性疾病模型。突变系的遗传性疾病很多，型和突变系的遗传性疾病模型。突变系的遗传性疾病很多，可分为代谢性疾病、分子性疾病、特种蛋白合成异常性疾病等，可分为代谢性疾病、分子性疾病、特种蛋白合成异常性疾病等，可分为代谢性疾病、分子性疾病、特种蛋白合成异常性疾病等，可分为代谢性疾病、分子性疾病、特种蛋白合成异常性疾病等，如裸鼠。如裸鼠。如裸鼠。如裸鼠。 免遍噎涵局腺敝娟咆锻欣嫩翔捶诬咯拥眉群恼降敲随秉仓进光慨非转埃炬动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用现在已经记载和保存了数百个具有模拟人类相似疾病状态现在已经记载和保存了数百个具有模拟人类相似疾病状态现在已经记载和保存了数百个具有模拟人类相似疾病状态现在已经记载和保存了数百个具有模拟人类相似疾病状态的遗传性异常的品种和品系（的遗传性异常的品种和品系（的遗传性异常的品种和品系（的遗传性异常的品种和品系（http:/www.jax.orghttp:/www.jax.org）典型例子：典型例子：典型例子：典型例子：n n 自发性高血压大鼠自发性高血压大鼠自发性高血压大鼠自发性高血压大鼠n n 裸小鼠裸小鼠裸小鼠裸小鼠 审期余钒喉卵喧农缝市炒遵缸痞涎叶剐周截捆图故酸嫉柑患誓热愚拷传捐动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用自发性疾病模型的特点自发性疾病模型的特点自发性疾病模型的特点自发性疾病模型的特点 自发性疾病模型通常是同源性模型，动物疾病的自发性疾病模型通常是同源性模型，动物疾病的自发性疾病模型通常是同源性模型，动物疾病的自发性疾病模型通常是同源性模型，动物疾病的表型表型表型表型表表表表现与相应的人类疾病相似。这种表型的相似性通常扩展到模现与相应的人类疾病相似。这种表型的相似性通常扩展到模现与相应的人类疾病相似。这种表型的相似性通常扩展到模现与相应的人类疾病相似。这种表型的相似性通常扩展到模型动物对治疗的型动物对治疗的型动物对治疗的型动物对治疗的反应反应反应反应与人类患者相似。自发性动物模型在人与人类患者相似。自发性动物模型在人与人类患者相似。自发性动物模型在人与人类患者相似。自发性动物模型在人类疾病治疗方案的研发方面已经起到重要作用。类疾病治疗方案的研发方面已经起到重要作用。类疾病治疗方案的研发方面已经起到重要作用。类疾病治疗方案的研发方面已经起到重要作用。 近交系小鼠的基因突变由于它们同时拥有相应的同类系近交系小鼠的基因突变由于它们同时拥有相应的同类系近交系小鼠的基因突变由于它们同时拥有相应的同类系近交系小鼠的基因突变由于它们同时拥有相应的同类系或同品系，从而提供了优异的对照。因为近交系小鼠的疾病或同品系，从而提供了优异的对照。因为近交系小鼠的疾病或同品系，从而提供了优异的对照。因为近交系小鼠的疾病或同品系，从而提供了优异的对照。因为近交系小鼠的疾病通常为一个受累基因或部位产生了变异，可同时研究与这些通常为一个受累基因或部位产生了变异，可同时研究与这些通常为一个受累基因或部位产生了变异，可同时研究与这些通常为一个受累基因或部位产生了变异，可同时研究与这些突变小鼠相同的遗传背景的参照品系。突变小鼠相同的遗传背景的参照品系。突变小鼠相同的遗传背景的参照品系。突变小鼠相同的遗传背景的参照品系。 侄唤磅钨扣响仔冈毫牙缸岂右袜斧遮酝猛俊妇蒜婴穷撩琉拌护拍噬劳定炕动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用特别提示特别提示特别提示特别提示n n 受损的基因或基因序列常常导致其他基因的激活，从而动员受损的基因或基因序列常常导致其他基因的激活，从而动员受损的基因或基因序列常常导致其他基因的激活，从而动员受损的基因或基因序列常常导致其他基因的激活，从而动员代偿代谢机制。这些代偿机制人类和动物模型之间可能不同。代偿代谢机制。这些代偿机制人类和动物模型之间可能不同。代偿代谢机制。这些代偿机制人类和动物模型之间可能不同。代偿代谢机制。这些代偿机制人类和动物模型之间可能不同。n n 多数情况下，具有自发性疾病的近交系动物的保种和繁殖困多数情况下，具有自发性疾病的近交系动物的保种和繁殖困多数情况下，具有自发性疾病的近交系动物的保种和繁殖困多数情况下，具有自发性疾病的近交系动物的保种和繁殖困难，价格较贵。难，价格较贵。难，价格较贵。难，价格较贵。 n n 有些自发性疾病模型不便于应用。例如，利用近交系动物自有些自发性疾病模型不便于应用。例如，利用近交系动物自有些自发性疾病模型不便于应用。例如，利用近交系动物自有些自发性疾病模型不便于应用。例如，利用近交系动物自发性肿瘤模型进行治疗研究，常常要观察发性肿瘤模型进行治疗研究，常常要观察发性肿瘤模型进行治疗研究，常常要观察发性肿瘤模型进行治疗研究，常常要观察1 1 1 1年才有肿瘤发生，而年才有肿瘤发生，而年才有肿瘤发生，而年才有肿瘤发生，而且肿瘤发生的时间、种类和发生部位在个体之间常不一致，往且肿瘤发生的时间、种类和发生部位在个体之间常不一致，往且肿瘤发生的时间、种类和发生部位在个体之间常不一致，往且肿瘤发生的时间、种类和发生部位在个体之间常不一致，往往难于确诊和判定治疗效果。往难于确诊和判定治疗效果。往难于确诊和判定治疗效果。往难于确诊和判定治疗效果。拾倚卞逗囱梢擞害趁姑巢紧宅宣晴第稼旧著间绥设竣双访快遥赶妖器猿四动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用基因工程动物模型基因工程动物模型基因工程动物模型基因工程动物模型：指某些遗传性状通过基因工程手段而指某些遗传性状通过基因工程手段而指某些遗传性状通过基因工程手段而指某些遗传性状通过基因工程手段而被人为改造的动物。以对动物改造的手段不同可将其分为被人为改造的动物。以对动物改造的手段不同可将其分为被人为改造的动物。以对动物改造的手段不同可将其分为被人为改造的动物。以对动物改造的手段不同可将其分为三种类型：三种类型：三种类型：三种类型：n n 转基因动物转基因动物转基因动物转基因动物（transgenic animaltransgenic animal）n n 基因敲除动物（基因敲除动物（基因敲除动物（基因敲除动物（gene knock-out animalgene knock-out animal）n n 基因替换动物（基因替换动物（基因替换动物（基因替换动物（gene knock-in animalgene knock-in animal）复谍仇盘剿镐缸卸节臭奇邑攀祷狱蹦恳鞠嚏俗溪悍佬瓶搞拽尉耐皆螺坦锹动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用转基因动物：转基因动物：转基因动物：转基因动物：通过实验手段将新的遗传物质导入到动物胚胎细通过实验手段将新的遗传物质导入到动物胚胎细通过实验手段将新的遗传物质导入到动物胚胎细通过实验手段将新的遗传物质导入到动物胚胎细胞中，并能稳定遗传，由此获得的动物称为转基因动物。胞中，并能稳定遗传，由此获得的动物称为转基因动物。胞中，并能稳定遗传，由此获得的动物称为转基因动物。胞中，并能稳定遗传，由此获得的动物称为转基因动物。基因敲除动物：基因敲除动物：基因敲除动物：基因敲除动物：通过基因工程手段将已知基因去除，或用其他通过基因工程手段将已知基因去除，或用其他通过基因工程手段将已知基因去除，或用其他通过基因工程手段将已知基因去除，或用其他顺序相近基因取代，而获得的工程化动物。通常针对一个结构顺序相近基因取代，而获得的工程化动物。通常针对一个结构顺序相近基因取代，而获得的工程化动物。通常针对一个结构顺序相近基因取代，而获得的工程化动物。通常针对一个结构已知但功能未知的基因，通过观察基因敲除动物的情况，推测已知但功能未知的基因，通过观察基因敲除动物的情况，推测已知但功能未知的基因，通过观察基因敲除动物的情况，推测已知但功能未知的基因，通过观察基因敲除动物的情况，推测相应基因的功能。相应基因的功能。相应基因的功能。相应基因的功能。 基因替换基因替换基因替换基因替换动物动物动物动物: :与某个生理现象相关的两个基因中与某个生理现象相关的两个基因中与某个生理现象相关的两个基因中与某个生理现象相关的两个基因中, , , ,一个基因的一个基因的一个基因的一个基因的编码区被另一个基因的编码区所替代的工程化小鼠。编码区被另一个基因的编码区所替代的工程化小鼠。编码区被另一个基因的编码区所替代的工程化小鼠。编码区被另一个基因的编码区所替代的工程化小鼠。 鲤结咕淖招赐萝罚禹脖做圈绑栋讥乙啮凶厄出菲倒弗般旧熙非咎购肆堵惑动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用基因工程动物模型的特点基因工程动物模型的特点基因工程动物模型的特点基因工程动物模型的特点n 可按照研究目的进行设计和培育，其建立过程的本身就可按照研究目的进行设计和培育，其建立过程的本身就可按照研究目的进行设计和培育，其建立过程的本身就可按照研究目的进行设计和培育，其建立过程的本身就可进行疾病机制的研究。可进行疾病机制的研究。可进行疾病机制的研究。可进行疾病机制的研究。 