补充申请注册事项 22资料项目 5目录目录122.12.22.3344.14.1.14.1.24.24.2.14.2.24.2.355.15.25.2.15.2.25.2.35.2.45.2.55.2.65.2.75.3677.17.27.2.17.2.27.2.37.2.47.37.3.17.3.27.3.37.3.4品种概述变更事项及变更原因变更事项变更内容及变更理由变更的合理性评价和风险分析变更前后辅料相关情况及其质量标准制剂处方研究湿法制粒处方研究采用清膏湿法制粒采用喷雾粉湿法制粒流化床一步制粒成型研究喷雾速率考察雾化压力考察小试样品的制备生产工艺研究与验证湿法制粒工艺研究流化床一步制粒工艺研究与验证变更后 XXXX 工艺流程图中试工艺验证样品生产工艺3 批中试工艺验证生产信息主要的生产设备各工序质量控制点中间产品的控制三批中试验证结果和评价变更前后的制备方法比较包装材料XXXX 质量研究性状鉴别仪器与试药丹参薄层鉴别川芎薄层鉴别葛根素薄层鉴别检查水分溶化性粒度微生物限度检查111122333410101111121213131415161617171818191919192024283232333333补充申请注册事项 22资料项目 57.47.4.17.4.27.4.37.4.488.18.299.19.29.39.49.59.69.6.19.6.2含量测定仪器与试药丹参含量测定方法学验证葛根含量测定方法学验证XXXX(未添加蔗糖)含量测定变更后连续 3 批样品的检验报告书样品信息检验结果稳定性研究试验仪器对照品和对照药材试验样品研究内容研究结论稳定性数据加速试验长期试验3535354453545454555555565657585862补充申请注册事项 22资料项目 51 1、品种概述、品种概述1.1 药品名称药品名称药品名称：XXXX1.2规格：规格：每袋装 10g1.3批准文号批准文号：国药准字 Z620201541.4批准时间批准时间：2002 年 7 月 101.5执行标准执行标准国家药品标准1.6有效期有效期：36 个月1.7 历次补充申请及最近一次再注册的情况历次补充申请及最近一次再注册的情况：补充申请补充申请：2012年9月5日： 企业名称由“XXXX特种药材饮片生产有限公司”变更为“XXXX药业有限公司”，生产地址不变。再注册情况再注册情况：2015 年 7 月 24 日，获得甘肃省食品药品监督管理局“药品再注册批件（批件号：）”，药品批准文号有效期：2020 年 7 月 23 日。2 2、变更事项及变更原因、变更事项及变更原因2.12.1 变更事项变更事项本次XXXX补充申请为“变更药品处方中已有药用要求的辅料”，即辅料由“蔗糖”变更为“糊精、甜菊素”。涉及到的关联变更包括： 增加药品规格， 即在原规格“每袋装 10g”基础上， 增加“每袋装 6g（未添加蔗糖）”。2.22.2 变更内容及变更理由变更内容及变更理由本品变更前后的主要变化包括：批量、辅料种类及用量。生产设备、制备方法、工艺参数等均未变化。表1. XXXX 变更前、后主要变化及原因变更内容批量变更前8 万袋变更后1 万袋原因变更研究阶段的批量较小，生产所使用的设备能满足该批量要求。辅料种类蔗糖 （适量） 糊精（适量）、甜菊根据临床需求， 由“有糖颗粒”变更为1补充申请注册事项 22资料项目 5及用量制得 1000g素 （2.4g） ， 制得 600g“无糖颗粒”， 通过处方研究， 确定了变更后的辅粒用量和种类。变更前后辅料用量不同，规格发生规格每袋装 10g每袋装 6g了变更，但每袋所含生药量没有变化。2.32.3 变更的合理性评价和风险分析变更的合理性评价和风险分析XXXX（添加蔗糖）的辅料为蔗糖，因药物的异味和苦味，其中蔗糖用量大，易吸潮，不宜用于老年人、糖尿病人等禁糖患者，临床应用局限。为克服中药颗粒剂因含糖而致的各种弊病，可对制剂进行改进，替换辅料蔗糖， 研发为中药无糖颗粒剂。其一，解除了糖尿病患者、肥胖的群体或潜在的代谢综合征患者等人群的用药限制，制剂得以更广泛的应用于各领域，并更好的服务与患者；其二，解决了颗粒中蔗糖易吸潮、软化的问题，无糖颗粒剂使药物更利于保存。传统含糖颗粒改制为无糖剂型后的优良特点，使无糖颗粒剂受到市场及临床的青睐。本品变更的辅料为常用辅料（糊精、甜菊素），具有法定标准，符合辅料管理要求，且辅料变更幅度符合各辅料允许使用范围。此类变更不会引起药用物质基础的改变，对药物的吸收、利用不会产生明显影响，不会引起安全性、有效性的明显改变。根据已上市中药变更研究技术指导原则（一），本次变更属类变更。经检索国家药品监督管理局网站国产药品数据库， XXXX 有“不含蔗糖”的批准文号，如：北京亚东生物制药（安国）有限公司，规格：8g；河南兴源制药有限公司，规格：5g；哈尔滨大洋制药股份有限公司，规格：6g。通过对变更前后产品的质量和稳定性研究比较， 变更后的产品与变更前产品质量无明显差异。综上所述，本次辅料的变更是合理可行，对本品的产品有效性、安全性不会产生影响。3. 3. 变更前后辅料相关情况及其质量标准变更前后辅料相关情况及其质量标准表2. 原辅料来源、批准文号及执行标准辅料变更前蔗糖生产商湖南九典宏阳制药股份批准文号湘食药辅准字执行标准ChP2015 年版四部产品登记号/2补充申请注册事项 22资料项目 5有限公司辽宁东源药业有限公司曲阜圣仁制药有限公司F20090025糊精变更后甜菊素/ChP2015 年版四部F20180000068/ChP2015 年版四部F20180000748糊精、甜菊素辅料资质文件见附件。4 4、制剂处方研究、制剂处方研究根据国家食品药品监督管理局药品注册管理办法及已上市中药变更研究的技术指导原则（一）中有关规定，在原 XXXX 的煎煮、浓缩、干燥等工艺不变的基础上，通过一系列优选试验，筛选辅料的种类和用量，确定 XXXX（未添加蔗糖）的制剂处方。在制剂处方研究过程中， 采用颗粒剂常用的湿法制粒和流化床一步制粒 2 种方式进行研究。4. 14. 1 湿法制粒处方研究湿法制粒处方研究选择颗粒剂常用辅料糊精和可溶性淀粉，设计不同的成型处方进行辅料筛选。4. 1.14. 1.1 采用清膏湿法制粒采用清膏湿法制粒取处方量的药材，加水煎煮二次，第一次1.5小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.08，趁热滤过，滤液浓缩至相对密度为1.30（80）和1.35（80）的清膏。分别取不同相对密度（1.30、1.35）的XXXX清膏适量，加入不同比例的糊精，混匀，并加入适量乙醇，14目筛制粒，结果如下：表3. 糊精用量筛选试验结果清膏相对密度清膏：糊精1:1.01.301:1.21:1.41:1.6清膏用量糊精用量乙醇用量（g）50.5550.7851.1050.33（g）50.6261.0471.5880.553（ml）1223制粒结果软材较黏，不能制粒软材较黏，制粒困难软材较黏，制粒困难软材黏，颗粒形状一般补充申请注册事项 22资料项目 51:1.81:1.21.351:1.61:1.854.0940.6041.0940.0597.3748.7165.8872.113222软材握之成团，触之即散，颗粒形状较好软材较粘，制粒困难软材软材握之成团， 触之即散，颗粒形状较好软材较松散， 颗粒细粉较多结论结论：根据初步试验摸索，清膏相对密度在 1.30 时，清膏：糊精（1:1.8）较适宜， 制成的颗粒形状较好， 经折算 XXXX 的规格相当于每袋 8g； 清膏相对密度在 1.35时，清膏：糊精（1:1.6）较适宜，制成的颗粒形状较好，经折算 XXXX 的规格相当于每袋 7g，均未达到拟定的规格要求（小于 6g/袋）。4. 1.24. 1.2 采用喷雾粉湿法制粒采用喷雾粉湿法制粒 制剂规格的确定制剂规格的确定按按5g/5g/袋规格设计的初步研究袋规格设计的初步研究称取XXXX喷雾粉（批号20190103，喷雾干燥制得，干膏率15.6%）23.4g，分别与26.6g糊精或可溶性淀粉混匀， 以不同浓度的乙醇为润湿剂制粒， 观察制粒的难易程度，结果如下：表4. 辅料筛选试验结果（规格：5g/袋）序号12345678910喷雾粉（g）23.4523.4423.5123.4823.4023.4923.5223.5523.4123.42糊精（g）26.68/26.71/26.66/26.61/26.65/可溶性淀粉（g）/26.61/26.66/26.65/26.60/26.674乙醇浓度（%）55制粒情况软材较黏，制粒困难软材较黏，制粒困难软材较黏，制粒困难软材较黏，制粒困难软材较黏，制粒困难软材较黏，制粒困难软材较黏，制粒困难软材较黏，制粒困难软材结小团块，制粒困难软材结小团块，制粒困难60657075补充申请注册事项 22资料项目 5结论结论：按 5g/袋设计成型处方，以糊精或可溶性淀粉为辅料，用不同浓度的乙醇为润湿剂制软材，均结团发黏，难以制粒，故本品不适合制备 5g/袋的规格。按按6g/6g/袋规格设计的初步研究袋规格设计的初步研究按6g/袋规格设计成型处方试验， 称取XXXX喷雾粉 （批号20190103， 干膏率15.6%）23.4g，与36.6g糊精或可溶性淀粉制粒，观察制粒的难易程度，结果如下：表5. 辅料筛选试验结果（规格：6g/袋）序号12345喷雾粉（g）23.4723.5023.4223.4623.51糊精（g）36.62/36.63/36.60可溶性淀粉（g）/36.65/36.69/6067891023.4123.4023.4223.5523.43/36.61/36.62/36.68/36.66/36.61乙醇浓度（%）50制粒情况软材黏，制粒困难软材黏，制粒困难软材较黏，制粒困难软材较黏，制粒困难软材握之成团，触之即散，颗粒形状较好软材握之成团，触之即散，颗粒形状较好65软材较松散，颗粒细粉较多软材较松散，颗粒细粉较多软材松散，颗粒细粉多软材松散，颗粒细粉多5570结论结论：以糊精或可溶性淀粉为辅料，使用 60%的乙醇适量制粒，颗粒形状较好，XXXX（未添加蔗糖）能够制成 6g/袋的规格。不同处方配比（糊精和可溶性淀粉）辅料筛选不同处方配比（糊精和可溶性淀粉）辅料筛选根据上述 6g/袋规格的处方预实验情况，考察喷雾粉和不同比例的糊精和可溶性淀粉混匀，以60%的乙醇为润湿剂制粒，以制粒情况、溶化性、成型性、流动性、吸湿性为指标进行综合评价。制粒情况制粒情况： 以“揉之成团， 触之即散”为软材的标准， 以大小均匀为湿颗粒的指标。溶化性溶化性：按ChP2015年版四部通则0104“颗粒剂”项下溶化性检查方法：取供试品10g，加热水200ml，搅拌5分钟，立即观察，应全部溶化或轻微浑浊，均不得有焦屑5补充申请注册事项 22资料项目 5等异物。成型性成型性： 用颗粒的成型率来测定， 按 ChP2015 年版四部通则 0982 “粒度和粒度分布测定法”（第二法双筛分法）测定，收集能通过 1 号筛而不能通过 5 号筛的颗粒称重，按下式计算成型率，颗粒成型率 =（过筛后颗粒重量 / 过筛前颗粒重量）100%。流动性流动性：颗粒流动性以休止角测定来衡量，休止角的测定采用固定漏斗法 ，即将 3 只漏斗串联并固定于水平放置的坐标纸上适宜高度处， 使漏斗下口距坐标纸的距离为 H（1cm），小心地将样品沿漏斗壁倒入最上面的漏斗中，直到最下面漏斗药粉的圆锥体尖端接触到漏斗口为止，此时由坐标纸测出圆锥体底部的直径R，计算出休止角（tan=2H/R）。每个处方选取一个，测定三次，求其平均值。休止角应控制在40o以下可满足颗粒装量差异的要求。吸湿性试验吸湿性试验：将称量瓶烘至恒重，冷却后准确称重，分别加入 1.0g 左右不同处方的颗粒，平铺于瓶底，精密称重后，放入有KNO3过饱和溶液的干燥器内(RH=92.5%)，将称量瓶打开，定时称重，按下式计算吸湿百分率，吸湿率=（吸湿后颗粒重量-吸湿前颗粒重量）/吸湿前颗粒重量100%。按表 7 设计的不同制剂处方配比，以60%的乙醇适量制粒，干燥，整粒，每个处方进行 3 次试验，结果见表 8、9、10。表6. 不同制剂处方配比处方号喷雾粉 g糊精 g可溶性淀粉 gA23.433.03.7B23.429.37.32表7. 不同处方配比的筛选试验结果（制粒情况、溶化性、成型率）处方号1A23B1制粒情况软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好溶化性符合规定符合规定符合规定符合规定成型率（%）92.893.192.293.592.692.7平均成型率（%）C23.425.611.0D23.422.014.6E23.418.318.3F23.436.6/6补充申请注册事项 22资料项目 5231C231D231E231F23软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好软材适宜，颗粒形状好符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定91.992.694.193.492.892.693.394.392.693.291.794.692.194.493.792.593.493.4表8. 