*第三章 药物(yow)(yow)的杂质检查& 3.1 概述概述(i sh) &3.2 一般杂质的检查一般杂质的检查(jinch)方法方法&3.3 特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法第1页/共79页第一页，共80页。*概 述3.1 概述概述(i sh) 检检查查F有效性：以动物实验为基础，最终以临床疗效来评价；有效性：以动物实验为基础，最终以临床疗效来评价；F安全性：热原检查、毒性试验、刺激性试验、过敏试验、升压或降压物质检查等。安全性：热原检查、毒性试验、刺激性试验、过敏试验、升压或降压物质检查等。F纯度要求纯度要求(yoqi)：对各类杂质的检查；：对各类杂质的检查；F制剂通则：含量均匀性，溶出度、释放度、装量差异、生物利用度的均一性；制剂通则：含量均匀性，溶出度、释放度、装量差异、生物利用度的均一性；第2页/共79页第二页，共80页。*一、药物一、药物(yow)的纯度与要求的纯度与要求药物药物(yow)的纯度的纯度 指药物指药物(yow)纯净程度，反映了药物纯净程度，反映了药物(yow)质量的优劣。质量的优劣。概 述含量测定杂质检查理化常数外观性状结构药物纯度F药物纯度从用药安全药物纯度从用药安全(nqun)、有效和对药物稳定、有效和对药物稳定性等方面考虑；性等方面考虑；F考虑杂质的生理作用；考虑杂质的生理作用； 药物合格不合格化学试剂不化学试剂不能代替药品！能代替药品！第3页/共79页第三页，共80页。*药物的杂质药物的杂质 指药物中存在的无治疗作用指药物中存在的无治疗作用(zuyng)或影或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害响药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。的物质。 药物的纯度(chnd)与要求例：例：乙酰水杨酸乙酰水杨酸 水杨酸水杨酸 第4页/共79页第四页，共80页。*二、杂质二、杂质(zzh)的来源的来源在贮藏在贮藏(zhcng)(zhcng)过过程中引入程中引入合成过程中，原料(yunlio)不纯；有一部分原料(yunlio)没有反应完全；反应中间产物和副产物在精制时没有除净；在制成制剂的过程中，产生新的杂质；制剂生产过程中所用溶剂、试剂的残留；与生产器皿接触引入杂质； 受外界条件的影响，发生水解、氧化、分解、聚合、异构化、发霉等变化。 由由生产过程生产过程中引入中引入概 述第5页/共79页第五页，共80页。*例：例：乙酰水杨酸乙酰水杨酸 水杨酸水杨酸 二羟乙基过氧化物二羟乙基过氧化物(u yn hu w)(u yn hu w)（有毒）（有毒） 麻醉麻醉(mzu)(mzu)乙乙醚醚例：例：例：例：差向四环素（毒性差向四环素（毒性(d xn)(d xn)高、活性低）高、活性低） 四环素四环素杂质的来源与种类第6页/共79页第六页，共80页。*按按理化性质理化性质分类分类无机杂质、有机杂质、残留溶剂无机杂质、有机杂质、残留溶剂按按毒性毒性分类分类普通杂质（信号杂质）普通杂质（信号杂质）毒性杂质（有害杂质）毒性杂质（有害杂质）按按来源来源分类分类一般杂质一般杂质、特殊杂质特殊杂质一般杂质一般杂质 是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程和贮藏过程(gu(gu chch ng)ng)中容易引入的杂质。中容易引入的杂质。特殊杂质特殊杂质 是指在特定药物的生产和贮藏过程是指在特定药物的生产和贮藏过程(gu(gu chch ng)ng)中中引入的杂质。引入的杂质。 杂质(zzh)的来源与种类三、杂质(zzh)的种类第7页/共79页第七页，共80页。*四、杂质四、杂质(zzh)的限量的限量杂质限量杂质限量(xinling) 是指药物中所含杂质的最大允许量。通常用百分之是指药物中所含杂质的最大允许量。通常用百分之几或百万分之几（几或百万分之几（ppm）来表示。）来表示。杂质杂质(zzh)(zzh)的量的量 杂质杂质(zzh)(zzh)限量限量合格合格不合格不合格杂质的量杂质的量概 述第8页/共79页第八页，共80页。*杂质限量检查杂质限量检查(jinch)(jinch)方法分为：标准对照法、灵敏度法、比较法方法分为：标准对照法、灵敏度法、比较法 标标准准对对照照法法杂质杂质(zzh)对照对照品或品或纯品纯品溶液溶液供供试试品品溶溶液液(rngy)在相同条件下处理在相同条件下处理 平行操作平行操作 比较结果比较结果 颜色颜色比色比色浑浊浑浊比浊比浊色斑色斑比较色斑比较色斑特点：特点：F不需知道杂质的准确含量；不需知道杂质的准确含量；F必须有对照品或是纯品。必须有对照品或是纯品。 杂质的限量第9页/共79页第九页，共80页。*杂质限量检查杂质限量检查(jinch)(jinch)方法分为：标准对照法、灵敏度法、比较法方法分为：标准对照法、灵敏度法、比较法 标标准准对对照照法法例1：中国药典规定检查砷盐时，应取标准砷溶液（每1ml相当于1ug的As）制备的标准砷斑，今依法检查溴化钠中的砷盐，规定含砷量不得(bu de)超过0.0004% ，问应取供试品多少克？ 杂质(zzh)的限量第10页/共79页第十页，共80页。*杂质限量检查杂质限量检查(jinch)(jinch)方法分为：标准对照法、灵敏度法、比较法方法分为：标准对照法、灵敏度法、比较法 标标准准对对照照法法例2：检查对乙酰氨基酚中的氯化物，取对乙酰氨基酚，加水100ml，加热溶解，冷却，滤过，取滤液25ml，依法检查氯化物，所产生(chnshng)的浑浊与标准氯化钠溶液（每1ml相当于10ug的Cl-）制成的对照液比较，不得更浓，问氯化物的限量？