n n 不但能从动物整体水平和组织器官水平上进行研究，不但能从动物整体水平和组织器官水平上进行研究，不但能从动物整体水平和组织器官水平上进行研究，不但能从动物整体水平和组织器官水平上进行研究，而且还可以深入到细胞水平和分子水平，为发病机制、药而且还可以深入到细胞水平和分子水平，为发病机制、药而且还可以深入到细胞水平和分子水平，为发病机制、药而且还可以深入到细胞水平和分子水平，为发病机制、药物筛选和临床医学研究提供了比较理想的实验体系。物筛选和临床医学研究提供了比较理想的实验体系。物筛选和临床医学研究提供了比较理想的实验体系。物筛选和临床医学研究提供了比较理想的实验体系。n n 转基因动物技术克服了物种之间的生殖隔离，实现了转基因动物技术克服了物种之间的生殖隔离，实现了转基因动物技术克服了物种之间的生殖隔离，实现了转基因动物技术克服了物种之间的生殖隔离，实现了动物物种之间遗传物质的交换和重组。动物物种之间遗传物质的交换和重组。动物物种之间遗传物质的交换和重组。动物物种之间遗传物质的交换和重组。 勺种匈尧贪自辛漾沂象稽将怕锦风宛春邵成娱棋罚岭婶伶缅魄寝吼彼蝴腰动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用特别提示特别提示特别提示特别提示 从从从从理理理理论论论论上上上上讲讲讲讲，随随随随着着着着遗遗遗遗传传传传工工工工程程程程的的的的发发发发展展展展，已已已已有有有有可可可可能能能能在在在在体体体体外外外外培培培培育育育育的的的的哺哺哺哺乳乳乳乳动动动动物物物物细细细细胞胞胞胞中中中中对对对对任任任任何何何何一一一一个个个个或或或或几几几几个个个个已已已已知知知知基基基基因因因因组组组组结结结结构构构构和和和和DNADNADNADNA序序序序列的位点进行各种类型的遗传修饰。列的位点进行各种类型的遗传修饰。列的位点进行各种类型的遗传修饰。列的位点进行各种类型的遗传修饰。 基基基基因因因因调调调调控控控控机机机机制制制制十十十十分分分分复复复复杂杂杂杂，目目目目前前前前基基基基因因因因工工工工程程程程动动动动物物物物模模模模型型型型提提提提供供供供的的的的信信信信息息息息还还还还很很很很局局局局限限限限。例例例例如如如如，利利利利用用用用转转转转基基基基因因因因小小小小鼠鼠鼠鼠的的的的研研研研究究究究证证证证实实实实除除除除了了了了单单单单一一一一的的的的癌癌癌癌基基基基因因因因可可可可以以以以引引引引起起起起肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤外外外外，癌癌癌癌基基基基因因因因之之之之间间间间的的的的协协协协同同同同作作作作用用用用也也也也可可可可能能能能导导导导致致致致肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤的的的的发发发发生生生生。即即即即导导导导入入入入一一一一个个个个癌癌癌癌基基基基因因因因可可可可能能能能会会会会激激激激活活活活另另另另一一一一个个个个癌癌癌癌基基基基因因因因，从从从从而而而而导导导导致了特异性肿瘤的发生。致了特异性肿瘤的发生。致了特异性肿瘤的发生。致了特异性肿瘤的发生。拉掠痰疑泞徽辖淑趟率孩汇她靖朗内哟冉吉反鹰吩储寅都挽闷糖诣义奄鲍动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用阴性疾病模型阴性疾病模型阴性疾病模型阴性疾病模型 Negative disease models Negative disease models 阴性疾病模型是指不能复制某些疾病的动物品系或品种。阴性疾病模型是指不能复制某些疾病的动物品系或品种。阴性疾病模型是指不能复制某些疾病的动物品系或品种。阴性疾病模型是指不能复制某些疾病的动物品系或品种。例如，感染性疾病模型通常局限于有限的敏感动物，而其余例如，感染性疾病模型通常局限于有限的敏感动物，而其余例如，感染性疾病模型通常局限于有限的敏感动物，而其余例如，感染性疾病模型通常局限于有限的敏感动物，而其余的不反应动物种类可看作是这一特殊人类病原微生物的阴性的不反应动物种类可看作是这一特殊人类病原微生物的阴性的不反应动物种类可看作是这一特殊人类病原微生物的阴性的不反应动物种类可看作是这一特殊人类病原微生物的阴性模型。阴性模型因此也包括表现对特定刺激缺乏反应的动物。模型。阴性模型因此也包括表现对特定刺激缺乏反应的动物。模型。阴性模型因此也包括表现对特定刺激缺乏反应的动物。模型。阴性模型因此也包括表现对特定刺激缺乏反应的动物。这类模型主要应用于探讨动物生理上对致病因素进行抵抗的这类模型主要应用于探讨动物生理上对致病因素进行抵抗的这类模型主要应用于探讨动物生理上对致病因素进行抵抗的这类模型主要应用于探讨动物生理上对致病因素进行抵抗的机制机制机制机制. . . .哺乳类动物均感染血吸虫病哺乳类动物均感染血吸虫病哺乳类动物均感染血吸虫病哺乳类动物均感染血吸虫病而东方田鼠却不感染血吸虫病而东方田鼠却不感染血吸虫病而东方田鼠却不感染血吸虫病而东方田鼠却不感染血吸虫病冕守四蕾汗频彦青等倡算滴拇抡核净哀采焦红耶哦盐片侗壬坯离撇澄则卷动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用孤立动物模型孤立动物模型孤立动物模型孤立动物模型 Orphan disease models Orphan disease models 孤立动物模型是指某种疾病最初在一些动物身上发现并孤立动物模型是指某种疾病最初在一些动物身上发现并孤立动物模型是指某种疾病最初在一些动物身上发现并孤立动物模型是指某种疾病最初在一些动物身上发现并被研究，但到目前为止在人类自身体内无法证实。包括：马被研究，但到目前为止在人类自身体内无法证实。包括：马被研究，但到目前为止在人类自身体内无法证实。包括：马被研究，但到目前为止在人类自身体内无法证实。包括：马立克氏病立克氏病立克氏病立克氏病（Mareks diseaseMareks disease）, , 多发性乳头瘤多发性乳头瘤多发性乳头瘤多发性乳头瘤（PapillomatosisPapillomatosis）, , 牛海绵状脑病牛海绵状脑病牛海绵状脑病牛海绵状脑病（bovine spongiform encephalopathybovine spongiform encephalopathy）, , 绵羊脱髓鞘绵羊脱髓鞘绵羊脱髓鞘绵羊脱髓鞘性脑白质炎性脑白质炎性脑白质炎性脑白质炎（Visna virus in sheepVisna virus in sheep）, , 猫白血病病毒感染猫白血病病毒感染猫白血病病毒感染猫白血病病毒感染（feline feline leukemia virusleukemia virus）。院搁石今逗乖鄂桑煽卡银惟珊影冯印箱贾弘垄焰焊蓑绒纽奄煤贮默登话嗣动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用从动物到人类的外推从动物到人类的外推从动物到人类的外推从动物到人类的外推 对动物实验结果不加批判地应用是危险的。在动物体内无对动物实验结果不加批判地应用是危险的。在动物体内无对动物实验结果不加批判地应用是危险的。在动物体内无对动物实验结果不加批判地应用是危险的。在动物体内无毒或无效的药物在人类体内可能有毒或有效，反之亦然。毒或无效的药物在人类体内可能有毒或有效，反之亦然。毒或无效的药物在人类体内可能有毒或有效，反之亦然。毒或无效的药物在人类体内可能有毒或有效，反之亦然。 人类在遗传上是高度变异的，同时伴随着文化、饮食和环人类在遗传上是高度变异的，同时伴随着文化、饮食和环人类在遗传上是高度变异的，同时伴随着文化、饮食和环人类在遗传上是高度变异的，同时伴随着文化、饮食和环境的差异。很多实验动物在遗传变异性上与人类不同，尤其对境的差异。很多实验动物在遗传变异性上与人类不同，尤其对境的差异。很多实验动物在遗传变异性上与人类不同，尤其对境的差异。很多实验动物在遗传变异性上与人类不同，尤其对于药理学和毒理学模型可成为重要因素。于药理学和毒理学模型可成为重要因素。于药理学和毒理学模型可成为重要因素。于药理学和毒理学模型可成为重要因素。糠嗡千勿夷公市狸啥痊栈叛瘟碑圣歪馋疑窗程箕酮瘪饥塘桅耪垃谈硕臂讽动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用免疫缺陷动物免疫缺陷动物第一节第一节 免疫缺陷动物的分类及其特点免疫缺陷动物的分类及其特点常用模型动物简介常用模型动物简介仇万著毙汞卸堑桑诈搪败箩潦锻巩采巢沏灿舱泽殊敬弟渣旭观适骏裂卧哗动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用免疫缺陷动物免疫缺陷动物是指由于先天性遗传突变或用人工方法是指由于先天性遗传突变或用人工方法造成一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物造成一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物 FF19621962年年年年 苏格兰苏格兰苏格兰苏格兰GristGrist首先发现无毛裸鼠首先发现无毛裸鼠首先发现无毛裸鼠首先发现无毛裸鼠FF19681968年年年年 Pantelouris Pantelouris发现裸小鼠无胸腺发现裸小鼠无胸腺发现裸小鼠无胸腺发现裸小鼠无胸腺FF19691969年年年年 丹麦丹麦丹麦丹麦RygaardRygaard首次成功将人类恶性肿瘤移植于裸小首次成功将人类恶性肿瘤移植于裸小首次成功将人类恶性肿瘤移植于裸小首次成功将人类恶性肿瘤移植于裸小鼠体内，肿瘤存活并生长。