不同处方配比的筛选试验结果（流动性）处方号1A231B231C231D23直径 R（cm）3.03.22.93.13.13.32.92.93.13.13.33.17休止角（）33.732.034.632.832.831.234.634.632.832.831.232.8平均休止角（）33.432.334.032.3补充申请注册事项 22资料项目 51E231F233.23.43.02.93.33.132.030.533.734.631.232.832.932.1表9. 各制剂处方颗粒在 RH=92.5%的环境中的吸湿百分率(%)处方号ABCDEF2 h1.621.581.681.871.821.844 h2.642.842.812.752.852.816 h3.633.933.913.833.923.8924 h12.5812.6212.7112.5812.2012.6448 h17.4717.5317.9117.7417.9217.27结论结论：不同处方配比辅料筛选结果表明，不同比例的糊精与可溶性淀粉混匀进行制粒，对XXXX（无糖型）的制备无明显影响，即：各试验组制备的软材适宜，颗粒形状较好；颗粒成型率良好；溶化性符合规定；颗粒流动性好（休止角小于 40）；吸湿性差异不大。在保证制剂质量的前提下，应尽量减少辅料种类及用量，以降低成本，减少服用量。糊精价格较低，且颗粒成型性好，成品颗粒水溶性好，因此，确定本品选用糊精为制剂成型辅料。矫味剂的筛选矫味剂的筛选XXXX 喷雾粉苦口难咽，为提高病人服药的顺应性，需在成型处方中加入一定量的矫味剂。甜菊素甜度是蔗糖的200300 倍，价格是蔗糖的30 倍，是常用的无糖颗粒矫味剂，己载入ChP2015 年版，其安全性高、热量低、应用广泛，故选用甜菊素作为本品的矫味剂。矫味剂用量筛选试验：按优选的处方，称取喷雾粉 54g，糊精约 66g，分别按成型处方量的 0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%加入甜菊素，混匀，用 60%乙醇8补充申请注册事项 22资料项目 5适量为润湿剂，14 目筛制粒，干燥，整粒。取制得的颗粒 6g，溶于 100ml 热水中，以口感为评价指标，筛选适宜的矫味剂用量。表10. 甜菊糖用量考察甜菊素用量口感情况0.1%苦0.2%微苦0.3%欠佳0.4%适宜，口感佳0.5%偏甜0.6%很甜结论结论：当甜菊素的用量占成型处方量的 0.4时，甜度适宜，口感佳，所以选择加入 0.4的甜菊素进行矫味。临界相对湿度的测定临界相对湿度的测定(CRH)(CRH)临界相对湿度测定：在已恒重的称量瓶底部放入厚约 2mm 的成品颗粒，105烘至恒重，准确称量后， 分别置于盛有不同浓度硫酸或不同盐的过饱和溶液的干燥器内（称量瓶盖打开），于 25恒温培养箱（HSW-250 型）中保持 96h 后称量，计算吸湿率，以吸湿率（）为纵坐标，相对湿度（）为横坐标作图，曲线两端的切线交点对应的横坐标即为临界相对湿度。表11. 25条件下不同相对湿度的颗粒吸湿率溶液54%硫酸溶液RH（%）吸湿百分率（%）平均吸湿百分率（%）29.553.963.995.975.818.398.4412.4412.4323.9823.2332.1332.9192.4840.8740.8393.9748%硫酸溶液40.525.8944%硫酸溶液48.528.4239.5%硫酸溶液57.7012.44氯化钠过饱和溶液75.2823.60氯化钾过饱和溶液84.2632.52硝酸钾过饱和溶液40.85补充申请注册事项 22资料项目 5图 1. XXXX（未添加蔗糖）相对临界湿度图结论结论：由“XXXX 相对临界湿度图”可见，XXXX 的临界相对温度为 61.0，故在生产时，分装车间的相对湿度应控制在 61.0以下。4.24.2 流化床一步制粒成型研究流化床一步制粒成型研究一步制粒机是一种将喷雾干燥技术和流化床技术结合为一体的新型制粒工艺设备。其原理是热空气从底部分布板进入流化床制粒室， 将制粒室中的粉末鼓动悬浮成流化态，并发生混匀，粘合剂在压缩空气的作用下雾化成细小液滴，喷洒在流化床制粒室中呈流化状态的粉末上使之胶结成团进行制粒。 与传统的颗粒制备工艺湿法制粒相比较，一步制粒技术集传统的制粒、干燥、混匀功能于一体，其优势在于该技术使得物料受热均匀，有效物质分散均匀，产品的产出率高。按“喷雾粉湿法制粒工艺（规格：6g/袋）”确定的的辅料和用量，采用流化床一步制粒对 XXXX 成型制粒技术进行研究，以期获得工艺参数稳定、质量合格的产品。成型研究所使用的设备：重庆英格 WBF-5C 流化床制粒干燥机4.2.14.2.1 喷雾速率考察喷雾速率考察根据变更前的 XXXX 的生产工艺要求， 物料温度控制在 5565， 研究中通过设置进风温度达到物料温度要求。喷雾速率考察试验：称取 XXXX 喷雾粉 156g、糊精 244g 置于流化床中，用水作润湿剂，采用不同的喷雾速率制粒，待颗粒成型后，继续干燥 20 分钟。流化床参数设置如下：1 0补充申请注册事项 22资料项目 5喷雾速率：15 r/min、20 r/min、25 r/min、30r/min进风温度：90雾化压力：1.0kg/cm2表12. 流化床一步制粒喷雾速率考察结果喷雾速率（r/min）15202530喷雾粉重量（g）156.27156.83156.02156.19糊精重量（g）244.12244.51244.75244.13颗粒总重（g）371.42379.06373.81385.14粒度不合格品重量（g）72.9346.4823.1074.05成型率（%）80.3687.7493.8280.77注：成型率=（颗粒总重-不合格品重量/颗粒重量）100%结论：结论：当喷雾速率在 25r/min 时，XXXX 成品率较高，故选择以 25r/min 作为小试一步制粒研究的喷雾速率。4.2.24.2.2 雾化压力考察雾化压力考察雾化压力考察试验：称取处方量配比 XXXX 喷雾粉 156g、糊精 244g 置于流化床中，用水作润湿剂，采用不同的雾化压力制粒，待颗粒成型后，继续干燥 20 分钟。流化床参数设置如下：雾化压力：0.75 kg/cm2、1.2 kg/cm2、1.4 kg/cm2进风温度：90喷雾速率：25r/min表13. 流化床一步制粒雾化压力考察结果雾化压力（kg/cm2）0.751.201.40喷雾粉重量（g）156.03156.44156.28糊精用量（g ）244.51244.01244.72颗粒总重（g）379.38368.81374.52粒度不合格品重量（g）75.7531.2363.92成型率（%）80.0391.5382.93结论：结论：在雾化压力为 1.20 kg/cm2时，颗粒成型率较好，在 0.75 kg/cm2时，颗粒易结块，塌床，而 1.40 kg/cm2时，颗粒粉性较高，故以雾化压力为 1.20 kg/cm2作为XXXX 的制备工艺参数。1 1补充申请注册事项 22资料项目 54.2.34.2.3 小试样品的制备小试样品的制备小试样品制备方法：称取处方量配比 XXXX 喷雾粉 234g、糊精约 364g、甜菊素约 2.4g 置于流化床中，用水作润湿剂，待颗粒成型后，继续干燥 20 分钟。按上述试验确定的流化床参数设置：进风温度：90喷雾速率：25r/min雾化压力：1.20 kg/cm2表14. 流化床一步制粒三批小试样品考察结果喷雾粉批号重量(g)20190308-120190308-220190308-3糊精用甜菊素颗粒总量(g)用量(g)重(g)粒度不合格品重量(g)44.60成型率 水分 休止（%）(%)角溶化性234.01363.692.51573.1792.221.4729符合规定符合规定符合规定234.24363.612.43581.0634.9393.991.6528234.17363.642.49579.2236.3293.731.6029结论：3 批小试样品颗粒成型率良好；水分符合颗粒剂要求；溶化性均符合颗粒剂规定；休止角均在 40以下，流动性较好。试验结果表明：一步制粒能够满足制备XXXX（未添加蔗糖）的要求。5 5、生产工艺研究与验证、生产工艺研究与验证按上述优选出的制备湿法制粒和流化床一步制粒方法进行中试生产， 结果表明采用流化床一步制粒方式生产 XXXX（未添加蔗糖），工艺设计合理，具有可重复性和易操作性，产品质量稳定可控，可将其作为本品的成型工艺。5.15.1 湿法制粒工艺研究湿法制粒工艺研究取 XXXX 喷雾粉（批号 20190103，干膏率 15.6%）、糊精置槽形混合机（CH-200 型）中，混匀，加入 60%乙醇适量制成软材，制粒，于鼓风干燥箱 5565干燥，用振荡筛整粒。1 2补充申请注册事项 22资料项目 5表15. 湿法制粒中试生产情况生产批号20190401批量物料用量物料用量物料名称通脉喷雾粉糊精60%乙醇物料编号/批号20190304F002-201901-01/主要生产设备主要生产设备设备名称槽形混合机摇摆颗粒机设备型号CH-200LYK-160D生产厂家常州品正干燥设备有限公司重庆市科旭制药机械设备制造有限公司重庆市科旭制药机械设备制造有限公司配料量25kg35kg适量1 万袋鼓风干燥机LGL-120生产数据生产数据颗粒总重合格颗粒重量 （整粒后）收率50.01kg41.04kg68.4%结论：结论：在制粒过程中，软材搅拌时间稍长，软材会发粘，经摇摆式制粒机制粒困难，粘网，且干燥过程中存在粘连成饼的现象，成品颗粒收率低，因此，确定本品成型工艺不采用湿法制粒。5.25.2 流化床一步制粒工艺研究与验证流化床一步制粒工艺研究与验证按变更前 XXXX 成型工艺参数要求，确定本品的流化床一步制粒工艺参数，变更前后未改变。5.2.15.2.1 变更后变更后 XXXXXXXX 工艺流程图工艺流程图1 3补充申请注册事项 22资料项目 5图 2. XXXX（未添加蔗糖）工艺流程图5.2.25.2.2中试工艺验证样品生产工艺中试工艺验证样品生产工艺制粒制粒：称取通脉喷雾粉、糊精、甜菊素，加入一步制粒机中，按 LGL-120 流化床制粒干燥机标准操作及维护保养规程 JSSB01-046 操作， 设置进风温度 90120，控制物料温度在 5565，风机频率控制在 2550HZ；喷液速度控制在 540rpm，将纯化水通过喷枪喷入沸腾床，使物料形成均匀的颗粒并干燥，取出，整粒，包装。整粒：整粒：按漩涡振荡筛标准操作及维护保养规程JSSB01-019 操作，将干颗粒进行整粒，上层过 10 目筛，下层过 80 目筛，使其不能通过的颗粒总和不得过 14%。混合：混合：整粒后的颗粒按批量进行混合，操作时用真空上料机吸入三维混合机中，按三维混合机标准操作及维护保养规程JSSB01-016 操作，混合 15 分钟。内包装内包装： 按 DXDK40IV 型自动颗粒包装机的操作与维护保养规程 JSSB01-1011 4补充申请注册事项 22资料项目 5操作，开启自动颗粒包装机，包装成 6g/袋。5.2.35.2.33 3 批中试工艺验证生产信息批中试工艺验证生产信息表16. 三批中试验证生产信息批号批量生产日期生产地点201904021 万袋2019.4.10201904031 万袋2019.4.11201904041 万袋2019.4.11XXXX 药业有限公司固体制剂车间物料用量物料用量物料名称喷雾粉糊精编码/批号20190304F002-201901-01F028-201903-01B221-201904-01用量（kg）25.0134.75编码/批号20190305F002-201901-01F028-201903-01B221-201904-01生产数据生产数据用量（kg）26.5033.26编码/批号20190306F002-201901-01F028-201903-01B221-201904-01用量（kg）26.5133.25甜菊素0.240.240.24复合膜12.3011.9011.77颗粒总重（kg）合格颗粒重量（整粒后）（kg）总混后颗粒重（kg）59.4260.8260.0057.3558.8558.7857.0057.5358.321 5补充申请注册事项 22资料项目 55.2.45.2.4 主要的生产设备主要的生产设备表17. 主要的生产设备工序设备名称流化床制粒干燥机旋涡振荡筛三维混合机规格型号数量1 台生产能力生产厂家重庆市科旭制药机械设备制造有限公司江苏瑰宝集团有限公司天津市三桥包装机械有限责任公司制粒LGC-12060-140 kg/批整粒总混内包装ZK-650SBH-8001 台180-2000 kg/h1 台750L/380kg自动颗粒包装机DXDK-40VI1 台50-110袋/分钟5.2.55.2.5 各工序质量控制点各工序质量控制点表18. 各工序质量控制点质量监控点控制项目外观、品名、批次、合格状态标志品名、有效期、批号、数量水分流化床干燥温度整粒混合筛网时间核对品名、批次、数量、状态标识装量、封口封口袋身封口牢固，无脱膜、漏气现象产品批号、生产日期、有效期至1 6监控标准应无肉眼可见异物；有检验报告书，核对品名、批次、合格状态标志不得有差错 7%90120上层筛为 10 目，下层筛为 80目15 分钟不得有差错6g5%喷雾粉、辅料投料制粒干燥装量差异补充申请注册事项 22资料项目 55.2.65.2.6 中间产品的控制中间产品的控制本品中间产品检查方法与限度见表 20；三批中试验证样品中间体检测结果见表21。表19. 中间产品的质量标准中间体名称检测项目性状粒度内控标准本品为棕黄色至棕褐色的颗粒；气微，味甜、微苦照粒度测定法（ChP2015 年四部通则 0982）测定，不能通过一号筛与能通过五号筛的总和，不得过 14%取本品 6g，加热水 200ml，搅拌 5 分钟，立即观察，应全部溶化或轻微浑浊。 （ChP2015 年四部通则 0104）照水分测定法（ChP2015 年四部通则 0832）测定，不得过 7.0%。本品每 6g 含葛根以葛根素(C21H20O9)计，不少于50mg， 含丹参以丹酚酸 B(C36H30O16)计， 不少于 30mg待包装品溶化性水分含量表20. 三批中试验证样品中间体检测结果项目性状粒度溶化性水分含葛根素/袋201904022019040320190404本品为棕黄色颗本品为棕黄色颗本品为棕黄色颗粒；微苦8%颗粒全部溶化1.3%84.6 mg43.2 mg粒；微苦10%颗粒全部溶化1.3%79.8 mg57.6 mg粒；微苦5%颗粒全部溶化1.3%85.8 mg48.6 mg量丹酚酸 B/袋5.2.75.2.7 三批中试验证结果和评价三批中试验证结果和评价表21. 工艺验证结果汇总表工序制粒工序验证结果经验证，制粒工序物料温度、雾化压力、喷雾速率、筛网目数均符1 7补充申请注册事项 22资料项目 5合工艺要求范围。总混工序包装工序经验证，总混工序混合时间、混合均匀度均符合工艺要求范围。经验证，包装工序装量差异、设定纵封温度、横封温度均符合工艺要求范围。5.35.3 变更前后的制备方法比较变更前后的制备方法比较通脉胶囊变更前后制备方法中，除辅料种类、用量以及制成总量发生改变外，其他制备过程均未变化，变更前后的制备方法比较如下：表22. 变更前后的制备方法比较处方丹参 500g川芎 500g葛根 500g以上三味，加水煎煮二次，第一次 1.5 小时，第二次 1 小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度 1.08（80），趁热滤过，变更前制备方法滤液浓缩至适量，加入蔗糖粉适量，制成颗粒，低温干燥，制成1000g；或喷雾干燥，加入蔗糖粉适量，混匀，制成颗粒 1000g，即得。以上三味，加水煎煮二次，第一次 1.5 小时，第二次 1 小时，合变更后制备方法并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度 1.08（80），趁热滤过，滤液浓缩至适量，喷雾干燥，加入糊精适量，甜菊素2.4g，混匀，制成颗粒 600g，即得。6 6、包装材料、包装材料变更前后的包装材料未发生改变，包材的类型、来源及相关证明文件如下：表23. 包材类型、来源及相关证明文件项 目包材类型包材生产商包材注册证号包材注册证有效期包材质量标准编号药品审评中心备案登记号1 8包装材料聚酯/铝/聚乙烯药用复合膜徐州龙润医药包装有限公司国药包字 201602832021 年 03 月 14 日YBB00172002-2015B20190000390补充申请注册事项 22资料项目 5附件： 徐州龙润医药包装有限公司营业执照附件：聚酯/铝/聚乙烯药用复合膜注册证附件：聚酯/铝/聚乙烯药用复合膜质量标准和检验报告7 7、XXXXXXXX 质量研究质量研究按照通脉胶囊的质量标准（WS3-B-0824-91-2015）对变更后样品的质量标准进行了研究，对薄层鉴别（丹参、川芎、葛根）、含量测定（丹酚酸B、葛根素）方法学进行了考察，通过方法学考察，确定仍采用原质量标准对本品进行控制（鉴别、含量测定项下的样品取样量因规格的改变作了相应的调整）。拟定的 XXXX(未添加蔗糖)的质量标准草案见附件7.17.1 性状性状根据三批 XXXX(未添加蔗糖)性状结果，暂定本品性状为：棕黄色至棕褐色的颗粒；气微，味甜、微苦。表24. 变更前后 XXXX 性状比较批号20190309变更前201903102019031120190402变更后20190403201904047.2 .2 鉴别鉴别7.2.17.2.1 仪器与试药仪器与试药（1 1）仪器）仪器ME204E 万分之一电子天平（梅特勒托利多）、ZF-2 三用紫外仪（上海安亭科学仪器厂）、KQ-500DB 超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）、展开缸、硅胶G 薄层板。（2 2）试药）试药性状为棕褐色的颗粒；气微，味甜、微苦。为棕褐色的颗粒；气微，味甜、微苦。为棕褐色的颗粒；气微，味甜、微苦。为棕褐色的颗粒；气微，微苦。为棕褐色的颗粒；气微，微苦。为棕褐色的颗粒；气微，微苦。1 9补充申请注册事项 22资料项目 5XXXX(未添加蔗糖)（批号：20190309、20190310、20190311）XXXX(未添加蔗糖)（批号：20190402、20190403、20190404）；川芎对照药材（批号：120918-201612；购于中国食品药品检定研究院）；丹参对照药材（批号：120923-201615；购于中国食品药品检定研究院）；葛根素对照品（批号：110752-201615；购于中国食品药品检定研究院）；乙醇、氯仿、甲醇、盐酸、乙酸乙酯、甲苯、甲酸、乙醚、正己烷均为分析纯；水为自制纯化水。7.2.27.2.2 丹参薄层鉴别丹参薄层鉴别薄层方法学考察项目包括：不同温度考察、不同湿度考察、不同薄层板考察。鉴别方法：取本品 6g，研细，加乙醇 50m1，超声处理 25 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水 20m1 使溶解，加盐酸2 滴，加乙酸乙酯振摇提取2 次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，低温蒸干，残渣加甲醇1ml 使溶解，作为供试品溶液。另取丹参对照药材2g，加水 30ml 煎煮 30 分钟，滤过，滤液加盐酸2 滴，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典 2015 年版四部通则 0502)试验，吸取上述两种溶液各3 l，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲苯-甲酸（24:20:10:6)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 1%三氯化铁乙醇溶液，日光下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。（1 1）方法学验证研究）方法学验证研究 不同厂家薄层板及专属性考察不同厂家薄层板及专属性考察分别采用不同厂家的硅胶薄层板 （青岛海洋化工、 乳山上邦新、 烟台新诺薄层板）上，按上述薄层色谱条件展开、取出、晾干，喷以 1%三氯化铁乙醇溶液，置日光下检视。2 0补充申请注册事项 22资料项目 5123123A(青岛海洋化工硅胶 G 板)B（烟台新诺硅胶 G 板）1. 丹参对照药材2. 供试品3.缺丹参阴性图 3. 不同厂家薄层板及专属性考察结果结果分析：结果分析：通过比较不同厂家生产的硅胶 G 薄层板，XXXX(未添加蔗糖)在与丹参对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的主斑点，色谱斑点分离效果都较好，阴性无干扰，专属性强，实验结果表明，不同厂家薄层板对 XXXX(未添加蔗糖)薄层鉴别无显著影响，该薄层鉴别方法的耐用性良好。不同湿度考察不同湿度考察分别吸取丹参对照药材溶液、供试品溶液（批号：20190402）、缺丹参供试品溶液点于同一硅胶 G 薄层板上， 按上述薄层色谱条件，分别在低湿 （25%）和高湿(65%)条件下展开、取出、晾干，置日光下检视。2 1补充申请注册事项 22资料项目 51212A(低湿 25%)B（高湿 65%）1. 丹参对照药材2. 供试品图 4. 不同湿度考察结果结果分析：结果分析：在低湿和高湿条件下，XXXX(未添加蔗糖)在与丹参对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的主斑点，且色谱斑点分离效果都较好，实验结果表明，湿度对 XXXX(未添加蔗糖)提取物薄层鉴别无显著影响，该薄层鉴别方法的耐用性良好。不同温度考察不同温度考察分别吸取丹参对照药材溶液、供试品溶液（批号：20190402）、缺丹参供试品溶液点于同一硅胶 G 薄层板上， 按上述薄层色谱条件， 分别在室温 （25） 和高温(40)条件下展开、取出、晾干，置日光下检视。2 2补充申请注册事项 22资料项目 51212A(室温 25)B（高温 40）1. 丹参对照药材2. 供试品图 5. 不同温度考察结果结果分析：结果分析：在室温和高温条件下，XXXX(未添加蔗糖)在与丹参对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的主斑点，且色谱斑点分离效果都较好，实验结果表明，湿度对 XXXX(未添加蔗糖)薄层鉴别无显著影响，该薄层鉴别方法的耐用性良好。（2 2）样品检验）样品检验XXXX 变更前 3 批样品（批号：20190309、20190310、20190311）、变更后 3批样品（批号：20190402、20190403、20190404）丹参薄层鉴别结果如下：2 3补充申请注册事项 22资料项目 5123415671.丹参对照药材（3L ）2. 供试品（20190402 批）3. 供试品（20190403 批）4. 供试品（20190404 批）5. 供试品（20190309 批）6. 供试品（20190310 批）7. 供试品（20190311 批）图 6. 三批中试样品考察结果结论：结论：XXXX 变更前后各 3 批样品的丹参薄层鉴别，供试品色谱中，在与丹参对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的主斑点，均符合规定。7.2.37.2.3 川芎薄层鉴别川芎薄层鉴别川芎薄层鉴别方法学考察项目： 不同温度考察、 不同湿度考察、 不同薄层板考察。鉴别方法：取本品 3.6g，加水 30ml，微热使溶解，滤过，滤液转移至分液漏斗中，加乙醚 60ml，加饱和氯化钠溶液 2ml，轻轻振摇，静置，分取乙醚液（如果乳化，分取乳化层，加无水乙醇 1ml，摇匀，分取乙醚液），水层继续用乙醚 60ml 提取，合并乙醚液，低温蒸干，残渣加甲醇2ml 使溶解，作为供试品溶液。另取川芎对照药材2g，加水 40ml，煎煮 15 分钟，滤过，放冷，转移至分液漏斗中，加乙醚60ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典 2015 年版四部通则 0502)试验，分别吸取供试品溶液 5ul，对照药材溶液 8ul，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以乙醚-正己2 4补充申请注册事项 22资料项目 5烷（9:1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。（1）方法学验证研究方法学验证研究不同厂家薄层板及专属性考察不同厂家薄层板及专属性考察分别吸取川芎对照药材溶液 2L、XXXX(未添加蔗糖)（20190402）供试品溶液3L、XXXX(未添加蔗糖)缺丹参供试品溶液 3L 点于不同厂家的硅胶薄层板（青岛海洋化工、乳山上邦新、烟台新诺薄层板）上，按上述薄层色谱条件展开、取出、晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。123123123A(青岛海洋化工硅胶 G 板)B（烟台新诺硅胶 G 板）C(乳山上邦新硅胶 G 板)1. 川芎对照药材（2L）2. 供试品3.缺川芎阴性图 7. 不同厂家薄层板及专属性考察结果结果分析：结果分析：通过比较不同厂家生产的硅胶 G 薄层板，XXXX(未添加蔗糖)在与川芎对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光主斑点，色谱斑点分离效果都较好，阴性无干扰，专属性强，实验结果表明，不同厂家薄层板对 XXXX(未添加蔗糖)薄层鉴别无显著影响，该薄层鉴别方法的耐用性良好。不同湿度考察不同湿度考察2 5补充申请注册事项 22资料项目 5分别吸取川芎对照药材溶液 2L、XXXX(未添加蔗糖)（20190402）供试品溶液3L、XXXX(未添加蔗糖)缺川芎供试品溶液 3L 点于同一硅胶 G 薄层板上，按上述薄层色谱条件，分别在低湿（25%）和高湿(65%)条件下展开、取出、晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。123123A(低湿 25%)B（高湿 65%）1. 缺丹参阴性（3L）2. 供试品3.川芎对照药材图 8. 不同湿度考察结果结果分析：结果分析：在低湿和高湿条件下，XXXX(未添加蔗糖)在与川芎对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光主斑点，且色谱斑点分离效果都较好，阴性无干扰，专属性强，实验结果表明，湿度对 XXXX(未添加蔗糖)薄层鉴别无显著影响，该薄层鉴别方法的耐用性良好。不同温度考察不同温度考察分别吸取川芎对照药材溶液 2L、XXXX(未添加蔗糖)（20190402）供试品溶液3L、XXXX(未添加蔗糖)缺川芎供试品溶液 3L 点于同一硅胶 G 薄层板上，按上述薄层色谱条件，分别在室温（25）和高温(40)条件下展开、取出、晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。