性传播疾病的实验室检测南康市疾病预防控制中心2012-08-22性传播疾病的实验室检测优秀一、概述一、概述- -梅毒病原体梅毒病原体n n（一）、名（一）、名词词n n由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性全身性性传播疾病由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性全身性性传播疾病由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性全身性性传播疾病由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性全身性性传播疾病n n是我国卫生部规定的重点防治性病之一是我国卫生部规定的重点防治性病之一是我国卫生部规定的重点防治性病之一是我国卫生部规定的重点防治性病之一n n中华人民共和国传染病防治法中华人民共和国传染病防治法中华人民共和国传染病防治法中华人民共和国传染病防治法规定的乙类传染病规定的乙类传染病规定的乙类传染病规定的乙类传染病n n世界卫生组织列为世界上最常见的世界卫生组织列为世界上最常见的世界卫生组织列为世界上最常见的世界卫生组织列为世界上最常见的5050种传染病之一种传染病之一种传染病之一种传染病之一n n梅毒螺旋体（梅毒螺旋体（Treponema pallidum，TP ）n n是梅毒的病原体，因其透明，不易着色，故又称苍白螺是梅毒的病原体，因其透明，不易着色，故又称苍白螺是梅毒的病原体，因其透明，不易着色，故又称苍白螺是梅毒的病原体，因其透明，不易着色，故又称苍白螺旋体旋体旋体旋体 性传播疾病的实验室检测优秀n n(二）、免二）、免疫疫n n以细胞免疫为主以细胞免疫为主，体液免疫只有一定的辅，体液免疫只有一定的辅助防御作用助防御作用n n当螺旋体从体内清除后可再感染当螺旋体从体内清除后可再感染，而且仍，而且仍可出现一期梅毒症状可出现一期梅毒症状n n此病周期性潜伏与再发的原因可能与体内此病周期性潜伏与再发的原因可能与体内产生的免疫力有关产生的免疫力有关性传播疾病的实验室检测优秀n n（三）、抗（三）、抗（三）、抗（三）、抗 原原原原n n1 1表面特异性抗原表面特异性抗原表面特异性抗原表面特异性抗原：刺激机体产生特异凝集抗体及密螺：刺激机体产生特异凝集抗体及密螺：刺激机体产生特异凝集抗体及密螺：刺激机体产生特异凝集抗体及密螺旋体制动或溶解抗体，后者加补体可溶解螺旋体旋体制动或溶解抗体，后者加补体可溶解螺旋体旋体制动或溶解抗体，后者加补体可溶解螺旋体旋体制动或溶解抗体，后者加补体可溶解螺旋体n n2 2螺旋体内类属抗原：螺旋体内类属抗原：螺旋体内类属抗原：螺旋体内类属抗原：可产生补体结合抗体，与非病原可产生补体结合抗体，与非病原可产生补体结合抗体，与非病原可产生补体结合抗体，与非病原性螺旋体有交叉反应性螺旋体有交叉反应性螺旋体有交叉反应性螺旋体有交叉反应n n3 3，螺旋体与宿主组织磷脂形成的复合抗原，螺旋体与宿主组织磷脂形成的复合抗原，螺旋体与宿主组织磷脂形成的复合抗原，螺旋体与宿主组织磷脂形成的复合抗原：当螺旋体侵：当螺旋体侵：当螺旋体侵：当螺旋体侵入组织后，组织中的磷脂可粘附在螺旋体上，形成复合入组织后，组织中的磷脂可粘附在螺旋体上，形成复合入组织后，组织中的磷脂可粘附在螺旋体上，形成复合入组织后，组织中的磷脂可粘附在螺旋体上，形成复合抗原，此种复合抗原可刺激机体产生抗磷脂的自身免疫抗原，此种复合抗原可刺激机体产生抗磷脂的自身免疫抗原，此种复合抗原可刺激机体产生抗磷脂的自身免疫抗原，此种复合抗原可刺激机体产生抗磷脂的自身免疫抗体，称为抗体，称为抗体，称为抗体，称为反应素反应素反应素反应素（AegaginAegagin），可与牛心肌或其他正），可与牛心肌或其他正），可与牛心肌或其他正），可与牛心肌或其他正常动物心肌提取的类脂质抗原起沉淀反应（康氏试验）常动物心肌提取的类脂质抗原起沉淀反应（康氏试验）常动物心肌提取的类脂质抗原起沉淀反应（康氏试验）常动物心肌提取的类脂质抗原起沉淀反应（康氏试验）或补体结合反应（华氏试验）或补体结合反应（华氏试验）或补体结合反应（华氏试验）或补体结合反应（华氏试验） 性传播疾病的实验室检测优秀二、检测方法二、检测方法- -病原体检查病原体检查n n梅毒螺旋体检查是诊断早期梅毒的最佳方法。 n n诊断一期梅毒、二期梅毒时，可取患者的渗出液或淋巴结穿刺术得到的组织液，在暗视野显微镜下观察螺旋体的特征性形态和运动方式.n n病原学检查的主要方法有暗视显微镜检查、镀银染色法和直接荧光法性传播疾病的实验室检测优秀1.1.暗视野显微镜检查、镀银染色和荧光抗梅毒螺旋体单暗视野显微镜检查、镀银染色和荧光抗梅毒螺旋体单克隆抗体等检查方法，直接镜检到梅毒螺旋体，在临克隆抗体等检查方法，直接镜检到梅毒螺旋体，在临床可确诊梅毒，且具有快速、方便、易操作的特点。