家兔失血性休克Hemorrhagic Shock in Rabbit 目的 (Purpose)1.1.复制家兔失血性休克模型复制家兔失血性休克模型(Replicate the hemorrhagic shock model in rabbit)2.2.观察失血性休克时家兔的一般表现、主要观察失血性休克时家兔的一般表现、主要生理学指标、肠系膜微循环变化生理学指标、肠系膜微循环变化(Observe the general manifestations, main physiological indexes and mesentery microcirculation alterations of animal in hemorrhagic shock) 3.3.学习家兔手术方法及插管技术学习家兔手术方法及插管技术(Learning of operation method and catheterization technique) 休克发生的三个基本环节休克发生的三个基本环节全血量的减少全血量的减少 低血容量性休克低血容量性休克 (Hypovolemic shock)心输出量的降低心输出量的降低心源性休克心源性休克 (Cardiogenic shock) 血管容量的增加血管容量的增加 神经源性休克神经源性休克 (neurogenic shock） 血管源性休克血管源性休克 (Vasogenic shock) Effective circulating blood volume insufficiency 急性大出血急性大出血 血容量减少血容量减少 回心血量减少回心血量减少、有效循环血量急剧降低有效循环血量急剧降低 动脉血压下降动脉血压下降 颈动脉体颈动脉体 主动脉体主动脉体 减压反射抑制减压反射抑制 化学感受器兴奋化学感受器兴奋 交感肾上腺髓质兴奋、交感肾上腺髓质兴奋、 缩血管体液因子大量产生缩血管体液因子大量产生( (缺血缺氧缺血缺氧) )失血性休克机理失血性休克机理 (Mechanism)(Mechanism)皮肤粘膜皮肤粘膜血管收缩血管收缩肾动脉痉挛肾动脉痉挛肾血流减少肾血流减少内脏血管内脏血管 收缩收缩脑灌流障碍脑灌流障碍少尿少尿苍白苍白意识障碍意识障碍呼吸抑制呼吸抑制肠系膜微循环障碍肠系膜微循环障碍 ( (淤血缺氧淤血缺氧) )微循环微循环、器官、器官衰竭衰竭死亡死亡Animal （动物）（动物）: adult rabbit, 2.0-3.0 kgEquipment （器材）（器材）: PcLab data acquisition system (PcLab生物信号采集系统), pressure transducer(压力换能器), surgical instruments(手术器械), microscope (显微镜), syringes (注射器) Drugs and Reagents (药品与试剂药品与试剂): 20% urethane(乌拉坦), 0.2% heparin(肝素), normal saline(生理盐水)。 实验材料实验材料Experimental MaterialExperimental Material1.1.一般指标：一般指标：皮肤粘膜颜色、一般状态(Color of skin and mucous membrane, general conditions)2.2.血流动力学指标：血流动力学指标：动脉血压、心率、脉压差(Blood pressure, heart rate, pulse pressure)3.3.呼吸系统观察指标：呼吸系统观察指标：呼吸频率、深度、节律(Respiratory rate, depth and rhythm )4.4.肠系膜微循环观察指标：肠系膜微循环观察指标：血管口径、血液流速、流态，毛细血管开放、白细胞粘附( Vessel diameter, flow speed, flow regime, opening of microcirculation，leukocyte sticking conditions) 观察指标观察指标 parametersparameters方法与步骤方法与步骤(Methods and Procedures )1:1:捉拿、称重捉拿、称重(catching & weighing)(catching & weighing)1 12 23 34 45 56 67 7 麻醉指标：麻醉指标： 四肢肌肉松弛；四肢肌肉松弛； 疼痛反射、疼痛反射、 角膜反射消失角膜反射消失 (Observing animal muscle tension, respiratory frequency and corneal reflex closely)方法方法(1):(1): 腹腔麻醉腹腔麻醉 20%20%乌拉坦乌拉坦(urethane) 5ml/kg5ml/kg 左侧下腹部注射左侧下腹部注射(intraperitoneal(intraperitoneal injection) injection)麻醉麻醉(Anesthesia) 方法方法(2):(2):耳缘静脉麻醉耳缘静脉麻醉 20%20%乌拉坦乌拉坦5ml/kg5ml/kg 沿耳缘静脉沿耳缘静脉(marginal (marginal ear vein)ear vein)缓慢注射缓慢注射 1 12 23 34 45 56 6麻醉指标：麻醉指标：四肢肌肉松弛；四肢肌肉松弛； 