2 6补充申请注册事项 22资料项目 5123123A(室温 25)B（高温 40）1.川芎对照药材2. 供试品3.缺川芎阴性图 9. 不同温度考察结果结论：结论：在室温和高温条件下，XXXX(未添加蔗糖)在与川芎对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光主斑点，且色谱斑点分离效果都较好，阴性无干扰，专属性强，实验结果表明，湿度对 XXXX(未添加蔗糖)薄层鉴别无显著影响，该薄层鉴别方法的耐用性良好。（2 2）样品检测）样品检测XXXX 变更前 3 批样品（批号：20190309、20190310、20190311）、变更后3 批样品（批号：20190402、20190403、20190404）川芎薄层鉴别结果如下：2 7补充申请注册事项 22资料项目 5123415671.川芎对照药材（2L ）2. 供试品（20190402 批）3. 供试品（20190403）4. 供试品（20190404 批）5. 供试品（20190309 批）6. 供试品（20190310 批）7. 供试品（20190311 批）图 10. 三批中试样品考察结果结论：结论：XXXX 变更前后各 3 批样品的川芎薄层鉴别，供试品色谱中，在与川芎对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的主斑点，均符合规定。7.2.47.2.4 葛根素薄层鉴别葛根素薄层鉴别取鉴别（1）项下的供试品溶液，作为供试品溶液，再取葛根素对照品，加甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典 2010 年版一部附录 VI B)试验，吸取上述二种溶液各 2ul，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水 （7:2.5:0.25)为展开剂， 预饱和 15 分钟， 展开， 取出， 晾干， 至紫外灯 （365nm）下检视，供试品色谱中，在.与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。方法学考察项目：不同点样量考察、不同温度考察、不同湿度考察、不同薄层板考察。（1 1）方法学验证研究）方法学验证研究2 8补充申请注册事项 22资料项目 5不同厂家薄层板及专属性考察不同厂家薄层板及专属性考察分别吸取葛根素对照品溶液 2L、XXXX(未添加蔗糖)（20190402）供试品溶液2L、XXXX(未添加蔗糖)缺丹参供试品溶液 2L 点于不同厂家的硅胶薄层板（青岛海洋化工、乳山上邦新、烟台新诺薄层板）上，按上述薄层色谱条件展开、取出、晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。123123123A(青岛海洋化工硅胶 G 板)B（烟台新诺硅胶 G 板） C(乳山上邦新硅胶 G 板)1. 葛根素对照品（2L）2. XXXX(未添加蔗糖)（2L）3. XXXX(未添加蔗糖)缺葛根阴性（2L）图 11. 不同厂家薄层板及专属性考察结果结论：结论：通过比较不同厂家生产的硅胶 G 薄层板，XXXX(未添加蔗糖)在与葛根素对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点，色谱斑点分离效果都较好， 阴性无干扰，专属性强，实验结果表明，不同厂家薄层板对 XXXX(未添加蔗糖)薄层鉴别无显著影响，该薄层鉴别方法的耐用性良好。不同湿度考察不同湿度考察分别吸取葛根素对照品溶液 2L、XXXX(未添加蔗糖)（20190402）供试品溶液2L、XXXX(未添加蔗糖)缺葛根供试品溶液 2L 点于同一硅胶 G 薄层板上，按上述2 9补充申请注册事项 22资料项目 5薄层色谱条件，分别在低湿（25%）和高湿(65%)条件下展开、取出、晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。1212A(低湿 25%)B（高湿 65%）1.葛根素对照品（2L）2. XXXX(未添加蔗糖)（2L）图 12. 不同湿度考察结果结论：结论：在低湿和高湿条件下，XXXX(未添加蔗糖)在与葛根素对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点， 且色谱斑点分离效果都较好， 阴性无干扰， 专属性强，实验结果表明，湿度对 XXXX(未添加蔗糖)薄层鉴别无显著影响，该薄层鉴别方法的耐用性良好。不同温度考察不同温度考察分别吸取葛根素对照品溶液 2L、XXXX(未添加蔗糖)（20190402）供试品溶液2L、XXXX(未添加蔗糖)缺葛根供试品溶液 2L 点于同一硅胶 G 薄层板上，按上述薄层色谱条件，分别在室温（25）和高温(40)条件下展开、取出、晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。3 0补充申请注册事项 22资料项目 51212A(室温 25)B（高温 40）1. 葛根素对照品（2L）2. XXXX(未添加蔗糖)（2L）图 13. 不同温度考察结果结论：结论：在室温和高温条件下，XXXX(未添加蔗糖)在与葛根素对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点， 且色谱斑点分离效果都较好， 阴性无干扰， 专属性强，实验结果表明，湿度对 XXXX(未添加蔗糖)薄层鉴别无显著影响，该薄层鉴别方法的耐用性良好。（2 2）样品检测）样品检测XXXX 变更前 3 批样品（批号：20190309、20190310、20190311）、变更后 3批样品（批号：20190402、20190403、20190404）葛根素薄层鉴别结果如下：3 1补充申请注册事项 22资料项目 5123415671.葛根素对照品2. 供试品（20190402 批）3. 供试品（20190403）4. 供试品（20190404 批）5. 供试品（20190309 批）6. 供试品（20190310 批）7. 供试品（20190311 批）图 14. 三批中试样品考察结果结论：结论：XXXX 变更前后各 3 批样品的葛根素薄层鉴别，供试品色谱中，在与葛根素对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的主斑点，均符合规定。7.37.3 检查检查应符合颗粒剂项下有关的各项规定(通则 0104)。7.3.17.3.1 水分水分中药颗粒剂照水分测定法（通则 0832)第二法（烘干法）测定，除另有规定外，水分不得超过 8.0%。水分检查方法：取供试品 25g，精密称定，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过 5mm；疏松供试品不超过 10mm，精密称定，开启瓶盖在105干燥 5 小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却 30 分钟，精密称定，再在上述温度干燥 1 小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过 5mg 为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量（%）。XXXX 变更前后各 3 批样品检查结果如下：3 2补充申请注册事项 22资料项目 5表25. 变更前后 XXXX 水分测定结果变更前批号201903092019031020190311201904022019040320190404水分（%）3.243.183.111.391.291.35变更后结论：结论：XXXX 变更前后各 3 批样品水分检测结果均未超过 8.0%，符合规定。7.3.27.3.2 溶化性溶化性除另有规定外，颗粒剂照下述方法检查，溶化性应符合规定。溶化性检查：取供试品 10g(中药单剂量包装取 1 袋），加热水200ml，搅拌 5 分钟，立即观察，可溶颗粒应全部溶化或轻微浑浊，均不得有焦屑等异物。表26. 变更前后 XXXX 溶化性测定结果变更前批号201903092019031020190311201904022019040320190404溶化性符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定变更后结论：结论：XXXX 变更前后各 3 批样品溶化性检查结果均符合规定。7.3.37.3.3 粒度粒度 除另有规定外，照粒度和粒度分布测定法（通则 0982 第二法双筛分法)测定，不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过 15%。粒度检查：取单剂量包装的 5 袋（瓶）或多剂量包装的 1 袋（瓶），称定重量，置该剂型或品种项下规定的上层 (孔径大的）药筛中 （下层的筛下配有密合的接收容器），保持水平状态过筛，左右往返，边筛动边拍打3 分钟。取不能通过大孔径筛和能通过小孔径筛的颗粒及粉末，称定重量，计算其所占比例（)。表27. 变更前后 XXXX 粒度测定结果变更前批号粒度（%）变更后2019030920190310201903112019040220190403201904047.697.587.661.151.271.16结论：结论：XXXX 变更前后各 3 批样品粒度检查结果均未超过 15%，符合规定。7.3.47.3.4 微生物限度检查微生物限度检查建立 XXXX（未添加蔗糖)微生物限度检查方法。按照 ChP2015 年版四部通则1105、 1106 进行验证， 确认对供试品进行微生物限度检查时， 所采用的需氧菌、 霉菌、酵母菌计数方法和控制菌检查方法适合于该药品的微生物限度检查。XXXX（未添加蔗糖)微生物限度检查方法适用性见附件。3 3补充申请注册事项 22资料项目 5表28. 微生物验证结果验证项目需氧菌、霉菌及酵母菌计数方法适用性试验控制菌大肠埃希菌检查方法适用性试验验证结果铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉的菌回收率均在 50-200%之间，可以确认采用稀释法，通过平皿倾注法培养，适合于 XXXX 的需氧菌总数、霉菌与酵母菌总数的测定。本品大肠埃希菌采用常规法进行控制菌检查， 阳性菌生长良好， 阴性对照组无菌生长，表明该控制菌检查方法专属性好。XXXX（未添加蔗糖）依据ChP2015 版微生物限度检测法，通过验证，可以得出如下方法进行微生物限度检测：需氧菌总数：需氧菌总数：供试品 10g 加到灭菌的三角瓶中，加入 pH7.0 氯化钠-蛋白胨缓冲液 100ml，溶解、混匀，制成 1:10 供试液，取 1:10 供试液 1ml 置直径 90mm 的无菌平皿中，注 2 个平皿，注入 20ml 温度不超过 45的溶化的胰酪大豆胨琼脂培养基，混匀，凝固，培养、计数，测定菌数。霉菌及酵母菌总数霉菌及酵母菌总数：取 1:10 供试液 1ml 置直径 90mm 的无菌平皿中，注 2 个平皿，注入 20ml 温度不超过 45的溶化的沙氏葡萄糖琼脂培养基，混匀，凝固，培养、计数，测定菌数。大肠埃希菌：大肠埃希菌：取 1:10 供试液 10ml 至 100ml 胰酪大豆胨液体培养基增菌培养后，按常规法进行检测。限度：限度：需氧菌总数不得过 103cfu/g，霉菌和酵母菌数不得过 102cfu/g，不得检出大肠埃希菌(1g)。表29. 变更前后 XXXX 微生物限度检验结果变更前批号2019030920190310需氧菌总数（cfu/g）霉菌、酵母菌（cfu/g）变更后201903111002019040220190403201904046005005506005002020202020203 4补充申请注册事项 22资料项目 5大肠埃希菌/g7.47.4、含量测定、含量测定未检出未检出未检出未检出未检出未检出照高效液相色谱法（中国药典2015 年版四部通则 0512）测定。参照 XXXX(添加蔗糖)含量测定项测定方法中色谱条件和方法， 建立 XXXX(未添加蔗糖)的含量测定，并根据中国药典 2015 版（四部通则9101）“药品质量标准分析方法验证指导原则”，对建立的 XXXX(未添加蔗糖)含量测定方法进行方法学验证，方法学研究结果表明该方法符合含量测定的要求，可用于测定 XXXX(未添加蔗糖)中丹酚酸 B、葛根素含量的测定。7.4.17.4.1 仪器与试药仪器与试药（1 1）仪器设备：）仪器设备：色谱仪色谱仪 1 1: 岛津 LC-2040C 3D 色谱系统色谱仪色谱仪 2 2： 岛津 LC-20A 色谱系统，包括 LC-20AT输液泵、SIL-20AC 自动进样器、CTO-20AC 色谱柱温箱、SPD-M20A 紫外检测器。电子天平：电子天平： ME204E（梅特勒托利多）、AG135（十万分之一）、XP6（百万分之一）。超声仪：超声仪：昆山市超声仪器有限公司。（2 2）色谱柱信息如下：）色谱柱信息如下：色谱柱色谱柱 1 1：依利特 Supersil ODS2 5m 4.6mm250mm 柱号：E2916630色谱柱色谱柱 2 2：岛津 Inertsil ODS-35m 4.6mm250mm S/N.1A7184412（3 3）试剂）试剂乙腈（Adamas-beta，色谱纯），水为纯化水，甲醇（北京百灵威科技有限公司，色谱纯），磷酸等其它试剂均为分析纯。