床可确诊梅毒，且具有快速、方便、易操作的特点。暗视野显微镜检查已被世界卫生组织指定为性病实验暗视野显微镜检查已被世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。室必备项目之一。2.2.螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法，对于患，对于患者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都有十分重要的意义。有十分重要的意义。3.3.如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性，如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性，性传播疾病的实验室检测优秀暗视野显微镜检查暗视野显微镜检查性传播疾病的实验室检测优秀检测方法-血清学检测 根据检测所用抗原不同，临床血清试验分为两大类：1.非梅毒螺旋体抗原血清试验2.梅毒螺旋体抗原血清试验性传播疾病的实验室检测优秀检测方法-非梅毒螺旋体血清试验n n性病研究实验室试验（VDRL）n n不加热血清反应素试验（USR）n n血浆反应素环状卡片试验（RPR、TRUST）性传播疾病的实验室检测优秀检测方法-非梅毒螺旋体血清试验n n所有的非梅毒螺旋体血清试验的抗原基本成分都一样,其基本成分是心磷脂 、卵磷脂和胆固醇n n抗原抗体结合形成复合物 凝集成网状沉淀颗粒 被肉眼所见n n上述方法的敏感性和特异性都基本相似性传播疾病的实验室检测优秀RPRRPR结果结果性传播疾病的实验室检测优秀TRUSTTRUST结果结果性传播疾病的实验室检测优秀检测方法非梅毒螺旋体血清试验临床意义非梅毒螺旋体血清试验临床意义n n非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏感性和特异性较好。适用于大量人群的筛查。感性和特异性较好。适用于大量人群的筛查。n n早期梅毒硬下疳出现早期梅毒硬下疳出现1 1周周-2-2周后，血清可呈阳性。周后，血清可呈阳性。n n经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征。观察、判愈、复发或再感染的指征。性传播疾病的实验室检测优秀检测方法-非梅毒螺旋体血清试验特点n n前带现象 指非梅毒螺旋体抗原血清试验中，有时血清指非梅毒螺旋体抗原血清试验中，有时血清中存在中存在高浓度的抗体时出现的弱阳性高浓度的抗体时出现的弱阳性、不典型或不典型或阴性反应的结果阴性反应的结果，而临床上又象二期梅毒，此时，而临床上又象二期梅毒，此时将血清稀释后再进行试验，出现了阳性的结果，将血清稀释后再进行试验，出现了阳性的结果，该现象称为前带现象。该现象称为前带现象。性传播疾病的实验室检测优秀检测方法-梅毒螺旋体血清试验 采用梅毒螺旋体作抗原，是特异性的抗原体采用梅毒螺旋体作抗原，是特异性的抗原体反应。反应。n n梅毒螺旋体血球凝集试验（梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHATPHA）n n梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TP-PATP-PA）n n荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABSFTA-ABS）、）、n n梅毒螺旋体酶联免疫试验（梅毒螺旋体酶联免疫试验（ELSA-TPELSA-TP）n n梅毒螺旋体蛋白印迹试验（梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB-TestWB-Test）性传播疾病的实验室检测优秀梅毒螺旋体血清试验的临床意义n n作为非梅毒螺旋体抗原血清试验作为非梅毒螺旋体抗原血清试验( (如如RPRRPR等等) )初筛阳性标本初筛阳性标本的确证试验。的确证试验。n n梅毒患者经过抗梅治疗后，梅毒患者经过抗梅治疗后，ELSAELSA、TPPATPPA试验仍可阳性，试验仍可阳性，故故TPPATPPA试验阳性不能作为疗效观察的指标。试验阳性不能作为疗效观察的指标。n nELSAELSA、TPPATPPA阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。