鼠体内，肿瘤存活并生长。鼠体内，肿瘤存活并生长。鼠体内，肿瘤存活并生长。FF7070年代后期我国开始引进裸鼠年代后期我国开始引进裸鼠年代后期我国开始引进裸鼠年代后期我国开始引进裸鼠趁登树峙鞍庐卒降灰聘即诽努肌吃下侵叁插座吧学缎萝潭阜祝误粪右鳃惶动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用免疫缺陷动物的分类免疫缺陷动物的分类F先天性免疫缺陷动物：先天性免疫缺陷动物： T淋巴细胞功能缺陷动物淋巴细胞功能缺陷动物 裸鼠裸鼠 B淋巴细胞功能缺陷动物淋巴细胞功能缺陷动物 CBA/N小鼠小鼠 NK细胞功能缺陷动物细胞功能缺陷动物 Beige小鼠小鼠 联合免疫缺陷小鼠联合免疫缺陷小鼠 SCID小鼠小鼠F获得性免疫缺陷动物模型获得性免疫缺陷动物模型 小鼠小鼠AIDS模型模型 猴猴AIDS模型模型 黑猩猩的黑猩猩的HIV感染模型感染模型 开魄读吨抛辊精迹梳或接菊袖心阉喀的甩咋媚厕饲向魔狂吟噬叼威巧抨酞动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用一一 、 裸小鼠裸小鼠1 1、无胸腺裸小鼠，含有隐性突变基因无胸腺裸小鼠，含有隐性突变基因无胸腺裸小鼠，含有隐性突变基因无胸腺裸小鼠，含有隐性突变基因nunu，位于，位于，位于，位于1111号染色号染色号染色号染色 体。体。体。体。 BALB/c-nu BALB/c-nu， NIH-nu NIH-nu，C3H-nuC3H-nu，C57BL/6-nuC57BL/6-nu。2 2、特征：（特征：（特征：（特征：（ 1 1 ）毛发生长异常，全身无毛（）毛发生长异常，全身无毛（）毛发生长异常，全身无毛（）毛发生长异常，全身无毛（2 2）无胸腺，）无胸腺，）无胸腺，）无胸腺， T T细胞不能正常分化，缺乏成熟的细胞不能正常分化，缺乏成熟的细胞不能正常分化，缺乏成熟的细胞不能正常分化，缺乏成熟的T T细胞的辅助、抑细胞的辅助、抑细胞的辅助、抑细胞的辅助、抑 制及杀伤功能，不能执行正常制及杀伤功能，不能执行正常制及杀伤功能，不能执行正常制及杀伤功能，不能执行正常T T细胞功能（细胞功能（细胞功能（细胞功能（3 3）B B细胞细胞细胞细胞 功能正常，较高的功能正常，较高的功能正常，较高的功能正常，较高的NKNK细胞活性。细胞活性。细胞活性。细胞活性。凡牺练糙个朽邀矽告剥峭库桂贱楼鸦肇纲匆森瞎嚏商伴高闺襄你惜妥袁动动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用3、应用应用uu在微生物学方面：研究病毒和细菌感染机制的极好模型动在微生物学方面：研究病毒和细菌感染机制的极好模型动在微生物学方面：研究病毒和细菌感染机制的极好模型动在微生物学方面：研究病毒和细菌感染机制的极好模型动物。裸鼠对麻风杆菌高度易感。物。裸鼠对麻风杆菌高度易感。物。裸鼠对麻风杆菌高度易感。物。裸鼠对麻风杆菌高度易感。uu在免疫学方面：可有效研究淋巴细胞的功能。裸鼠不排斥在免疫学方面：可有效研究淋巴细胞的功能。裸鼠不排斥在免疫学方面：可有效研究淋巴细胞的功能。裸鼠不排斥在免疫学方面：可有效研究淋巴细胞的功能。裸鼠不排斥杂交瘤，腹水产量高，效价高。杂交瘤，腹水产量高，效价高。杂交瘤，腹水产量高，效价高。杂交瘤，腹水产量高，效价高。uu在寄生虫学方面：可用于多种寄生虫感染模型的研究，如在寄生虫学方面：可用于多种寄生虫感染模型的研究，如在寄生虫学方面：可用于多种寄生虫感染模型的研究，如在寄生虫学方面：可用于多种寄生虫感染模型的研究，如复制卡氏肺囊虫模型。复制卡氏肺囊虫模型。复制卡氏肺囊虫模型。复制卡氏肺囊虫模型。uu在遗传学方面：裸鼠的遗传因素、免疫缺陷指标及组织学在遗传学方面：裸鼠的遗传因素、免疫缺陷指标及组织学在遗传学方面：裸鼠的遗传因素、免疫缺陷指标及组织学在遗传学方面：裸鼠的遗传因素、免疫缺陷指标及组织学特征均与人类免疫缺陷病相似，是研究这些疾病的发病机特征均与人类免疫缺陷病相似，是研究这些疾病的发病机特征均与人类免疫缺陷病相似，是研究这些疾病的发病机特征均与人类免疫缺陷病相似，是研究这些疾病的发病机理和遗传规律的重要模型。理和遗传规律的重要模型。理和遗传规律的重要模型。理和遗传规律的重要模型。uu肿瘤学方面肿瘤学方面肿瘤学方面肿瘤学方面: : 制备人体肿瘤移植模型制备人体肿瘤移植模型制备人体肿瘤移植模型制备人体肿瘤移植模型惭透捅厌瞅缚诬碴言碗啸拇残悉桅高凑爽顽饱延琐某职包兔柯舰耙范侩预动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用二、裸大鼠二、裸大鼠 1 1、19531953年由英国人年由英国人年由英国人年由英国人RowettRowett首先发现，基因符号为首先发现，基因符号为首先发现，基因符号为首先发现，基因符号为rnurnu，具有与裸小鼠相似的特征，无胸腺，缺乏功能性具有与裸小鼠相似的特征，无胸腺，缺乏功能性具有与裸小鼠相似的特征，无胸腺，缺乏功能性具有与裸小鼠相似的特征，无胸腺，缺乏功能性T T淋巴细淋巴细淋巴细淋巴细胞，胞，胞，胞，B B细胞功能正常，细胞功能正常，细胞功能正常，细胞功能正常，NKNK细胞活力增强细胞活力增强细胞活力增强细胞活力增强 2 2、体毛稀少，有时暂时完全消失，、体毛稀少，有时暂时完全消失，、体毛稀少，有时暂时完全消失，、体毛稀少，有时暂时完全消失，以后又复现，躯干仍有稀少背毛。以后又复现，躯干仍有稀少背毛。以后又复现，躯干仍有稀少背毛。以后又复现，躯干仍有稀少背毛。 3 3、抵抗力差，易患溃疡性气管炎、抵抗力差，易患溃疡性气管炎、抵抗力差，易患溃疡性气管炎、抵抗力差，易患溃疡性气管炎及化脓性支气管肺炎等呼吸道疾病及化脓性支气管肺炎等呼吸道疾病及化脓性支气管肺炎等呼吸道疾病及化脓性支气管肺炎等呼吸道疾病试赋怔暴泥只举蓑栖膘拣烘灌创旗胜赊裹足弗暂唁骏势丫舒瞳添煌趾佯配动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用4 4、发育相对迟缓，其体重只有正常大鼠的、发育相对迟缓，其体重只有正常大鼠的、发育相对迟缓，其体重只有正常大鼠的、发育相对迟缓，其体重只有正常大鼠的70%70%。5 5、雌性大鼠繁育能力低。、雌性大鼠繁育能力低。、雌性大鼠繁育能力低。、雌性大鼠繁育能力低。6 6、能接受人类正常组织和肿瘤的异种移植，由于、能接受人类正常组织和肿瘤的异种移植，由于、能接受人类正常组织和肿瘤的异种移植，由于、能接受人类正常组织和肿瘤的异种移植，由于其体形大，可提供足够的血样进行血液学和血其体形大，可提供足够的血样进行血液学和血其体形大，可提供足够的血样进行血液学和血其体形大，可提供足够的血样进行血液学和血清生化分析实验。清生化分析实验。清生化分析实验。清生化分析实验。镑殊俱屿例舆籽讲般靖跌谎丈诵销辅喘掏葵杯莉艰攻墟店含没迁森西芭巴动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用三、性连锁免疫缺陷小鼠三、性连锁免疫缺陷小鼠（X-linked immune deficiency mouse ,XID）1 1、CBA/NCBA/N小鼠，小鼠，小鼠，小鼠，B B细胞功能缺陷细胞功能缺陷细胞功能缺陷细胞功能缺陷, ,基因符号基因符号基因符号基因符号XidXid，位于，位于，位于，位于X X性染色体性染色体性染色体性染色体2 2、纯合雌鼠和杂合雄鼠对非胸腺依赖性纯合雌鼠和杂合雄鼠对非胸腺依赖性纯合雌鼠和杂合雄鼠对非胸腺依赖性纯合雌鼠和杂合雄鼠对非胸腺依赖性IIII型抗原没有体液免疫型抗原没有体液免疫型抗原没有体液免疫型抗原没有体液免疫 反应，血清中反应，血清中反应，血清中反应，血清中IgGIgG和和和和IgMIgM含量降低，其含量降低，其含量降低，其含量降低，其T T细胞功能正常。细胞功能正常。细胞功能正常。细胞功能正常。 分泌分泌分泌分泌IgGIgG和和和和IgMIgM的的的的的的的的B B细胞数量减少细胞数量减少细胞数量减少细胞数量减少3 3、该模型是研究该模型是研究该模型是研究该模型是研究B B淋巴细胞的发生、淋巴细胞的发生、淋巴细胞的发生、淋巴细胞的发生、 功能与异质性理想的动物功能与异质性理想的动物功能与异质性理想的动物功能与异质性理想的动物坞乞羊膝识压纫霍塞尽拴秋跑夜脯矗佯浊您庸壮赂量陋羊鸡阿厢枫即坝言动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用四、四、Beige小鼠小鼠 1 1、为、为、为、为NKNK细胞活性缺陷的突变系小鼠，细胞活性缺陷的突变系小鼠，细胞活性缺陷的突变系小鼠，细胞活性缺陷的突变系小鼠，bgbg是隐性突是隐性突是隐性突是隐性突变基因，位于变基因，位于变基因，位于变基因，位于1313号染色体。纯合的小鼠被毛完整，号染色体。纯合的小鼠被毛完整，号染色体。