（4 4）试药）试药丹酚酸 B 对照品 （中国食品药品检定研究院 批号： 111562-201716， 含量 94.1%） ；葛根素对照品（中国食品药品检定研究院 批号：110752-201615，含量95.4%）；葛根素对照品（中国食品药品检定研究院 批号：110752-201816，含量95.4%）；XXXX(未添加蔗糖)（20190402、20190403、20190404）7.4.27.4.2 丹参含量测定方法学验证丹参含量测定方法学验证丹酚酸丹酚酸 B B 含量测定方法：含量测定方法：3 5补充申请注册事项 22资料项目 5色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙晴-0.1%磷酸溶液（22:78）为流动相；检测波长 266nm。理论板数按丹酚酸 B 峰计算应不低于 6000。对照品溶液的制备对照品溶液的制备取丹酚酸 B 对照品适量，精密称定，加 75%甲醇制成每 1ml含 80g 的溶液，即得。供试品溶液的制备供试品溶液的制备取装量差异项下的本品，研细，取约0.5g，精密称定，精密加入 75%甲醇 50ml，称定重量，超声处理（功率300W，频率40Hz）30 分钟，放冷，再称定重量，用 75%甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，滤过，即得。测定法测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 20L， 注入液相色谱仪， 测定，即得。表30. 丹酚酸 B 含量测定方法验证结果项目专属性可接受标准验证结果缺丹参供试品阴性试验不阴性试验不干扰本品含量测定，本方干扰本品含量测定以丹酚酸 B 对照品的浓度（ g/ml）为横坐标，色谱法专属性良好。丹酚酸 B 在 9.37187.48g/ml 浓度范围内呈线性， 线性方程为y=26947.5829x - 5161.5311，相关系数 r =1.0000，说明在此浓度范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系。线性峰面积（A）为纵坐标，作线性回归得回归方程，回归线的相关系数（r）不得小于 0.999。6 份供试品溶液，含量测本品 6 份供试品溶液，丹酚酸 B 含量重复性定结果的相对标准偏差不均值为 7.91 mg/g，RSD 为 1.24%，小大于 2.0%。精密度中间精密度由另一名分析人员使用不同的仪器进行测试，测试6 份，与重复性样品进行比较， 所得 12 份供试品溶液，丹酚酸 B 含量测定结果的 RSD 应不大于 4.0%。于 2.0%，表明本方法重复性良好。两名分析人员使用不同的仪器进行测试，所得 12 份供试品溶液，丹酚酸 B含量均值为 8.04 mg/g， RSD 为 2.18%，小于 4.0%，表明本此方法中间精密度良好。3 6补充申请注册事项 22资料项目 5各浓度样品的回收率均应回收率在 92.0%105.0%之间， 且6 次测得结果间 RSD 不大于 2.0%。6份 供 试 品 溶 液 的 回 收 率 在100.00102.37% 范 围 内 ， 均 在92.0%105.0%之间，且 6 次测得结果的 RSD 为 0.91%，小于2.0%，表明本方法回收率良好。对照品溶液于室温条件放置 24h， 丹酚酸 B 保留时间的 RSD 值为 0.61%，峰对照品及供试品溶液中丹面积 RSD 值为 1.28%，供试品溶液于溶液稳定性酚酸 B 保留时间、峰面积室温条件放置 24h， 丹酚酸 B 保留时间的相对标准偏差不大于的 RSD 值为 0.72%， 峰面积 RSD 值为2.0%。1.61%， 均小于 2.0%； 可认为对照品溶液和供试品溶液室温条件放置 24h 内稳定性良好。微调波长(2nm)、流速(0.02ml/min)、通过微小改变波长、 流速、 柱温(1)、流动相比例（乙腈-0.1%柱温、流动相比例及更换磷酸 （21:79)和乙腈-0.1%磷酸 （23:77） ）不同色谱柱等色谱条件参及更换不同型号、 不同品牌色谱柱 （依数，考察测定结果不受影耐用性响的程度。要求在各变动利特 Supersil ODS2 C18 5m(4.6*250mm)和岛津 Inertsil ODS3 C18参数下，丹酚酸 B 含量的5m( 4.6*250mm)） ， 在各色谱条件下，RSD4.0%； 可认为本方法丹酚酸B含量与正常条件相比较， RSD对此色谱条件耐用性良均小于 4.0%，可认为微小变动上述色好。谱条件，对本品含量测定结果无影响。表明本法耐用性良好。（1 1）专属性考察）专属性考察按照供试品溶液制备方法依法制备缺丹参供试品溶液，精密吸取20L，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果阴性试验无干扰。见附图3 7补充申请注册事项 22资料项目 5图 15. 丹酚酸 B 对照品色谱图图 16. XXXX(未添加蔗糖)供试品色谱图图 17. XXXX(未添加蔗糖)缺丹参色谱图（2 2）线性考察）线性考察精密称取丹酚酸 B 对照品 4.981mg，置 25ml 量瓶中，加 75%甲醇振摇使溶解并定容至刻度，作为对照品贮备液。再分别精密量取对照品贮备液 1.0ml20ml、3 8补充申请注册事项 22资料项目 51.0ml10ml、2.0ml10ml、3.0ml10ml、5.0ml10ml、10.0ml10ml，加 75%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。精密量取上述溶液各20l，注入液相色谱仪，记录色谱图（见附件-图），以对照品浓度为横坐标（x），峰面积为纵坐标（y），进行线性回归分析，绘制标准曲线。回归方程：y = 26947.5829 x - 5161.5311，r= 1.0000。表31. 丹酚酸 B 线性关系考察结果浓度 （g/ml）峰面积回归方程相关系数9.3724904218.7550166537.50100493656.25150690793.742520784187.485047998y = = 26947.5829 x - 5161.5311r=1.0000线性关系图结论结论：线性考察结果表明，丹酚酸 B 在 9.37187.48g/ml 范围内线性关系良好。（3 3）精密度考察）精密度考察 重复性考察重复性考察取同一批（20190402）XXXX(未添加蔗糖)6 份，按供试品溶液的制备方法制备成供试品溶液，照上述色谱条件进行测定并计算含量结果 RSD。表32. 重复性试验结果分析员：实验员 A高效液相色谱仪：岛津 LC-2040C 3D序号含量(mg/g)平均含量(mg/g)RSD(%)17.7627.9437.847.911.2448.0057.9268.02结论结论：本品6 份供试品溶液，丹酚酸B 含量均值为 7.91 mg/g，RSD 为 1.24%，小3 9补充申请注册事项 22资料项目 5于 2.0%，表明本方法重复性良好。中间精密度考察中间精密度考察由另一人，取同一批（20190402）XXXX(未添加蔗糖)6 份，按供试品溶液的制备方法制备成供试品溶液，在另一台仪器，照上述色谱条件进行测定并计算含量结果RSD%。结果见下表，结果 RSD 为 0.51%，表明该方法中间精密度良好。表33. 中间精密度试验结果分析员：实验员 B高效液相色谱仪：岛津 LC-20A 高效液相供试品含量(mg/g)18.1428.1338.1148.2258.2068.17均值(mg/g)8.16RSD （%）0.5112 次含量检测结果平均值：8.04mg/g12 次检测结果 RSD：2.18%结论：两名分析人员使用不同的仪器进行测试，所得 12 份供试品溶液，丹酚酸B 含量均值为 8.04 mg/g，RSD 为 2.18%，小于4.0%，表明本此方法中间精密度良好。（4 4）准确度考察）准确度考察精密称取同一批号（20190402）XXXX（未添加蔗糖）6 份样品(丹酚酸 B 含量为7.72mg/g)约 0.25g，分别置于 50ml 量瓶中，分别精密加入丹酚酸 B 对照品溶液（浓度 1.882mg/mL）1mL，按供试品制备方法处理，即得加样回收样品溶液；进行含量测定。测定上述溶液及对照品溶液峰面积，计算丹酚酸B 加样回收率。结果表明，平均回收率为 101.19%。实验结果表明方法准确性良好。表34. 准确度试验结果样品取样量(mg)0.28510.28450.29630.27987.721.882样品含量(mg/g)加入对照品量(mg)样品含量(mg)2.2012.1962.2872.1604 0名称测得总含量(mg)4.10894.11704.21394.0419回收率(%)101.39102.06102.37100.00平均回收率(%)RSD（%）1234101.190.91补充申请注册事项 22资料项目 5560.27470.28252.1212.1814.01184.0776100.50100.79结果及分析： 经试验考察， 丹酚酸 B 的平均加样回收率为 101.19%， RSD%为 0.91，表明该方法良好。（5 5） 溶液稳定性考察溶液稳定性考察精密称取丹酚酸 B 对照品 2.215mg，按对照品溶液制备方法制备对照品溶液。另精密称取同一批号（20190402）XXXX（未添加蔗糖），按供试品制备方法，制备供试品溶液，分别在 0、2、4、8、12、24 小时进样，测定峰面积，考察丹酚酸 B 对照品及供试品溶液的稳定性。实验结果见下表：表35. 丹酚酸 B 对照品溶液稳定性测定结果时间（h）02481224RSD%保留时间（min）22.57022.70822.83222.48722.47522.6150.61表36. 供试品溶液稳定性测定结果时间（h）02481224RSD%保留时间（min）22.72122.76222.93122.47822.53022.6640.72峰面积1933031192963819931941975000197855320075091.61峰面积2220499221203921891662175667214802421631511.28结论：经稳定性 24 小时考察，丹酚酸 B 对照品及 XXXX（未添加蔗糖）溶液的RSD 均小于 2%，表明丹酚酸 B 对照品及供试品溶液在 24 小时内基本稳定，可以满4 1补充申请注册事项 22资料项目 5足测定需要。（6 6）耐用性考察）耐用性考察不同波长考察不同波长考察取同一批号（20190402）XXXX（未添加蔗糖），按“供试品制备方法”制备供试品溶液，分别在不同波长 284nm、286nm、288nm 下进行试验，测定丹酚酸 B 的含量。表37. 不同波长测定结果波长284nm含量（mg/g）7.747.487.737.717.737.70均值（mg/g）7.61相对标准偏差（%）286nm7.720.83288nm7.72结论：结果表明不同波长对丹酚酸 B 的含量测定影响较小。不同流速考察不同流速考察: :取同一批号（20190402）XXXX（未添加蔗糖），按供试品制备方法，制备成供试品溶液，分别在不同流速 0.98mL/min、1.0mL/min、1.02mL/min 下进行试验，测定丹酚酸 B 的含量。表38. 不同流速测定结果流速0.98mL/min含量（mg/g）7.787.727.737.718.017.85均值（mg/g）7.75相对平均偏差/%1.0mL/min7.721.461.02mL/min7.93结论：结果表明改变微小条件（流速0.02ml/min），不同流速对丹酚酸 B 的含量测定影响较小。不同柱温的考察：不同柱温的考察：4 2补充申请注册事项 22资料项目 5取同一批号（20190402）XXXX（未添加蔗糖），按“供试品制备方法”制备供试品溶液，分别在不同柱温 24、25、26下进行试验，测定丹酚酸 B 的含量。表39. 不同柱温测定结果柱温24含量（mg/g）7.547.797.737.717.987.89均值（mg/g）7.67相对平均偏差/%257.721.07267.56结果及分析：结果表明改变微小条件 （柱温1），不同柱温对丹酚酸B 的含量测定影响较小。不同色谱柱的考察：不同色谱柱的考察：取同一批号（20190402）XXXX（未添加蔗糖），按“供试品制备方法”制备供试品溶液， 分别在不同色谱柱 Agilent HC C18、Diamonsil C18、 岛津 Shim-Pack VP-ODSC18、岛津 Inertsil ODS3 C18 下进行试验，测定丹酚酸 B 的含量。表40. 不同色谱柱的测定结果色谱柱依利特 Supersil ODS2 C18含量（mg/g）7.737.717.897.87均值（mg/g）7.721.457.88相对平均偏差/%岛津 Inertsil ODS3 C18结论： 在进行不同色谱柱考察时， Agilent HC C18、 Diamonsil C18、 岛津 Shim-PackVP-ODS C18 均不适用， 而岛津 Inertsil ODS3 C18 色谱柱对丹酚酸 B 的含量影响较小。