疼痛反射、疼痛反射、 角膜反射消失角膜反射消失固定固定FastenFasten 麻醉效应趋于平稳后麻醉效应趋于平稳后 将家兔将家兔仰卧位仰卧位固定固定(rabbit fixed in the supine position )1 12 23 34 45 56 6剪毛备皮剪毛备皮Hair removal1 12 21 12 23 33 3颈静脉插管颈静脉插管Jugular vein catheterizationJugular vein catheterization家兔下额至胸骨家兔下额至胸骨( (sternum) )上缘处范上缘处范围内围内, , 剪毛剪毛甲状软骨下甲状软骨下( (thyroid cartilage ) )正中剪正中剪开皮肤开皮肤4 45cm5cm钝性分离钝性分离(blunt dissection)皮下筋膜皮下筋膜(superficial fascia )注意注意: :分离右分离右侧颈外静脉侧颈外静脉( right external jugular vein) 穿根手术线，先用动脉夹夹闭穿根手术线，先用动脉夹夹闭近心端近心端，后结扎远心端，后结扎远心端眼科剪刀与血管成眼科剪刀与血管成45角角，剪开静脉口径剪开静脉口径1/3的小口的小口向向近心端近心端插入静脉插管插入静脉插管松开动脉夹松开动脉夹，结扎、固定静脉插管结扎、固定静脉插管注意注意: : 1) 1)插管前静脉导管插管前静脉导管 必须充满肝素必须充满肝素 2)2)插管后由静脉插管输入插管后由静脉插管输入 5%5%葡萄糖生理盐水葡萄糖生理盐水20ml20ml颈动脉插管颈动脉插管Common Carotid Artery CatheterizationCommon Carotid Artery Catheterization沿胸锁乳头肌和胸骨舌骨肌间隙钝性分离沿胸锁乳头肌和胸骨舌骨肌间隙钝性分离在气管正中钝性分离颈阔肌在气管正中钝性分离颈阔肌注意注意: :分离左侧颈总动脉分离左侧颈总动脉(left common carotid artery) 穿根手术线，结扎远心端，用动脉夹夹闭近心端穿根手术线，结扎远心端，用动脉夹夹闭近心端紧靠远心端处，紧靠远心端处，剪刀与血管成剪刀与血管成4545角角, ,剪开动脉口径剪开动脉口径1/31/3小小口口向近心端插入动脉导管向近心端插入动脉导管结扎、固定动脉导管结扎、固定动脉导管松开动脉夹松开动脉夹打开换能器，观察正常血压打开换能器，观察正常血压注意注意: : 1) 1)插管前动脉导管与插管前动脉导管与 压力换能器必须充满肝素压力换能器必须充满肝素 2)2)描记血压之前描记血压之前 一定要进行零点设置一定要进行零点设置耻骨联合耻骨联合(pubic symphysis(pubic symphysis) )以上腹部剪毛，切开皮肤以上腹部剪毛，切开皮肤（约（约4cm4cm）在耻骨联合上缘在耻骨联合上缘约约0.5cm0.5cm处，沿腹白线处，沿腹白线(linea alba abdominis(linea alba abdominis) )切开腹壁肌肉层组织切开腹壁肌肉层组织, ,注意勿损伤腹腔脏器注意勿损伤腹腔脏器(abdomen viscera)(abdomen viscera)沿腹白线沿腹白线剪开肌肉层组织剪开肌肉层组织寻找膀胱寻找膀胱(bladder)(bladder)，将其翻至腹外，将其翻至腹外辨清两侧输尿管，钝性分离一(两)侧输尿管输尿管插管输尿管插管(catheterization of Ureter(catheterization of Ureter) )在输尿管下方穿两根丝线，结扎近膀胱端在输尿管下方穿两根丝线，结扎近膀胱端用眼科镊托起输尿管，持眼科剪使其与输尿管呈用眼科镊托起输尿管，持眼科剪使其与输尿管呈4545角，角， 剪开输尿管口径剪开输尿管口径1/31/3的小口的小口用眼科镊夹住切口的一角，向肾脏方向插入输尿管导管用眼科镊夹住切口的一角，向肾脏方向插入输尿管导管 （事前输尿管导管充满生理盐水）（事前输尿管导管充满生理盐水）用另一根丝线结扎固定，平放输尿管导管，待输尿管插管用另一根丝线结扎固定，平放输尿管导管，待输尿管插管 外口有尿液流出确认。用试管接收尿液外口有尿液流出确认。用试管接收尿液微循环观察微循环观察 (Microcirculation (Microcirculation Observation)Observation)腹部剪毛腹部剪毛( (Shear hair)剑突下剑突下3cm3cm起取腹正中线纵行切口起取腹正中线纵行切口4 45cm5cm ( (incision along the abdominal centre line)打开腹腔找到打开腹腔找到回肠回肠末段（末段（a segment of ileum loop,左侧腹部）、左侧腹部）、动物侧身再固定动物侧身再固定轻轻拉出游离度较大的一段肠袢轻轻拉出游离度较大的一段肠袢( (intestinal loop) )，放在恒温灌，放在恒温灌流盒（流盒（thermostatic perfusion box）内）内点滴点滴温暖的生理盐水，保持观察部位的温度和湿度温暖的生理盐水，保持观察部位的温度和湿度调节显微镜焦距，找到肠系膜上的微血管调节显微镜焦距，找到肠系膜上的微血管观察正常状态下的微循环血流（流速和流态）观察正常状态下的微循环血流（流速和流态）2323 家兔肠系膜家兔肠系膜微循环观察方法微循环观察方法1 1 2 2 3 3 Observatory Indexes (先观察记录正常指标先观察记录正常指标)1.1.