纯合的小鼠被毛完整，号染色体。纯合的小鼠被毛完整，但毛色变浅。但毛色变浅。但毛色变浅。但毛色变浅。 2 2、内源性、内源性、内源性、内源性NKNK细胞功能缺乏，是由于细胞溶解作用细胞功能缺乏，是由于细胞溶解作用细胞功能缺乏，是由于细胞溶解作用细胞功能缺乏，是由于细胞溶解作用的识别过程受损所致。纯合的的识别过程受损所致。纯合的的识别过程受损所致。纯合的的识别过程受损所致。纯合的bgbg基因同时还损伤细基因同时还损伤细基因同时还损伤细基因同时还损伤细胞毒胞毒胞毒胞毒T T细胞功能，降低粒细胞趋化性和杀菌活性。细胞功能，降低粒细胞趋化性和杀菌活性。细胞功能，降低粒细胞趋化性和杀菌活性。细胞功能，降低粒细胞趋化性和杀菌活性。挫黎篷窟搏跋闪康剁懒笑帮步闺肉顾诀弟糟掐密遵缀拆吉惫聪苔县朔荣泵动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用 3. bg3. bg基因影响溶酶体的发生过程，导致溶酶体膜缺基因影响溶酶体的发生过程，导致溶酶体膜缺基因影响溶酶体的发生过程，导致溶酶体膜缺基因影响溶酶体的发生过程，导致溶酶体膜缺损，由于溶酶体功能缺陷，损，由于溶酶体功能缺陷，损，由于溶酶体功能缺陷，损，由于溶酶体功能缺陷，bgbg对化脓性细菌感染非对化脓性细菌感染非对化脓性细菌感染非对化脓性细菌感染非常敏感，对各种病原因子也较敏感。这种小鼠要在常敏感，对各种病原因子也较敏感。这种小鼠要在常敏感，对各种病原因子也较敏感。这种小鼠要在常敏感，对各种病原因子也较敏感。这种小鼠要在SPFSPF环境中才能较好地生存，繁殖采用纯合子交配。环境中才能较好地生存，繁殖采用纯合子交配。环境中才能较好地生存，繁殖采用纯合子交配。环境中才能较好地生存，繁殖采用纯合子交配。稍茬升饰弹漾湃迈保辆秽敌缅恬吗拎婿孪兄惧撕耘吞萍响羹否柠涝瑚喉敖动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用五、严重联合免疫缺陷小鼠（五、严重联合免疫缺陷小鼠（Severe combinedimmunodeficient mice，SCID）1. 19831. 1983年由美国学者年由美国学者年由美国学者年由美国学者BosmaBosma首先发现于首先发现于首先发现于首先发现于C.B-17C.B-17近交系小近交系小近交系小近交系小 鼠，位鼠，位鼠，位鼠，位于于于于1616号染色体的号染色体的号染色体的号染色体的scidscid的单个隐性突变基因所致。的单个隐性突变基因所致。的单个隐性突变基因所致。的单个隐性突变基因所致。2. 2. 纯合纯合纯合纯合scidscid基因导致编码免疫球蛋白重链（基因导致编码免疫球蛋白重链（基因导致编码免疫球蛋白重链（基因导致编码免疫球蛋白重链（IgHIgH）和）和）和）和T T细胞抗原细胞抗原细胞抗原细胞抗原受体基因（受体基因（受体基因（受体基因（TCRTCR）V-D-JV-D-J基因重排异常，抑制基因重排异常，抑制基因重排异常，抑制基因重排异常，抑制B B细胞和细胞和细胞和细胞和T T和和和和T T细胞前体的正常分化，造成细胞前体的正常分化，造成细胞前体的正常分化，造成细胞前体的正常分化，造成T T、B B淋巴细胞自身不能分化成特淋巴细胞自身不能分化成特淋巴细胞自身不能分化成特淋巴细胞自身不能分化成特异性功能淋巴细胞，异性功能淋巴细胞，异性功能淋巴细胞，异性功能淋巴细胞， 循环中免疫球蛋白减少或缺损循环中免疫球蛋白减少或缺损循环中免疫球蛋白减少或缺损循环中免疫球蛋白减少或缺损抑点歌妓溉也勃央古卵升津法丫熬眶擒比读稍县测捎邹析椎匆腆构漠浴留动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用C.B-17C.B-17小鼠是小鼠是小鼠是小鼠是BALB/cAnIcrBALB/cAnIcr小鼠的同源近交系，差别在于小鼠的同源近交系，差别在于小鼠的同源近交系，差别在于小鼠的同源近交系，差别在于该小鼠携带了该小鼠携带了该小鼠携带了该小鼠携带了C57BL/kaC57BL/ka小鼠的免疫球蛋白重链小鼠的免疫球蛋白重链小鼠的免疫球蛋白重链小鼠的免疫球蛋白重链Igh-1bIgh-1b等等等等位基因位基因位基因位基因. .C.B-17C.B-17小鼠的遗传背景与小鼠的遗传背景与小鼠的遗传背景与小鼠的遗传背景与BALB/cAnIcrBALB/cAnIcr基本相同，其基本相同，其基本相同，其基本相同，其H-2H-2抗原均为抗原均为抗原均为抗原均为H-2H-2d d. .此外目前已有此外目前已有此外目前已有此外目前已有C3H-SCIDC3H-SCID等其他品系遗传背景的等其他品系遗传背景的等其他品系遗传背景的等其他品系遗传背景的SCIDSCID小小小小鼠出现鼠出现鼠出现鼠出现. .秉巧睬甚西挺攒罐朝篇集桅园孵严呻蛋蛇照衫憨麓限仲膀查晾酋赣孽规补动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用 3 3、SCIDSCID小鼠外观与普通小鼠无异，胸腺、脾和淋巴结的重小鼠外观与普通小鼠无异，胸腺、脾和淋巴结的重小鼠外观与普通小鼠无异，胸腺、脾和淋巴结的重小鼠外观与普通小鼠无异，胸腺、脾和淋巴结的重量不及正常的量不及正常的量不及正常的量不及正常的30%30%，组织学上为淋巴细胞显著缺乏。，组织学上为淋巴细胞显著缺乏。，组织学上为淋巴细胞显著缺乏。，组织学上为淋巴细胞显著缺乏。FF胸腺为脂肪组织包裹，没有皮质结构，主要由类上皮细胞和胸腺为脂肪组织包裹，没有皮质结构，主要由类上皮细胞和胸腺为脂肪组织包裹，没有皮质结构，主要由类上皮细胞和胸腺为脂肪组织包裹，没有皮质结构，主要由类上皮细胞和成纤维细胞构成。成纤维细胞构成。成纤维细胞构成。成纤维细胞构成。FF脾白髓不明显，脾小体无淋巴细胞聚集，主要脾白髓不明显，脾小体无淋巴细胞聚集，主要脾白髓不明显，脾小体无淋巴细胞聚集，主要脾白髓不明显，脾小体无淋巴细胞聚集，主要 由网状细胞由网状细胞由网状细胞由网状细胞构成。淋巴结无明显皮质区，呈淋巴细胞脱空状。小肠粘膜构成。淋巴结无明显皮质区，呈淋巴细胞脱空状。小肠粘膜构成。淋巴结无明显皮质区，呈淋巴细胞脱空状。小肠粘膜构成。淋巴结无明显皮质区，呈淋巴细胞脱空状。小肠粘膜下和支气管淋巴结较少见，无淋巴细胞聚集。其外周血白细下和支气管淋巴结较少见，无淋巴细胞聚集。其外周血白细下和支气管淋巴结较少见，无淋巴细胞聚集。其外周血白细下和支气管淋巴结较少见，无淋巴细胞聚集。其外周血白细胞较少，淋巴细胞占白细胞总数的胞较少，淋巴细胞占白细胞总数的胞较少，淋巴细胞占白细胞总数的胞较少，淋巴细胞占白细胞总数的10-20%10-20%，而正常小鼠应，而正常小鼠应，而正常小鼠应，而正常小鼠应占占占占70%70%。基早子萄亩训苏焊缸欲榴届氰虑卞从暗择痛人涤沟穆篙汉宿耀焉谦抖唇秒动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用4. SCID4. SCID小鼠所有小鼠所有小鼠所有小鼠所有T T和和和和B B淋巴细胞功能测试均为阴性，对外源抗淋巴细胞功能测试均为阴性，对外源抗淋巴细胞功能测试均为阴性，对外源抗淋巴细胞功能测试均为阴性，对外源抗原无细胞免疫及抗体反应。原无细胞免疫及抗体反应。原无细胞免疫及抗体反应。原无细胞免疫及抗体反应。NKNK细胞功能细胞功能细胞功能细胞功能 正常，巨噬细胞、正常，巨噬细胞、正常，巨噬细胞、正常，巨噬细胞、粒细胞和红细胞等呈正常状态粒细胞和红细胞等呈正常状态粒细胞和红细胞等呈正常状态粒细胞和红细胞等呈正常状态. .5. 5. 渗漏渗漏渗漏渗漏：大部分：大部分：大部分：大部分SCIDSCID小鼠缺乏功能性淋巴细胞，但少数小鼠缺乏功能性淋巴细胞，但少数小鼠缺乏功能性淋巴细胞，但少数小鼠缺乏功能性淋巴细胞，但少数SCIDSCID小鼠在饲养过程中可出现极少程度的免疫功能恢复，即约有小鼠在饲养过程中可出现极少程度的免疫功能恢复，即约有小鼠在饲养过程中可出现极少程度的免疫功能恢复，即约有小鼠在饲养过程中可出现极少程度的免疫功能恢复，即约有15%15%的的的的SCIDSCID小鼠血清中可检测出免疫球蛋白，这与小鼠的小鼠血清中可检测出免疫球蛋白，这与小鼠的小鼠血清中可检测出免疫球蛋白，这与小鼠的小鼠血清中可检测出免疫球蛋白，这与小鼠的年龄、品系和饲养环境有关。年龄、品系和饲养环境有关。年龄、品系和饲养环境有关。年龄、品系和饲养环境有关。