不同流动相比例的考察：不同流动相比例的考察：取同一批号（20190402）XXXX（未添加蔗糖），按“供试品制备方法”制备供试品溶液，分别在不同流动相比例乙腈-0.1%磷酸（21:79）、乙腈-0.1%磷酸（22:78）、乙腈-0.1%磷酸（23:77）下试验，测定丹酚酸 B 的含量。4 3补充申请注册事项 22资料项目 5表41. 不同流动相比例的测定结果流动相比例乙腈-0.1%磷酸（21:79）乙腈-0.1%磷酸（22:78）乙腈-0.1%磷酸（23:77）含量（mg/g）7.757.857.737.718.028.12均值（mg/g）7.80相对平均偏差/%7.722.338.07结论：结果表明不同流动相比例对丹酚酸 B 的含量测定影响较小。7.4.37.4.3 葛根含量测定方法学验证葛根含量测定方法学验证葛根素含量测定方法：色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙晴 -水（10:90）为流动相；检测波长 250nm。理论板数按葛根素峰计算应不低于 5000。对照品溶液的制备对照品溶液的制备取葛根素对照品适量，精密称定，加 30%乙醇制成每 1ml含 40g 的溶液，即得。供试品溶液的制备供试品溶液的制备取装量差异项下的本品，研细，取约0.12g，精密称定，精密加入 30%乙醇 50ml，称定重量，超声处理（功率 300W，频率 40Hz）30 分钟，放冷，再称定重量，用 30%乙醇补足减失的重量，摇匀，静置，滤过，即得。测定法测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10l，注入液相色谱仪，测定，即得。表42. 葛根素含量测定方法验证结果项目专属性可接受标准验证结果缺葛根供试品阴性试验不干阴性试验不干扰本品含量测定，本扰本品含量测定方法专属性良好。以 葛 根 素 对 照 品 的 浓 度葛根素在 7.03140.58g/ml 浓度范（ g/ml）为横坐标，色谱峰 围 内 呈 线 性 ， 线 性 方 程 为线性面积（A）为纵坐标，作线性y=45869.7695 x - 4682.8040， 相关系回归得回归方程，回归线的数 r =1.0000，说明在此浓度范围内相关系数 （r） 不得小于0.999。 峰面积与浓度呈良好的线性关系。4 4补充申请注册事项 22资料项目 56 份供试品溶液，含量测定本品 6 份供试品溶液，葛根素含量重复性结果的相对标准偏差不大于均值为 13.10 mg/g，RSD 为 0.56%，2.0%。精密度中间精密度由另一名分析人员使用不同的仪器进行测试， 测试 6 份，与重复性样品进行比较，所得 12 份供试品溶液， 丹酚酸B 含量测定结果的 RSD 应不大于 4.0%。各浓度样品的回收率均应在回收率92.0%105.0%之间，且 6 次测得结果间 RSD 不大于2.0%。小于 2.0%， 表明本方法重复性良好。两名分析人员使用不同的仪器进行测试，所得12 份供试品溶液，葛根素含量均值为 13.01 mg/g，RSD 为1.03%，小于 4.0%，表明本此方法中间精密度良好。6 份 供 试 品 溶 液 的 回 收 率 在97.6499.75% 范 围 内 ， 均 在92.0%105.0%之间，且 6 次测得结果的 RSD 为 0.74%，小于 2.0%，表明本方法回收率良好。对照品溶液于室温条件放置 48h， 葛根素保留时间的 RSD 值为 1.10%，对照品及供试品溶液中葛根溶液稳定性素保留时间、峰面积的相对标准偏差不大于 2.0%。峰面积 RSD 值为 0.36%，供试品溶液于室温条件放置 48h， 葛根素保留时间的 RSD 值为 0.78%，峰面积RSD 值为 0.21%，均小于 2.0%；可认为对照品溶液和供试品溶液室温条件放置 48h 内稳定性良好。通过微小改变波长、流速、微 调 波 长 (2nm) 、 流 速柱温、流动相比例及更换不(0.05ml/min)、柱温(2)、流动相同色谱柱等色谱条件参数，比例（乙腈 -水（9:91）和乙腈 -水耐用性考察测定结果不受影响的程（11:89）及更换不同型号、不同度。要求在各变动参数下，品牌色谱柱（月旭 Welch Ultimate葛根素含量的 RSD4.0%；AQC185m(4.6*250mm) 、可认为本方法对此色谱条件Diamonsil C18 5m( 4.6*250mm)和4 5补充申请注册事项 22资料项目 5耐用性良好。依 利 特SupersilODS2C185m( 4.6*250mm) ），在各色谱条件下，葛根素含量与正常条件相比较，RSD 均小于 4.0%，可认为微小变动上述色谱条件，对本品含量测定结果无影响。表明本法耐用性良好。（1 1）专属性考察）专属性考察按照供试品溶液制备方法依法制备缺葛根供试品溶液，按【含量测定】项下所述的色谱条件进行 HPLC 分析，记录色谱图，结果阴性试验无干扰。图 18. 葛根素对照品色谱图图 19. XXXX(未添加蔗糖)供试品色谱图4 6补充申请注册事项 22资料项目 5图 20. XXXX(未添加蔗糖)缺葛根色谱图（2 2）线性考察）线性考察精密称取葛根素对照品 3.684mg，置 25ml 量瓶中，加 30%乙醇醇振摇使溶解并定容至刻度，作为对照品贮备液。再分别精密量取对照品贮备液 1.0ml20ml、1.0ml10ml、2.0ml10ml、3.0ml10ml、5.0ml10ml、10.0ml10ml，加 30%乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。精密量取上述溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图（见附件-图），以对照品浓度为横坐标（x），峰面积为纵坐标（y），进行线性回归分析，绘制标准曲线。回归方程：y = 45869.7695 x - 4682.8040，R= 1.0000。表43. XXXX（未添加蔗糖）线性关系考察结果浓度 （g/ml）峰面积回归方程相关系数7.0331640214.0664567228.12128536442.17192624770.293216814140.586445542y = 45869.7695 x - 4682.8040r=1.0000线性关系图结果及分析：经线性考察，结果表明葛根素浓度在 7.03140.58g/ml 范围内4 7补充申请注册事项 22资料项目 5线性关系良好。（3 3）精密度考察）精密度考察 重复性考察重复性考察取同一批（20190402）XXXX(未添加蔗糖)6 份，按供试品溶液的制备方法制备成供试品溶液，照上述色谱条件进行测定并计算含量结果 RSD%。结果见下表，结果 RSD 为 0.56%，表明该方法重复性良好。表44. 重复性试验结果分析员：实验员 A高效液相色谱仪：岛津 LC-20A 高效液相序号含量(mg/g)平均含量RSD(%)中间精密度考察中间精密度考察由另一人，取同一批（20190402）XXXX(未添加蔗糖)6 份，按供试品溶液的制备方法制备成供试品溶液，在另一台仪器，照上述色谱条件进行测定并计算含量结果RSD%。结果见下表，结果 RSD 为 0.33%，表明该方法中间精密度良好。表45. 中间精密度试验结果分析员：实验员 B高效液相色谱仪：岛津 LC-20A 高效液相供试品含量（%）112.9523456均值（%）RSD（%）12.910.33113.10213.01313.21413.14513.03613.1213.100.5612.9112.8912.9712.9012.8512 次含量检测结果平均值：13.01 %12 次检测结果 RSD：1.03 %结论：精密度试验结果表明葛根素的含测精密度良好。（4 4）准确度考察）准确度考察精密称取同一批号（20190402）XXXX（未添加蔗糖）6 份样品(葛根素含量为13.03mg/g)约 0.065g，分别置于 50ml 量瓶中，分别精密加入葛根素对照品溶液（浓度4 8补充申请注册事项 22资料项目 50.8405mg/mL）1mL，按供试品制备方法处理，即得加样回收样品溶液；进行含量测定。测定上述溶液及对照品溶液峰面积，计算葛根素加样回收率。结果表明，平均回收率为 99.00%。实验结果表明方法准确性良好。表46. 准确度试验结果样品取名称样量(mg)12345664.9765.4464.3865.4664.9265.1413.030.8405样品含量(mg/g)加入对照品量(mg)样品含量(mg)0.84660.85270.83890.85290.84590.8488测得总含量(mg)1.66731.98671.67391.68311.67991.6872回收率(%)97.6499.2399.3598.7799.2399.7599.000.74平均回收率(%)RSD（%）结果及分析：经试验考察，葛根素的平均加样回收率为99.00%，RSD%为 0.74，表明该方法良好。（5 5）溶液稳定性考察）溶液稳定性考察精密称取葛根素对照品 2.130mg，按对照品溶液制备方法，制备成对照品溶液。另精密称取同一批号（20190402）XXXX（未添加蔗糖），按供试品制备方法，制备成供试品溶液，分别在0、2、4、6、8、10、12、24、36、48 小时进样，测定峰面积，考察葛根素对照品及供试品溶液的稳定性。实验结果见下表表47. 葛根素对照品溶液稳定性测定结果时间（h）024681012保留时间（min）26.03025.94225.71725.60125.78525.82825.8134 9峰面积1888258188255718799971876832187659118759991875137补充申请注册事项 22资料项目 5243648RSD%25.38125.26625.2171.101871753186823018652600.36表48. 供试品溶液稳定性测定结果时间（h）024681012243648RSD%保留时间（min）25.89925.69625.43725.55925.62625.64025.65825.32925.31525.2900.78峰面积15758061582876157791215767511578036157509115752381571327157174215768170.21结果及分析：经稳定性 48 小时考察，葛根素对照品及 XXXX（未添加蔗糖）溶液的 RSD 均小于 2%，表明葛根素对照品及供试品溶液在 48 小时内基本稳定，可以满足测定需要。（6 6）耐用性考察）耐用性考察不同波长考察不同波长考察取同一批号（20190402）XXXX（未添加蔗糖），按供试品制备方法，制备成供试品溶液，分别在不同波长 248nm、250nm、252nm 下进行试验，测定葛根素的含量。表49. 不同波长测定结果波长含量（mg/g）均值（mg/g）相对平均偏差/%5 0补充申请注册事项 22资料项目 5248nm13.0413.0113.0413.0213.0613.0313.02250nm13.030.12252nm13.05结果及分析：结果表明不同波长对葛根素的含量测定影响较小。不同流速考察不同流速考察取同一批号（20190402）XXXX（未添加蔗糖），按供试品制备方法，制备成供试品溶液，分别在不同流速 0.95mL/min、1.0mL/min、1.05mL/min 下进行试验，测定葛根素的含量。表50. 不同流速测定结果流速0.95mL/min含量（mg/g）13.3813.3613.0413.0213.1412.98均值（mg/g）13.37相对标准偏差（%）1.0mL/min13.031.431.05mL/min13.06结论：结果表明，以不同流速1.00.05ml/min 试验时，对葛根素的含量测定影响较小。不同柱温的考察不同柱温的考察取同一批号（20190402）XXXX（未添加蔗糖），按供试品制备方法，制备成供试品溶液，分别在不同柱温 33、35、37下进行试验，测定葛根素的含量。表51. 不同柱温测定结果柱温33含量（mg/g）13.095 1均值（mg/g）13.06相对平均偏差/%0.27补充申请注册事项 22资料项目 513.023513.0413.0213.1113.0813.033713.10结果及分析：结果表明，以不同柱温 252试验时，对葛根素的含量测定影响较小。不同色谱柱的考察不同色谱柱的考察取同一批号（20190402）XXXX（未添加蔗糖），按供试品制备方法，制备成供试品溶液， 分别在不同色谱柱 Agilent HC C18、 Diamonsil C18、 岛津 Inertsil ODS3 C18、依利特 Supersil ODS2 C18 下进行试验，测定葛根素的含量。表52. 不同色谱柱的测定结果色谱柱月旭 Welch Ultimate AQC18Diamonsil C18含量（mg/g）13.1813.1113.0413.0213.0612.88均值（mg/g）13.14相对平均偏差/%13.030.66依利特Supersil ODS2 C1812.97结果及分析：在进行不同色谱柱考察时，Agilent HC C18、岛津 Inertsil ODS3 C18均不适用，而 Diamonsil C18、依利特 Supersil ODS2 C18 色谱柱对葛根素的含量影响较小。