杂质(zzh)的限量第11页/共79页第十一页，共80页。*杂质限量检查方法分为杂质限量检查方法分为(fn wi)(fn wi)：标准对照法、灵敏度法、比较法：标准对照法、灵敏度法、比较法 灵灵敏敏度度法法供供试试品品溶溶液液(rngy)特点：特点：以该检测条件下反应的灵敏度来控制杂质限量以该检测条件下反应的灵敏度来控制杂质限量(xinling)(xinling)不需对照品不需对照品 试剂试剂无无正反应正反应合格合格 有有正反应正反应不合格合格 杂质的限量第12页/共79页第十二页，共80页。*杂质限量检查方法分为杂质限量检查方法分为(fn wi)(fn wi)：标准对照法、灵敏度法、比较法：标准对照法、灵敏度法、比较法 比比较较法法供试品供试品 测定特定的待检杂质测定特定的待检杂质(zzh)(zzh)的参数的参数 如：测定如：测定(cdng)A(cdng)A、pHpH值等值等 结果结果规定的限量规定的限量 特点：不需要对照品特点：不需要对照品 杂质的限量第13页/共79页第十三页，共80页。*一般杂质(zzh)的检查方法3.2 一般杂质的检查一般杂质的检查(jinch)方法方法氯化物检查法氯化物检查法硫酸盐检查法硫酸盐检查法重金属检查法重金属检查法一般杂质一般杂质的的检查检查(jinch(jinch) )方法方法溶液颜色检查法溶液颜色检查法铁盐检查法铁盐检查法砷盐检查法砷盐检查法易炭化物检查法易炭化物检查法溶液澄清度检查法溶液澄清度检查法干燥失重测定法干燥失重测定法残留溶剂测定法残留溶剂测定法炽灼残渣检查法炽灼残渣检查法水分测定法水分测定法第14页/共79页第十四页，共80页。*（一）原理(yunl)一、氯化物检查法一、氯化物检查法（二）操作（标准（二）操作（标准(biozhn)对照法）对照法）供试品供试品溶液溶液(rngy)标准标准NaCl溶液溶液稀稀HNO310mlH2O稀稀HNO310mlH2O40ml40mlAgNO31mlAgNO31mlH2OH2O50ml50ml 暗处放置暗处放置5min 暗处放置暗处放置5min一般杂质的检查方法第15页/共79页第十五页，共80页。*供试供试品溶品溶液液标准标准NaCl溶液溶液稀稀HNO310mlH2O稀稀HNO310mlH2O40ml40mlAgNO31mlAgNO31mlH2OH2O50ml50ml 暗处放置暗处放置5min 暗处放置暗处放置5min（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln)1. 条件条件(tiojin) 纳氏比色管应配对纳氏比色管应配对(p(p i dui du ) ) ；氯化物检查法第16页/共79页第十六页，共80页。*供试供试品溶品溶液液标准标准NaCl溶液溶液稀稀HNO310mlH2O稀稀HNO310mlH2O40ml40mlAgNO31mlAgNO31mlH2OH2O50ml50ml 暗处放置暗处放置5min 暗处放置暗处放置5min（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln)1. 条件条件(tiojin) 纳氏比色管应配对纳氏比色管应配对 ；酸性酸性(sun x(sun x n)n)条件条件稀硝酸；稀硝酸；F可以加速氯化银的生成；可以加速氯化银的生成；F产生较好的乳浊；产生较好的乳浊；F可避免产生碳酸银、氧化银、磷酸银沉淀。可避免产生碳酸银、氧化银、磷酸银沉淀。氯化物检查法第17页/共79页第十七页，共80页。*供试供试品溶品溶液液标准标准NaCl溶液溶液稀稀HNO310mlH2O稀稀HNO310mlH2O40ml40mlAgNO31mlAgNO31mlH2OH2O50ml50ml 暗处放置暗处放置5min 暗处放置暗处放置5min（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln)1. 条件条件(tiojin) 纳氏比色管应配对纳氏比色管应配对(p(p i dui du ) ) ；酸性条件酸性条件稀硝酸；稀硝酸；稀释到稀释到40ml40ml后加硝酸银试液；后加硝酸银试液；F使生成白色浑浊而不是白色沉淀使生成白色浑浊而不是白色沉淀 氯化物检查法第18页/共79页第十八页，共80页。*供试供试品溶品溶液液标准标准NaCl溶液溶液稀稀HNO310mlH2O稀稀HNO310mlH2O40ml40mlAgNO31mlAgNO31mlH2OH2O50ml50ml 暗处放置暗处放置5min 暗处放置暗处放置5min（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln)1. 条件条件(tiojin) 纳氏比色管应配对纳氏比色管应配对 ；酸性条件酸性条件稀硝酸；稀硝酸；稀释到稀释到40ml40ml后加硝酸银试液；后加硝酸银试液；暗处暗处( ( n ch)n ch)放置放置 ；比浊方法：黑色背景，自上而下的观察比浊方法：黑色背景，自上而下的观察 ；平行操作。平行操作。 氯化物检查法第19页/共79页第十九页，共80页。*反复反复(fnf)过滤过滤至澄清至澄清H2O（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln)2. 供试品溶液不澄清时的处理供试品溶液不澄清时的处理(chl)方法方法过滤过滤3. 