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抗原抗体反应第一节第一节 抗原抗体反应原理抗原抗体反应原理第二节第二节 抗原抗体反应特点抗原抗体反应特点第三节第三节 抗原抗体反应影响因素抗原抗体反应影响因素第四节第四节 抗原抗体反应类型抗原抗体反应类型一、基本原理一、基本原理 第一节第一节 抗原抗体反应原理抗原抗体反应原理 AgAg决定簇和决定簇和AbAb分子超变区相互分子超变区相互 作用作用( (相互吻合相互吻合, ,具有互补性具有互补性) )分子表面特异的可逆的弱结合力分子表面特异的可逆的弱结合力在极短距离内才能发生在极短距离内才能发生基本条件:基本条件:结合力结合力亲和性亲和性亲水胶体转亲水胶体转化为疏水胶化为疏水胶体体抗原和抗体的结合是互补性的特异性结合抗原和抗体的结合是互补性的特异性结合不形成牢固的共价键,通过非共价键结合不形成牢固的共价键,通过非共价键结合这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力 一、抗原抗体结合力一、抗原抗体结合力 * *1 1静电引力静电引力 * *2 2范德华引力范德华引力 * *3 3氢键结合力氢键结合力 * *4 4疏水作用力疏水作用力抗原抗体结合力示意图抗原抗体结合力示意图抗原抗原抗体抗体氢键结合力氢键结合力 O ON NO ON NH HH H静电引力静电引力- - -+ + +范得华力范得华力- -+ + +- -+ +- - -+ +疏水作用力疏水作用力排斥的水排斥的水 二、抗原抗体亲和性二、抗原抗体亲和性(affinityaffinity)* * 亲和性亲和性 是抗体分子上一个抗原结合点与对是抗体分子上一个抗原结合点与对 应的抗原决定簇之间的相适应性而存在着的应的抗原决定簇之间的相适应性而存在着的 引力,这是抗原与抗体之间固有的结合力。引力,这是抗原与抗体之间固有的结合力。* * 亲和力亲和力(avidity)avidity) 是指反应系统中复杂抗是指反应系统中复杂抗 原与相应抗体之间的结合能力。原与相应抗体之间的结合能力。 亲和力与亲和性、抗体的结合价和抗原的有亲和力与亲和性、抗体的结合价和抗原的有 效决定簇数目相关。效决定簇数目相关。 亲和力越大,抗原抗体结合越牢固。亲和力越大,抗原抗体结合越牢固。 亲和常数亲和常数亲和常数亲和常数K=K= K K值大的抗体与抗原牢固结合,不易值大的抗体与抗原牢固结合,不易 解离,说明该抗体有高亲和力。解离,说明该抗体有高亲和力。抗体与抗原结合是可逆的反应,在平衡时其抗体与抗原结合是可逆的反应,在平衡时其 血清学反应条件下,抗原抗体均带负电荷,血清学反应条件下,抗原抗体均带负电荷, 使极化的水分子在其周围形成水化层,成为使极化的水分子在其周围形成水化层,成为 亲水胶体。亲水胶体。 三、亲水胶体转化为疏水胶体三、亲水胶体转化为疏水胶体 当抗原与抗体结合后,表面电荷减少,水化当抗原与抗体结合后,表面电荷减少,水化 层变薄;而且由于抗原抗体复合物形成后,层变薄;而且由于抗原抗体复合物形成后, 与水接触的表面积减少,由亲水胶体转化为与水接触的表面积减少,由亲水胶体转化为 疏水胶体。疏水胶体。 在电解质作用下,各疏水胶体之间靠拢,形在电解质作用下,各疏水胶体之间靠拢,形 成可见的抗原抗体复合物。成可见的抗原抗体复合物。 亲水胶体转化为疏水胶体示意图亲水胶体转化为疏水胶体示意图亲水胶体亲水胶体疏水胶体疏水胶体转化转化NaClNaCl可见反应可见反应 第二节第二节 抗原抗体反应的特点抗原抗体反应的特点* *1.1.特异性特异性 * *2.2.比例性比例性 * *3.3.