性传播疾病的实验室检测优秀梅毒血清假阳性反应n n技术性假阳性反应：如实验室操作错误，标本溶技术性假阳性反应：如实验室操作错误，标本溶技术性假阳性反应：如实验室操作错误，标本溶技术性假阳性反应：如实验室操作错误，标本溶血等，如重复试验，无梅毒患者血清试验成为阳血等，如重复试验，无梅毒患者血清试验成为阳血等，如重复试验，无梅毒患者血清试验成为阳血等，如重复试验，无梅毒患者血清试验成为阳性。性。性。性。n n生物学假阳性反应：因非螺旋体抗原血清试验是生物学假阳性反应：因非螺旋体抗原血清试验是生物学假阳性反应：因非螺旋体抗原血清试验是生物学假阳性反应：因非螺旋体抗原血清试验是非特异性的，在其它一些疾病，尤以感染性疾病，非特异性的，在其它一些疾病，尤以感染性疾病，非特异性的，在其它一些疾病，尤以感染性疾病，非特异性的，在其它一些疾病，尤以感染性疾病，也可释放心拟脂至血液中，产生反应素，也可释放心拟脂至血液中，产生反应素，也可释放心拟脂至血液中，产生反应素，也可释放心拟脂至血液中，产生反应素，如麻风、如麻风、如麻风、如麻风、麻疹、疟疾、传染性肝炎、病毒性肺炎、传染性麻疹、疟疾、传染性肝炎、病毒性肺炎、传染性麻疹、疟疾、传染性肝炎、病毒性肺炎、传染性麻疹、疟疾、传染性肝炎、病毒性肺炎、传染性单核细胞增多症，系统性红斑狼疮，非典型性肺单核细胞增多症，系统性红斑狼疮，非典型性肺单核细胞增多症，系统性红斑狼疮，非典型性肺单核细胞增多症，系统性红斑狼疮，非典型性肺炎、甚至妊娠都可出现阳性，但这类患者血清反炎、甚至妊娠都可出现阳性，但这类患者血清反炎、甚至妊娠都可出现阳性，但这类患者血清反炎、甚至妊娠都可出现阳性，但这类患者血清反应滴度低，很少超过应滴度低，很少超过应滴度低，很少超过应滴度低，很少超过1 1：8 8。而且半年内渐转成阴。而且半年内渐转成阴。而且半年内渐转成阴。而且半年内渐转成阴性。性。性。性。另外可用特异性的梅毒血清反应证实。如用另外可用特异性的梅毒血清反应证实。如用另外可用特异性的梅毒血清反应证实。如用另外可用特异性的梅毒血清反应证实。如用FTAFTAABSABS试验试验试验试验性传播疾病的实验室检测优秀假阴性反应n n在梅毒螺旋体感染后在梅毒螺旋体感染后12周内可呈阴性反周内可呈阴性反应应n n梅毒螺旋体感染不久即开始治疗梅毒螺旋体感染不久即开始治疗n n晚期梅毒患者的血清中反应素含量低，敏晚期梅毒患者的血清中反应素含量低，敏感性低的梅毒血清试验易出现阴性反应感性低的梅毒血清试验易出现阴性反应n n在二期梅毒时在二期梅毒时RPR试验也可出现阴性反应，试验也可出现阴性反应，前带现象前带现象(prozone phenomenon) 性传播疾病的实验室检测优秀血清学检测的几个特点n n在最初的两周可能是阴性结果在最初的两周可能是阴性结果n nFTA、TPPA和和ELISA在所有阶段都最敏感在所有阶段都最敏感n nVDRL和和RPR在三期梅毒期可能为阴性在三期梅毒期可能为阴性n nVDRL-CSF仅用于诊断神经性梅毒仅用于诊断神经性梅毒性传播疾病的实验室检测优秀淋球菌实验室诊断技术淋球菌实验室诊断技术性传播疾病的实验室检测优秀概况概况- -病原学病原学n n淋病是指由淋病奈瑟菌淋病是指由淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae,(Neisseria gonorrhoeae,简简称淋球菌称淋球菌) )引起的各种化脓性感染，是一种经典的常引起的各种化脓性感染，是一种经典的常见的性传播疾病见的性传播疾病. .n n淋球菌为革兰阴性双球菌，大小约淋球菌为革兰阴性双球菌，大小约0.60.8m0.60.8m。通常。通常成对生长，两菌接触面平坦。成对生长，两菌接触面平坦。n n淋球菌与奈瑟属的另一种致病菌脑膜炎球菌及其他淋球菌与奈瑟属的另一种致病菌脑膜炎球菌及其他共栖奈瑟菌在生物学上有许多相似性，可通过生化共栖奈瑟菌在生物学上有许多相似性，可通过生化特性加以鉴别。淋球菌特性加以鉴别。淋球菌原发性感染部位主要为男性尿道或原发性感染部位主要为男性尿道或女性宫颈管内膜女性宫颈管内膜性传播疾病的实验室检测优秀概况概况- -流行病学流行病学淋病的传播途径有以下二种：淋病的传播途径有以下二种： 1)1)直直接接性性接接触触感感染染：成成人人淋淋病病几几乎乎全全部部通通过过性接触感染。性接触感染。 2)2)间间接接接接触触感感染染：儿儿童童可可通通过过污污染染了了淋淋球球菌菌的的物物品品间间接接感感染染。新新生生儿儿可可通通过过母母亲亲产产道道分分泌泌物间接感染物间接感染。