供试品溶液供试品溶液有色有色时的处理方法时的处理方法内消色法内消色法/外消色法外消色法稀稀HNO3H2OAgNO31ml 暗处放置暗处放置10min标准标准NaCl溶液溶液AgNO31mlH2O无无Cl- 暗处放置暗处放置5min 暗处放置暗处放置5min50ml50ml内消色法内消色法2倍量的倍量的供试品供试品氯化物检查法第20页/共79页第二十页，共80页。*（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln)3. 供试品溶液供试品溶液(rngy)有色时的处理方法有色时的处理方法内消色法内消色法/外外消色法消色法外消色法外消色法 向供试品溶液中加入某种试剂，使供试品溶液的颜色向供试品溶液中加入某种试剂，使供试品溶液的颜色(y(y nsns ) )褪去或与对照品溶褪去或与对照品溶液颜色液颜色(y(y nsns ) )相同后再依法检查。相同后再依法检查。 4. 供试品溶液供试品溶液显碱性显碱性时的处理方法时的处理方法F先先中和中和为中性后再检查；为中性后再检查；F避免避免硝酸银在碱性条件下硝酸银在碱性条件下生成生成氢氧化银和氧化银氢氧化银和氧化银。5. 预先排除干扰物。预先排除干扰物。氯化物检查法第21页/共79页第二十一页，共80页。*（一）原理(yunl)二、硫酸盐检查法二、硫酸盐检查法（二）操作（二）操作(cozu)（标准对照法）（标准对照法）供试品供试品溶液溶液(rngy)标准标准K2SO4溶液溶液H2OH2O25% BaCl2 5ml25% BaCl2 5mlH2OH2O50ml50ml放置放置10min放置放置10min40ml40ml稀稀HCl 2ml稀稀HCl 2ml一般杂质的检查方法第22页/共79页第二十二页，共80页。*（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln)1. 条件条件(tiojin) 纳氏比色管应配对纳氏比色管应配对 ；酸性条件酸性条件稀盐酸；稀盐酸；比浊方法：黑色背景，自上而下比浊方法：黑色背景，自上而下(z(z sh sh n n r r xixi ) )的观察的观察 ；平行操作。平行操作。 2. 供试品溶液供试品溶液不澄清不澄清时的处理方法时的处理方法过滤过滤3. 供试品溶液供试品溶液有色有色时的处理方法时的处理方法内消色法内消色法/外消色法外消色法硫酸盐检查法第23页/共79页第二十三页，共80页。*过硫酸铵过硫酸铵 50mg过硫酸铵过硫酸铵 50mg（一）原理(yunl)三、铁盐检查法三、铁盐检查法（二）操作（标准（二）操作（标准(biozhn)对照法）对照法）供试品溶供试品溶液液(rngy)标准铁标准铁溶液溶液H2OH2O30% 硫氰酸铵硫氰酸铵 3ml30% 硫氰酸铵硫氰酸铵 3mlH2OH2O50ml50ml25ml25ml稀稀HCl 4ml稀稀HCl 4ml35ml35ml一般杂质的检查方法第24页/共79页第二十四页，共80页。*（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln)供试供试品溶品溶液液标准标准铁溶铁溶液液H2OH2O25ml25ml过硫酸铵过硫酸铵 50mg过硫酸铵过硫酸铵 50mg稀稀HCl 4ml稀稀HCl 4ml35ml35ml30% 硫氰酸铵硫氰酸铵 3ml30% 硫氰酸铵硫氰酸铵 3mlH2OH2O50ml50ml纳氏比色管应配对；纳氏比色管应配对；酸性条件酸性条件稀盐酸稀盐酸加过硫酸铵氧化剂：加过硫酸铵氧化剂： 加过量加过量(gu(guling)ling)硫氰酸铵硫氰酸铵 比色方法：白色的背景上，自上而下的观察。比色方法：白色的背景上，自上而下的观察。F稀盐酸可以防止稀盐酸可以防止(fngzh)铁盐水解铁盐水解F氧化供试品中氧化供试品中 Fe2+生成生成Fe3+ ；F防止光线使硫氰酸铁还原或分解退色。防止光线使硫氰酸铁还原或分解退色。F增加生成的配合物的稳定性，提高灵敏度；增加生成的配合物的稳定性，提高灵敏度；F消除消除Cl-、PO43-、SO42-等离子与铁盐形成配合物的干扰。等离子与铁盐形成配合物的干扰。铁盐检查法第25页/共79页第二十五页，共80页。*四、重金属检查法四、重金属检查法重金属重金属 指在实验指在实验(shyn)条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。作用显色的金属杂质。Pb第一法第一法第四法第四法重金属含量低的药物重金属含量低的药物(2(25g)5g)第三法第三法使用范围使用范围微孔滤膜法微孔滤膜法硫化钠法硫化钠法溶于碱性水溶液而难于溶于稀酸或溶于碱性水溶液而难于溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物在稀酸中生成沉淀的药物方法方法硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法溶于水、稀酸、乙醇的药物溶于水、稀酸、乙醇的药物炽灼后的硫代乙炽灼后的硫代乙酰胺法酰胺法含芳环、杂环以及难溶于水、含芳环、杂环以及难溶于水、乙醇乙醇的药物的药物第二法第二法一般(ybn)杂质的检查方法第26页/共79页第二十六页，共80页。*第一第一(dy)(dy)法法 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法黄色黄色(hungs)(hungs)至棕黑色混至棕黑色混悬液悬液（一）原理（一）原理(yunl)（二）（二）操作操作（标准对照法）（标准对照法）供试品供试品溶液溶液标准标准铅溶铅溶液液H2O醋酸盐醋酸盐buffer（）（）2mlH2O醋酸盐醋酸盐buffer（）（）2ml25ml25ml硫代乙酰胺硫代乙酰胺 2ml摇匀放置摇匀放置2min硫代乙酰胺硫代乙酰胺 2ml摇匀放置摇匀放置2min重金属检查法第27页/共79页第二十七页，共80页。