紫外可见分光光度法紫外可见分光光度法第四章第四章Ultraviolet and Visible Spectrophotometry第一节第一节 紫外紫外- -可见吸收光谱可见吸收光谱一、紫外-可见吸收光谱的产生二、紫外-可见吸收光谱的电子跃迁类型 三、相关的基本概念四、吸收带类型和影响因素一一. .紫外可见吸收光谱的产生紫外可见吸收光谱的产生1.1.概述概述紫外可见吸收光谱：分子价电子能级跃迁，称为电子光谱;属分子吸收光谱。波长范围：100-800 nm.(1) 远紫外光区: 100-200nm (2) 近紫外光区: 200-360nm(3)可见光区:360-760nm可用于结构鉴定和定量分析。电子跃迁的同时，伴随着振动转动能级的跃迁;带状光谱。250300350400nm1234 2.2.物质对光的选择性吸收及吸收曲线物质对光的选择性吸收及吸收曲线M + 热M + 荧光或磷光E = E2 - E1 = h量子化 ；选择性吸收吸收曲线与最大吸收波长 max 用不同波长的单色光照射，测吸光度;M+h M *基态基态 激发态激发态E1（E）E2 /nm颜色颜色互补光互补光400-450紫黄绿450-480蓝蓝黄黄480-490绿蓝绿蓝橙橙490-500蓝绿蓝绿红红500-560绿绿红紫红紫560-580黄绿黄绿紫紫580-610黄黄蓝蓝610-650橙橙绿蓝绿蓝650-760红红蓝绿蓝绿不同颜色的可见光波长及其互补光不同颜色的可见光波长及其互补光3.3.电子跃迁与分子吸收光谱电子跃迁与分子吸收光谱物质分子内部三种运动形式：物质分子内部三种运动形式： （1 1）电子相对于原子核的运动；）电子相对于原子核的运动； （2 2）原子核在其平衡位置附近的相对振动；）原子核在其平衡位置附近的相对振动； （3 3）分子本身绕其重心的转动。）分子本身绕其重心的转动。分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能级分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能级三种能级都是量子化的，且各自具有相应的能量。三种能级都是量子化的，且各自具有相应的能量。分子的内能：电子能量分子的内能：电子能量Ee、振动能量、振动能量Ev、转动能量、转动能量Er即即:EEe+Ev+Erevr4.能级跃迁 电子能级间跃电子能级间跃迁的同时，总伴迁的同时，总伴随有振动和转动随有振动和转动能级间的跃迁。能级间的跃迁。即电子光谱中总即电子光谱中总包含有振动能级包含有振动能级和转动能级间跃和转动能级间跃迁产生的若干谱迁产生的若干谱线而呈现宽谱带。线而呈现宽谱带。4.4.讨论：讨论：（1 1） 转动能级间的能量差转动能级间的能量差r r：0.0050.0050.050eV0.050eV，跃迁，跃迁产生吸收光谱位于远红外区。远红外光谱或分子转动光谱；产生吸收光谱位于远红外区。远红外光谱或分子转动光谱；（2 2） 振动能级的能量差振动能级的能量差v v约为：约为：0.050.05eVeV，跃迁产，跃迁产生的吸收光谱位于红外区，红外光谱或分子振动光谱；生的吸收光谱位于红外区，红外光谱或分子振动光谱；（3 3） 电子能级的能量差电子能级的能量差e e较大较大1 120eV20eV。电子跃迁产生。电子跃迁产生的吸收光谱在紫外的吸收光谱在紫外可见光区，紫外可见光区，紫外可见光谱或分子的电可见光谱或分子的电子光谱；子光谱；4.4.