性传播疾病的实验室检测优秀淋病的实验室诊断方法淋病的实验室诊断方法n n直接显微镜检查，观察淋球菌细胞；n n分离培养淋球菌；n n非培养技术检测淋球菌细胞成份如抗原或DNA（EIA, PCR/LCR） 性传播疾病的实验室检测优秀标本的采集和运送标本的采集和运送n n 取材的部位年龄年龄 性别性别 性接触方式性接触方式 临床表现临床表现n n取材拭子 藻酸钙拭子藻酸钙拭子 普普 通通 棉棉 拭拭子子 涤纶拭子涤纶拭子 性传播疾病的实验室检测优秀标本的采集和运送标本的采集和运送- -取材部位取材部位n n男性男性 异性恋者异性恋者: :采集尿道标本，有口淫史者加取咽部标本；采集尿道标本，有口淫史者加取咽部标本； 同性恋者同性恋者: : 采集尿道、直肠及咽部标本采集尿道、直肠及咽部标本. .n n女性女性 采采集集宫宫颈颈标标本本，必必要要时时从从尿尿道道、直直肠肠、咽咽部部、前前庭庭大大腺腺和和尿尿道道旁腺取材；旁腺取材；n n幼女幼女 采集阴道分泌物；采集阴道分泌物；n n新生儿眼炎患者新生儿眼炎患者 采集眼结膜分泌物，对其母亲采集宫颈、尿道及直肠标本。采集眼结膜分泌物，对其母亲采集宫颈、尿道及直肠标本。 性传播疾病的实验室检测优秀标本的采集和运送标本的采集和运送- -取材方法取材方法尿道尿道n n男性患者男性患者 用用手手指指从从阴阴茎茎根根部部向向尿尿道道口口方方向向挤挤压压，有有症症状状患患者者可可挤挤出出脓脓液液，用用取取样样拭拭子子蘸蘸取取脓脓液液作作涂涂片片或或培培养养。对对挤挤压压后后无无明明显显分分泌泌物物时时，采采用用男男用用取取材材拭拭子子插插入入尿尿道道 2 23cm3cm，稍稍用用力转动，保留数秒钟再取出，力转动，保留数秒钟再取出， 以采集到粘膜上皮细胞。以采集到粘膜上皮细胞。n n女性患者女性患者 可可抵抵着着耻耻骨骨联联合合轻轻轻轻按按摩摩尿尿道道口口，挤挤压压出出分分泌泌物物。如如果无明显分泌物，可用同男性相似的上述方法取材。果无明显分泌物，可用同男性相似的上述方法取材。性传播疾病的实验室检测优秀标本的采集和运送标本的采集和运送- -取材方法取材方法宫颈宫颈 取取材材前前用用温温水水或或生生理理盐盐水水湿湿润润扩扩阴阴器器。应应避避免免使使用用防防腐腐剂剂和和润润滑滑剂剂，因因为为这这些些物物质质对对淋淋球球菌菌有有抑抑制制作作用用。仔仔细细检检查查阴阴道道壁壁和和宫宫颈颈，如如果果宫宫颈颈口口外外面面的的分分泌泌物物较较多多，先先用用无无菌菌棉棉拭拭清清除除过过多多的的宫宫颈颈粘粘液液。将将一一取取样样拭拭子子插插入入宫宫颈颈管管内内1 12cm2cm，稍稍用用力力转转动动，保保留留10103030秒后取出。秒后取出。性传播疾病的实验室检测优秀标本的采集和运送标本的采集和运送- -取材取材n n直肠直肠 将将取取样样拭拭子子插插入入肛肛门门2 23cm3cm，从从紧紧靠靠肛肛环环边边的的隐隐窝中取材。避免接触粪便。窝中取材。避免接触粪便。n n阴道阴道 青青春春期期前前女女孩孩可可采采集集阴阴道道标标本本。将将取取样样拭拭子子置置于于阴道后穹窿阴道后穹窿10101515秒，采集阴道分泌物。秒，采集阴道分泌物。n n咽部咽部 从咽后壁或扁桃体隐窝取材从咽后壁或扁桃体隐窝取材 性传播疾病的实验室检测优秀标本的采集和运送标本的采集和运送- -运送运送n n淋淋球球菌菌的的抵抵抗抗力力弱弱，对对热热敏敏感感，不不耐耐干干燥燥。取取材材后后标标本本若若不不能能立立即即接接种种于于选选择择性性培培养养基基上上时时，需需采采用用运运送送系系统统。置置于于非非营营养养型型运运送送培培养养基基中中的的标标本本应应在在1212小小时时内内送送到到实实验验室室，接接种种于于选选择择性性培培养养基基，分分离离阳阳性性率率可可达达90%90%以以上上。超超过过2424小小时则分离阳性率下降。时则分离阳性率下降。性传播疾病的实验室检测优秀直接显微镜检查直接显微镜检查染色方法染色方法: : 革兰染液革兰染液 美兰染液美兰染液 姬姆萨染液姬姆萨染液 荧光抗体荧光抗体 革革兰兰染染色色为为一一传传统统方方法法，因因简简便便、快快捷捷及及价价廉廉、仍仍然然为为最最广广泛泛采采用用的的方方法法。革革兰兰染染色色将将菌菌分分为为二二大大类类，即染成紫色的革兰阳性菌及染成红色的革兰阴性菌。即染成紫色的革兰阳性菌及染成红色的革兰阴性菌。性传播疾病的实验室检测优秀直接显微镜检查的临床意义直接显微镜检查的临床意义n n男性淋菌性尿道炎的尿道标本男性淋菌性尿道炎的尿道标本 敏感性及特异性可高达敏感性及特异性可高达95%95%99%99%，具诊断价值。，具诊断价值。n n宫颈标本、无症状男性尿拭子及取自直肠的涂片时宫颈标本、无症状男性尿拭子及取自直肠的涂片时 敏感性仅敏感性仅404070%70%。 不不推推荐荐直直接接显显微微镜镜检检查查诊诊断断直直肠肠和和咽咽部部淋淋球球菌菌感感染染。 亦亦不不能能用用于于疗疗后后判判愈愈。如如果果在在多多形形核核细细胞胞外外见到形态典型的革兰阴性双球菌，需做培养进行确证。见到形态典型的革兰阴性双球菌，需做培养进行确证。性传播疾病的实验室检测优秀淋球菌培养淋球菌培养n n培养法为诊断淋病的金标准培养法为诊断淋病的金标准. .n n对女性淋病的确诊应做淋球菌培养对女性淋病的确诊应做淋球菌培养 n n从选择性培养基上分离出淋球菌即可诊断淋病。