一般指标：一般指标：皮肤粘膜颜色、一般状态、尿量、尿量。2.2.血流动力学指标：血流动力学指标：动脉血压、心率、脉压差。3.3.呼吸系统观察指标：呼吸系统观察指标：呼吸频率、深度、节律。4.4.肠系膜微循环观察指标：肠系膜微循环观察指标：血管口径、血液流速、毛细血管开放、细胞流态、白细胞粘附。1.General indexes (一般指标一般指标): Color of skin and mucous membrane, general conditions2.Hemodynamics indexes (血流动力血流动力学指标学指标): Blood pressure, central venous pressure, heart rate, pulse pressure.3.Indexes of respiratory system (呼呼吸系统观察指标吸系统观察指标): Respiratory rate, depth and rhythm 4.Indexes of mesentery microcirculation (肠系膜微循环观察肠系膜微循环观察指标指标): Vessel diameter, flow speed, opening or closing of microcirculation, cell flowing regime, leukocyte sticking conditions复制失血性休克模型复制失血性休克模型Replicating model of hemorrahgicReplicating model of hemorrahgic shock shock 1 1）从颈动脉缓慢放血至血压下降到）从颈动脉缓慢放血至血压下降到 40mmHg40mmHg （用（用50ml50ml注射器，内装注射器，内装 3 ml3 ml肝素）肝素） 2 2）每放血）每放血10ml10ml观察一次各项指标的变化观察一次各项指标的变化, ,依次可观察到依次可观察到: : * * 血压逐渐血压逐渐明显下降、脉压差逐渐明显下降、脉压差逐渐明显缩小明显缩小 * * 微循环流速逐渐微循环流速逐渐明显减慢、血流量逐渐明显减慢、血流量逐渐明显减少明显减少 * * 微血管收缩、白细胞出现附壁滚动微血管收缩、白细胞出现附壁滚动 * * 心率、呼吸、口唇颜色的异常变化心率、呼吸、口唇颜色的异常变化抢抢 救救 TreatmentTreatment1.1.放血至动脉血压下降到放血至动脉血压下降到40mmHg40mmHg后维持后维持10-3010-30分钟，分钟，2.2. 观察各项指标变化观察各项指标变化 ： 血压和脉压差的变化血压和脉压差的变化 微循环血管和血流的改变微循环血管和血流的改变 动物的一般状况、心率、呼吸、口唇颜色动物的一般状况、心率、呼吸、口唇颜色3.3.将放出的血液从颈静脉缓慢回输，再一次观察各项指标将放出的血液从颈静脉缓慢回输，再一次观察各项指标的恢复变化情况的恢复变化情况。4.4.各项指标恢复不明显时可再输入各项指标恢复不明显时可再输入20ml20ml生理盐水生理盐水。5.5.各项指标恢复正常后各项指标恢复正常后( (要麻醉状态下要麻醉状态下!)!)再放血至家兔死再放血至家兔死亡，同时观察各项指标的变化过程亡，同时观察各项指标的变化过程。 1 1、麻醉、麻醉 ( (缓缓慢慢、观察麻醉程度，不要随意追加麻药）、观察麻醉程度，不要随意追加麻药）。 2 2、手术创伤程度的控制（手术技巧、手术创伤程度的控制（手术技巧、钝性分离）钝性分离）。 3 3、颈静脉、颈动脉、输尿管在插管前充满、颈静脉、颈动脉、输尿管在插管前充满肝素肝素, ,排尽空气排尽空气。 4 4、插管、插管 ( (牢固牢固、稳妥、畅通）、稳妥、畅通）。 5 5、插管后、插管后, ,描记血压前必须进行零点设置描记血压前必须进行零点设置 ( (调零调零) )。 6 6、药品试剂在固定位置上索取、药品试剂在固定位置上索取, ,不得转移不得转移。 7 7、显微镜和观察盒属共用设备、显微镜和观察盒属共用设备, ,用后清理干净放回原位置用后清理干净放回原位置。 8 8、肠系膜保温、肠系膜保温保湿保湿，勿过分牵拉，勿过分牵拉。 9 9、防止漏电、触电、防止漏电、触电 ( (显微镜、恒温水箱显微镜、恒温水箱) )。 1010、分工与配合、分工与配合。 1111、器械清点、签名、器械清点、签名( (损坏损坏、丢失物品要、丢失物品要赔偿赔偿) )。 1212、打扫卫生打扫卫生。注意事项注意事项实验实验步骤步骤流程流程捉捉拿拿、称称重重麻麻醉醉、固固定定分分离离右右侧侧颈颈外外静静脉脉、排排空空气气、插插管管、补补液液 分分离离左左侧侧颈颈动动脉脉、排排空空气气、插插管管、观观察察血血压压输输尿尿管管插插管管、肠肠系系膜膜微微循循环环观观察察放血放血复制休克模型复制休克模型观察休克后指标观察休克后指标维持休克维持休克20分钟后分钟后再次观察指标再次观察指标回输血（补液）抢救回输血（补液）抢救观察抢救后指标观察抢救后指标观察正常指标观察正常指标再次放血至死亡再次放血至死亡死亡前指标死亡前指标开始实验 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