*（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln)1. 条件条件(tiojin) 用用Pb(NO3)2先配制贮备液，并加入硝酸防止先配制贮备液，并加入硝酸防止(fngzh)铅盐的水解，临用前稀释；铅盐的水解，临用前稀释；醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液 () 硫代乙酰胺试液硫代乙酰胺试液 ；平行操作；平行操作； 比色方法：白色背景，自上而下的观察比色方法：白色背景，自上而下的观察 ；重金属检查法硫代乙酰胺法第28页/共79页第二十八页，共80页。*2. 供试品溶液有色供试品溶液有色(yu s)时的处理方法时的处理方法外消色法外消色法/内内消色法消色法外消色法外消色法用稀焦糖用稀焦糖(jio tn)(jio tn)溶液调节对照管颜色与样品管颜色溶液调节对照管颜色与样品管颜色一致。一致。 用对测定不干扰的指示剂调节对照管颜色与样品管颜色一用对测定不干扰的指示剂调节对照管颜色与样品管颜色一致。致。内消色法内消色法重金属检查法硫代乙酰胺法第29页/共79页第二十九页，共80页。*3. 干扰物的排除干扰物的排除(pich)方法方法高铁盐（高铁盐（Fe3+）供试品中微量高价供试品中微量高价Fe3+存在存在 供试品为铁盐（大量的供试品为铁盐（大量的Fe3+）药物本身能生成不溶性硫化物药物本身能生成不溶性硫化物加入加入(jir)掩蔽剂掩蔽剂 重金属检查法硫代乙酰胺法第30页/共79页第三十页，共80页。*第二第二(d r)(d r)法法 炽灼后的硫代乙酰胺法炽灼后的硫代乙酰胺法 （一）原理（一）原理 供试品在供试品在500-600炽灼破坏后，加炽灼破坏后，加HNO3加热处加热处理理(chl)，再按第一法进行检查。，再按第一法进行检查。 （二）操作（二）操作(cozu)重金属检查法第31页/共79页第三十一页，共80页。*（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln)HNO3处理后必须蒸干除尽氧化氮；处理后必须蒸干除尽氧化氮；炽灼炽灼(ch zhu)温度：温度：500600；含钠盐或氟的有机药物应用铂坩埚、石英坩埚含钠盐或氟的有机药物应用铂坩埚、石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿。或硬质玻璃蒸发皿。重金属检查法炽灼(ch zhu)后硫代乙酰胺法第32页/共79页第三十二页，共80页。*第三第三(d sn)(d sn)法法 硫化钠法硫化钠法 （一）原理（一）原理(yunl) （二）操作（标准（二）操作（标准(biozhn)对照法，比色）对照法，比色）（三）（三）注意事项及讨论注意事项及讨论碱性条件：碱性条件：NaOH显色剂：显色剂：Na2S 重金属检查法黄色至棕黑色混悬液黄色至棕黑色混悬液第33页/共79页第三十三页，共80页。*第四法第四法 微孔微孔(wi kn)(wi kn)滤膜法滤膜法 （一）原理（一）原理(yunl)：同第一法：同第一法 （二）操作（二）操作(cozu)CABFE滤器下部滤器上盖连接头辅助滤板D滤膜(直径10mm, 孔径3.0m)垫圈(外径10mm,内径6mm)重金属检查法微孔滤膜过滤法检查重金属装置第34页/共79页第三十四页，共80页。*五、砷盐检查法五、砷盐检查法古蔡氏法古蔡氏法白田道夫法白田道夫法二乙基二硫代氨基甲酸二乙基二硫代氨基甲酸(ji sun)银法（银法（Ag-DDC法）法）奇列氏法（次磷酸法）奇列氏法（次磷酸法）一般杂质(zzh)的检查方法第35页/共79页第三十五页，共80页。*（一）原理（一）原理(yunl) 砷砷()的反应：的反应： As3+ + 3Zn + 3H+ AsH3+ 3Zn2+ AsO33- + 3Zn + 9H+ AsH3+ 3Zn2+ + 3H2O AsH3 + 3HgBr2 3HBr + As(HgBr)3（黄色（黄色(hungs)） AsH3 + 2As(HgBr)3 3AsH(HgBr)2 （棕色）（棕色） AsH3 + As(HgBr)3 3HBr + As2Hg3（黑色）（黑色） 砷盐检查法古蔡氏法第36页/共79页第三十六页，共80页。*（二）操作（二）操作(cozu)8cm有孔玻璃有孔玻璃(b l)(b l)旋塞旋塞导气管导气管(qgun)(qgun)AsH3发生瓶发生瓶溴化汞试纸溴化汞试纸醋酸铅棉花醋酸铅棉花(60mg)HCl Zn 粒粒碘化钾试液碘化钾试液酸性氯化亚锡试液酸性氯化亚锡试液生成砷斑生成砷斑吸收硫化氢气体吸收硫化氢气体古蔡氏法检砷装置古蔡氏法检砷装置砷盐检查法古蔡氏法标准砷斑标准砷斑 供试品砷斑供试品砷斑第37页/共79页第三十七页，共80页。*（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln) 各试剂各试剂(shj)的作用的作用FHCl：提供酸性环境：提供酸性环境(hunjng)，反应物；，反应物；F加加KI和酸性和酸性SnCl2的作用：的作用：F做还原剂，还原砷做还原剂，还原砷()为砷为砷()砷盐检查法古蔡氏法 As3+ + 3Zn + 3H+ AsH3+ 3Zn2+ AsO33- + 3Zn + 9H+ AsH3+ 3Zn2+ + 3H2O第38页/共79页第三十八页，共80页。