检验科检验科 泰淑红泰淑红2015.102015.102015.102015.10主要内容1.正确标本采集重要性2.血培养的标本采集3.痰培养的标本采集4.尿培养的标本采集5.大便培养的标本采集6.生殖道标本的采集7.化脓和创伤标本的采集8.穿刺液标本的采集9.眼、耳、鼻、咽拭子标本的采集10.组织标本的采集11.其他成功治疗感染症的因素 成功分离病原菌并成功分离病原菌并检测 标本收集、运送、保存本收集、运送、保存 标本处理方法 检验医师专业知识 医医师判判读病原菌培养病原菌培养结果果 选择适当治适当治疗方法方法培养假阳性的危害增加患者抗生素用量，破坏微生破坏微生态环境境延延长住院天数住院天数延延误病情病情诊断增加经济负担担增加医医疗纠纷的风险微生物微生物样本采本采样基本原基本原则在抗菌药物使用前采集标本采样时严格执行无菌操作采样后立即送检标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂血培养检测采血指征临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染血液感染的患者 1. 发热（38）或低温（36）2. 寒战3. 白细胞增多（10109/L、“核左移”、未成熟白细胞增多） 4. 粒细胞减少（成熟的多核白细胞1109/L）5. 血小板减少6皮肤粘膜出血7昏迷，休克8多器官衰竭 9. CRP升高如何正确进行血培养标本的采集？最佳采血时机最佳采血时机标准的采血方案标准的采血方案合适的采血量合适的采血量标准消毒方法标准消毒方法 正确的标本采集，能很大程度上提高血培养检测质量和临床价值，并减少样本污染和“假阳性”结果的发生率。血培养最佳的采血时机尽可能在患者寒战开始时、发热高峰前30-60分钟内采血在患者接受抗生素治疗前采血如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养细菌量 体温 时间上升幅度标准的采血方案 不同部位抽取2套血培养 成人一套：1需氧瓶+1厌氧瓶 儿童：1需氧瓶 注：一个静脉穿刺点只能采集1套血培养，采集第2套血培养应该选择第2个静脉穿刺点;一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单个血培养血培养组合的累积敏感性急性高烧：10分钟内，同部位抽取2套非急性高烧疾病： 24小时内，由同的部位抽取2-3套（间隔小于3小时）急性心内膜炎： 1-2小时内，由三个同的部位抽取3套亚急性心内膜炎：24小时内采集3套，每套间隔1小时以上，培养24小时阴性者，追加2-3套采血量成年患者：每瓶8-10ml婴幼儿患者：每瓶1-3ml病原菌检出率与采血量成正比例增长。每增加1ml的血液，病原菌的检出率增加3.2%儿童患者因为血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于成人血培养检测消毒程序l皮肤消毒程序皮肤消毒程序1.75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上2.1%-2%碘酊作用30秒或10%碘伏作用60秒，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达3cm以上3.75%酒精脱碘，待酒精挥发干燥后采血l培养瓶瓶塞消毒培养瓶瓶塞消毒 用75%酒精消毒培养瓶塞，充分待干待干60秒注意：塑料帽下面的橡皮塞并非是无菌的，必须进 行消毒l要要 求求严格无菌操作，不允许在皮肤消毒后用手按压静脉，除非带有无菌手套不推荐采血和接种血培养瓶更换注射器针头，采用真空采血装置能降低污染率l不建议采集不建议采集1.动脉血2.静脉留置导管，因其常伴有高污染率。如果必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本，以帮助阳性结果的判读血培养标本的运送采集后的血培养瓶应在1小时之内送检血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏、冷冻痰标本现状l国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象l多种微生物存在于呼吸道：细菌、真菌、病毒、支原体、衣原体与立克次体、原虫、寄生虫l唾液中口咽部定植菌的浓度可达108 109/ml采集方法自然咳痰法 以晨痰为佳。用清水反复漱口，用力咳出呼吸道深部的痰（非唾液），吐入无菌容器中，尽快送检小儿取痰法小儿取痰法用压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可获得肺部和气管分泌物，粘在棉拭子上送检。对难于自主吐痰者（婴幼儿）可用无菌吸痰管抽取气管深部分泌物支气管支气管镜采集法采集法经支气管镜直接吸引、支气管肺泡灌洗、防污染样本毛刷注意事注意事项在抗生素应用前采集痰标本取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口深咳，采集标本过程应予以指导痰标本及时送检者（室温耽搁久，定植口咽部的非致病菌过度生长，4冰箱会导致肺炎链球菌、流感嗜血杆菌检出率降低）对于细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续23天，不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状改变怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检标本采集方法清清洁中段尿中段尿 先用肥皂水清洗会阴部，再用清水冲洗尿道口周围；将前段尿排去，留取中段尿10ml左右于无菌容器内，立即加盖送检耻骨上膀胱穿刺耻骨上膀胱穿刺 使用无菌注射器直接从耻骨上经皮肤消毒穿入膀胱吸取尿液留置留置导尿管收集尿液尿管收集尿液 消毒导尿管外部及尿管口，采取无菌操作方法，用注射器通过导尿管吸取尿液。