醇诽汕摹秩恤拳欢彭佃彼琐课很蹦金菜车惰醉吾耸基刑续思朵芜然嘲扼重动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用FF许多人类寄生虫不能感染其他小鼠，而许多人类寄生虫不能感染其他小鼠，而许多人类寄生虫不能感染其他小鼠，而许多人类寄生虫不能感染其他小鼠，而SCIDSCID小鼠不但可被小鼠不但可被小鼠不但可被小鼠不但可被人类丝虫病所感染，而且所出现的病变也与人类相似人类丝虫病所感染，而且所出现的病变也与人类相似人类丝虫病所感染，而且所出现的病变也与人类相似人类丝虫病所感染，而且所出现的病变也与人类相似. .FFSCIDSCID小鼠肿瘤移植存活率高达小鼠肿瘤移植存活率高达小鼠肿瘤移植存活率高达小鼠肿瘤移植存活率高达36.9%,36.9%,一般裸鼠为一般裸鼠为一般裸鼠为一般裸鼠为16.8%,16.8%,对对对对白血病和恶性肿瘤不但转移率高白血病和恶性肿瘤不但转移率高白血病和恶性肿瘤不但转移率高白血病和恶性肿瘤不但转移率高, ,而且能广泛扩散而且能广泛扩散而且能广泛扩散而且能广泛扩散, ,与人体与人体与人体与人体肿瘤生物学行为极为相似肿瘤生物学行为极为相似肿瘤生物学行为极为相似肿瘤生物学行为极为相似, ,其侵润和转移与人类肿瘤自发转其侵润和转移与人类肿瘤自发转其侵润和转移与人类肿瘤自发转其侵润和转移与人类肿瘤自发转移相似移相似移相似移相似. .FFSCIDSCID小鼠是研究淋巴细胞分化作用和调控作用的主要模型小鼠是研究淋巴细胞分化作用和调控作用的主要模型小鼠是研究淋巴细胞分化作用和调控作用的主要模型小鼠是研究淋巴细胞分化作用和调控作用的主要模型, ,也是研究免疫缺陷与自发淋巴瘤之间关系的主要模型也是研究免疫缺陷与自发淋巴瘤之间关系的主要模型也是研究免疫缺陷与自发淋巴瘤之间关系的主要模型也是研究免疫缺陷与自发淋巴瘤之间关系的主要模型. .颤寻报碴谢奥畏仁熟歇衰世耸求曙挑泰揪崔梨姻敏唐幽瘦牧柴裕枷沦貌待动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用坍弟蛀此殊桑舞韦度策墒铭肯掣妓买嘿首践巾绥较赶份系务土屎食固茵党动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用FF目前已有将目前已有将目前已有将目前已有将T T细胞性白血病细胞，细胞性白血病细胞，细胞性白血病细胞，细胞性白血病细胞，B B 细胞性白血病细胞，髓细胞性白血病细胞，髓细胞性白血病细胞，髓细胞性白血病细胞，髓细胞性白血病细胞移植于细胞性白血病细胞移植于细胞性白血病细胞移植于细胞性白血病细胞移植于SCIDSCID小鼠后，癌细胞在其骨髓，胸小鼠后，癌细胞在其骨髓，胸小鼠后，癌细胞在其骨髓，胸小鼠后，癌细胞在其骨髓，胸腺，脾等造血器官及非造血器官中腺，脾等造血器官及非造血器官中腺，脾等造血器官及非造血器官中腺，脾等造血器官及非造血器官中( (包括中枢神经系统包括中枢神经系统包括中枢神经系统包括中枢神经系统) )增生增生增生增生扩散的报道，其病理过程与白血病病人的临床过程相似。扩散的报道，其病理过程与白血病病人的临床过程相似。扩散的报道，其病理过程与白血病病人的临床过程相似。扩散的报道，其病理过程与白血病病人的临床过程相似。FF北京医科大学王顺和将人肺腺癌北京医科大学王顺和将人肺腺癌北京医科大学王顺和将人肺腺癌北京医科大学王顺和将人肺腺癌PGPG和和和和PGTSPGTS细胞移植到细胞移植到细胞移植到细胞移植到SCID SCID 小鼠，所有动物均见肿瘤生长，其移植成功率为小鼠，所有动物均见肿瘤生长，其移植成功率为小鼠，所有动物均见肿瘤生长，其移植成功率为小鼠，所有动物均见肿瘤生长，其移植成功率为100100，并，并，并，并显示肿瘤细胞的侵袭及转移，表明显示肿瘤细胞的侵袭及转移，表明显示肿瘤细胞的侵袭及转移，表明显示肿瘤细胞的侵袭及转移，表明SCIDSCID小鼠亦为研究小鼠亦为研究小鼠亦为研究小鼠亦为研究PGPG及及及及PGTSPGTS细胞的良好模型。细胞的良好模型。细胞的良好模型。细胞的良好模型。 谦舌医健咖归脐冉频袱铰序妨摆奉横邢假未穆夹筑森卵影惫支识昏糜诲性动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用六、六、Motheaten小鼠小鼠 1. 1.突变基因（突变基因（突变基因（突变基因（meme）位于第）位于第）位于第）位于第6 6对染色体，出生后对染色体，出生后对染色体，出生后对染色体，出生后2d2d可出现皮肤脓肿可出现皮肤脓肿可出现皮肤脓肿可出现皮肤脓肿 2. 2.有严重联合免疫缺陷，表现为对胸腺依赖和不依赖抗原均有严重联合免疫缺陷，表现为对胸腺依赖和不依赖抗原均有严重联合免疫缺陷，表现为对胸腺依赖和不依赖抗原均有严重联合免疫缺陷，表现为对胸腺依赖和不依赖抗原均 无反应，对无反应，对无反应，对无反应，对T T、B B细胞分裂素的增殖反应严重受损，细胞毒和细胞分裂素的增殖反应严重受损，细胞毒和细胞分裂素的增殖反应严重受损，细胞毒和细胞分裂素的增殖反应严重受损，细胞毒和 NK NK细胞活性降低。细胞活性降低。细胞活性降低。细胞活性降低。 3. 3.纯合型伴有自身免疫的倾向，是自身免疫性疾病的良好模型纯合型伴有自身免疫的倾向，是自身免疫性疾病的良好模型纯合型伴有自身免疫的倾向，是自身免疫性疾病的良好模型纯合型伴有自身免疫的倾向，是自身免疫性疾病的良好模型性支谩帕恬填款恭酉踏稀体穴肌厅藏巳法赌斌赦奴撅淹娜呻伴戊讯古搜涉动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用七、人工培育的先天性联合免疫缺陷动物七、人工培育的先天性联合免疫缺陷动物 1. 1. 将将将将3 3种小鼠的种小鼠的种小鼠的种小鼠的3 3个隐性突变基因即个隐性突变基因即个隐性突变基因即个隐性突变基因即BeigeBeige基因、基因、基因、基因、T T细胞缺陷的细胞缺陷的细胞缺陷的细胞缺陷的 nunu基因以及基因以及基因以及基因以及B B细胞缺陷的细胞缺陷的细胞缺陷的细胞缺陷的xidxid基因经过杂交、筛选及导入，基因经过杂交、筛选及导入，基因经过杂交、筛选及导入，基因经过杂交、筛选及导入，育成育成育成育成T T、B B、NKNK细胞三连缺陷的细胞三连缺陷的细胞三连缺陷的细胞三连缺陷的Beige-nude-xidBeige-nude-xid小鼠。小鼠。小鼠。小鼠。 2. 2.表型为裸鼠，皮肤清淡呈苍白色，虹膜睫状体和脉络膜色素表型为裸鼠，皮肤清淡呈苍白色，虹膜睫状体和脉络膜色素表型为裸鼠，皮肤清淡呈苍白色，虹膜睫状体和脉络膜色素表型为裸鼠，皮肤清淡呈苍白色，虹膜睫状体和脉络膜色素变浅，并形成了一个深色颗粒的色素环，以及无肉眼可见的变浅，并形成了一个深色颗粒的色素环，以及无肉眼可见的变浅，并形成了一个深色颗粒的色素环，以及无肉眼可见的变浅，并形成了一个深色颗粒的色素环，以及无肉眼可见的胸腺，出血时间延长。胸腺，出血时间延长。胸腺，出血时间延长。胸腺，出血时间延长。檄蝶砂匝吗扩纶俊癸眉胶趋誓壶递帆察即腆衙沫蒋踞降业恶崩姥瞥脊渣眷动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用第二节第二节 人体肿瘤裸鼠移植模型概述人体肿瘤裸鼠移植模型概述 一、人体肿瘤异种移植的历史一、人体肿瘤异种移植的历史 1. 1.同种鼠移植成功率高，异种鼠体内不能生长同种鼠移植成功率高，异种鼠体内不能生长同种鼠移植成功率高，异种鼠体内不能生长同种鼠移植成功率高，异种鼠体内不能生长 2. 2.移植于动物免疫抑制或免疫反应迟发的特殊部位移植于动物免疫抑制或免疫反应迟发的特殊部位移植于动物免疫抑制或免疫反应迟发的特殊部位移植于动物免疫抑制或免疫反应迟发的特殊部位: :地鼠颊地鼠颊地鼠颊地鼠颊 囊、鸡胚或豚鼠的眼前房囊、鸡胚或豚鼠的眼前房囊、鸡胚或豚鼠的眼前房囊、鸡胚或豚鼠的眼前房 3. 3.使用免疫抑制剂全身照射使用免疫抑制剂全身照射使用免疫抑制剂全身照射使用免疫抑制剂全身照射 4.1969 4.1969年年年年RygaadRygaad和和和和PovlsonPovlson首次将人结肠癌在裸鼠移植成功首次将人结肠癌在裸鼠移植成功首次将人结肠癌在裸鼠移植成功首次将人结肠癌在裸鼠移植成功. . 目前有目前有目前有目前有400400多种多种多种多种 5.1979 5.1979年引进裸鼠，年引进裸鼠，年引进裸鼠，年引进裸鼠，19821982年上海第一医院首次报道人肝癌裸年上海第一医院首次报道人肝癌裸年上海第一医院首次报道人肝癌裸年上海第一医院首次报道人肝癌裸 鼠体内移植成功，目前已有鼠体内移植成功，目前已有鼠体内移植成功，目前已有鼠体内移植成功，目前已有4040多种多种多种多种始稗话宦艾铣丈泣堡厨每虫快市侵略斡猫梳葬噪仰频乾衫跪邮剂富合碾鲜动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用 6. 6. 肿瘤转移模型肿瘤转移模型肿瘤转移模型肿瘤转移模型 北北北北京京京京医医医医科科科科大大大大学学学学病病病病理理理理学学学学教教教教研研研研室室室室，吴吴吴吴秉秉秉秉铨铨铨铨等等等等曾曾曾曾研研研研究究究究出出出出高高高高转转转转移移移移肺肺肺肺巨巨巨巨细细细细胞胞胞胞癌癌癌癌系系系系PGPG裸裸裸裸鼠鼠鼠鼠的的的的移移移移植植植植模模模模型型型型，皮皮皮皮下下下下接接接接种种种种淋淋淋淋巴巴巴巴细细细细胞胞胞胞转转转转移移移移率率率率可达可达可达可达100100，肺转移为，肺转移为，肺转移为，肺转移为8383，长期传代高转移特性不变，长期传代高转移特性不变，长期传代高转移特性不变，长期传代高转移特性不变NakanishNakanish等等等等将将将将一一一一例例例例分分分分化化化化程程程程度度度度较较较较差差差差的的的的人人人人胃胃胃胃髓髓髓髓样样样样癌癌癌癌移移移移植植植植于于于于裸裸裸裸鼠鼠鼠鼠的的的的皮皮皮皮下下下下及及及及肌肌肌肌肉肉肉肉，获获获获得得得得肺肺肺肺转转转转移移移移率率率率100100的的的的转转转转移移移移模模模模型型型型，建建建建立立立立了了了了一一一一株株株株裸鼠体内的人胃癌高转移模型。