*（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln) 各试剂各试剂(shj)的作用的作用F加加KI和酸性和酸性SnCl2的作用：的作用：FKI被氧化生成的被氧化生成的I2又可以被又可以被SnCl2还原为还原为I F I与反应中产生的与反应中产生的Zn 2能形成稳定的配位离能形成稳定的配位离子子(lz)，有利于生成，有利于生成AsH3的反应不断进行。的反应不断进行。砷盐检查法古蔡氏法 As3+ + 3Zn + 3H+ AsH3+ 3Zn2+ AsO33- + 3Zn + 9H+ AsH3+ 3Zn2+ + 3H2O第39页/共79页第三十九页，共80页。*（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln) 各试剂各试剂(shj)的作用的作用F加加KI和酸性和酸性SnCl2的作用：的作用：FKI和酸性和酸性SnCl2可抑制可抑制SbH3生成生成(shn chn) F 锑斑，影响结果观察锑斑，影响结果观察FSnCl2可以与可以与Zn生成生成(shn chn)锌锡齐，起去锌锡齐，起去极化的作用，使氢气均匀连续发生极化的作用，使氢气均匀连续发生 砷盐检查法古蔡氏法第40页/共79页第四十页，共80页。*（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln) 各试剂各试剂(shj)的作用的作用F醋酸醋酸(c sun)铅棉花的作用铅棉花的作用 ：吸收：吸收H2S，排除硫，排除硫化物干扰化物干扰 F 砷盐检查法古蔡氏法第41页/共79页第四十一页，共80页。*（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln)2. 反应反应(fnyng)的最佳条件的最佳条件 F加加Zn粒：能通过粒：能通过(tnggu)1号筛（号筛（850-1000m）；）；约约2gF盐酸酸性下盐酸酸性下F反应温度反应温度2540，45minF标准砷溶液标准砷溶液2ml（1g/ml）砷盐检查法古蔡氏法3. 供试品砷斑和标准砷斑应供试品砷斑和标准砷斑应平行操作平行操作，并，并立即观察立即观察； 供试品砷斑与标准砷斑比较，供试品砷斑与标准砷斑比较，颜色不得更深颜色不得更深。第42页/共79页第四十二页，共80页。*（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln)4. 干扰干扰(gnro)物的排除物的排除 F如供试品为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等应在检如供试品为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等应在检查前加入查前加入HNO3处理，氧化成硫酸盐，再做检查；处理，氧化成硫酸盐，再做检查；F供试品若为铁盐，需先加酸性供试品若为铁盐，需先加酸性(sun xn)SnCl2试液，试液，将将Fe3+还原为还原为Fe2+ 砷盐检查法古蔡氏法第43页/共79页第四十三页，共80页。*（三）注意事项及讨论（三）注意事项及讨论(toln)4. 干扰干扰(gnro)物的排除物的排除 F供试品为共价键结合的砷化物，要先进行有机破坏，供试品为共价键结合的砷化物，要先进行有机破坏，否则检出结果偏低或难以检出。否则检出结果偏低或难以检出。F排除方法：酸破坏法排除方法：酸破坏法/碱破坏法碱破坏法F酸破坏法：酸破坏法：+稀硫酸与溴化钾，如：葡萄糖中砷盐的检稀硫酸与溴化钾，如：葡萄糖中砷盐的检查查F碱破坏法：碱破坏法：+氢氧化钙，氢氧化钙，500-600灼烧，如：中药灼烧，如：中药(zhngyo)麻仁丸中砷麻仁丸中砷 F 盐的检盐的检查查F +无水碳酸钠碱融，如：苯甲酸钠中砷盐无水碳酸钠碱融，如：苯甲酸钠中砷盐的检查的检查砷盐检查法古蔡氏法第44页/共79页第四十四页，共80页。*（四）古蔡氏法的特点（四）古蔡氏法的特点(tdin)F优点优点(yudin)：灵敏度高。：灵敏度高。F缺点：不适于含锑的药物。缺点：不适于含锑的药物。砷盐检查法古蔡氏法第45页/共79页第四十五页，共80页。*五、砷盐检查法五、砷盐检查法白田道夫法白田道夫法一般杂质的检查(jinch)方法（一）原理（一）原理(yunl)棕褐色棕褐色(h s)(h s)的胶态砷的胶态砷 （二）（二）特点特点F优点：不受锑干扰优点：不受锑干扰 。F缺点：灵敏度低缺点：灵敏度低 。第46页/共79页第四十六页，共80页。*五、砷盐检查法五、砷盐检查法 二乙基二硫代氨基二乙基二硫代氨基(nj)甲酸银法（甲酸银法（Ag-DDC法）法） 一般杂质的检查(jinch)方法（一）原理（一）原理(yunl)红色的胶态银红色的胶态银 红色的胶态银红色的胶态银 第47页/共79页第四十七页，共80页。*（二）操作（二）操作(cozu)Ag-DDC法检砷装置法检砷装置(zhungzh)砷盐检查法Ag-DDC法AsH3发生发生(fshng)瓶瓶醋酸铅棉花醋酸铅棉花(60mg)HCl Zn 粒粒碘化钾试液碘化钾试液酸性氯化亚锡试液酸性氯化亚锡试液吸收硫化氢气体吸收硫化氢气体Ag-DDC第48页/共79页第四十八页，共80页。*（三）（三） Ag-DDC法的特点法的特点(tdin)F优点：灵敏度高；优点：灵敏度高；F 可限量也可定量；可限量也可定量；F 锑干扰小锑干扰小F缺点：吡啶有恶臭缺点：吡啶有恶臭( chu)，中国药典改为，中国药典改为Ag-DDC的三乙胺的三乙胺-氯仿（：）溶液代替，灵敏度略氯仿（：）溶液代替，灵敏度略低。