实验器材的清洗、包装和消毒1实验目的掌握细胞培养常用实验器材（玻璃器皿、橡胶制品、正负压除菌滤器、塑料制品）的清洗要领、清洗步骤和注意事项。掌握细胞培养常用器材的包装要领和要求了解灭菌方法，掌握高压湿热灭菌方法及操作注意事项。掌握正、负压除菌滤器的安装、使用和拆除方法及操作注意事项。熟悉细胞培养过程中的无菌要求2实验内容常用的实验器材清洗包装消毒3玻璃器皿国产螺旋口培养瓶培养皿离心管注射器盐水瓶，血清瓶青霉素瓶吸管载玻片盖玻片贮存尖吸管用的玻璃筒或金属筒漏斗烧杯量筒贮蒸馏水瓶冷冻管常用的实验器材常用的实验器材4塑料品塑料品多孔培养板规格有4、6、12、 24、96孔等，培养皿直径有3厘米、6厘米、10厘米等。塑料品经消毒灭菌密封包装，供次性使用，重复使用的需经特殊方法清洗消毒常用的实验器材常用的实验器材5器械解剖刀、眼科剪和镊（直头和弯头）、中号圆头镊、止血钳等。常用的实验器材常用的实验器材6杂用品金属饭盒、试管架、各种规格胶塞、记号笔、搪瓷盘、吸头（吸取液体的胶帽）、酒精灯、酒精、碘酒棉球瓶、火柴等。常用的实验器材常用的实验器材7常用玻璃器皿清洗要领清洗清洗8常用玻璃器皿清洗要领清洗清洗9常用玻璃器皿清洗步骤清洗清洗10常用玻璃器皿清洗注意事项清洗清洗11常用玻璃器皿清洗注意事项清洗清洗12橡胶制品的清洗清洗清洗13除菌滤器的清洗清洗清洗14塑料制品的清洗清洗清洗15包装16器材包装时应注意事项和要求17消毒湿热消毒干热消毒紫外线消毒滤过消毒消毒剂塑料器皿消毒电离辐射消毒18湿热消毒的要求19湿热消毒的要求20湿热消毒的注意事项21干热消毒22紫外线消毒23滤过消毒 大多数培养用液，如人工合成培养基、血清、酶液等均采用滤过法除菌。常用的除菌滤器有正压式和负压式两种2425滤膜使用时应注意26塑料器皿消毒 塑料器皿不耐高温，清洗干净后用75酒精（分析纯）浸泡过夜，灭菌三蒸水浸泡两次，甸次10分钟，紫外线照射1小时再经细胞基础营养液浸泡过渡后，供短期内使用。27 n 定定期期打打扫扫无无菌菌室室: :每每周周打打扫扫一一次次, ,先先用用自自来来水水拖拖地地, ,擦擦桌桌子子, ,超超净净工工作作台台等等, ,然然后用后用 33来苏尔或者新洁尔灭或者来苏尔或者新洁尔灭或者 0.5%0.5%过氧乙酸擦拭过氧乙酸擦拭. .n CO2 CO2 孵孵箱箱( (培培养养箱箱) )灭灭菌菌: :先先用用 33新新洁洁尔尔灭灭擦擦拭拭, ,然然后后用用 75%75%酒酒精精擦擦拭拭或或者者 0.5% 0.5% 过氧乙酸过氧乙酸, ,再用紫外灯照射。再用紫外灯照射。 n 实验前灭菌实验前灭菌: :打开紫外灯打开紫外灯, ,三氧杀菌机三氧杀菌机, ,空气净化器系统各空气净化器系统各 20-30 20-30 分钟。分钟。 n 实实验验后后灭灭菌菌: :用用 75%75%酒酒精精(3(3新新洁洁尔尔灭灭) )擦擦拭拭超超净净台台, ,边边台台, ,倒倒置置显显微微镜镜的的载载物台物台. . 无菌室的灭菌28n 肥皂洗手肥皂洗手. . n 穿好隔离衣穿好隔离衣, ,带好隔离帽带好隔离帽, ,口罩口罩, ,放好拖鞋放好拖鞋n 用用 75%75%酒精棉球擦净双手酒精棉球擦净双手. . 实验人员的无菌准备实验人员的无菌准备: :29作业写出负压除茵滤器安装要求及注意事项写出细胞培养实验器材包装要领，并阐明其原因30