可逆可逆性性 一、一、 特异性特异性(specificityspecificity)* *概念:概念:抗原分子,只能与由它刺激所产生的抗抗原分子,只能与由它刺激所产生的抗 体结合而起反应的专一性能。体结合而起反应的专一性能。* *决定因素:决定因素:由抗原决定簇和抗体分子超变区之由抗原决定簇和抗体分子超变区之 间空间结构的互补性决定的。间空间结构的互补性决定的。 抗体分子抗体分子N N端可变区形成端可变区形成3nm1.5nm0.7nm3nm1.5nm0.7nm的槽沟,的槽沟,只有与其空间结构互补的抗原决定簇才能如楔状嵌入。只有与其空间结构互补的抗原决定簇才能如楔状嵌入。* *交叉反应交叉反应(cross reaction) (cross reaction) 两种不同的抗原两种不同的抗原 物质具有部分相同或类似结构的抗原决定簇,物质具有部分相同或类似结构的抗原决定簇, 则可与彼此相应的抗体反应。则可与彼此相应的抗体反应。 特异性示意图特异性示意图 * *最适比最适比(optimal ratio)(optimal ratio)或等价点或等价点( (equivzlenceequivzlence point) point) 最迅速出现沉淀时的抗原抗体的浓度最迅速出现沉淀时的抗原抗体的浓度 比或量比。比或量比。 二、比例二、比例性性(proportionalityproportionality) 等价带等价带( (equivalencezoneequivalencezone) )抗原与抗体分子比抗原与抗体分子比 例合适的范围。例合适的范围。 带现象带现象:AgAg与与AbAb比例不适而不出现可见反应。比例不适而不出现可见反应。* * 前带前带( (prozoneprozone ) ) 抗体过量时。抗体过量时。* * 后带后带( (postzonepostzone) ) 抗原过量时。抗原过量时。比例性示意图比例性示意图抗体过量抗体过量比例合适比例合适抗原的量抗原的量抗原过量抗原过量抗抗体体沉沉淀淀的的量量前带前带等价带等价带后带后带 三、可逆性三、可逆性(reversibility)reversibility)概念:概念:是指抗原与抗体结合成复合物后,在是指抗原与抗体结合成复合物后,在 一定条件下可解离为游离抗原与抗体的特性。一定条件下可解离为游离抗原与抗体的特性。 解离后抗原抗体仍保持原有特性。解离后抗原抗体仍保持原有特性。 一定条件:低一定条件:低pHpH、高浓度盐等。高浓度盐等。 常用于解离抗原抗体复合物的物质有:常用于解离抗原抗体复合物的物质有: 3mol/L3mol/L硫氰化钾、硫氰化钾、pH2.4 0.1mol/LpH2.4 0.1mol/L甘氨酸、甘氨酸、 7mol/L7mol/L尿素等。尿素等。抗体抗体混混有有S SP PA Ag g抗体抗体- -SPAgSPAg抗体抗体- -SPAgSPAg分分离离剂剂一一、抗抗原原抗抗体体结结合合二二、分分离离抗抗体体 可逆性示意图可逆性示意图抗体抗体 第三节第三节 抗原抗体反应影响因素抗原抗体反应影响因素一、反应一、反应物自身因素物自身因素 * *抗原:抗原:1.1.理化特性理化特性 2.Ag2.Ag决定簇数量决定簇数量 3.Ag3.Ag决定簇种类决定簇种类 * *抗体:抗体:1.1.来源来源 2.2.特异性与亲和力特异性与亲和力 3.3.浓度浓度二、环境条件:二、环境条件:* *电解质:电解质:0.85%NaCl0.85%NaCl* *酸碱度:酸碱度:pH6pH69 9* *温度:温度:15154040* *酸凝集:酸凝集:当当pHpH为为3 3左右时,接近细菌左右时,接近细菌AgAg的等电点,可出的等电点,可出现非特异性凝集。现非特异性凝集。
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