CHO细胞大规模悬浮培养流程简介一 悬浮培养特点（suspension culture)v非贴壁依赖型细胞的一种培养方式非贴壁依赖型细胞的一种培养方式v细胞悬浮于培养基中生长或者维持细胞悬浮于培养基中生长或者维持v某些贴壁依赖型细胞经过适应和选择后也可某些贴壁依赖型细胞经过适应和选择后也可用此方法培养用此方法培养v使用振荡或者转动装置使细胞始终处于悬浮使用振荡或者转动装置使细胞始终处于悬浮状态状态2 摇瓶细胞传代v摇瓶细胞培养2-3天后，细胞密度增高，营养物逐渐耗尽，需要对细胞进行扩培v根据细胞密度计算扩培体积v当达到反应器扩培接种细胞数量要求后，停止摇瓶培养，接种至反应器进行扩培3 反应器扩培v在超净台内将摇瓶细胞合并至接种瓶内v用无菌焊接机将接种瓶管路与反应器管路无菌焊接，将细胞液打入反应器进行扩培v当反应器内细胞密度达到要求后，接种至下一级反应器开始生产阶段培养4 反应器生产阶段培养v取样v补碱v补料v补糖v收获取样v取样瓶灭菌v将取样瓶连接至反应器取样口，开始管路灭菌v灭菌完成后等待管路冷却v开始取样v取样完成后用纯蒸汽冲洗取样管路v将所取细胞液测定细胞密度、活力、pH值等参数补碱、补糖、补料v当反应器内pH值低于6.8左右时，需要进行补碱v当反应器内糖含量低于2g/L时，需要进行补糖v当反应器内营养物逐渐耗尽，需要根据工艺进行补料收获细胞液v在培养末期，细胞密度及活力都开始下降，此时应该进行细胞液的收获，收获时保证细胞活力高于60%v预先准备好深层过滤膜包及管路的安装和保压v将反应器降温至18左右，连接深层过滤夹具进口，开始截留细胞，收获细胞液v将细胞液转入收集罐内或者与纯化进行交接谢谢结束语结束语谢谢大家聆听！谢谢大家聆听！13