讨论：讨论： （4 4）吸收光谱的波长分布是由产生谱带的跃迁能级间的）吸收光谱的波长分布是由产生谱带的跃迁能级间的能量差所决定，反映了分子内部能级分布状况，是物质定性能量差所决定，反映了分子内部能级分布状况，是物质定性的依据；的依据； （5 5）吸收谱带的强度与电子的跃迁几率有关，也提供分子）吸收谱带的强度与电子的跃迁几率有关，也提供分子结构的信息。通常将在最大吸收波长处测得的摩尔吸光系数结构的信息。通常将在最大吸收波长处测得的摩尔吸光系数maxmax也作为定性的依据。也作为定性的依据。不同物质的不同物质的maxmax有时可能相同，有时可能相同，但但maxmax不一定相同；不一定相同； （6 6）吸收谱带强度与该物质分子吸收的光子数成正比，定）吸收谱带强度与该物质分子吸收的光子数成正比，定量分析的依据。量分析的依据。二、紫外二、紫外- -可见吸收光谱的电子跃迁类型可见吸收光谱的电子跃迁类型1.预备知识：预备知识：价电子：价电子：电子电子饱和的饱和的键键 电子电子 不饱和的不饱和的 键键 n n电子电子轨道：轨道：电子围绕原子或分子运动的几率电子围绕原子或分子运动的几率 轨道不同，电子所具有能量不同轨道不同，电子所具有能量不同 基态与激发态：基态与激发态：电子吸收能量，由基态电子吸收能量，由基态激发态激发态 c c成键轨道与反键轨道：成键轨道与反键轨道：n n * * *图示2.2.有机物吸收光谱与电子跃迁有机物吸收光谱与电子跃迁紫外紫外可见吸收光谱可见吸收光谱 有机化合物的紫外可见吸收光谱是三种电子跃迁的结果：电子、电子、n电子。分子轨道理论分子轨道理论：成键轨道反键轨道。当外层电子吸收紫外或可见辐射后，就从基态向激发态(反键轨道)跃迁。主要有四种跃迁四种跃迁所需能量大小顺序大小顺序为：n n n s sp p *s s *RKE,Bnp p ECOHnp ps sH图示跃迁 所需能量最大；电子只有吸收远紫外光的能量才能发生跃迁； 饱和烷烃的分子吸收光谱出现在远紫外区； 吸收波长104 强带 min102 弱带四、吸收带类型和影响因素四、吸收带类型和影响因素1R带：由含杂原子的不饱和基团的n *跃迁产生CO；CN；NN E小，max250400nm，max200nm，max104共轭体系增长，max红移，max溶剂极性，对于(CHCH)n max不变 对于CHCCO max红移续前3B带：由 *跃迁产生芳香族化合物的主要特征吸收带 max =254nm，宽带，具有精细结构；max=200极性溶剂中，或苯环连有取代基，其精细结构消失4E带：由苯环环形共轭系统的 *跃迁产生芳香族化合物的特征吸收带 E1 180nm max104 （常观察不到）E2 200nm max=7000 强吸收苯环有发色团取代且与苯环共轭时，E2带与K带合并 一起红移（长移）图示图示图示续前影响吸收带位置的因素：影响吸收带位置的因素：1溶剂效应：对max影响： next n-*跃迁：溶剂极性，max蓝移 -*跃迁：溶剂极性 ，max红移对吸收光谱精细结构影响 next 溶剂极性，苯环精细结构消失溶剂的选择溶剂的选择极性；纯度高；截止波长极性；纯度高；截止波长 主成分吸收与纯品比较，E，光谱变形续前2杂质限量的测定：例2：肾上腺素中微量杂质肾上腺酮含量计算 2mg/mL -0.05mol/L的HCL溶液， 310nm下测定. 规定 A3100.05 即符合要求的杂质限量0.06%二、定量分析二、定量分析（一）单组分的定量方法1吸光系数法 2标准曲线法 3对照法：外标一点法续前1吸光系数法（绝对法）吸光系数法（绝对法）练习例3：维生素B12 的水溶液在361nm处的百分吸光系数为207，用1cm比色池测得某维生素B12溶液的吸光度是0.414，求该溶液的浓度。解：练习例4：精密称取B12样品25.0mg，用水溶液配成100ml。