多多糖糖的的提提取取和和纯纯化化 This model paper was revised by LINDA on December 15, 2012.多糖的提取和纯化多糖的提取和纯化多糖的提取和纯化摘 要本文较详细地介绍了多糖的提取和纯化方法，为多糖的研究和生产提供参考依据。关键词多糖；提取；纯化；活性炭多糖（polysacharides，PS），又称多聚糖，是由 10 个以上的单糖通过苷键连接而成的，具有广泛生物活性的天然大分子化合物。它广泛分布于自然界高等植物、藻类、微生物（细菌和真菌）与动物体内。20 世纪 60 年代以来，人们逐渐发现多糖具有复杂的、多方面的生物活性和功能1：(1)多糖可作为广谱免疫促进剂，具有免疫调节功能，能治疗风湿病、慢性病毒性肝炎、癌症等免疫系统疾病，甚至能抗 AIDS 病毒2。如甘草多糖具有明显的抗病毒和抗肿瘤作用10，黑木耳多糖、银杏外种皮多糖和芦荟多糖可抗肿瘤和增强人体免疫功能3-5。(2)多糖具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促进核酸与蛋白质的生物合成作用。如柴胡多糖具有抗辐射，增强免疫功能等生物学作用6，麦冬多糖具有降血糖及免疫增强作用7-8，动物黏多糖具有抗凝血、降血脂等功能9。(3)多糖能控制细胞分裂和分化，调节细胞的生长与衰老。如爬山虎多糖具有抗病毒和抗衰老作用粉碎脱脂粗提（23 次）吸滤或离心沉淀洗涤干燥首先除去表面脂肪。原料经粉碎后加入甲醇、乙醚、乙醇、丙酮或 1：1 的乙醇乙醚混合液，水浴加热搅拌或回流 13 小时，脱脂后过滤得到的残渣一般用水作溶剂（也有用氢氧化钾碱性水液、氯化钠水液、1醋酸和 1苯酚或1M 氢氧化钠作为提取溶剂）提取多糖。温度控制在 90100，搅拌 46 小时，反复提取 23 次。得到的多糖提取液大多较粘稠，可进行吸滤。也可用离心法将不溶性杂质除去，将滤液或上清液混合（得到的多糖若为碱性则需要中和）。然后浓缩，再加入 25 倍低级醇（甲醇或乙醇）沉淀多糖；也可加入费林氏溶液或硫酸铵或溴化十六烷基三甲基铵等，与多糖物质结合生成不溶性络合物或盐类沉淀。然后依次用乙醇、丙酮和乙醚洗涤。将洗干后疏松的多糖迅速转入装有五氧化二磷和氢氧化钠的真空干燥器中减压干燥（若沉淀的多糖为胶状或具粘着性时，可直接冷冻干燥）。干燥后可得粉末状的粗多糖。 微波辅助提取法：其原理为利用不同极性的介质对微波能的不同吸收程度，使基体物质中的某些区域和萃取体系中的某些组分被选择性加热，从而使萃取物质从基体或体系中分离出来，进入到介电常数小，微波吸收能力较差的萃取剂中14。由于微波能极大加速细胞壁的破裂，因而应用于中草药中有效成分的提取能极大加快提取速度，增加提取产率。而且由于其选择性好，提取后基体能保持良好的性状，提取液也较一般的提取方法澄清15。聂金源等在柴胡多糖和黄酮化合物的提取18中对微波辅助提取法、超声辅助法和索氏提取法进行比较，发现微波辅助提取法所需时间最短（10min），多糖的提取率最高（）。 超声辅助法：其原理是利用超声波的空化作用加速植物有效成分的浸出提取，另外超声波的次级效应，如机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也能加速欲提取成分的扩散释放并充分与溶剂混合，利于提取16。超声波辅助法与常规提取法相比，具有提取时间短、产率高、无需加热等优点17。 索氏提取法：将植物粉末置于索氏提取器中，加入石油醚，60-90条件下提取至无色（一般为 6 小时）。过滤，滤渣挥发干燥完溶媒后加入 80%乙醇，再提取 6 小时，过滤，滤渣乙醇挥发干燥后加蒸馏水。回流提取 2 次，趁热过滤，滤液减压浓缩，再除蛋白，醇沉，除色素。60干燥，称重。 醇提法：先后将 90%和 50%乙醇加入植物粉末中，振荡充分再抽滤。滤液中加入足量无水乙醇，至于 4冰箱中过夜。减压抽滤，再除去色素，得多糖粗品，在 60l