从选择性培养基上分离出淋球菌即可诊断淋病。n n培养的敏感性培养的敏感性81100%81100%。n n培养的优点有：培养的优点有： 特异性极高（特异性极高（100%100%）；）； 可发现无症状淋球菌感染患者；可发现无症状淋球菌感染患者； 可确诊儿童性虐待；可确诊儿童性虐待； 可用于进一步作药敏试验；可用于进一步作药敏试验； 可用于治疗后的判愈试验。可用于治疗后的判愈试验。性传播疾病的实验室检测优秀淋球菌培养淋球菌培养- -培养条件培养条件n n培培养养条条件件 ： 35 35 3636，含含5%5%10% 10% COCO2 2，湿润（湿润（70%70%湿度）的环境。湿度）的环境。 COCO2 2环环境境可可由由COCO2 2培培养养箱箱、COCO2 2产产气气袋袋及及烛烛缸缸提提供供。使使用用烛烛缸缸时时，应应使使用用白白色色、无无芳芳香香味味的的无无毒毒性性蜡蜡烛烛。在烛缸底部放些浸水棉球以保持一定的湿度。在烛缸底部放些浸水棉球以保持一定的湿度。n n培养时间：培养时间：24482448小时小时性传播疾病的实验室检测优秀淋球菌培养淋球菌培养- -培养条件培养条件性传播疾病的实验室检测优秀淋球菌培养淋球菌培养- -观察结果观察结果n n培培养养2424小小时时后后检检查查平平皿皿，此此时时没没有有菌菌生生长长的的平平皿皿应应继继续续培培养养至至4848小小时时，仍仍无无菌菌生生长长才才可可丢丢弃弃，作出淋球菌培养阴性的报告。作出淋球菌培养阴性的报告。n n对对选选择择性性培培养养基基上上分分离离的的直直径径在在0.50.51mm1mm，无无色、灰白色的半透明菌落应作进一步鉴定。色、灰白色的半透明菌落应作进一步鉴定。性传播疾病的实验室检测优秀淋球菌培养淋球菌培养- -观察结果观察结果性传播疾病的实验室检测优秀淋球菌培养淋球菌培养- -淋球菌的初步鉴定淋球菌的初步鉴定n n初步鉴定淋球菌的主要依据初步鉴定淋球菌的主要依据 菌落特征氧化酶试验 革兰染色性传播疾病的实验室检测优秀淋球菌氧化酶阳性淋球菌氧化酶阳性性传播疾病的实验室检测优秀淋球菌培养淋球菌培养- -淋球菌的确证试验淋球菌的确证试验n n糖发酵试验n n免疫学试验 -荧光抗体染色 -协同凝集试验 n n酶底物试验n nDNA探针试验性传播疾病的实验室检测优秀淋球菌的鉴定特征淋球菌的鉴定特征菌落形态菌落形态淋球菌样淋球菌样革兰染色革兰染色革兰阴性双球菌革兰阴性双球菌氧化酶试验氧化酶试验阳性阳性过氧化物酶试验过氧化物酶试验阳性阳性快速糖发酵试验快速糖发酵试验G+ L- M- S- G+ L- M- S- -内酰胺酶内酰胺酶阳性阳性PPNGPPNG或阴性或阴性性传播疾病的实验室检测优秀非培养诊断技术非培养诊断技术n n非培养技术的特点非培养技术的特点 不依赖于活的病原体的存在，无需特殊运送条件；不依赖于活的病原体的存在，无需特殊运送条件； 仅适合尿道或宫颈标本，以及尿液（仅适合尿道或宫颈标本，以及尿液（PCR/LCRPCR/LCR）；）； 不能进行抗生素敏感性试验不能进行抗生素敏感性试验 用于判愈试验需在治疗后至少用于判愈试验需在治疗后至少3 3 周以上进行周以上进行. .性传播疾病的实验室检测优秀 生殖道沙眼衣原体感染性传播疾病的实验室检测优秀生殖道沙眼衣原体感染-病原体n n沙眼衣原体有沙眼衣原体有15个血清型，个血清型，A, B, Ba, C, D-K, LI, L2, L3n n-A, B, Ba和和C型最常引起沙眼型最常引起沙眼n nD-K型主要感染泌尿生殖道型主要感染泌尿生殖道n nLI, L2, L3型引起性病性淋巴肉芽肿型引起性病性淋巴肉芽肿性传播疾病的实验室检测优秀生殖道沙眼衣原体感染-病原体n非淋菌性尿道炎（非淋菌性尿道炎（NGU)是指由性是指由性接触传染的一种尿道炎，它在临接触传染的一种尿道炎，它在临床上有尿道炎的表现，但在尿道床上有尿道炎的表现，但在尿道分泌物中查不到淋球菌。分泌物中查不到淋球菌。n40-50%由沙眼衣原体引起，由沙眼衣原体引起，20-30%由支原体引起，尚有由支原体引起，尚有10-20%由阴道毛滴虫、白色念珠菌和单由阴道毛滴虫、白色念珠菌和单纯疱疹病毒等引起。纯疱疹病毒等引起。