裸鼠体内的人胃癌高转移模型。裸鼠体内的人胃癌高转移模型。裸鼠体内的人胃癌高转移模型。识疗胀祭雌般卤繁赣腋截世腑夷郎董扒估喜栋棒拖临婴椽稽沼敞譬讽萨葬动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用跪甩震浚锯顾寻盂猴嚎冻竿及吴奥屁枝褐灶垂谈确嫁蛊氛崎寿牛识丸斥啊动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用二、人体肿瘤裸鼠移植瘤的生物学特征二、人体肿瘤裸鼠移植瘤的生物学特征 (1) 保持原发瘤的病理形态学、染色体特征、肿瘤标记物保持原发瘤的病理形态学、染色体特征、肿瘤标记物 等特点。等特点。 (2) 多数肿瘤呈结节状生长，周围有膜包裹，极少可有局部多数肿瘤呈结节状生长，周围有膜包裹，极少可有局部 侵润和远处转移，其组织形态、超微结构等均保持移植侵润和远处转移，其组织形态、超微结构等均保持移植 前肿瘤的特征。前肿瘤的特征。 (3) 传代的移植瘤能保持肿瘤的机能。如原发肿瘤的分泌特传代的移植瘤能保持肿瘤的机能。如原发肿瘤的分泌特 性。性。AFP，HBsAg，CEA诞藐岳躺挞弱躯哆彰盟想滥哦余沉发官窗匪抿循鞭踪零博雁氛咐酞哼沥灸动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用沿漱摇梦臆绒烷眶喜三耐嗅块哩奉漓相信咨姚攘颜罩曲堂痈烂衣吸权魄互动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用(4)(4)裸鼠不能再现人体原发瘤的全部特征及其遗传学上的不裸鼠不能再现人体原发瘤的全部特征及其遗传学上的不裸鼠不能再现人体原发瘤的全部特征及其遗传学上的不裸鼠不能再现人体原发瘤的全部特征及其遗传学上的不 稳定性稳定性稳定性稳定性人体原发瘤的的所有细胞亚群不能全部出现在移植瘤中，人体原发瘤的的所有细胞亚群不能全部出现在移植瘤中，人体原发瘤的的所有细胞亚群不能全部出现在移植瘤中，人体原发瘤的的所有细胞亚群不能全部出现在移植瘤中，出现异质性。出现异质性。出现异质性。出现异质性。一些生物学特性的丢失。一些生物学特性的丢失。一些生物学特性的丢失。一些生物学特性的丢失。出现了原发瘤中并不存在的细胞亚群出现了原发瘤中并不存在的细胞亚群出现了原发瘤中并不存在的细胞亚群出现了原发瘤中并不存在的细胞亚群疙咬筑岳秸勘晒晚废撅毡咳刑取验贸碴经搜奏劣则纵萄轨鸳笔搐撂合况闹动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用（5）裸鼠对移植瘤的反应）裸鼠对移植瘤的反应丧失原有间质，而获得小鼠间质丧失原有间质，而获得小鼠间质当肿瘤生长时，原发肿瘤的间质退化，由宿主产生新的当肿瘤生长时，原发肿瘤的间质退化，由宿主产生新的 移植瘤间质。移植瘤间质。间质可引起癌组织本身分化程度的差别及发生化生的可间质可引起癌组织本身分化程度的差别及发生化生的可能。如裸鼠的结缔组织可以增生和分化为软骨和骨能。如裸鼠的结缔组织可以增生和分化为软骨和骨Ewing肉瘤可以诱导裸鼠产生新生骨。肉瘤可以诱导裸鼠产生新生骨。膊瘩再崔棉壳貉廉瞳韦胰钝司谭盒接绷须乞溶烁婆测削鲍秃短梯毕敦郁傀动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用uu体内和体外研究互补配合进行观察体内和体外研究互补配合进行观察体内和体外研究互补配合进行观察体内和体外研究互补配合进行观察uu利用动物模型可进行药物筛选利用动物模型可进行药物筛选利用动物模型可进行药物筛选利用动物模型可进行药物筛选uu在动物体内进行连续传代后的肿瘤细胞，在体外培养中也在动物体内进行连续传代后的肿瘤细胞，在体外培养中也在动物体内进行连续传代后的肿瘤细胞，在体外培养中也在动物体内进行连续传代后的肿瘤细胞，在体外培养中也易获得长期生存，可提高培养的成功率易获得长期生存，可提高培养的成功率易获得长期生存，可提高培养的成功率易获得长期生存，可提高培养的成功率（6）裸鼠移植瘤的评估）裸鼠移植瘤的评估 捡诀誊求默沮诣讫烹腐围恐砂围刷碗易炒今概膨危椽虾詹搏朔狗蚂辉友废动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用三、裸鼠肿瘤移植模型具有的优点三、裸鼠肿瘤移植模型具有的优点 1. 1.裸鼠体内免疫缺陷机制恒定，其它鼠类需另加去免疫措施，其裸鼠体内免疫缺陷机制恒定，其它鼠类需另加去免疫措施，其裸鼠体内免疫缺陷机制恒定，其它鼠类需另加去免疫措施，其裸鼠体内免疫缺陷机制恒定，其它鼠类需另加去免疫措施，其条件恒定性受个体差异的影响。条件恒定性受个体差异的影响。条件恒定性受个体差异的影响。条件恒定性受个体差异的影响。 2. 2.可以控制肿瘤的致癌性，使人体肿瘤移植后良好生长可以控制肿瘤的致癌性，使人体肿瘤移植后良好生长可以控制肿瘤的致癌性，使人体肿瘤移植后良好生长可以控制肿瘤的致癌性，使人体肿瘤移植后良好生长 3. 3.接种成功的瘤组织具有原肿瘤的结构特点，有利于体外培养的接种成功的瘤组织具有原肿瘤的结构特点，有利于体外培养的接种成功的瘤组织具有原肿瘤的结构特点，有利于体外培养的接种成功的瘤组织具有原肿瘤的结构特点，有利于体外培养的瘤细胞株的鉴定瘤细胞株的鉴定瘤细胞株的鉴定瘤细胞株的鉴定 4. 4.研究肿瘤在体内的生长行为与过程，探讨肿瘤与宿主免疫间的研究肿瘤在体内的生长行为与过程，探讨肿瘤与宿主免疫间的研究肿瘤在体内的生长行为与过程，探讨肿瘤与宿主免疫间的研究肿瘤在体内的生长行为与过程，探讨肿瘤与宿主免疫间的相互关系。相互关系。相互关系。相互关系。空魏肆枢穷婶悸掠疚敌周篡斤鸵寝蘑撕烧窖秦拍鸟攘宅界放苦喷镰震痊厨动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用四、裸鼠肿瘤移植模型缺点四、裸鼠肿瘤移植模型缺点不不不不能能能能完完完完全全全全接接接接受受受受异异异异种种种种移移移移植植植植物物物物，例例例例如如如如人人人人体体体体肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤和和和和淋淋淋淋巴巴巴巴组组组组织织织织，而而而而且且且且不不不不同同同同起起起起源源源源的的的的人人人人肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤在在在在裸裸裸裸鼠鼠鼠鼠身身身身上上上上的的的的可可可可移移移移植性差异很大。植性差异很大。植性差异很大。植性差异很大。稼袱条否杂肿垂剥咱凤颅伞王吹擎智毁毗掉朗瓶灭铁杀殆政展卤撞检消喊动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用第三节、人体肿瘤裸鼠移植瘤模型的建立方法第三节、人体肿瘤裸鼠移植瘤模型的建立方法 1 1、裸鼠的繁育、裸鼠的繁育、裸鼠的繁育、裸鼠的繁育 母性差，选用雄性裸鼠与半裸雌鼠交配。母性差，选用雄性裸鼠与半裸雌鼠交配。母性差，选用雄性裸鼠与半裸雌鼠交配。母性差，选用雄性裸鼠与半裸雌鼠交配。 2 2、裸鼠的饲养条件：、裸鼠的饲养条件：、裸鼠的饲养条件：、裸鼠的饲养条件：SPFSPF环境环境环境环境 隔离器，超净层流架，隔离器，超净层流架，隔离器，超净层流架，隔离器，超净层流架，SPFSPF级洁净饲养室级洁净饲养室级洁净饲养室级洁净饲养室浦谎挞癣告寒申婚葫摧淆垄得苞勤寿部划尸陋厨铣准糯杂棚役咀椿玖棒霖动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用人体肿瘤裸鼠移植方法人体肿瘤裸鼠移植方法（一）移植肿瘤的常规处理及移植方法：（一）移植肿瘤的常规处理及移植方法： 1 1、组织块移植法：新鲜的手术标本切成、组织块移植法：新鲜的手术标本切成、组织块移植法：新鲜的手术标本切成、组织块移植法：新鲜的手术标本切成3-6mm3-6mm3 3 接种接种接种接种 2 2、悬液移植法：大批量接种实验、悬液移植法：大批量接种实验、悬液移植法：大批量接种实验、悬液移植法：大批量接种实验 3 3、培养细胞法：对数生长期的细胞、培养细胞法：对数生长期的细胞、培养细胞法：对数生长期的细胞、培养细胞法：对数生长期的细胞10106 6-10-107 7 /0.2ml /0.2ml 尺尘寞串谩膨饭帮鸯饱差褪肘蹦瞳炒贸蠢沟绥琅今诚匡河拇雅墓攒卷村滥动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用岳俊滇熔醇舍敏咎即创若惊黍镭音梳作真磁俗蒸痴物悉呼孽炔微坠交孩蔚动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用（二）不同移植部位（二）不同移植部位 1、腹水瘤的建立及移植方法：、腹水瘤的建立及移植方法：将实体瘤细胞悬液注入裸鼠腹将实体瘤细胞悬液注入裸鼠腹腔，可形成腹水，用于定量移植，早期为血性后为乳白色，腔，可形成腹水，用于定量移植，早期为血性后为乳白色，若将腹水细胞注入皮下可形成实体瘤若将腹水细胞注入皮下可形成实体瘤 2、肾包膜移植：、肾包膜移植：可将人癌组织移植于正常非免疫抑制小鼠肾可将人癌组织移植于正常非免疫抑制小鼠肾包膜，癌组织成活包膜，癌组织成活6d。