卵巢癌新型标志物卵巢癌新型标志物HE4临床介绍临床介绍15th, Sep, 2014李超李超RocheRoche内 容n卵巢癌背景介绍卵巢癌背景介绍nHE4的临床意义解读n卵巢癌标志物临床应用（ROMA）nRoche Elecsys HE4 介绍卵巢癌概述卵巢癌的全球发病率估计在每年每年20万左万左右右，每年死亡例数预计可达12万万。卵巢癌高死亡率的主要原因是不能早期诊断不能早期诊断，大部分进展期的卵巢癌患者最终死于该病；相反，如果早期得到诊治，90高分化的患者最终可以存活。浆液性癌浆液性癌占卵巢肿瘤的绝大部分，通常所说的卵巢癌就是指浆液性癌。page 3 2011 Roche卵巢癌的现状一个难题：无成熟的早期诊断方法；一个难题：无成熟的早期诊断方法；二个二个70%：确诊时约：确诊时约70%已属晚期；治疗后即使是已已属晚期；治疗后即使是已达到临床完全缓解的病人仍有达到临床完全缓解的病人仍有70%最终将复发；最终将复发；三个进展：手术病理分期、肿瘤细胞减灭术、紫杉醇三个进展：手术病理分期、肿瘤细胞减灭术、紫杉醇+卡铂化疗方案卡铂化疗方案四个焦点：保留生育四个焦点：保留生育/生理功能、早期的辅助治疗、晚生理功能、早期的辅助治疗、晚期的治疗、复发的诊断和治疗期的治疗、复发的诊断和治疗卵巢癌的现状早期诊断极有价值卵巢癌在卵巢癌在女性生殖系统女性生殖系统恶性肿瘤中死亡恶性肿瘤中死亡率占率占第一位。第一位。70%卵巢癌卵巢癌 晚期（晚期（III期和期和IV期）期）page 5 2011 Roche卵巢癌的诊断策略早期诊断卵卵巢巢癌癌的的早早期期诊诊断断一一直直是是卵卵巢巢癌癌研研究究中中最具挑战性的课题最具挑战性的课题肿瘤诊断的三大支柱肿瘤诊断的三大支柱图像诊断图像诊断：B超超 CT、MRI PET/CT血液与体液检测血液与体液检测：肿瘤标记物：肿瘤标记物细胞学与组织学诊断细胞学与组织学诊断卵巢癌诊断面临的挑战早期诊断及鉴别诊断u诊断常用的两种方法：1 经阴道超声检测 (TVS) TVS 不能对肿块的良恶性做出准确的判断TVS结果准确解释需要丰富的临床经验积累 2 CA125 (目前认为卵巢癌生物标志物的金标准)假阳性和假阴性比例太高假阳性和假阴性比例太高临床对良恶性肿瘤的鉴别诊断存在困难临床对良恶性肿瘤的鉴别诊断存在困难如何早期正确的诊断卵巢癌现存诊断流程难以作出正确诊断 家族史 腹部/盆腔检查 CA-125 经阴超声检查（经阴超声检查（TVU） ） CT 胸片 胃肠功能评估 血常规尿常规 生化检查探探查手手术组织病理病理检查 良性恶性 TVU (经阴道超声阴道超声检查)：卵巢：卵巢肿块形形态学的基本学的基本检查盆腔肿块盆腔肿块/腹水、腹胀早期症状表现不明显或早期症状表现不明显或缺乏特异性，缺乏特异性，例如出血、盆腔或腹部疼痛，泌尿系统症状卵巢癌的生物标志物CA 125 不完美的“金标准”CA 125解读解读敏感性低敏感性低：只有50%的I期卵巢癌期卵巢癌和80%的上皮性卵巢癌出现CA125的升高1特异性低特异性低：妇科良性疾病和其他系统恶性疾病也可出现CA125的升高1,2某些妇科恶性肿瘤患者完全不表达CA125CA125联合经阴超声检查是卵巢癌诊断的“金标准金标准”1 NIH Consensus Development Conference Statement. Gynecol Oncol. 1994, 55, S4-S14.2 ACOG Practice Bulletin. Obstet Gynecol. 2007, 110, 201-213.CA125和TVS联合检测国际上正在进行两项超大规模的卵巢癌筛查研究英国英国1313个中心联合进行的卵巢癌筛查研究个中心联合进行的卵巢癌筛查研究（UKCTOCSUKCTOCS）招募招募200,000200,000绝经后女性绝经后女性三种筛查模式：三种筛查模式： ROCAROCA与与TVSTVS的复杂序列筛查模式的复杂序列筛查模式 TVSTVS单一筛查模式单一筛查模式 对照组即不做任何筛查对照组即不做任何筛查结果结果：ROCAROCA与与TVSTVS的的复杂序列复杂序列筛查模式的筛查模式的可达到可达到35.1%35.1%的阳性预测值，的阳性预测值，但该研究尚未但该研究尚未得出这种复杂序列筛查模式未能降低卵巢得出这种复杂序列筛查模式未能降低卵巢癌的死亡率，同时筛查策略本身的复杂给癌的死亡率，同时筛查策略本身的复杂给研究的顺应性造成困难，且大大提高了成研究的顺应性造成困难，且大大提高了成本。