性传播疾病的实验室检测优秀病原学 革兰阴性、专性细胞内寄生的微生物衣原体有特殊的发育周期,可见2种不同的结构 原体：感染型，较小，呈球形 始体：增殖型，大，呈圆形或卵圆形性传播疾病的实验室检测优秀沙眼衣原体感染的并发症n n附睾炎附睾炎n n前列腺炎前列腺炎n nReiter病病性传播疾病的实验室检测优秀直肠炎n n多发于男性同性恋者，由多发于男性同性恋者，由LGU株引起株引起n n在男性同性恋者中，直肠沙眼衣原体的分在男性同性恋者中，直肠沙眼衣原体的分离率为离率为48；而在男性直肠炎患者中，；而在男性直肠炎患者中，分离率为分离率为12n n临床表现：轻者无症状，重者有直肠疼痛、临床表现：轻者无症状，重者有直肠疼痛、出血、腹泻及粘液性分泌物出血、腹泻及粘液性分泌物性传播疾病的实验室检测优秀女性感染宫颈炎n n约约1/3左右的病人无任何临床症状左右的病人无任何临床症状n n阴道分泌物：稀薄至脓性，正常至增多有阴道分泌物：稀薄至脓性，正常至增多有气味气味n n宫颈充血，水肿，脆性增加宫颈充血，水肿，脆性增加n n宫颈管口粘液脓性分泌物宫颈管口粘液脓性分泌物性传播疾病的实验室检测优秀尿道炎n n大多数女性尿道沙眼衣原体感染无症状大多数女性尿道沙眼衣原体感染无症状n n急性尿道综合症：可与急性细菌性膀胱炎急性尿道综合症：可与急性细菌性膀胱炎的症状相似，如排尿困难、尿频、尿急的症状相似，如排尿困难、尿频、尿急n n6080的尿道感染者同时合并宫颈感的尿道感染者同时合并宫颈感染染性传播疾病的实验室检测优秀盆腔炎（PID）n n衣原体宫颈炎衣原体宫颈炎2040n n上生殖道感染上生殖道感染1040n n有症状有症状PID性传播疾病的实验室检测优秀新生儿感染n n分娩时传播分娩时传播n n沙眼衣原体活动性感染的孕妇，其新生儿沙眼衣原体活动性感染的孕妇，其新生儿的感染率的感染率n n在任何部位的感染在任何部位的感染5070n n新生儿结膜炎黄新生儿结膜炎黄050n n至少有至少有50的结膜炎患儿同时有鼻咽感染的结膜炎患儿同时有鼻咽感染n n30的鼻咽感染发展为衣原体肺炎的鼻咽感染发展为衣原体肺炎性传播疾病的实验室检测优秀男性感染非淋菌性尿道炎n n潜伏期：潜伏期：13周周n n症状：尿道粘液性或粘液脓性分泌物，并症状：尿道粘液性或粘液脓性分泌物，并有尿痛、尿道不适等症状。有尿痛、尿道不适等症状。性传播疾病的实验室检测优秀沙眼衣原体感染- -实验室检测实验室检测FF细胞培养FF抗原检测试验 （酶联免疫吸附实验、直接荧光法、酶联免疫吸附实验、直接荧光法、酶联免疫吸附实验、直接荧光法、酶联免疫吸附实验、直接荧光法、快速抗原试验）快速抗原试验）快速抗原试验）快速抗原试验）FF直接涂片显微镜检查直接涂片显微镜检查FF核酸扩增检测(NAAT)法FF抗体检测抗体检测 性传播疾病的实验室检测优秀衣原体的培养评评 价价n n敏感性敏感性70708080n n特异性特异性100100缺点缺点n n费时（需费时（需3 35 5天），费力，技术要求高天），费力，技术要求高n n不宜作为临床常规检查不宜作为临床常规检查n n不宜用于大规模的筛查和流行病学调查不宜用于大规模的筛查和流行病学调查 性传播疾病的实验室检测优秀抗原检测评 价酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验 敏感性和特异性与直接免疫荧光法相似敏感性和特异性与直接免疫荧光法相似 敏感性：敏感性：79799797 高高 特异性特异性: 97: 979999 高高 试验结果阴性时，不能完全排除沙眼衣原体试验结果阴性时，不能完全排除沙眼衣原体感染，有可能是沙眼衣原体数量不足或标本感染，有可能是沙眼衣原体数量不足或标本采集不当的缘故采集不当的缘故性传播疾病的实验室检测优秀抗原检测评 价直接免疫荧光法vv敏感性70%90%vv特异性83%99%vv由于有可能将某些发光颗粒(白细胞、上皮细胞、色素颗粒)、细菌和酵母菌误认为沙眼衣原体，因此此法对于实验人员的技术水平要求较高性传播疾病的实验室检测优秀抗原检测抗原快速检测:优 点n n简易，方便，快速，尤其适用于基层单位缺 点n n标本中需要足够数量的沙眼衣原体抗原，否则有假阴性结果性传播疾病的实验室检测优秀核酸扩增检测n n核酸扩增技术是通过扩增沙眼衣原体的多拷贝基因（如核酸扩增技术是通过扩增沙眼衣原体的多拷贝基因（如隐蔽性质粒、染色体和隐蔽性质粒、染色体和RNARNA）检测病原体。方法包括）检测病原体。方法包括n n聚合酶链反应（聚合酶链反应（PCRPCR）n n连接酶链反应（连接酶链反应（LCRLCR）n n等温链置换扩增技术（等温链置换扩增技术（SDASDA）n n转录介导扩增技术（转录介导扩增技术（TMATMA）n n核酸序列扩增技术（核酸序列扩增技术（NASBANASBA）n n实时荧光实时荧光PCRPCR等。等。性传播疾病的实验室检测优秀核酸扩增检测n n核算扩增检测具有很高的敏感性和特异性，世界卫生组核算扩增检测具有很高的敏感性和特异性，世界卫生组织已推荐为扩大的生殖道沙眼衣原体感染实验室诊断的织已推荐为扩大的生殖道沙眼衣原体感染实验室诊断的“金标准金标准”。n n核算扩增检测不仅可用于宫颈、尿道标本中沙眼衣原体核算扩增检测不仅可用于宫颈、尿道标本中沙眼衣原体的检测，也可用于男女性尿液标本的检测。的检测，也可用于男女性尿液标本的检测。 