不同流动相比例的考察不同流动相比例的考察取同一批号（20190402）XXXX（未添加蔗糖），按供试品制备方法，制备成供试品溶液， 分别在不同流动相比例乙腈-水 （9:91） 、 乙腈-水 （10:90） 、 乙腈-水 （11:89）下试验，测定丹酚酸 B 的含量。表53. 不同流动相比例的测定结果流动相比例乙腈-水（9:91）含量（mg/g）13.025 2均值（mg/g）13.00相对平均偏差/%1.04补充申请注册事项 22资料项目 512.99乙腈-水（10:90）13.0413.0213.2213.2813.03乙腈-水（11:89）13.25结果及分析：结果表明不同流动相比例对葛根素的含量测定影响较小。以上方法学研究结果表明该方法符合含量测定的要求，可用于测定 XXXX(未添加蔗糖)中葛根素含量的测定。7.4.4 XXXX(7.4.4 XXXX(未添加蔗糖未添加蔗糖) )含量测定含量测定3 批 XXXX（批号：20190402、20190403、20190404）丹酚酸B 和葛根素含量测定结果如下：表54. 三批 XXXX(未添加蔗糖)丹酚酸 B 含量测定结果批号20190402均值（mg/g）7.447.487.507.547.233.7.16平均含量(mg/g)7.46折合 mg/袋44.74201904037.5245.12201904043.7.1943.16表55. 三批 XXXX(未添加蔗糖)葛根素含量测定结果批号20190402均值（mg/g）13.1813.1412.8212.8813.2012.60平均含量(mg/g)13.16折合 mg/袋78.962019040312.8573.7.102019040412.9077.40结论：经三批中试样品测定，XXXX（未添加蔗糖）中丹酚酸 B 的含量，每袋含5 3补充申请注册事项 22资料项目 5丹参以丹酚酸 B(C36H30O16)计，符合规定（每袋不少于30mg）；每袋含葛根以葛根素(C21H20O9)计，符合规定（每袋不少于 50mg）。8 8、变更后连续、变更后连续 3 3 批样品的检验报告书批样品的检验报告书8.18.1 样品信息样品信息2019 年 4 月连续制备了 3 批样品，详细信息如下：表56. 3 批连续生产的样品信息批号生产地点生产时间生产批量用途8.28.2 检验结果检验结果表57. 3 批连续生产的样品检验数据检验项目放行标准201904022019040320190404201904022019040320190404甘肃省兰州市榆中县和平镇工贸一条街 148 号 制剂车间2019.04.101 万袋2019.04.111 万袋2019.04.111 万袋稳定研究、质量研究稳定研究、质量研究稳定研究、质量研究性状为棕黄色至棕褐色的颗粒；气微，微苦应检出丹参应检出川芎应检出葛根素7.0%应全部溶化或轻微浑浊，不得有异物、焦屑不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过 14%需氧菌总数103cfu/g为棕褐色的为棕褐色的为棕褐色的颗粒；气微，颗粒；气微，颗粒；气微，微苦检出丹参检出川芎微苦检出丹参检出川芎微苦检出丹参检出川芎（1）薄层鉴别（2）（3）水分（%）溶化性检出葛根素检出葛根素检出葛根素5.4%符合规定5.8%符合规定6.9%符合规定粒度8%600 cfu/g10%500 cfu/g20cfu/g5%550 cfu/g20cfu/g微生物限度霉菌和酵母菌总数102cfu/g20cfu/g5 4补充申请注册事项 22资料项目 5不得检出大肠埃希菌（1g）未检出/g葛根素含量（/袋）丹酚酸 B 含量（/袋）每袋不得少于 50mg84.6 mg未检出/g79.8 mg未检出/g85.8 mg每袋不得少于 30mg43.2 mg57.6 mg48.6 mg3 批样品检验报告书（XXXX 药业有限公司）详见附件9 9、稳定性研究、稳定性研究对变更前后的 XXXX 进行长期和加速稳定性对比考察，比较其关键项目的变化趋势，为变更后内包装材料、贮藏条件、有效期的确定提供依据。9.19.1 试验仪器试验仪器表58. 试验涉及的仪器仪器溶剂输送泵高效液相色谱仪紫外检测器进样器高效液相色谱仪超声波清洗器十万分之一电子天平百万分之一电子天平万分之一天平9.29.2 对照品和对照药材对照品和对照药材表59. 试验涉及的对照品和对照药材对照品和对照药材葛根素对照品葛根素对照品丹酚酸 B 对照品丹参对照药材川芎对照药材批号110752-201615110752-201816111562-201716120923-201615120918-201612纯度95.4%95.4%94.1%/来源中国食品药品检定研究院中国食品药品检定研究院中国食品药品检定研究院中国食品药品检定研究院中国食品药品检定研究院型号LC-20ATvpSPD-20AvpSIL-20ACLC-2040C 3DKQ-500DBAG135XP6ME204E日本岛津公司昆山市超声仪器有限公司METTLER TOLEDOMETTLER TOLEDOMETTLER TOLEDO日本岛津公司厂家5 5补充申请注册事项 22资料项目 59.39.3 试验样品试验样品表60. 试验用样品情况批号201904022019040320190404201903092019031020190311生产日期2019.04.102019.04.112019.04.112019.03.092019.03.102019.03.11生产地点批量内包装材料9.49.4 研究内容研究内容XXXX（未添加蔗糖）稳定性试验的条件和方法主要根据中药、天然药物稳定性研究技术指导原则、中国药典2015 版四部（通则 9001）原料药物与制剂稳定性试验指导原则的要求进行，具体如下：表61. 常规稳定性考察结果项目放置条件考察时间考察项目性状、溶化性、鉴别、加速试验402、0、1、2、3、 粒度、水分、含量、微75%5%RH6 个月国家药品标准：分析方法XXXX 药业有限公司固体制剂车间1 万袋8 万袋聚酯/镀铝聚酯/聚乙烯药品包装用复合膜生物限度（检测 0 月、 WS3-B-0824-91-20156 月）性状、溶化性、鉴别、长期试验252、0、3、6、9、 粒度、水分、含量、微国家药品标准：60%10%RH12、18 个月生物限度（检测 0 月、 WS3-B-0824-91-20156 月、12 月、24 月）本品三批样品在加速试验条件下放置 6 个月、长期试验条件下放置 6 个月，性状、溶化性、粒度、鉴别、水分、含量、微生物限度等各项检测指标结论均符合规定。根据稳定性试验考察结果，结合变更前产品的贮藏条件、有效期，将本品贮藏条件定为：密封；有效期 24 个月。注：稳定性考察试验中除微生物限度检查外，其他数据均为合肥创新医药技术有限公司检验结果。5 6补充申请注册事项 22资料项目 59.59.5 研究结论研究结论表62. 稳定性研究考察结论内包材贮藏条件有效期对说明书中相关内容的提示聚酯/镀铝聚酯/聚乙烯药品包装用复合膜密封24 个月5 7补充申请注册事项 22资料项目 59.69.6、稳定性数据、稳定性数据9.6.19.6.1 加速试验加速试验表63. XXXX（未添加蔗糖）（批号：20190402）加速试验结果规格: 每袋装 6g包装：聚酯/镀铝聚酯/聚乙烯药品包装用复合膜考察条件：402/75%5%RH试验开始时间留样地点检验项目标准要求2019 年 5 月合肥创新医药技术有限公司 药品稳定性考察室，XXXX 药业有限公司留样室（二）考察时间0 月1 月2 月3 月6 月性状（1）薄层鉴别（2）（3）水分（%）溶化性粒度为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色为棕黄色至棕褐色的颗粒； 气的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味微，味甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦应检出丹参应检出川芎应检出葛根素8.0%应全部溶化或轻微浑浊， 不得有异物、焦屑不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过 15%需氧菌总数103cfu/g检出丹参检出川芎检出葛根素1.39符合规定1.15cfu/gcfu/g未检出/g78.9644.74检出丹参检出川芎检出葛根素1.50符合规定1.19/78.5440.58检出丹参检出川芎检出葛根素1.59符合规定1.44/80.4643.68检出丹参检出川芎检出葛根素1.62符合规定2.16/78.7246.59检出丹参检出川芎检出葛根素符合规定cfu/gcfu/g未检出/g微生物限度霉菌和酵母菌总数102cfu/g不得检出大肠埃希菌（1g）葛根素含量（mg/袋）丹酚酸 B 含量 （mg/袋）每袋不得少于 50mg每袋不得少于 30mg56补充申请注册事项 22资料项目 5表64. XXXX（未添加蔗糖）（批号：20190403）加速试验结果规格: 每袋装 6g包装：聚酯/镀铝聚酯/聚乙烯药品包装用复合膜考察条件：402/75%5%RH试验开始时间留样地点检验项目标准要求2019 年 5 月合肥创新医药技术有限公司 药品稳定性考察室，XXXX 药业有限公司留样室（二）考察时间0 月1 月2 月3 月6 月性状（1）薄层鉴别（2）（3）水分（%）溶化性粒度为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色为棕黄色至棕褐色的颗粒； 气的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味微，味甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦应检出丹参应检出川芎应检出葛根素8.0%应全部溶化或轻微浑浊， 不得有异物、焦屑不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过 15%需氧菌总数103cfu/g检出丹参检出川芎检出葛根素1.29符合规定1.27cfu/gcfu/g未检出/g77.1045.12检出丹参检出川芎检出葛根素1.42符合规定1.25/76.3241.04检出丹参检出川芎检出葛根素1.48符合规定1.79/78.7240.20检出丹参检出川芎检出葛根素1.50符合规定2.54/76.8045.60检出丹参检出川芎检出葛根素符合规定cfu/gcfu/g未检出/g微生物限度霉菌和酵母菌总数102cfu/g不得检出大肠埃希菌（1g）葛根素含量（mg/袋）丹酚酸 B 含量 （mg/袋）每袋不得少于 50mg每袋不得少于 30mg57补充申请注册事项 22资料项目 5表65. XXXX（未添加蔗糖）（批号：20190404）加速试验结果规格: 每袋装 6g包装：聚酯/镀铝聚酯/聚乙烯药品包装用复合膜考察条件：402/75%5%RH试验开始时间留样地点检验项目标准要求2019 年 5 月合肥创新医药技术有限公司 药品稳定性考察室，XXXX 药业有限公司留样室（二）考察时间0 月1 月2 月3 月6 月性状（1）薄层鉴别（2）（3）水分（%）溶化性粒度为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色为棕黄色至棕褐色的颗粒； 气的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味微，味甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦应检出丹参应检出川芎应检出葛根素8.0%应全部溶化或轻微浑浊， 不得有异物、焦屑不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过 15%需氧菌总数103cfu/g检出丹参检出川芎检出葛根素1.35符合规定1.16cfu/gcfu/g未检出/g77.4043.16检出丹参检出川芎检出葛根素1.55符合规定1.14/76.1442.16检出丹参检出川芎检出葛根素1.59符合规定1.59/77.6442.81检出丹参检出川芎检出葛根素1.64符合规定3.70/77.1647.58检出丹参检出川芎检出葛根素符合规定cfu/gcfu/g未检出/g微生物限度霉菌和酵母菌总数102cfu/g不得检出大肠埃希菌（1g）葛根素含量（mg/袋）丹酚酸 B 含量 （mg/袋）每袋不得少于 50mg每袋不得少于 30mg58补充申请注册事项 22资料项目 5表66. XXXX（含蔗糖）（批号：20190309）加速试验结果规格: 每袋装 6g包装：聚酯/镀铝聚酯/聚乙烯药品包装用复合膜考察条件：402/75%5%RH试验开始时间留样地点检验项目标准要求2019 年 5 月合肥创新医药技术有限公司 药品稳定性考察室，XXXX 药业有限公司留样室（二）考察时间0 月1 月2 月3 月6 月性状（1）薄层鉴别（2）（3）水分（%）溶化性粒度为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色为棕黄色至棕褐色的颗粒； 气的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味微，味甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦应检出丹参应检出川芎应检出葛根素8.0%应全部溶化或轻微浑浊， 