本。page 10 2011 RocheCA125和TVU联合检测国际上正在进行两项超大规模的卵巢癌筛查研究美国进行的前列腺癌、肺癌、结肠癌和卵美国进行的前列腺癌、肺癌、结肠癌和卵巢癌筛查研究（巢癌筛查研究（PLCOPLCO）uN=39,105N=39,105例例u对普通妇女进行对普通妇女进行CA125CA125和和TVUTVU联合筛查联合筛查u20092009年：年：CA125CA125的阳性预测值（的阳性预测值（PPVPPV）为）为3.7%3.7%，经阴道超声（，经阴道超声（TVUTVU）的）的PPVPPV为为1.4%1.4%，两者同时进行筛查的，两者同时进行筛查的PPVPPV是是23.5%23.5%，60%60%的卵巢癌漏诊的卵巢癌漏诊u20112011年：高达年：高达23.5%23.5%的阳性预测者中的阳性预测者中误诊误诊率是率是33.2%33.2%u20112011年年6 6月（月（JAMAJAMA）：对普通人群的）：对普通人群的CA125CA125联合联合TVSTVS的筛查对生存率影响的最的筛查对生存率影响的最终结果。经过长达终结果。经过长达6 6年的筛查试验以及年的筛查试验以及1212年的随访，年的随访，CA125CA125联合联合TVSTVS对美国普通妇对美国普通妇女的卵巢癌筛查研究增加了不必要的手女的卵巢癌筛查研究增加了不必要的手术，增加了经济成本，但术，增加了经济成本，但未能降低卵巢未能降低卵巢癌的死亡率癌的死亡率page 11 2011 Roche内 容n卵巢癌背景介绍nHE4的临床意义解读的临床意义解读 n卵巢癌标志物临床应用（ROMA）nRoche Elecsys HE4 介绍卵巢癌新型标志物HE4生物学特点乳清酸性蛋白家族乳清酸性蛋白家族(WAP家族家族)由2个乳清酸性蛋白域（WAP）和一个4-二硫中心(WFDC2)组成乳清酸性蛋白基因编码的13KDa的分泌性糖蛋白N-端糖基化：20 - 25 kDa （CA 125分子量 200 kDa !) 蛋白酶抑制剂家族蛋白酶抑制剂家族相应的底物和HE4的生物学功能未知可能是抗菌、抗炎因子1 Bouchard D et al. Lancet Oncol 2006; 7, 16774.2 Hellstrm I et al. Cancer Res. 2003, 63, 36953700.HE4生物学特点生理情况下，在以下组织表达生理情况下，在以下组织表达生殖系统上呼吸系统乳腺上皮肾脏远曲小管结肠粘膜胰腺恶性肿瘤，在卵巢癌、子宫内膜癌、肺癌恶性肿瘤，在卵巢癌、子宫内膜癌、肺癌（腺癌）和间皮瘤表达升高（腺癌）和间皮瘤表达升高肿瘤的早期和晚期阶段，表达均升高1 Bouchard D et al. Lancet Oncol 2006; 7, 16774.2 Hellstrm I et al. Cancer Res. 2003, 63, 36953700.HE4的临床研究结果在良性疾病的浓度水平妊娠妇女妊娠妇女HE4 140 pmol/LHE4 的临床研究结果HE4 水平与年龄相关健康女性不同年龄的健康女性不同年龄的HE4水平水平HE4的临床研究结果健康女性HE4 水平140 pmol/L超过超过98% 表观健康女性表观健康女性HE4的水平的水平 140 pmol/LHE4的临床意义改善盆腔肿块诊断的敏感性来源于不同文献盆腔肿块良性VS.卵巢癌(所有分期) 的敏感性比较特异性= 95 % (绝经前和绝经后)敏感性%Huhtinen et al, 2008 1Moore et al, 2008 21 Huhtinen, K. et al. J. Cancer, 2009, 100, 1315-1319.2 Moore, R.G. et al. Gynecologic Oncology, 2009, 112, 40-46.敏感性%HE4HE4的临床意义反映卵巢癌化疗的效果HE4水平的变化与病程发展的关系病情进展(PD)、稳定(SD)与缓解(包括完全缓解和部分缓解，CR+PR）之间，HE4浓度变化率差别具有显著性(chisquare值为26.6，P但-31.25%2215-31.25%021517合计841628HE4的临床意义反映卵巢癌手术的效果25例卵巢癌患者术后HE4水平的变化卢仁泉等. 