用于体内抗癌药物的筛选。用于体内抗癌药物的筛选 3、原位移植：、原位移植：将人体肿瘤细胞移植于与肿瘤原发部位相同的将人体肿瘤细胞移植于与肿瘤原发部位相同的裸鼠脏裸鼠脏 器内，如将肝癌移植于裸鼠的肝。器内，如将肝癌移植于裸鼠的肝。声绦哲仅脑讳响斤衬键剧搽给勿睬荐刁皂祷耻刨咖豫拱障肤岁阳姻虎倚要动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用鼓泅右天会灵尽影素哉干噶保侄专韦突岩戮呵吓洽晶尿碍蓟羌屿斗芋仆写动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用影响人体肿瘤裸鼠移植的因素影响人体肿瘤裸鼠移植的因素 1、人体肿瘤细胞本身的特征：、人体肿瘤细胞本身的特征： 人手术标本裸鼠移植成功率为人手术标本裸鼠移植成功率为28.3%,其中复发瘤其中复发瘤为为50%,转移瘤为转移瘤为38.5%,而原发瘤仅为而原发瘤仅为20.5%. 黑色素瘤和结肠癌的移植成功率高黑色素瘤和结肠癌的移植成功率高,而腺癌和造血而腺癌和造血系统肿瘤移植成功率低系统肿瘤移植成功率低. 用已建株的癌细胞系移植成功率高于用人癌手术用已建株的癌细胞系移植成功率高于用人癌手术标本移植标本移植.耘暴堵棠佳晤殉做末格挝率郡镜疗丫破雏比宿六支魔贮锅疚狐辽肇汰姿征动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用2、裸鼠的免疫状态：、裸鼠的免疫状态： 裸鼠体内裸鼠体内NK细胞和细胞和B细胞活性正常，可采用免疫抑制细胞活性正常，可采用免疫抑制剂、射线照射等措施降低动物的免疫功能。剂、射线照射等措施降低动物的免疫功能。 采用联合免疫缺陷动物。采用联合免疫缺陷动物。3、移植部位和途径：、移植部位和途径： 皮下接种时，以接近头侧的成功率高，通常为腋下。皮下接种时，以接近头侧的成功率高，通常为腋下。一般不发生转移和侵袭。一般不发生转移和侵袭。 肾包膜接种成功率高于皮下。肾包膜接种成功率高于皮下。 腹腔接种产量高，较易显示癌细胞的侵袭和转移力。腹腔接种产量高，较易显示癌细胞的侵袭和转移力。 原位接种，成功率高，生物学行为和药物动力学更接原位接种，成功率高，生物学行为和药物动力学更接近人体的原发瘤。近人体的原发瘤。颂股矗渊空里呐跃财中绷辟诌八陶戍抓喀杏业凹炽刨哉势迟乃恿擂率巴绢动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用4、激素和宿主性别：、激素和宿主性别： 依赖雌激素的乳腺癌接种于正常雌性裸鼠上生长较慢，依赖雌激素的乳腺癌接种于正常雌性裸鼠上生长较慢，接种到雄性裸鼠上生长则更慢。接种到雄性裸鼠上生长则更慢。PC82人前列腺癌可在雄性裸人前列腺癌可在雄性裸鼠中连续传代，而不能在雌性裸鼠中长出肿瘤。鼠中连续传代，而不能在雌性裸鼠中长出肿瘤。5、鼠龄：、鼠龄： 与成年（与成年（6-8周龄）的裸鼠相比，移植在幼年或新生裸鼠周龄）的裸鼠相比，移植在幼年或新生裸鼠体内的肿瘤更易生长和转移。这与不同龄鼠体内的肿瘤更易生长和转移。这与不同龄鼠NK细胞活性不细胞活性不同有关。同有关。油淹醉醚喷面沽猜屯暇忙劣顶时采赣院效问旗哉宠之厂全擞衰斤苯贱妇联动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用 6、裸鼠的健康及洁净状况：、裸鼠的健康及洁净状况： 洁净度越高，外界抗原越少，裸鼠的洁净度越高，外界抗原越少，裸鼠的NK细胞活力越细胞活力越低，更适宜移植瘤的生长及转移的形成。低，更适宜移植瘤的生长及转移的形成。 Kyriazis发现发现SPF级裸鼠皮下或腹腔接种级裸鼠皮下或腹腔接种106人喉癌细人喉癌细胞胞HEP-2均可成瘤，且可见皮下肿瘤侵袭包膜，腹腔接种均可成瘤，且可见皮下肿瘤侵袭包膜，腹腔接种呈明显侵袭和转移，但相同数量瘤细胞接种到肝炎阳性裸呈明显侵袭和转移，但相同数量瘤细胞接种到肝炎阳性裸鼠身上，却未发展成肉眼可见的瘤节。鼠身上，却未发展成肉眼可见的瘤节。 一般认为裸鼠受病毒、细菌等感染，可增加抗原的刺一般认为裸鼠受病毒、细菌等感染，可增加抗原的刺激，从而影响激，从而影响NK细胞等非细胞等非T细胞依赖性免疫活性。细胞依赖性免疫活性。批悬劈冉渣励总牵兆弃袜洋拯彼蒂琴待埂棘袍呐蠕扇夷突佰拖抉代闭寨毒动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用第四节第四节 SCID-hu模型的建立极其在肿瘤学研究中模型的建立极其在肿瘤学研究中的应用的应用一、一、SCID-hu小鼠模型的概述小鼠模型的概述 将人外周血淋巴细胞和其他人体组织移植于将人外周血淋巴细胞和其他人体组织移植于SCID小鼠，小鼠，使其具有人体的某些免疫学特征，称之为使其具有人体的某些免疫学特征，称之为SCID-hu模型模型 可将自身免疫性疾病患者的淋巴细胞、脾细胞、胸腺细胞可将自身免疫性疾病患者的淋巴细胞、脾细胞、胸腺细胞移植于移植于SCID小鼠，鼠体内出现自身免疫性抗体，可出现相似小鼠，鼠体内出现自身免疫性抗体，可出现相似于患者的自身免疫性组织学损伤。于患者的自身免疫性组织学损伤。 在移植在移植SCID小鼠人皮肤组织中接种黑色素瘤组织，观察小鼠人皮肤组织中接种黑色素瘤组织，观察人正常皮肤组织与瘤组织的相互作用。人正常皮肤组织与瘤组织的相互作用。快小林填柄谅箔寡崔恬屈役让悦滁寺妇斤锐寨遣请薄悬桃良两唐粘咖世艇动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用二、可移植的组织二、可移植的组织1、胎肝、胎胸腺，胎儿骨髓和成年人外周血淋巴细胞、胎肝、胎胸腺，胎儿骨髓和成年人外周血淋巴细胞(PBL)，后者最常用，称之为后者最常用，称之为hu-PBL-SCID。2、特征：免疫重建小鼠体内存在各类、特征：免疫重建小鼠体内存在各类lg，其外周血及淋巴器官，其外周血及淋巴器官中可检出人淋巴细胞。中可检出人淋巴细胞。酣垫吓怨陶磺咖欺气收拍征区忧麦酶滦柠姚防炔球敖绑辱缅吮鹏荡雕眯巷动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用三、存在的问题三、存在的问题 1 1、移植的、移植的、移植的、移植的SCIDSCID小鼠并非小鼠并非小鼠并非小鼠并非100%100%成功，不同小鼠之间个体差成功，不同小鼠之间个体差成功，不同小鼠之间个体差成功，不同小鼠之间个体差异较大，模型缺乏稳定性。异较大，模型缺乏稳定性。异较大，模型缺乏稳定性。异较大，模型缺乏稳定性。 2 2、关于、关于、关于、关于SCIDSCID小鼠体内的淋巴细胞是否具有功能，能否形成小鼠体内的淋巴细胞是否具有功能，能否形成小鼠体内的淋巴细胞是否具有功能，能否形成小鼠体内的淋巴细胞是否具有功能，能否形成继发性或原发性免疫应答的结果存在差异。继发性或原发性免疫应答的结果存在差异。继发性或原发性免疫应答的结果存在差异。继发性或原发性免疫应答的结果存在差异。 3 3、重建的、重建的、重建的、重建的SCIDSCID小鼠，小鼠，小鼠，小鼠，T T细胞易获得免疫重建，但虽有高水细胞易获得免疫重建，但虽有高水细胞易获得免疫重建，但虽有高水细胞易获得免疫重建，但虽有高水平的平的平的平的lglg在小鼠外周血中得以检测，活性在小鼠外周血中得以检测，活性在小鼠外周血中得以检测，活性在小鼠外周血中得以检测，活性B B细胞的数目却极其细胞的数目却极其细胞的数目却极其细胞的数目却极其有限，难以形成原发性抗体反应。有限，难以形成原发性抗体反应。有限，难以形成原发性抗体反应。有限，难以形成原发性抗体反应。 4 4、易发生移植物抗宿主反应导致小鼠死亡。、易发生移植物抗宿主反应导致小鼠死亡。、易发生移植物抗宿主反应导致小鼠死亡。、易发生移植物抗宿主反应导致小鼠死亡。 5 5、重建方法不统一，效果不同。、重建方法不统一，效果不同。、重建方法不统一，效果不同。、重建方法不统一，效果不同。菠瞩期托尉绽效蛹闸箱捐苹舟羞钥勋梨晓将健剥置勾敞捡瘴抬陆箩狰熄鞘动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用四、有益的探索四、有益的探索 移植物方面：移植物方面：移植物方面：移植物方面：FFShirokiShiroki等以抗人等以抗人等以抗人等以抗人CD3CD3抗体、抗体、抗体、抗体、PWMPWM处理及混合淋巴细胞培处理及混合淋巴细胞培处理及混合淋巴细胞培处理及混合淋巴细胞培养等方法，先激活人淋巴细胞后再移植于养等方法，先激活人淋巴细胞后再移植于养等方法，先激活人淋巴细胞后再移植于养等方法，先激活人淋巴细胞后再移植于SCIDSCID小鼠，小鼠，小鼠，小鼠，hu-hu-PBL-SCIDPBL-SCID小鼠的成功率达到小鼠的成功率达到小鼠的成功率达到小鼠的成功率达到86.7%86.7%FFAlegreAlegre以新鲜尸体脾细胞建立的以新鲜尸体脾细胞建立的以新鲜尸体脾细胞建立的以新鲜尸体脾细胞建立的hu-spl-SCIDhu-spl-SCID模型获得成模型获得成模型获得成模型获得成功功功功, ,在小鼠体内存在的人功能性淋巴细胞可排斥移植于小在小鼠体内存在的人功能性淋巴细胞可排斥移植于小在小鼠体内存在的人功能性淋巴细胞可排斥移植于小在小鼠体内存在的人功能性淋巴细胞可排斥移植于小鼠的不同人体的皮肤鼠的不同人体的皮肤鼠的不同人体的皮肤鼠的不同人体的皮肤. .