低。 砷盐检查法Ag-DDC法第49页/共79页第四十九页，共80页。*五、砷盐检查法五、砷盐检查法奇列氏法（次磷酸奇列氏法（次磷酸(ln sun)法）法） 一般杂质(zzh)的检查方法（一）原理（一）原理(yunl)（二）（二）特点特点F优点：不受优点：不受S2-、SO32-、Sb的干扰，适用于硫化物、的干扰，适用于硫化物、亚硫酸盐以及含锑药物砷盐的检查亚硫酸盐以及含锑药物砷盐的检查 F缺点：灵敏度较古蔡氏法低缺点：灵敏度较古蔡氏法低 。第50页/共79页第五十页，共80页。*六、溶液六、溶液(rngy)颜色检查法颜色检查法一般(ybn)杂质的检查方法是控制药物中有色是控制药物中有色(yu s)(yu s)杂质量杂质量的方法的方法 中国药典收载有三种方法：中国药典收载有三种方法： F第一法第一法 目视比色法，即与标准比色液比较的方法。目视比色法，即与标准比色液比较的方法。F第二法第二法 分光光度法。分光光度法。F第三法第三法 色差计法色差计法 第51页/共79页第五十一页，共80页。*七、易炭化物检查法七、易炭化物检查法一般杂质(zzh)的检查方法易炭化物易炭化物指药物指药物(yow)中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂质。量有机杂质。方法方法(fngf)：H2SO4炭化后与对照液比较。炭化后与对照液比较。 对照液：对照液：（1）“溶液颜色检查溶液颜色检查”项下的标准比色液；项下的标准比色液；（2）由比色用氯化钴液，比色用重铬酸钾液，比色用）由比色用氯化钴液，比色用重铬酸钾液，比色用硫酸铜液按规定方法配成的对照液；硫酸铜液按规定方法配成的对照液；（3）高锰酸钾液。）高锰酸钾液。 第52页/共79页第五十二页，共80页。*八、溶液八、溶液(rngy)澄清度检查法澄清度检查法 一般杂质的检查(jinch)方法澄清度检查澄清度检查(jinch)(jinch)是检查是检查(jinch)(jinch)药品溶液的药品溶液的混浊程度。混浊程度。它可以反映药物溶液中微量不溶性杂质的存在。它可以反映药物溶液中微量不溶性杂质的存在。 方法：与方法：与浊度标准液浊度标准液比浊。比浊。浊度标准液制备原理： 甲醛腙（白色混浊） 肼 第53页/共79页第五十三页，共80页。*溶液(rngy)澄清度检查法 澄清指供试品溶液的澄清度相同澄清指供试品溶液的澄清度相同(xin tn)于所用溶于所用溶剂或未超过号浊度标准液。剂或未超过号浊度标准液。 第54页/共79页第五十四页，共80页。*九、炽灼九、炽灼(ch zhu)残渣检查法残渣检查法一般杂质(zzh)的检查方法炽灼残渣炽灼残渣 指有机药物经炭化指有机药物经炭化(tnhu)或挥发性无机药物加热或挥发性无机药物加热分解后，高温炽灼，所产生的非挥发性无机杂质的硫酸分解后，高温炽灼，所产生的非挥发性无机杂质的硫酸盐。盐。0.1%0.2%12 mg第55页/共79页第五十五页，共80页。*十、干燥十、干燥(gnzo)失重测定法失重测定法一般(ybn)杂质的检查方法干燥干燥(gnz(gnz o)o)失重失重 药品在规定的条件下，经干燥药品在规定的条件下，经干燥(gnz(gnz o)o)后所减失后所减失的量。的量。 用于检查药物中的用于检查药物中的水分水分及其他及其他挥发性物质。挥发性物质。 恒重恒重 供试品连续两次干燥或炽灼后称重的差异在以下。供试品连续两次干燥或炽灼后称重的差异在以下。第56页/共79页第五十六页，共80页。*干燥(gnzo)失重测定法分类分类适用范围适用范围备注备注常温常压干燥常温常压干燥受热较稳定的药物 105，一般2-4h，干燥至恒重 干燥剂干燥干燥剂干燥适用于受热易分解或挥发的供试品 常用干燥剂：硅胶、五氧化二磷、浓硫酸等 减压干燥法减压干燥法 适用于熔点低，受热不稳定及较难赶除水分的供试品 热分析法热分析法研究其受热过程所发生的晶型转变、熔融、升华、吸附等物理变化和脱水、热分解、氧化还原等化学变化，对物质进行物理常数（如熔点和沸点）的确定、鉴别和纯度检查的方法 包括：热重分析法、差热分析法等 干燥干燥(gnzo)(gnzo)失重测定方法：失重测定方法： 第57页/共79页第五十七页，共80页。*十一十一(ShY)、水分测定法、水分测定法一般杂质的检查(jinch)方法2005版中国版中国(zhn u)药典二部收载两种方法：费休氏法、甲药典二部收载两种方法：费休氏法、甲苯法苯法 （一）费休氏法（一）费休氏法A供试品消耗的费休试液的体积B空白消耗的费休试液的体积F每1ml费休试剂相当于水的重量(mg)W供试品的重量第58页/共79页第五十八页，共80页。*水分(shufn)测定法费休氏法费休试液的配制费休试液的配制(pizh) (pizh) 称取碘称取碘( (置硫酸干燥器置硫酸干燥器内内4848小时以上小时以上)110g)110g，置干燥的具塞烧瓶中，加无，置干燥的具塞烧瓶中，加无水吡啶水吡啶160ml,160ml,注意冷却，振摇至碘全部溶解后，注意冷却，振摇至碘全部溶解后，加无水甲醇加无水甲醇300ml300ml，称定重量，将烧瓶置冰浴中冷，称定重量，将烧瓶置冰浴中冷却，通入干燥的二氧化硫至重量增加却，通入干燥的二氧化硫至重量增加72g72g，再加无，再加无水甲醇使成水甲醇使成1000ml1000ml，密塞，摇匀，在暗处放置，密塞，摇匀，在暗处放置2424小时。本液应遮光，密封，置阴凉干燥处保存。小时。本液应遮光，密封，置阴凉干燥处保存。临用前应标定浓度临用前应标定浓度 第59页/共79页第五十九页，共80页。