精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm处测定吸光度为0.507，求B12的百分含量？解：练习例5：解：续前续前2标准曲线法标准曲线法参比参比 标准样品标准样品 待测样品待测样品例6 芦丁含量测定0.710mg/25mL0.710mg/25mL续前3对照法：外标一点法对照法：外标一点法注：当样品溶液与标准品溶液的注：当样品溶液与标准品溶液的 稀释倍数相同时稀释倍数相同时练习例7： 维生素B12的含量测定 精密吸取B12注射液2.50mL，加水稀释至10.00mL；另配制对照液，精密称定对照品25.00mg，加水稀释至1000mL。在361nm处，用1cm吸收池，分别测定吸光度为0.508和0.518，求B12注射液注射液的浓度以及标示量的百分含量（该B12注射液的标示量为100g / mL）解：1 1）对照法）对照法 练习2）吸光系数法 续前（二）多组分的定量方法（二）多组分的定量方法三种情况：1两组分吸收光谱不重叠两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 两组分在各自两组分在各自max下不重叠下不重叠分别按单组分定量分别按单组分定量续前2两组分吸收光谱部分重叠两组分吸收光谱部分重叠 1测测A1b组分不干扰组分不干扰可按单组分定量测可按单组分定量测Ca 2测测A2a组分干扰组分干扰不能按单组分定量测不能按单组分定量测Ca 续前3 3两组分吸收光谱完全重叠两组分吸收光谱完全重叠混合样品测定混合样品测定（1）解线性方程组法）解线性方程组法（2）等吸收双波长消去法）等吸收双波长消去法（3）系数倍率法）系数倍率法1解线性方程组法解线性方程组法步骤：步骤：2等吸收双波长法等吸收双波长法步骤：步骤： 消除消除a的影响测的影响测b续前消去消去b的影响测的影响测a 注：须满足两个基本条件注：须满足两个基本条件选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大3系数倍率法系数倍率法前提：干扰组分前提：干扰组分b不成峰形不成峰形 无等吸收点无等吸收点练习解：例例8 8取咖啡酸，在取咖啡酸，在165165干燥至恒重，精密称取干燥至恒重，精密称取10.00mg10.00mg，加少量，加少量 乙醇溶解，转移至乙醇溶解，转移至200mL200mL容量瓶中，加水至刻度线，取此溶容量瓶中，加水至刻度线，取此溶 液液5.00mL5.00mL，置于，置于50mL50mL容量瓶中，加容量瓶中，加6mol/L6mol/L的的HCL 4mLHCL 4mL，加，加 水至刻度线。取此溶液于水至刻度线。取此溶液于1cm1cm比色池中，在比色池中，在323nm323nm处测定吸处测定吸 光度为光度为0.4630.463，已知该波长处的，已知该波长处的 ，求咖啡酸百分，求咖啡酸百分 含量含量练习解：例例例例9 9精密称取精密称取0.0500g0.0500g样品，置于样品，置于250mL250mL容量瓶中，加入容量瓶中，加入 0.02mol/L HCL0.02mol/L HCL溶解，稀释至刻度。准确吸取溶解，稀释至刻度。准确吸取2mL2mL，稀释至，稀释至 100mL100mL。以。以0.02mol/L HCL0.02mol/L HCL为空白为空白, ,在在263nm263nm处用处用1cm1cm吸收池吸收池 测定透光率为测定透光率为41.7%41.7%，其摩尔吸光系数为，其摩尔吸光系数为1200012000，被测物分，被测物分 子 量 为子 量 为100.0100.0， 试 计 算， 试 计 算263nm263nm处处 和样品的百分含量。