n n开展核酸检测的实验室应通过有关部门考核取得开展临开展核酸检测的实验室应通过有关部门考核取得开展临床核酸检测技术资格证。床核酸检测技术资格证。性传播疾病的实验室检测优秀显微镜检查n n涂片姬姆萨染色、碘染色或帕氏染色直接涂片姬姆萨染色、碘染色或帕氏染色直接镜检可发现沙眼衣原体包涵体。只适合新镜检可发现沙眼衣原体包涵体。只适合新生儿眼结膜刮片的检查。生儿眼结膜刮片的检查。性传播疾病的实验室检测优秀抗体检测n n抗体检测抗体检测n n血清抗体水平升高（血清抗体水平升高（1:64),见于沙眼衣原见于沙眼衣原体性附睾炎、输卵管炎。新生儿衣原体肺体性附睾炎、输卵管炎。新生儿衣原体肺炎中沙眼衣原体炎中沙眼衣原体IgM抗体滴度升高。抗体滴度升高。性传播疾病的实验室检测优秀 生殖器疱疹(HSV-2)性传播疾病的实验室检测优秀生殖器疱疹n n有单纯疱疹病毒感染泌尿生殖器及肛门部有单纯疱疹病毒感染泌尿生殖器及肛门部位皮肤粘膜引起的常见性病位皮肤粘膜引起的常见性病n n单纯疱疹病毒有两种类型：单纯疱疹病毒有两种类型：HSV-!和和HSV-2,多数生殖器疱疹由多数生殖器疱疹由HSV2引起引起n n本病呈慢性复发过程，尚无彻底治愈的方本病呈慢性复发过程，尚无彻底治愈的方法法性传播疾病的实验室检测优秀病原体n nHSV是双联是双联DNA病毒，属于人类疱疹病毒病毒，属于人类疱疹病毒a亚科，人类是亚科，人类是HSV的唯一自然宿主的唯一自然宿主n n病毒颗粒直径约病毒颗粒直径约150nm,其中央为病毒核心，其中央为病毒核心，含有病毒基因组含有病毒基因组DNAn n病毒具有嗜感觉神经节而形成潜伏感染状病毒具有嗜感觉神经节而形成潜伏感染状态的特征态的特征n n潜伏部位：骶神经根区潜伏部位：骶神经根区性传播疾病的实验室检测优秀病原学n nHSV-2是生殖器疱疹的主要病原体，是生殖器疱疹的主要病原体，HSV1引起的生殖器疱疹约占该病的引起的生殖器疱疹约占该病的1040。今年来，。今年来，HSV-1所致生殖器疱疹增多，所致生殖器疱疹增多，这与口交等性行为方式有关。这与口交等性行为方式有关。性传播疾病的实验室检测优秀血清学检测的意义HSV感染的血清流行病学调查鉴别诊断原发性及非原发性HSV感染n n感染者性伴的HSV感染状况的判断n n孕妇产前监测性传播疾病的实验室检测优秀样品的采集n n原发性生殖器疱疹的病程为原发性生殖器疱疹的病程为23周，周，病毒排放的持续时间平均为病毒排放的持续时间平均为12d。复。复发性生殖器疱疹的病程为发性生殖器疱疹的病程为1周周2周，周，病毒排放的持续时间平均为病毒排放的持续时间平均为4d。取材。取材时，应尽可能取疱液和溃疡，以提高时，应尽可能取疱液和溃疡，以提高检查的阳性率。取材后，将标本放入检查的阳性率。取材后，将标本放入装有装有1ml-2ml病毒运送液或病毒运送液或hanks液的液的小瓶中送检，或直接涂片作细胞学检小瓶中送检，或直接涂片作细胞学检查或病毒的直接免疫荧光检查。查或病毒的直接免疫荧光检查。性传播疾病的实验室检测优秀实验室诊断方法n n细胞学检查n n抗原检测n n病毒培养性传播疾病的实验室检测优秀n抗原检测：n n用免疫学方法检测HSV抗原是目前最常用的快速诊断方法。这些方法以抗HSV抗体为基础，包括直接免疫荧光法、免疫酶染色和酶联免疫吸附实验(ELISA).其中直接免疫荧光法应用较多。性传播疾病的实验室检测优秀尖锐湿疣尖锐湿疣性传播疾病的实验室检测优秀病原体n n尖锐湿疣又称尖圭湿疣、生殖器疣或性病尖锐湿疣又称尖圭湿疣、生殖器疣或性病疣，是有某些类型的人类乳头瘤病毒疣，是有某些类型的人类乳头瘤病毒n n是最小的是最小的DNA病毒病毒n n有有100多种亚型，不同型别的致病性不同多种亚型，不同型别的致病性不同n n病毒只能在人体存活病毒只能在人体存活n n病毒不能在体外组织培养、细胞培养和实病毒不能在体外组织培养、细胞培养和实验动物中生长验动物中生长性传播疾病的实验室检测优秀n n（HPV)引起的增生性疾病。在性活跃人群引起的增生性疾病。在性活跃人群中，通过性接触而发生肛门生殖器疣，目中，通过性接触而发生肛门生殖器疣，目前，已被公认为性传播疾病之一。本病与前，已被公认为性传播疾病之一。本病与癌有一定关系，日益为人们所重视。其亚癌有一定关系，日益为人们所重视。其亚临床感染也引起人们注意。临床感染也引起人们注意。性传播疾病的实验室检测优秀临床表现n n好发年龄：性活跃的年轻人好发年龄：性活跃的年轻人n n潜伏期：潜伏期：13月月n n开始为小而淡红色丘疹，渐增大增多，表开始为小而淡红色丘疹，渐增大增多，表面凹凸不平面凹凸不平n n通常无自觉症状通常无自觉症状性传播疾病的实验室检测优秀n n临床检查临床检查: （一）醋酸白试验（一）醋酸白试验（一）醋酸白试验（一）醋酸白试验用用用用3-5%3-5%醋酸外搽或湿敷，醋酸外搽或湿敷，醋酸外搽或湿敷，醋酸外搽或湿敷，2-52-5分钟后，肛门则需分钟后，肛门则需分钟后，肛门则需分钟后，肛门则需5min5min，病灶稍膨隆，大多数结果可直接用肉眼观，病灶稍膨隆，大多数结果可直接用肉眼观，病灶稍膨隆，大多数结果可直接用肉眼观，病灶稍膨隆，大多数结果可直接用肉眼观察，阴道内皮损借助于阴道镜或放大镜观察更清察，阴道内皮损借助于阴道镜或放大镜观察更清察，阴道内皮损借助于阴道镜或放大镜观察更清察，阴道内皮损借助于阴道镜或放大镜观察更清楚。