*（二）甲苯（二）甲苯(ji bn)法法适用于含挥发性成分适用于含挥发性成分(chng fn)(chng fn)的药品的药品 A500ml的短颈圆底烧瓶；B水分(shufn)测定管；C直形冷凝管，外管长40cm。 甲苯法装置甲苯法装置水分测定法第60页/共79页第六十页，共80页。*十二十二(sh r)、残留溶剂测定法、残留溶剂测定法一般杂质(zzh)的检查方法残留溶剂残留溶剂 指在合成原料药、辅料指在合成原料药、辅料(f lio)或制剂生产的过程中使用的，或制剂生产的过程中使用的，但在工艺中未能完全除去的有机溶剂。但在工艺中未能完全除去的有机溶剂。第61页/共79页第六十一页，共80页。*&3.3 特殊杂质的检查特殊杂质的检查(jinch)方法方法特殊杂质特殊杂质(z(z zhzh ) ) 是指在特定药物的生产和贮藏过程中引入的杂质是指在特定药物的生产和贮藏过程中引入的杂质(z(z zhzh ) )。 F原理：利用药品和杂质原理：利用药品和杂质(zzh)(zzh)在理化性质及生理作用的差异在理化性质及生理作用的差异 F方法：色谱分析法方法：色谱分析法 光谱分析法光谱分析法 化学分析法化学分析法 物理分析法物理分析法 生物学分析法生物学分析法 特殊杂质的检查方法第62页/共79页第六十二页，共80页。*一、色谱分析一、色谱分析(s p fn x)(s p fn x)法法包括包括(boku)(boku)：薄层色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法：薄层色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法 （一）薄层（一）薄层(bo cn)色谱法（色谱法（TLC法）法）1、杂质对照法、杂质对照法 适用于已知杂质并能够得到杂质对照品的情况适用于已知杂质并能够得到杂质对照品的情况。例：枸橼酸乙胺嗪中N-甲基哌嗪的检查 N-甲基哌嗪甲基哌嗪供试品(50mg/ml)10lN-甲基哌嗪对照品(50mg/ml)10l特殊杂质的检查方法第63页/共79页第六十三页，共80页。*2、供试品溶液自身、供试品溶液自身(zshn)稀释对照法稀释对照法适用于杂质的结构不能确定或无杂质对照品的情况适用于杂质的结构不能确定或无杂质对照品的情况 例：氢化可的松中“其他(qt)甾体”的检查 供试品液：3mg/ml对照液：60g/ml（供试液(sh y)稀释50倍）判断： 供试品溶液的杂质斑点数3个； 颜色对照液主斑点颜色。 薄层色谱法第64页/共79页第六十四页，共80页。*3、杂质对照品法与供试品溶液、杂质对照品法与供试品溶液(rngy)自身稀释对照自身稀释对照法并用法并用4、对照药物法、对照药物法当无合适的杂质对照品，或者是供试品显示的杂质斑当无合适的杂质对照品，或者是供试品显示的杂质斑点颜色和主成分颜色有差异，难以判断限量时，可以点颜色和主成分颜色有差异，难以判断限量时，可以用含待检测杂质符合限度要求的与供试品相同的药物用含待检测杂质符合限度要求的与供试品相同的药物作为对照品。作为对照品。薄层(bo cn)色谱法第65页/共79页第六十五页，共80页。*内标法加校正因子法内标法加校正因子法外标法外标法加校正因子的主成分自身对照加校正因子的主成分自身对照(duzho)(duzho)法法不加校正因子的主成分自身对照不加校正因子的主成分自身对照(duzho)(duzho)法法 峰面积归一化法峰面积归一化法（二）高效（二）高效(o xio)液相色谱法（液相色谱法（HPLC法）法）HPLC法检查法检查(jinch)杂质的方法有五种：杂质的方法有五种：特殊杂质的检查方法第66页/共79页第六十六页，共80页。*1 1、内标法加校正因子法、内标法加校正因子法 适用适用(shyng)(shyng)于有杂质对照品时能够测定杂质的于有杂质对照品时能够测定杂质的校正因子杂质的含量测定。校正因子杂质的含量测定。高效(o xio)液相色谱法对照品+内标进样，求校正(jiozhng)因子 供试品+内标进样，求Cx 内标物浓度 杂质对照品浓度 供试品中杂质的峰面积内标物的峰面积杂质对照品的峰面积 供试品中杂质浓度 第67页/共79页第六十七页，共80页。*2 2、外标测定法、外标测定法 适用于有对照品的杂质适用于有对照品的杂质(zzh)(zzh)，而且进样量能够，而且进样量能够精确控制的情况。精确控制的情况。 3 3、加校正、加校正(jiozhng)(jiozhng)因子的主成分自身对照测定法因子的主成分自身对照测定法高效(o xio)液相色谱法例：红霉素中红霉素B、C的检查： 对照品液(0.2mg/ml)进样20l，调灵敏度，使主峰达满量程的20%； 供试品液(4mg/ml)进样20l，红霉素B、C校正后的A，均不得大于对照品液的主峰面积；其它单个杂质峰的峰面积之和不得大于对照品液主峰面积（5.0%）。对照品液：供试品的稀释液对照品液：供试品的稀释液 第68页/共79页第六十八页，共80页。*4 4、不加校正因子的主成分自身对照法、不加校正因子的主成分自身对照法 该方法适用该方法适用(shyng)(shyng)于没有杂质对照品的情况。于没有杂质对照品的情况。高效(o xio)液相色谱法对照对照(duzho)(duzho)品液：供试品的稀释液品液：供试品的稀释液 例:甲硝唑中2-甲基-5-硝基咪唑的检查： 对照品液(0.01mg/ml)进样20l，调灵敏度，使主峰达10%30% 样品液(0.14mg/ml)进样20l，杂质峰的峰面积之和不得大于对照品液主峰面积的1.0%。 第69页/共79页第六十九页，共80页。*5 5、面积归一化法、面积归一化法 适用于粗略测量适用于粗略测量(cling)(cling)供试品中杂质的含量。