和样品的百分含量。一、一、显色反应的选择显色反应的选择二、显色反应的要求二、显色反应的要求三、显色反应条件的选择三、显色反应条件的选择四、共存离子干扰的消除四、共存离子干扰的消除五、测定条件的选择五、测定条件的选择六、提高光度测定灵敏度和选择性的途径六、提高光度测定灵敏度和选择性的途径第五节第五节 光电比色法光电比色法一、一、显色反应的选择显色反应的选择1.1.选择显色反应时，应考虑的因素选择显色反应时，应考虑的因素 灵敏度高、选择性高、生成物稳定、灵敏度高、选择性高、生成物稳定、显色剂在测定波显色剂在测定波长处无明显吸收长处无明显吸收，两种有色物最大吸收波长之差：，两种有色物最大吸收波长之差：“对比度对比度”，要求，要求 60nm。2.2.配位显色反应配位显色反应当金属离子与有机显色剂形成配合物时，通常会发生当金属离子与有机显色剂形成配合物时，通常会发生电荷转移跃迁，产生很强的紫外电荷转移跃迁，产生很强的紫外可见吸收光谱。可见吸收光谱。3.3.氧化还原显色反应氧化还原显色反应 某些元素的氧化态，如某些元素的氧化态，如Mn（）、）、Cr（）在紫外或）在紫外或可见光区能强烈吸收，可利用氧化还原反应对待测离子进行可见光区能强烈吸收，可利用氧化还原反应对待测离子进行显色后测定。显色后测定。例例10：钢中微量锰的测定，：钢中微量锰的测定，Mn2不能直接进行光度测不能直接进行光度测定定2Mn25S2O82-8H2O=2MnO4+10SO42-16H+将将Mn2氧化成紫红色的氧化成紫红色的MnO4后后，在在525nm处进行测处进行测定。定。4.4.显色剂显色剂 无机显色剂：无机显色剂：硫氰酸盐、钼酸铵、过氧化氢等几种。硫氰酸盐、钼酸铵、过氧化氢等几种。 有机显色剂：有机显色剂：种类繁多种类繁多 偶氮类显色剂偶氮类显色剂：本身是有色物质，生成配合物后，颜本身是有色物质，生成配合物后，颜色发生明显变化；具有性质稳定、显色反应灵敏度高、选色发生明显变化；具有性质稳定、显色反应灵敏度高、选择性好、对比度大等优点，应用最广泛。偶氮胂择性好、对比度大等优点，应用最广泛。偶氮胂、PARPAR等等。 三苯甲烷类三苯甲烷类：铬天青铬天青S S、二甲酚橙等、二甲酚橙等1.被测物质与所生成的有色物质之间，必须有确定的定量关系，2.反应物必须有足够的稳定性，3.有色生成物与有色试剂之间必须有明显的颜色差异，4.反应物要有足够的摩尔吸收系数，5.显色反应必须有较好的选择性。二、显色反应的要求二、显色反应的要求三、显色反应条件的选择三、显色反应条件的选择1.1.显色剂用量显色剂用量 吸光度吸光度A A与显色剂用量与显色剂用量C CR R的关系会出现如图所示的几种的关系会出现如图所示的几种情况。选择曲线变化平坦处。情况。选择曲线变化平坦处。2.2.反应体系的酸度反应体系的酸度 在相同实验条件下，分别测定不同在相同实验条件下，分别测定不同pHpH值条件值条件下显色溶液的吸光度。选择曲线中吸光度较大且下显色溶液的吸光度。选择曲线中吸光度较大且恒定的平坦区所对应的恒定的平坦区所对应的pHpH范围。范围。3.3.显色时间与温度显色时间与温度 实验确定实验确定 4.4.溶剂溶剂5.5.酸碱度酸碱度四、共存离子干扰的消除四、共存离子干扰的消除1.1.加入掩蔽剂加入掩蔽剂 选择掩蔽剂的原则是：掩蔽剂不与待测组分反应；掩选择掩蔽剂的原则是：掩蔽剂不与待测组分反应；掩蔽剂本身及掩蔽剂与干扰组分的反应产物不干扰待测组分蔽剂本身及掩蔽剂与干扰组分的反应产物不干扰待测组分的测定。的测定。 