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大鼠心梗模型大鼠心梗模型good沿左侧胸骨旁斜行切口,上界为两前肢后缘连线,下界为第5肋间,依次切开皮肤、浅筋膜和深筋膜,并用止血钳钝性分离胸大肌和前锯肌交界处,在靠胸骨缘处用止血钳钝性分离第3、4肋间进胸,用专用开胸器撑开3、4肋间暴露心脏,将棉纱放置在肺组织旁边,防止损伤肺组织。,潮气量约 3ml/100g,频率为70次/min用0号婴儿喉镜片号婴儿喉镜片经口气管插管,插入16G静脉留置针静脉留置针,接小动物呼吸机控制呼吸。1011Pfu/ml Ad一hPPARYl 自制Pfu/ml:plaque forming unit/ml,噬斑形成单位,指每毫升试样中所含有的具有侵染性的噬菌体数 当噬菌体裂解平板培养基上细菌后,就形成一个空斑,计为一个plaqueTTC染色法染色法并行TTC染色进行心肌梗死范围的测定。TTC染色法:染色法:在体动物模型灌注结束后,结扎冠状动脉,左心室注入2-3Evans蓝2-3ml,确定未缺血心肌(呈蓝色)和缺血心肌(无蓝色)。分离缺血区和非缺血区并以滤纸吸干,置于天平上称重,将缺血区心室肌以平行于房室沟的方向切成7-8片,每片厚1-2mm,置入1氯化三苯基四氮唑(TTC)磷酸盐缓冲液(PH 7.4)中37水浴10-15min。缺血危险区因脱氢酶还原TTC而呈红色,梗死区因脱氢酶流失而呈白色,将梗死区和非梗死区分离并分别称重,梗死范围以梗死心肌占缺血心肌重量的百分比表示。给药实验兔称重 ,硫责妥钠 ;30mg/kg静脉麻醉,免仰卧位固定于手术台上 ,Maclab/8s多功能生理仪行心电监护。常规备皮、消毒,无菌条件下行胸正中切口,沿胸骨正中将胸骨切开,暴露心脏,保持两侧胸膜完整无破损,小心提起心包并剪开,可见与左冠状动脉前降支(LAD)相伴行的心大静脉,LAD走行于心大静脉深方 ,表面覆盖薄层心肌 ,肉眼不易见 。以心大静脉为标志 ,取其中下1/3交界处以一根5/0外科缝合丝线结扎(Sham组冠脉只穿线不结扎),结扎前于心脏上滴少量利多卡因。观察心尖部及部分左室前壁心肌变苍白,并出现室壁运动减弱 , Maclab/8s多功能生理仪记录冠脉结扎前后心电图变化。 Ad-Blank组于苍白区心肌组织周围分别取对称组于苍白区心肌组织周围分别取对称4个点个点,各点间距各点间距5mm,用无菌微量注射器注用无菌微量注射器注8ul不含不含HIF-1a腺病毒空载体腺病毒空载体,平均每个点注射平均每个点注射2ul。Ad-HIF-1a 组注人含HIF-1a 腺病毒载体8ul,Rz-HIF-1a组注入HIF-1a核酶基因8ul,方法均同Ad-Blank 组结束语结束语谢谢大家聆听!谢谢大家聆听!13
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