供试品中杂质的含量。高效(o xio)液相色谱法 例：利巴韦林中有关杂质的检查： 对照(duzho)品液(5g/ml)进样10l,调灵敏度，使主峰达满量程的20%25% 样品液(0.4mg/ml)进样10l, 各杂质峰的面积之和不得超过总峰面积 的1.0%第70页/共79页第七十页，共80页。*高效(o xio)液相色谱法（三）气相色谱法（三）气相色谱法（GC法）法） 主要用于药物主要用于药物(yow)中挥发性的杂质检查。中挥发性的杂质检查。 内标法加校正因子法内标法加校正因子法外标法外标法峰面积峰面积(min j)(min j)归一化法归一化法标准溶液加入法标准溶液加入法第71页/共79页第七十一页，共80页。*二、光谱分析二、光谱分析(un p fn x)(un p fn x)法法 包括：紫外分光光度法、红外分光光度法、原子包括：紫外分光光度法、红外分光光度法、原子(yunz)(yunz)吸收分光光度法吸收分光光度法 （一）紫外分光（一）紫外分光(fn un)光度法光度法特殊杂质的检查方法肾上腺酮肾上腺酮及及肾上腺素肾上腺素的紫外吸收曲线的紫外吸收曲线220 260 300 nmmax310nm第72页/共79页第七十二页，共80页。*（二）红外分光（二）红外分光(fn un)光度法光度法特殊杂质的检查(jinch)方法 供试品在640cm-1和662cm-1处的校正(jiozhng)吸收值之比，不得大于含10%A晶型甲苯咪唑对照品在该波长处的校正(jiozhng)吸收值之比。 第73页/共79页第七十三页，共80页。*（三）原子（三）原子(yunz)吸收分光光度法吸收分光光度法特殊杂质(zzh)的检查方法 是通过测定药物(yow)中所含待测元素原子蒸气，吸收发自光源的该元素特定波长的程度，以求出药物(yow)中待测元素的含量。 限量检查时：对照品液 = 供试品 + 限量- a 供试品液 = - b b (a-b)合格; b (a-b)不合格。第74页/共79页第七十四页，共80页。*三、化学分析三、化学分析(huxu fnx)(huxu fnx)法法特殊杂质(zzh)的检查方法杂质与一定试剂产生沉淀；杂质与一定试剂产生沉淀；杂质与一定试剂产生颜色反应杂质与一定试剂产生颜色反应(fnyng)(fnyng)；杂质与一定试剂反应杂质与一定试剂反应(fnyng)(fnyng)产生气体。产生气体。例：呋塞米中芳香第一胺的检查呋塞米呋塞米2-2-氨基氨基-4-4-氯氯-5-5-氨磺酸基苯甲酸氨磺酸基苯甲酸重氮化重氮化- -耦合反应显色耦合反应显色三、化学分析法三、化学分析法杂质与一定试剂产生杂质与一定试剂产生沉淀沉淀；杂质与一定试剂产生杂质与一定试剂产生颜色颜色反应；反应；杂质与一定试剂反应产生杂质与一定试剂反应产生气体气体。第75页/共79页第七十五页，共80页。*三、化学分析三、化学分析(huxu fnx)(huxu fnx)法法特殊杂质的检查(jinch)方法例：阿司匹林( s p ln)中游离水杨酸的检查 阿司匹林 + FeCl3 （无酚羟基） 水杨酸 + FeCl3 紫色（有酚羟基） 阿斯匹林阿斯匹林水杨酸水杨酸第76页/共79页第七十六页，共80页。*四、物理四、物理(wl)(wl)分析法分析法特殊(tsh)杂质的检查方法 是根据药物与杂质在物理性质上的不同来进行是根据药物与杂质在物理性质上的不同来进行(jnxng)检查的。如气味、颜色、旋光度等。检查的。如气味、颜色、旋光度等。四、物理分析法四、物理分析法 是根据药物与杂质在物理性质上的不同来进行检是根据药物与杂质在物理性质上的不同来进行检查的。如气味、颜色、旋光度等。查的。如气味、颜色、旋光度等。五、生物学分析法五、生物学分析法 利用药物本身与可能存在的杂质间生物活性上的差利用药物本身与可能存在的杂质间生物活性上的差异，采用生物学分析法以控制杂质的限量。异，采用生物学分析法以控制杂质的限量。第77页/共79页第七十七页，共80页。*本章(bnzhn)重点本章(bn zhn)重点掌握药物的纯度、杂质、一般杂质、特殊杂质等基本概掌握药物的纯度、杂质、一般杂质、特殊杂质等基本概念；念；掌握杂质的来源、种类；掌握杂质的来源、种类；掌握杂质限量检查的方法和限量检查的计算公式；掌握杂质限量检查的方法和限量检查的计算公式；掌握氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐检查的方法、掌握氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐检查的方法、原理、反应条件、加入原理、反应条件、加入(jir)各试剂的作用及试验注意各试剂的作用及试验注意事项等；事项等；熟悉特殊杂质检查的一般方法。熟悉特殊杂质检查的一般方法。第78页/共79页第七十八页，共80页。感谢您的观看(gunkn)！第79页/共79页第七十九页，共80页。内容(nirng)总结*。有效性：以动物实验为基础，最终以临床疗效(lioxio)来评价。使生成白色浑浊而不是白色沉淀。氧化供试品中 Fe2+生成Fe3+。溶于碱性水溶液而难于溶于稀酸或。3. 供试品砷斑和标准砷斑应平行操作，并立即观察。二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC法）。可限量也可定量。澄清指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂或未超过号浊度标准液。F每1ml费休试剂相当于水的重量(mg)。b (a-b)合格。b (a-b)不合格第八十页，共80页。