中国癌症杂志2010年第20卷第9期手术治疗的25例EOC,手术后病情基本缓解血清的HE4水平出现阴转：21例，符合率为84%(21/25)，HE4水平降低-20%左右：3例*HE4呈现升高：1例，随访中HE4的临床意义随访病例报告绝经后卵巢癌患者1例治疗后HE4和CA125水平的随访结果：第6个月HE4开始升高，112 pmol/L 第8个月HE4水平达168.3 pmol/L，第8.5个月迅速升高至993 pmol/L，临床症状明显恶化，进行联合化疗第10个月临床症状有所改善，HE4水平下降CA125也呈相应变化，但变化幅度不及HE4明显卢仁泉等. 中华检验杂志，2009，第32卷，第12期内 容n卵巢癌背景介绍nHE4的临床意义解读n卵巢癌标志物临床应用（卵巢癌标志物临床应用（ROMA）nRoche Elecsys HE4 介绍卵巢癌血清学标志物HE4和CA125相互补充多数卵巢癌HE4和CA125水平同时升高HE4和CA 125来源于不同的组织- 某些卵巢癌，CA125显著升高- 某些卵巢癌，HE4显著升高24卵巢癌肿瘤标志物联合检测卵巢癌肿瘤标志物联合检测HE4和CA125的联合检测(1) HE4 + CA 125联合应用可减少生物标志物阴性卵巢癌的漏诊CA125联合HE4可以减少30-50%生物标志物阴性卵巢癌的漏诊1改善卵巢癌诊断和治疗监测的敏感性21 Moore RG et al. Gynecologic Oncology 2008, 111, 4024082 Allard WJ et al. Clinical Laboratory International 2009, 3, 20-21HE4和CA125的联合检测(2) 发现尚处于早期阶段的卵巢癌HE4: 分期较早卵巢癌的早期诊断CA125: 对晚期卵巢癌有较好的临床意义HE4和CA125的联合检测(3) 更好的鉴别诊断子宫内膜异位症Graph acc. Tab. 2 of Huhtinen et al.: Br. J Cancer, 2009, 100(8)HE4: 子子宫内膜异位症几乎不升高内膜异位症几乎不升高HE4: 卵巢癌卵巢癌显著升高著升高CA125: 子子宫内膜异位症内膜异位症轻微升高微升高CA125: 卵巢癌卵巢癌显著升高著升高HE4和CA125的联合检测(4) 改善女性盆腔肿块卵巢癌的风险评估ROMA Moore RG et al. Gynecologic Oncology 2008, 111, 402408通过通过ROMA指数可将患者分成低风险和高风险人群指数可将患者分成低风险和高风险人群HE4和CA125的联合应用可以判断绝经期前后女性盆腔肿块的良恶性程度 使用ROMA指数可以更好地进行风险分级风险分级ROMA指数可以将94%的上皮卵巢癌进行正确分类 卵巢癌风险评估ROMA指数ROMA计算公式ROMA(恶恶性性风险计风险计算方法）算方法）公式和得分公式和得分绝经前前:PI = -12,0 + 2,38*LNHE4 +0,0626*LNCA125绝经后后:PI = -8,09 + 1,04*LNHE4 + 0,732*LNCA125ROMA (%) =Exp(PI) x 1001 + Exp(PI)绝经前的公式，绝经前的公式，HE4权重更大权重更大, CA125在绝经前良性疾病升高更常见在绝经前良性疾病升高更常见ROMA 指数罗氏的参考值 前瞻性研究，共入组384例患者 通过ROMA指数将人群分成低风险组和高风险组，从而预测卵巢癌的可能性 Elecsys HE4和 Elecsys CA 125 II联合应用的cut-off值的特异性设置为75% ：绝经期前的女性绝经期前的女性ROMA 指数指数 11.4% = 上皮性卵巢癌的高风险组上皮性卵巢癌的高风险组ROMA 指数指数 11.4% = 上皮性卵巢癌的低风险组上皮性卵巢癌的低风险组绝经期后的女性绝经期后的女性ROMA 指数指数 29.9% =上皮性卵巢癌的高风险组上皮性卵巢癌的高风险组ROMA 指数指数 29.9% =上皮性卵巢癌的低风险组上皮性卵巢癌的低风险组HE4&CA125HE4特异性和敏感性更高正常人群HE4的阳性率为1.1%，低于CA-125的阳性率（9.9%）仅有1.3%的卵巢良性疾病HE4增高，而CA125的阳性率为33.2%其它恶性肿瘤HE4也会增高，特别是肺癌，但是其阳性率大多低于CA125不管是以所有恶性肿瘤组作为对照，还是以卵巢良性疾病作为对照，HE4诊断卵巢恶性肿瘤的准确性均优于CA125HE4比CA125更早发现早期卵巢癌和无症状卵巢癌，监测阶段更早的发现肿瘤的复发和转移HE4受肾功能影响的程度要稍小于CA125Escudero