例：测定例：测定TiTi4 4，可加入，可加入H H3 3POPO4 4掩蔽剂使掩蔽剂使FeFe3+3+( (黄色黄色) )成为成为Fe(POFe(PO) )2 23-3-( (无色无色) )，消除，消除FeFe3+3+的干扰；又如用铬天菁的干扰；又如用铬天菁S S光光度法测定度法测定AlAl3+3+时，加入抗坏血酸作掩蔽剂将时，加入抗坏血酸作掩蔽剂将FeFe3+3+还原为还原为FeFe2+2+，消除，消除FeFe3+3+的干扰。的干扰。2.2.选择适当的显色反应条件选择适当的显色反应条件3.3.分离干扰离子分离干扰离子五、测定条件的选择五、测定条件的选择1.1.选择适当的入射波长选择适当的入射波长 一般应该选择一般应该选择maxmax为入射光波长。为入射光波长。 如果如果maxmax处有共存组分干扰时，则应考虑选择灵敏度处有共存组分干扰时，则应考虑选择灵敏度稍低但能避免干扰的入射光波长。稍低但能避免干扰的入射光波长。 2.2.选择合适的参比溶液选择合适的参比溶液 为什么需要使用参比溶液？为什么需要使用参比溶液？ 测得的的吸光度真正反映待测溶液吸光强度。测得的的吸光度真正反映待测溶液吸光强度。 参比溶液的选择一般遵循以下原则：参比溶液的选择一般遵循以下原则： 若仅待测组分与显色剂反应产物在测定波长处有吸收，若仅待测组分与显色剂反应产物在测定波长处有吸收，其它所加试剂均无吸收，用纯溶剂（水其它所加试剂均无吸收，用纯溶剂（水) )作参比溶液；作参比溶液； 若显色剂或其它所加试剂在测定波长处略有吸收，而试若显色剂或其它所加试剂在测定波长处略有吸收，而试液本身无吸收，用液本身无吸收，用“试剂空白试剂空白”( (不加试样溶液不加试样溶液) )作参比溶液；作参比溶液；参比溶液的选择一般遵循以下原则：参比溶液的选择一般遵循以下原则： 若待测试液在测定波长处有吸收，而显色剂等无吸收，若待测试液在测定波长处有吸收，而显色剂等无吸收，则可用则可用“试样空白试样空白”( (不加显色剂不加显色剂) )作参比溶液；作参比溶液； 若若显显色色剂剂、试试液液中中其其它它组组分分在在测测量量波波长长处处有有吸吸收收，则则可可在在试试液液中中加加入入适适当当掩掩蔽蔽剂剂将将待待测测组组分分掩掩蔽蔽后后再再加加显显色色剂剂，作为参比溶液。作为参比溶液。3.3.控制适宜的吸光度（读数范围）控制适宜的吸光度（读数范围） 不同的透光度读数，产生的误差大小不同：不同的透光度读数，产生的误差大小不同：lgT=bc微分：微分：dlgT0.434dlnT =-0.434T -1dT =bdc两式相除得：两式相除得：dc/c =（0.434/TlgT）dT以有限值表示可得：以有限值表示可得：c/c =（0.434/TlgT）T 浓度测量值的相对误差（浓度测量值的相对误差（c/c）不仅与仪器的透光度误）不仅与仪器的透光度误差差T 有关，而且与其透光度读数有关，而且与其透光度读数T 的值也有关。的值也有关。是否存在最佳读数范围？何值时误差最小？是否存在最佳读数范围？何值时误差最小？ 最佳读数范围与最佳值最佳读数范围与最佳值 设：设：T =1%，则可绘出溶液浓度，则可绘出溶液浓度相对误差相对误差c/c与其透光度与其透光度T 的关系曲线。的关系曲线。如图所示：如图所示：当：当：T =1%，T 在在20%65%之之间时，浓度相对误差较小，间时，浓度相对误差较小，最佳读数最佳读数范围。范围。可求出浓度相对误差最小时的透光度可求出浓度相对误差最小时的透光度Tmin为：为： Tmin36.8%,Amin0.434 用仪器测定时应尽量使溶液透光度值在用仪器测定时应尽量使溶液透光度值在T %=2065%(吸光度吸光度A =0.700.20)。六、提高光度测定灵敏度和选择性的途径六、提高光度测定灵敏度和选择性的途径1.1.