不得有异物、焦屑不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过 15%需氧菌总数103cfu/g检出丹参检出川芎检出葛根素3.24符合规定7.69cfu/gcfu/g未检出/g72.2046.47检出丹参检出川芎检出葛根素3.50符合规定7.68/71.2043.06检出丹参检出川芎检出葛根素3.10符合规定7.19/70.2045.25检出丹参检出川芎检出葛根素3.33符合规定8.86/72.1047.90检出丹参检出川芎检出葛根素符合规定cfu/gcfu/g未检出/g微生物限度霉菌和酵母菌总数102cfu/g不得检出大肠埃希菌（1g）葛根素含量（mg/袋）丹酚酸 B 含量 （mg/袋）每袋不得少于 50mg每袋不得少于 30mg59补充申请注册事项 22资料项目 5表67. XXXX（含蔗糖）（批号：20190310）加速试验结果规格: 每袋装 6g包装：聚酯/镀铝聚酯/聚乙烯药品包装用复合膜考察条件：402/75%5%RH试验开始时间留样地点检验项目标准要求2019 年 5 月合肥创新医药技术有限公司 药品稳定性考察室，XXXX 药业有限公司留样室（二）考察时间0 月1 月2 月3 月6 月性状（1）薄层鉴别（2）（3）水分（%）溶化性粒度为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色为棕黄色至棕褐色的颗粒； 气的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味微，味甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦应检出丹参应检出川芎应检出葛根素8.0%应全部溶化或轻微浑浊， 不得有异物、焦屑不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过 15%需氧菌总数103cfu/g检出丹参检出川芎检出葛根素3.18符合规定7.58cfu/gcfu/g未检出/g73.3043.27检出丹参检出川芎检出葛根素3.45符合规定7.47/71.3039.95检出丹参检出川芎检出葛根素3.84符合规定7.99/71.2044.75检出丹参检出川芎检出葛根素4.05符合规定10.01/72.9044.65检出丹参检出川芎检出葛根素符合规定cfu/gcfu/g未检出/g微生物限度霉菌和酵母菌总数102cfu/g不得检出大肠埃希菌（1g）葛根素含量（mg/袋）丹酚酸 B 含量 （mg/袋）每袋不得少于 50mg每袋不得少于 30mg60补充申请注册事项 22资料项目 5表68. XXXX（含蔗糖）（批号：20190311）加速试验结果规格: 每袋装 6g包装：聚酯/镀铝聚酯/聚乙烯药品包装用复合膜考察条件：402/75%5%RH试验开始时间留样地点检验项目标准要求2019 年 5 月合肥创新医药技术有限公司 药品稳定性考察室，XXXX 药业有限公司留样室（二）考察时间0 月1 月2 月3 月6 月性状（1）薄层鉴别（2）（3）水分（%）溶化性粒度为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色 为棕黄色至棕褐色为棕黄色至棕褐色的颗粒； 气的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味 的颗粒；气微，味微，味甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦甜、微苦应检出丹参应检出川芎应检出葛根素8.0%应全部溶化或轻微浑浊， 不得有异物、焦屑不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过 15%需氧菌总数103cfu/g检出丹参检出川芎检出葛根素3.11符合规定7.66cfu/gcfu/g未检出/g72.4039.81检出丹参检出川芎检出葛根素3.39符合规定7.69/71.4038.26检出丹参检出川芎检出葛根素3.96符合规定7.11/70.2042.20检出丹参检出川芎检出葛根素4.19符合规定6.70/71.8041.35检出丹参检出川芎检出葛根素符合规定cfu/gcfu/g未检出/g微生物限度霉菌和酵母菌总数102cfu/g不得检出大肠埃希菌（1g）葛根素含量（mg/袋）丹酚酸 B 含量 （mg/袋）每袋不得少于 50mg每袋不得少于 30mg61补充申请注册事项 22资料项目 5.6.2.6.2长期试验长期试验表69. XXXX（未添加蔗糖）（批号：20190402）长期试验结果规格: 每袋装 6g包装：聚酯/镀铝聚酯/聚乙烯药品包装用复合膜考察条件：252/60%10%RH试验开始时间留样地点检验项目标准要求2019 年 5 月合肥创新医药技术有限公司 药品稳定性考察室，XXXX 药业有限公司留样室（二）考察时间0 月3 月6 月为棕黄色至棕褐色的为棕黄色至棕褐色的颗粒；气微，为棕黄色至棕褐色的颗粒； 气微， 味甜、 为棕黄色至棕褐色的颗粒；气微，颗粒；气微，味甜、微味甜、微苦微苦味甜、微苦苦应检出丹参检出丹参检出丹参检出丹参应检出川芎应检出葛根素8.0%应全部溶化或轻微浑浊，不得有异物、焦屑不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过 15%需氧菌总数103cfu/g霉菌和酵母菌总数102cfu/g不得检出大肠埃希菌（1g）葛根素含量（mg/袋）丹酚酸 B 含量（mg/袋）不得少于 50mg不得少于 30mg检出川芎检出葛根素1.39符合规定1.151400cfu/g10cfu/g未检出/g78.9644.74检出川芎检出葛根素1.65符合规定2.07/79.2046.68检出川芎检出葛根素符合规定400cfu/g10cfu/g未检出/g性状（1）薄层鉴别（2）（3）水分（%）溶化性粒度微生物限度62补充申请注册事项 22资料项目 5表70. XXXX（未添加蔗糖）（批号：20190403）长期试验结果规格: 每袋装 6g包装：聚酯/镀铝聚酯/聚乙烯药品包装用复合膜考察条件：252/60%10%RH试验开始时间留样地点检验项目性状（1）薄层鉴别（2）（3）水分（%）溶化性粒度标准要求2019 年 5 月合肥创新医药技术有限公司 药品稳定性考察室，XXXX 药业有限公司留样室（二）考察时间0 月3 月6 月为棕黄色至棕褐色的颗粒；气微， 为棕黄色至棕褐色的颗粒；气 为棕黄色至棕褐色的颗粒；气为棕黄色至棕褐色的颗粒；气微，味甜、微苦微，味甜、微苦微，味甜、微苦味甜、微苦应检出丹参检出丹参检出丹参检出丹参应检出川芎应检出葛根素8.0%应全部溶化或轻微浑浊，不得有异物、焦屑不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过 15%需氧菌总数103cfu/g霉菌和酵母菌总数102cfu/g不得检出大肠埃希菌（1g）葛根素含量（mg/袋）丹酚酸 B 含量（mg/袋）每袋不得少于 50mg每袋不得少于 30mg检出川芎检出葛根素1.29符合规定1.271400cfu/g10cfu/g未检出/g77.1045.12检出川芎检出葛根素1.56符合规定2.85/76.9046.50检出川芎检出葛根素符合规定400cfu/g10cfu/g未检出/g微生物限度63补充申请注册事项 22资料项目 5表71. XXXX（未添加蔗糖）（批号：20190404）长期试验结果规格: 每袋装 6g包装：聚酯/镀铝聚酯/聚乙烯药品包装用复合膜考察条件：252/60%10%RH试验开始时间留样地点检验项目性状（1）薄层鉴别（2）（3）水分（%）溶化性粒度标准要求2019 年 5 月合肥创新医药技术有限公司 药品稳定性考察室，XXXX 药业有限公司留样室（二）考察时间0 月3 月6 月为棕黄色至棕褐色的颗粒；气微， 为棕黄色至棕褐色的颗粒；气 为棕黄色至棕褐色的颗粒；气为棕黄色至棕褐色的颗粒；气微，味甜、微苦微，味甜、微苦微，味甜、微苦味甜、微苦应检出丹参检出丹参检出丹参检出丹参应检出川芎应检出葛根素8.0%应全部溶化或轻微浑浊，不得有异物、焦屑不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过 15%需氧菌总数103cfu/g霉菌和酵母菌总数102cfu/g不得检出大肠埃希菌（1g）葛根素含量（mg/袋）丹酚酸 B 含量（mg/袋）每袋不得少于 50mg每袋不得少于 30mg检出川芎检出葛根素1.35符合规定1.161400cfu/g10cfu/g未检出/g77.4043.16检出川芎检出葛根素1.68符合规定3.59/76.6847.01检出川芎检出葛根素符合规定400cfu/g10cfu/g未检出/g微生物限度64补充申请注册事项 22资料项目 5表72. XXXX（含蔗糖）（批号：20190309）长期试验结果规格: 每袋装 10g包装：聚酯/镀铝聚酯/聚乙烯药品包装用复合膜考察条件：252/60%10%RH试验开始时间留样地点检验项目性状（1）薄层鉴别（2）（3）水分（%）溶化性粒度标准要求2019 年 5 月合肥创新医药技术有限公司 药品稳定性考察室，XXXX 药业有限公司留样室（二）考察时间0 月3 月6 月为棕黄色至棕褐色的颗粒；气微， 为棕黄色至棕褐色的颗粒；气 为棕黄色至棕褐色的颗粒；气为棕黄色至棕褐色的颗粒；气微，味甜、微苦微，味甜、微苦微，味甜、微苦味甜、微苦应检出丹参检出丹参检出丹参检出丹参应检出川芎应检出葛根素8.0%应全部溶化或轻微浑浊，不得有异物、焦屑不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过 15%需氧菌总数103cfu/g霉菌和酵母菌总数102cfu/g不得检出大肠埃希菌（1g）葛根素含量（mg/袋）丹酚酸 B 含量（mg/袋）每袋不得少于 50mg每袋不得少于 30mg检出川芎检出葛根素3.24符合规定7.691400cfu/g10cfu/g未检出/g72.2046.47检出川芎检出葛根素3.21符合规定8.19/71.7047.75检出川芎检出葛根素符合规定400cfu/g10cfu/g未检出/g微生物限度65补充申请注册事项 22资料项目 5表73. XXXX（含蔗糖）（批号：20190310）长期试验结果规格: 每袋装 10g包装：聚酯/镀铝聚酯/聚乙烯药品包装用复合膜考察条件：252/60%10%RH试验开始时间留样地点检验项目性状（1）薄层鉴别（2）（3）水分（%）溶化性粒度标准要求2019 年 5 月合肥创新医药技术有限公司 药品稳定性考察室，XXXX 药业有限公司留样室（二）考察时间0 月3 月6 月为棕黄色至棕褐色的颗粒；气微， 为棕黄色至棕褐色的颗粒；气 为棕黄色至棕褐色的颗粒；气为棕黄色至棕褐色的颗粒；气微，味甜、微苦微，味甜、微苦微，味甜、微苦味甜、微苦应检出丹参检出丹参检出丹参检出丹参应检出川芎应检出葛根素8.0%应全部溶化或轻微浑浊，不得有异物、焦屑不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过 15%需氧菌总数103cfu/g霉菌和酵母菌总数102cfu/g不得检出大肠埃希菌（1g）葛根素含量（mg/袋）丹酚酸 B 含量（mg/袋）每袋不得少于 50mg每袋不得少于 30mg检出川芎检出葛根素3.18符合规定7.58cfu/gcfu/g未检出/g73.3043.27检出川芎检出葛根素4.01符合规定9.57/72.3045.15检出川芎检出葛根素符合规定cfu/gcfu/g未检出/g微生物限度66补充申请注册事项 22资料项目 5表74. XXXX（含蔗糖）（批号：20190311）长期试验结果规格: 每袋装 10g包装：聚酯/镀铝聚酯/聚乙烯药品包装用复合膜考察条件：252/60%10%RH试验开始时间留样地点检验项目性状（1）薄层鉴别（2）（3）水分（%）溶化性粒度标准要求2019 年 5 月合肥创新医药技术有限公司 药品稳定性考察室，XXXX 药业有限公司留样室（二）考察时间0 月3 月6 月为淡棕黄色至棕褐色的颗粒； 气微， 为棕黄色至棕褐色的颗粒；气 为棕黄色至棕褐色的颗粒；气为棕黄色至棕褐色的颗粒；气微，味甜、微苦微，味甜、微苦微，味甜、微苦味甜、微苦应检出丹参检出丹参检出丹参检出丹参应检出川芎应检出葛根素8.0%应全部溶化或轻微浑浊，不得有异物、焦屑不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过 15%需氧菌总数103cfu/g霉菌和酵母菌总数102cfu/g不得检出大肠埃希菌（1g）葛根素含量（mg/袋）丹酚酸 B 含量（mg/袋）每袋不得少于 50mg每袋不得少于 30mg检出川芎检出葛根素3.11符合规定7.66cfu/gcfu/g未检出/g72.4039.81检出川芎检出葛根素4.12符合规定7.44/71.6041.55检出川芎检出葛根素符合规定cfu/gcfu/g未检出/g微生物限度注：稳定性试验中薄层鉴别图谱见注：稳定性试验中薄层鉴别图谱见附件附件 2 2；含量测定图谱详见；含量测定图谱详见附件附件 3 3。67