嘛咋乎疹岁四铣叉佩溅棵览晃倪镀根烙优唬腥元哮京暮沙喀鸵鲍临详炕始动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用 宿主方面：宿主方面：宿主方面：宿主方面：FFShippedShipped等以抗等以抗等以抗等以抗NKNK细胞抗体及射线处理细胞抗体及射线处理细胞抗体及射线处理细胞抗体及射线处理SCIDSCID小鼠以抑小鼠以抑小鼠以抑小鼠以抑制其制其制其制其NKNK细胞活性细胞活性细胞活性细胞活性, ,同时利用新生同时利用新生同时利用新生同时利用新生SCIDSCID小鼠小鼠小鼠小鼠NKNK细胞活性细胞活性细胞活性细胞活性低、体内存在多种生长因子的特点进行移植，均促进了低、体内存在多种生长因子的特点进行移植，均促进了低、体内存在多种生长因子的特点进行移植，均促进了低、体内存在多种生长因子的特点进行移植，均促进了免疫重建。免疫重建。免疫重建。免疫重建。FFPollockPollock等的实验表明，等的实验表明，等的实验表明，等的实验表明，CB-17-SCIDCB-17-SCID的免疫重建效果优的免疫重建效果优的免疫重建效果优的免疫重建效果优于于于于C3H-SCIDC3H-SCID，而，而，而，而T T、B B、NKNK细胞三联免疫缺陷小鼠未细胞三联免疫缺陷小鼠未细胞三联免疫缺陷小鼠未细胞三联免疫缺陷小鼠未能成功的免疫重建。能成功的免疫重建。能成功的免疫重建。能成功的免疫重建。畦止歼滦憎导仆植追丙鞍肤藐粥梗避料沮锤蛀汪淀跨批少协光磺屁我屉乎动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用 移植方法：移植方法：移植方法：移植方法：FFSCIDSCID小鼠在移植人淋巴细胞后连续注射人重组生长激小鼠在移植人淋巴细胞后连续注射人重组生长激小鼠在移植人淋巴细胞后连续注射人重组生长激小鼠在移植人淋巴细胞后连续注射人重组生长激素、素、素、素、IL-2IL-2、人主细胞生长因子、巨噬细胞集落刺激因、人主细胞生长因子、巨噬细胞集落刺激因、人主细胞生长因子、巨噬细胞集落刺激因、人主细胞生长因子、巨噬细胞集落刺激因子等细胞因子可促进免疫重建。子等细胞因子可促进免疫重建。子等细胞因子可促进免疫重建。子等细胞因子可促进免疫重建。友咬戳插户公迸逆哈陛铬跨跟播蒙葫确镇油鸭浓驯卤勘疲汇蛙她椽爷虎柜动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用五、五、SCID-hu的应用的应用1 1、病毒学方面、病毒学方面、病毒学方面、病毒学方面 主要用于主要用于主要用于主要用于HIVHIV、肝炎病毒和致瘤病毒等的致病性和抗、肝炎病毒和致瘤病毒等的致病性和抗、肝炎病毒和致瘤病毒等的致病性和抗、肝炎病毒和致瘤病毒等的致病性和抗病毒药物的筛选及疫苗的研制。病毒药物的筛选及疫苗的研制。病毒药物的筛选及疫苗的研制。病毒药物的筛选及疫苗的研制。2 2、免疫学方面、免疫学方面、免疫学方面、免疫学方面 用于研究人类免疫系统的发育过程及功能，包括疾用于研究人类免疫系统的发育过程及功能，包括疾用于研究人类免疫系统的发育过程及功能，包括疾用于研究人类免疫系统的发育过程及功能，包括疾病如何产生和发展、免疫细胞如何发挥作用等。还可制病如何产生和发展、免疫细胞如何发挥作用等。还可制病如何产生和发展、免疫细胞如何发挥作用等。还可制病如何产生和发展、免疫细胞如何发挥作用等。还可制备人单抗以解决目前尚不能用人进行的人体免疫的问题备人单抗以解决目前尚不能用人进行的人体免疫的问题备人单抗以解决目前尚不能用人进行的人体免疫的问题备人单抗以解决目前尚不能用人进行的人体免疫的问题屑碾萝验剁串驳护求滤翟俘迄碗柔把瑶颈守贴费啤庞睁蓄乔旗毯逞寡鹰锻动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用3 3、肿瘤学方面、肿瘤学方面、肿瘤学方面、肿瘤学方面FurukawaFurukawa等等等等以人脾细胞接种于以人脾细胞接种于以人脾细胞接种于以人脾细胞接种于SCIDSCID小鼠进行免疫重建后，小鼠进行免疫重建后，小鼠进行免疫重建后，小鼠进行免疫重建后，再以人结肠癌细胞接种动物，肿瘤生长受到抑制。再以人结肠癌细胞接种动物，肿瘤生长受到抑制。再以人结肠癌细胞接种动物，肿瘤生长受到抑制。再以人结肠癌细胞接种动物，肿瘤生长受到抑制。MurphyMurphy等等等等以抗以抗以抗以抗CD3CD3抗体或抗体或抗体或抗体或IL-7IL-7激活的人外周血淋巴细胞等移激活的人外周血淋巴细胞等移激活的人外周血淋巴细胞等移激活的人外周血淋巴细胞等移植于预先接种结肠癌细胞的植于预先接种结肠癌细胞的植于预先接种结肠癌细胞的植于预先接种结肠癌细胞的SCIDSCID小鼠，均显著抑制了肿瘤小鼠，均显著抑制了肿瘤小鼠，均显著抑制了肿瘤小鼠，均显著抑制了肿瘤生长。生长。生长。生长。SabzevariSabzevari等等等等将人黑色素瘤细胞将人黑色素瘤细胞将人黑色素瘤细胞将人黑色素瘤细胞M24M24与人与人与人与人PBLPBL共同培养后，建共同培养后，建共同培养后，建共同培养后，建立了对立了对立了对立了对M24M24细胞具有杀伤作用的细胞毒细胞，此细胞具有杀伤作用的细胞毒细胞，此细胞具有杀伤作用的细胞毒细胞，此细胞具有杀伤作用的细胞毒细胞，此CTLCTL移植移植移植移植于于于于SCIDSCID小鼠后特异性抑制了小鼠后特异性抑制了小鼠后特异性抑制了小鼠后特异性抑制了M24M24细胞的转移。细胞的转移。细胞的转移。细胞的转移。拓姬耀君兑痕撞拢帮祖簇证花朝敬伯京壶柜层仑海农货渤氓才警珊祥贝腮动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用4 4、血液方面、血液方面、血液方面、血液方面 给给给给SCID-huSCID-hu小鼠输入人骨髓干细胞，在其循环血液中小鼠输入人骨髓干细胞，在其循环血液中小鼠输入人骨髓干细胞，在其循环血液中小鼠输入人骨髓干细胞，在其循环血液中可使人类各种血细胞得以发育，故可用于研究人类镰刀性可使人类各种血细胞得以发育，故可用于研究人类镰刀性可使人类各种血细胞得以发育，故可用于研究人类镰刀性可使人类各种血细胞得以发育，故可用于研究人类镰刀性贫血、白血病及地中海贫血等。贫血、白血病及地中海贫血等。贫血、白血病及地中海贫血等。贫血、白血病及地中海贫血等。5 5、其它医学研究、其它医学研究、其它医学研究、其它医学研究 移植人肝组织于移植人肝组织于移植人肝组织于移植人肝组织于SCID-huSCID-hu小鼠，即可用于人肝炎感染小鼠，即可用于人肝炎感染小鼠，即可用于人肝炎感染小鼠，即可用于人肝炎感染的研究，也可进行人肝细胞正常功能的研究，如肝细胞是的研究，也可进行人肝细胞正常功能的研究，如肝细胞是的研究，也可进行人肝细胞正常功能的研究，如肝细胞是的研究，也可进行人肝细胞正常功能的研究，如肝细胞是如何产生胆固醇的研究如何产生胆固醇的研究如何产生胆固醇的研究如何产生胆固醇的研究 。糖尿病孕妇流产的胎儿组织也。糖尿病孕妇流产的胎儿组织也。糖尿病孕妇流产的胎儿组织也。糖尿病孕妇流产的胎儿组织也可植入可植入可植入可植入SCIDSCID小鼠，以揭开糖尿病基因组成之谜。小鼠，以揭开糖尿病基因组成之谜。小鼠，以揭开糖尿病基因组成之谜。小鼠，以揭开糖尿病基因组成之谜。毛乎昭习虾夹靳貌喜嘲獭阐酞贱埠斯志湃信衷览弘绸厌腺嘴刺雇苯凤葛逞动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用FFSCID-huSCID-hu小小小小鼠鼠鼠鼠迄迄迄迄今今今今已已已已用用用用于于于于人人人人类类类类生生生生理理理理学学学学、病病病病理理理理学学学学、病病病病毒毒毒毒学学学学、免免免免疫疫疫疫学学学学和和和和血血血血液液液液学学学学的的的的研研研研究究究究。它它它它在在在在用用用用于于于于药药药药物物物物筛筛筛筛选选选选和和和和疫疫疫疫苗苗苗苗效效效效应应应应与与与与安安安安全全全全性性性性的的的的实实实实验验验验。SCID-huSCID-hu小小小小鼠鼠鼠鼠应应应应用用用用领领领领域域域域可可可可进进进进一一一一步步步步拓拓拓拓宽宽宽宽，前前前前景景景景广广广广阔阔阔阔。研研研研究究究究者者者者可可可可根根根根据据据据其其其其研研研研究究究究目目目目的的的的需需需需要要要要，巧巧巧巧妙妙妙妙设设设设计计计计，赋赋赋赋予予予予SCID-huSCID-hu小小小小鼠鼠鼠鼠人人人人类类类类的的的的任任任任何何何何组组组组织织织织器器器器官官官官，整整整整个个个个系系系系统统统统或或或或部部部部分分分分，进进进进行更多科学的深入研究。行更多科学的深入研究。行更多科学的深入研究。行更多科学的深入研究。钎泞咖厩冈文突玉痕短伙敌厂垦腑皆圭袱柬讳棺戎恬烷量曝溯歌裕湛笋俯动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用归伟吵潭彻拄逮汪妓锚腾钓张垣蓑震犬核停谱靡挝筷哆铝度兢蜜神光嘿诺动物模型的建立与应用动物模型的建立与应用