注意防止混入消毒剂。长期留置导尿管者，应在更换新导尿管后留取尿标本。注：不能从尿液收集袋中采集尿液注：不能从尿液收集袋中采集尿液采集时间和标本运送 抗菌药物应用前不得加防腐剂和消毒剂采集清晨第1次尿液送检，确保尿液在膀胱内停留4h以上，嘱患者睡前少饮水以免尿液稀释标本采集后应立即送检、室温不得超过1h，冷藏必须在4h内送检（不用于淋病检测）采集时间腹泻患者应在急性期，并尽可能在使用抗生素之前采集新鲜粪便采集标本后应立即送检采集方法自然排便采集法自然排便采集法 挑取有脓血或黏液部位的粪便2-3g，液状粪便取絮状物于无菌容器内送检直直肠拭子采集法拭子采集法 将拭子前端用甘油湿润。然后插入肛门约45cm（幼儿约23cm）处，轻轻在直肠内旋转，擦取直肠表面粘液后取出，盛入无菌试管中送检采集方法尿道分泌物 清洗尿道口，用灭菌纱布或棉球擦拭干净，用泌尿生殖道拭子插入尿道24cm，旋转拭子采集 阴道分泌物 擦除过多的分泌物和排出液，用无菌棉拭子采取阴道口内4cm内侧壁或后穹窿处分泌物宫颈分泌物 先清除阴道和宫颈局部分泌物，然后轻压宫颈使宫颈内分泌物流出，用女性拭子插入宫颈管1-2cm转动并停留1030s采取分泌物，置入灭菌试管内送检注意事项生殖器是开放性器官，标本采集过程中应严格遵 循无菌操作规程以减少杂菌污染疑有宫腔感染，如遇产妇需行剖宫产，待胎儿娩出后取宫腔分泌物，并同时取婴儿耳拭子一同送检沙眼衣原体和病毒均在宿主细胞内繁殖，取材时拭子应在病变部位（移行上皮处稍内）停留十几秒钟，并采集尽可能多的上皮细胞l淋病奈瑟菌检查时，因为淋球菌好发于柱状上皮细胞而不是复层鳞状上皮细胞。故拭子需插入尿道或子宫颈3cm深转动并停留10-30s取样送检l淋病奈瑟菌要尽快送检，立即接种，标本离体时间越短越好标本采集开放性感染和已开放性感染和已溃破的化破的化脓灶灶 标本采集前先用灭菌生理盐水拭去表面渗出物，从脓肿底部或脓肿壁取样，效果最好。封封闭性性脓肿 局部消毒后用注射器抽吸脓肿壁，将所有物质置于无菌试管内送检，疑为厌氧菌感染时立即送检（针头插一橡皮塞隔绝空气）。大面大面积创伤感染感染可取感染组织块或沾有脓汁的内层敷料送检注意事项细菌对干燥敏感或只能采集少量标本时，用棉拭子采集标本后立即放入液体培养基内，或采标本前先将棉拭子沾少许肉汤以保持标本湿度对于不能立即送检的标本，应放4保存（淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌除外）采样前病灶局部应避免用抗菌药物或消毒剂穿刺液主要包括：脑脊液、胆汁、胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液在正常人体中，上述体液均是无菌的。采集时尤其应注意无菌操作脑脊液采集采集时间怀疑为脑膜炎时，应立即采集脑脊液采集方法采集方法用腰穿方法采集脑脊液35ml，分装到3个无菌试管中，每个试管12ml。第一管用于细菌培养运送和保存运送和保存标本应立即送检（30 min），并注意保温、防干燥。切不可置冰箱保存 其它穿刺液采集采集时间 怀疑感染存在，应尽早采集标本采集方法采集方法无菌操作穿刺抽取标本或外科手术采集标本。标本采集量应1ml。胸腔积液、腹水可抽10ml； 心包液、关节液等可抽取25ml标本采集后注入无菌小瓶或无菌试管中送检为防止穿刺液的凝固，应在无菌试管中预先加入灭菌肝素，再注入穿刺液标本采集眼眼 结膜：分别用（无菌盐水预湿）拭子绕每一个结膜取；采集完即接种培养基；将拭子涂片在两个玻片上染色角膜刮擦：滴两滴局部麻醉液；用无菌铲刮擦脓肿或溃疡，将刮擦物直接接种于培养基；将剩余材料涂于两个干净的玻片上染色液体或抽吸物：常为术中标本，需备眼，用针头抽吸液体耳耳 内耳：对复杂的、反复的或慢性顽固的中耳炎做鼓膜穿刺术，接触耳鼓室先用肥皂水清洗耳道再用注射器收集液体；对破裂的鼓室，借助耳科诊视器，用软杆拭子收集液体外耳：用湿拭子将耳道的任何碎屑或痂皮拭去；在外耳道用力旋转拭子取样鼻或鼻咽分泌物鼻或鼻咽分泌物 直接用拭子涂抹病灶部位，切勿接触周围粘膜或皮肤，标本立即送检咽分泌物咽分泌物 先用清水漱口，用压舌板将舌向下向外压，将咽拭子在咽后壁或悬雍垂后侧涂抹数次，插入运送培养基。切勿接触口腔和舌粘膜标本运送和保存无菌拭子采集病变明显处的脓液和分泌物，置于运送培养基或培养拭子运送，以防干燥立即送检，如不能及时送检，应置于冰箱保存，超过48h不可使用10.其它标本采集结核抗体（空腹，红管，2ml）九项呼吸道病原抗体检测(红管，2ml)微生物标本的保存储存环境储存环境 标本来源标本来源44冰箱冰箱 尿液、痰液、粪便尿液、痰液、粪便 3535温箱温箱 脑脊液细菌培养标本脑脊液细菌培养标本室温室温 眼、耳、鼻、咽、血管导管、眼、耳、鼻、咽、血管导管、 组织、体液、生殖道、组织、体液、生殖道、 厌氧菌培养标本、厌氧菌培养标本、 血液培养瓶血液培养瓶 指甲，头发，皮肤刮取物霉菌培养标本指甲，头发，皮肤刮取物霉菌培养标本