JM. Clin Chem 2011;57(11):1534-1544page 32 2011 Roche卵巢癌标志物临床应用小结p两个标志物联合应用拥有最佳的敏感性和特异性，减少生物标志物阴性卵巢癌的漏诊p发现尚处于早期阶段的卵巢癌p更好的鉴别诊断子宫内膜异位症改善pROMA指数改善女性盆腔肿块卵巢癌的风险评估p监测治疗及判断是否复发转移预后评估CA 125与与HE4联合应用可实现卵巢癌的早期诊断，改善患者预后联合应用可实现卵巢癌的早期诊断，改善患者预后HE4联合联合CA125内 容n卵巢癌背景介绍nHE4的临床意义解读n卵巢癌标志物临床应用（ROMA）nRoche Elecsys HE4 介绍介绍page 34 2011 RocheElecsys HE4 性能更优异检测范围全程的准确性所需样本量低适用于血清和血浆样本一管血可同时检测HE4和CA 125两个指标用于卵巢癌的风险评估和监测，同样适用于某些良性疾病卵巢癌肿瘤标志物HE4和CA125检测的厂家HE4CA 125Roche (Elecsys, cobas e)Abbott (Architect)Beckman (Access)Siemens (Immulite, Centaur, Vista)Diasorin (Liaison)B.R.A.H.M.S (Kryptor)Becton Dickinson (TriPath)plannedCanAg（ELISA）贝克曼和西门子均没有贝克曼和西门子均没有HE4罗氏所有免疫平台均可以同罗氏所有免疫平台均可以同时提供时提供CA125和和HE4的检测的检测不同试剂及厂家的参数比较项目Elecsys HE4RocheELISA HE4CanAgArchitect HE4Abbott检测方法ECLIAEIA 2步法CMIA规格100 test96 test100 test溯源性Fujirebio HE4 EIAInternal standardFujirebio HE4 EIA样本量10 L25 L100 L检测时间18 min3 h29 min定标2点点6点6点检测范围15-1500 pmol/L15 - 900 pmol/L 20-1500 pmol/LCut-off 值140 pmol/L150 pmol/L绝经前70 pmol/L绝经后140 pmol/L检测下限15 pmol/L15 pmol/L20 pmol/L总CV5%15%10%Hook效应40,000 pmol/L300,000 pmol/L94,000 pmol/L上机稳定性28d28 d30 d罗氏罗氏HE4 样本用量少，检测速度快，检测范围宽和精密度高样本用量少，检测速度快，检测范围宽和精密度高HE4方法学评估Roche Elecsys vs. Fujirebio ELISA (参考方法)两种方法有很好的相关性两种方法有很好的相关性P/B regressiony = 1.018x + 5.523r = 0.9783 = 0.8080n = 1502 样本Fujirebio HE4 ELISA 检测上限为 900 pmol/LRoche Elecsys HE4 pmol/LFujirebio HE4 EIA pmol/LHE4方法学评估Fujirebio EIA vs. Abbott ArchitectAbbott Architect pmol/LFujirebio HE4 EIA pmol/LP/B regressiony = 1.087x - 2.137r = 0.9643 = 0.8030n = 694Abbott HE4与与Fujirebio的相关性的相关性比罗氏差比罗氏差尽管双方使用相同抗体，尽管双方使用相同抗体，Abbott的的结果比结果比Fujirebio高高10%Fujirebio HE4 ELISA has 900 pmol/Las upper measuring rangeHE4联合CA125改善卵巢癌的管理卵巢癌卵巢癌鉴别诊断鉴别诊断ROMA指数风险评估指数风险评估卵巢癌的治疗监测卵巢癌的治疗监测 复发和转移复发和转移卵巢癌卵巢癌预后评估预后评估卵巢癌卵巢癌早期诊断早期诊断提高标志物灵敏度提高标志物灵敏度Thank you for your attentionRoche Diagnostics Ltd. 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