合成新的高灵敏度有机显色剂合成新的高灵敏度有机显色剂2.2.采用分离富集和测定相结合采用分离富集和测定相结合3.采用三元采用三元( (多元多元) )配合物显色体系配合物显色体系 由一个中心金属离子与两种由一个中心金属离子与两种( (或两种以上或两种以上) )不同配位体形成的配合不同配位体形成的配合物，称为三元物，称为三元( (多元多元) )配合物。配合物。 多元配合物显色反应具有很高的灵敏度，一方面是因为多元配合物多元配合物显色反应具有很高的灵敏度，一方面是因为多元配合物比其相应的二元配合物分子截面积更大；另一方面是因为第二或第三配比其相应的二元配合物分子截面积更大；另一方面是因为第二或第三配位体的引入，可能产生配位体之间、配位体与中心金属离子间的协同作位体的引入，可能产生配位体之间、配位体与中心金属离子间的协同作用，使共轭用，使共轭电子的流动性和电子跃迁几率增大。电子的流动性和电子跃迁几率增大。 三元配合物主要类型有：三元离子缔合物、三元混配配合物、三三元配合物主要类型有：三元离子缔合物、三元混配配合物、三元胶束元胶束( (增溶增溶) )配合物。配合物。紫外吸收光谱在分子结构测定中的应用紫外吸收光谱在分子结构测定中的应用官能团及大致结构的探求官能团及大致结构的探求结构式的确定结构式的确定构型和构象的测定构型和构象的测定有机药物的鉴定有机药物的鉴定官能团及大致结构的探求（一）官能团及大致结构的探求（一）一个化合物如果在215800nm波长区没有吸收带，它就不可能含共轭链烯、-不饱和羰基、苯环等发色基团，很可能是脂肪族或环状烃、胺类、醇类等化合物。在210250nm波长区有强吸收，则很可能有两个双键的共轭体系，如共轭二烯类和、-不饱和羰基化合物。共轭二烯的K带几乎不受溶剂效应的影响。 、-不饱和羰基化合物的K带随溶剂极性的增加而红移。官能团及大致结构的探求（二）官能团及大致结构的探求（二）3、如果在260nm,300nm或330nm附近有强吸收带，则相对于化合物有三个、四个、五个共轭双键。一般有色化合物共轭双键应在五个以上。4、如果在230270nm波长区有中等强度吸收带，则很可能有苯环。苯环若被取代，当取代基与苯环形成共轭体系时吸收峰红移，吸收强度可显著增加。官能团及大致结构的探求（三）官能团及大致结构的探求（三）5、200250nm 波长区无主要吸收，但在275340nm波长范围内有低强度的吸收带，通常表明是n跃迁，可能的基团是未共轭的不饱和杂原子。 典型例题典型例题1丙酮在乙烷中的近紫外吸收在279nm有吸收峰, 其为14.8, 此吸收峰是由( A )能级跃迁产生的。A n*B. n* C. *D. *说明：掌握说明：掌握4 4种主要跃迁的特点种主要跃迁的特点典型例题典型例题2某化合物在正己烷中测吸收波长max为305，在乙醇中max为307，则该吸收的跃迁类型为（ A ）。A、n* B、n* C、* D、*说明：掌握溶剂对吸收带的影响说明：掌握溶剂对吸收带的影响典型例题典型例题3应用紫外光谱法进行定量分析时，在测量范围内与待测组分比百分吸收系数无关的因素是 （ B ）。A、波长 B、浓度 C、入射光纯度 D、组分结构和性质说明：掌握影响吸收系数的因素说明：掌握影响吸收系数的因素典型例题典型例题4下面几个化合物中*跃迁所需能量最大者是（ A ）。A. 1,4-戊二烯 B. 1,3-丁二烯C. 1,3-环已二烯 D. 2,3-二甲基-1,3-丁二烯说明：导致说明：导致*红移的因素是共轭红移的因素是共轭典型例题典型例题5苯甲醛的近紫外光谱中有（ D ）吸收带。A. KB. R C. BD. A+B+C 典型例题典型例题6双光束可见紫外分光光度计可减少误差，主要是（ B ）A 减少比色皿间误差 B. 