楚。楚。楚。结果：人类乳头瘤病毒感染部位现百色改变，为结果：人类乳头瘤病毒感染部位现百色改变，为结果：人类乳头瘤病毒感染部位现百色改变，为结果：人类乳头瘤病毒感染部位现百色改变，为均匀一致的白色，临床可疑损害或临床未见皮损均匀一致的白色，临床可疑损害或临床未见皮损均匀一致的白色，临床可疑损害或临床未见皮损均匀一致的白色，临床可疑损害或临床未见皮损的部位均可出现白色改变，直径数毫米至数厘米，的部位均可出现白色改变，直径数毫米至数厘米，的部位均可出现白色改变，直径数毫米至数厘米，的部位均可出现白色改变，直径数毫米至数厘米，形态规则或不规则，边界清楚，也可不什分清楚。形态规则或不规则，边界清楚，也可不什分清楚。形态规则或不规则，边界清楚，也可不什分清楚。形态规则或不规则，边界清楚，也可不什分清楚。性传播疾病的实验室检测优秀临床意义n n该方法简便、经济、快速使用方便，敏感该方法简便、经济、快速使用方便，敏感性较高，对于临床非典型和亚临床感染的性较高，对于临床非典型和亚临床感染的诊断有一定帮助，在治疗前使用以确定治诊断有一定帮助，在治疗前使用以确定治疗范围，为防治或减少治疗后复发有一定疗范围，为防治或减少治疗后复发有一定帮助。但该方法的特异性不高，有些慢性帮助。但该方法的特异性不高，有些慢性炎症，例如念珠菌性阴道炎、生殖器部位炎症，例如念珠菌性阴道炎、生殖器部位的外伤以及非特异性炎症引起的粘膜上皮的外伤以及非特异性炎症引起的粘膜上皮增厚等均可出现假阳性结果。增厚等均可出现假阳性结果。性传播疾病的实验室检测优秀n实验室检查实验室检查n n显微镜检查显微镜检查 通过通过PapPap涂片发现宫颈麟状上皮内的涂片发现宫颈麟状上皮内的损害损害n n病理学检查病理学检查 符合尖锐湿疣的病理学征象符合尖锐湿疣的病理学征象n n抗原检测抗原检测 免疫组织化学检测标本免疫组织化学检测标本HPVHPV抗原阳性抗原阳性n n核酸扩增实验核酸扩增实验聚合酶链反应法等检测可疑损害聚合酶链反应法等检测可疑损害标本中标本中HPVHPV核酸阳性核酸阳性性传播疾病的实验室检测优秀一、性病实验室的建设基本条件一、性病实验室的建设基本条件1 1、人员要求、人员要求实验室人员至少实验室人员至少2 2名以上，其中具有中级卫生技术职名以上，其中具有中级卫生技术职称人员至少称人员至少1 1名，。实验室技术人员应接受过地方或省级名，。实验室技术人员应接受过地方或省级性病检测技术培训，并获得培训证书。性病检测技术培训，并获得培训证书。2 2、基本设置、基本设置（1 1）实验室根据所开项目的要求进行分区，包括常规性）实验室根据所开项目的要求进行分区，包括常规性病检测、细菌培养、血清检测、样本接收室以及工作人病检测、细菌培养、血清检测、样本接收室以及工作人员休息区等。员休息区等。性传播疾病的实验室检测优秀n n（2）实验室应配置如下设备：普通显微镜、普通离心机、普通冰箱、CO2培养箱（或电热恒温培养箱）、电热烤箱、水浴箱、（酶标读数仪、洗板机）、普通天平、生物安全柜、水平旋转仪(梅毒检测用)、振荡器、加样器（仪）、实验室恒温设备、高压蒸汽灭菌锅，安全防护用品。性传播疾病的实验室检测优秀开展性病实验室项目开展性病实验室项目(1)(1)n n病病 种种项项 目目n n梅毒梅毒病原体检测病原体检测梅毒螺旋体暗视野检查（根据条件开展）梅毒螺旋体暗视野检查（根据条件开展）非梅毒螺旋体抗原血清试验（非梅毒螺旋体抗原血清试验（RPRRPR或或TRUSTTRUST） 梅毒螺旋体抗原血清试验（梅毒螺旋体抗原血清试验（ TPPA/ELISATPPA/ELISA）n n 淋病淋病涂片革兰染色镜检涂片革兰染色镜检淋球菌培养淋球菌培养氧化酶试验氧化酶试验n n沙眼衣原体感染沙眼衣原体感染抗原检测抗原检测性传播疾病的实验室检测优秀n n生殖器疱疹生殖器疱疹 抗原检测（根据条件开展）抗原检测（根据条件开展）细胞培养（根据条件开展）细胞培养（根据条件开展）n n尖锐湿疣尖锐湿疣组织病理（根据条件开展）组织病理（根据条件开展）免疫组化（根据条件开展）免疫组化（根据条件开展）n n阴道滴虫病阴道滴虫病湿片镜检湿片镜检 n n念珠菌病念珠菌病1010KOHKOH湿片镜检湿片镜检n n 细菌性阴道病细菌性阴道病线索细胞检查线索细胞检查性传播疾病的实验室检测优秀n 谢 谢!性传播疾病的实验室检测优秀性传播疾病的实验室检测优秀