减少光源误差C. 减少光电管间的误差 D. 减少狭缝误差说明：了解紫外分光光度计的特点说明：了解紫外分光光度计的特点典型例题典型例题7下列化合物中，在紫外光区有两个吸收带的是（ D ）A. 乙烯 B. 1，4戊二烯 C. 1,3丁二烯 D. 丙烯醛典型例题典型例题8下列化合物中，（下列化合物中，（ B ）的最大吸收波长）的最大吸收波长最长。最长。A B. C D. 典型例题典型例题9取咖啡酸，在165干燥至恒重，精密称取10.00 mg，加少量醇溶解，转移至200mL容量瓶中，加水至刻度线，取此溶液5.00mL，置于50mL容量瓶中，加6mol/L的HCL 4mL，加水至刻度线。取此溶液于1 cm比色池中，在323nm处测定吸光度为0.463，已知该波长处的 ，求咖啡酸百分含量。典型例题典型例题10解：典型例题典型例题11精密称取0.0500g某药品，置250ml容量瓶中，加入0.02mol/LHCl溶解，稀释至刻度。准确吸取2ml，稀释至100ml。以0.02mol/LHCl为空白，在263nm处用1cm吸收池测得透光率为41.7%，其为12000，被测物质的摩尔质量为100.0。试计算263nm处的百分吸收系数和样品的百分含量。 典型例题典型例题12在一定波长下，某溶液用1 cm 的吸收池测定其透光率T，若改用2 cm的吸收池测定时，其透光率为（ D）A、2TB、Tlg2C 、D、T2典型例题典型例题13有一符合Lambert-Beer定律的溶液，吸收池厚度不变，当浓度为C时，透光率为T，当溶液为C/2时，则透光率为（ C）A、B、T/2C 、D、T2典型例题典型例题14浓度为5.0010-4mol/L的某酸HA溶液，于440nm，1cm比色皿中测量得到的吸收度数据pH=1时为0.401，pH=13时为0.067。问当pH=7时该溶液的吸收度是多少？该酸HA的解离常数为5.0010-7。典型例题典型例题15含有含有Fe3+的某药物溶解后，加入显色剂的某药物溶解后，加入显色剂KSCN生成红色络生成红色络合物，用合物，用1.00cm吸收池在吸收池在420 cm波长处测定，已知该化波长处测定，已知该化合物在上述条件下合物在上述条件下=1.80=1.80104，如该药物含铁量约为，如该药物含铁量约为0.5%，现欲配制，现欲配制50ml试液，测定时再稀释试液，测定时再稀释10倍，为使测倍，为使测定结果相对误差最小，应称量药物多少克？定结果相对误差最小，应称量药物多少克？典型例题典型例题16请说明等吸收双波长法中测定波长和参比波长如何选择？说明紫外可见分光光度计、荧光分光光度计、红外分光光度计的异同。紫外吸收光谱中主要的跃迁类型有哪几种？各有什么特点？典型例题典型例题17某有色溶液以试剂空白作为参比，用某有色溶液以试剂空白作为参比，用1 cm吸收池于最大波吸收池于最大波长处测得长处测得A=1.120，已知有色溶液的，已知有色溶液的=2.50104。为使测量。为使测量误差最小，则误差最小，则参比溶液参比溶液的浓度为多少？的浓度为多少？本章小结本章小结1.掌握有机化合物的四种主要跃迁方式及能量大小顺序： n n n 2.掌握四个吸收带的特征：R带、K带、B带和E1、E2带；熟悉影响吸收带的主要因素。3.掌握Lamber-Beer定律的表达式及其影响因素，掌握吸收系数的物理意义及计算要点。4.掌握紫外-可见分光光度计的组成部件5.掌握单组分定量分析方法；熟悉定性鉴别方法，纯度检查方法；了解多组分定量分析方法。6.了解光电比色法的要求与显色条件。公式小结公式小结作业作业P80 思考题1-10P80 习题1、2、3、5、6完成习题册相关内容