孕前干预工程沙眼衣原体孕前干预工程沙眼衣原体和淋球菌检测新方法的应和淋球菌检测新方法的应用及效果分析用及效果分析淋球菌和沙眼衣原体感染的危害淋球菌和沙眼衣原体感染的危害奈瑟氏淋球菌奈瑟氏淋球菌(Neisseria gonorrhoeae, N.G.)是是造成淋病的病原微生物，妊娠期感染淋病对母婴造成淋病的病原微生物，妊娠期感染淋病对母婴危害极大，宫内感染易致自然流产、早产及胎儿危害极大，宫内感染易致自然流产、早产及胎儿宫内发育迟缓，分娩时母婴垂直传播，可致新生宫内发育迟缓，分娩时母婴垂直传播，可致新生儿淋病性结膜炎，治疗若不及时彻底，新生儿有儿淋病性结膜炎，治疗若不及时彻底，新生儿有致盲的危险，淋病孕妇产后易发生播散性淋病致盲的危险，淋病孕妇产后易发生播散性淋病. 沙眼衣原体沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis, C.T.)是造是造成非淋菌性尿道炎的重要病原体，引起尿道炎、成非淋菌性尿道炎的重要病原体，引起尿道炎、宫颈炎、子宫内膜炎及盆腔炎。可致孕妇早产、宫颈炎、子宫内膜炎及盆腔炎。可致孕妇早产、流产、胎膜早破、胚胎停育等严重妊娠并发症，流产、胎膜早破、胚胎停育等严重妊娠并发症，另产道感染可致婴儿急性结膜炎。沙眼衣原体母另产道感染可致婴儿急性结膜炎。沙眼衣原体母婴传播可导致新生儿眼炎或肺炎，其危险性分别婴传播可导致新生儿眼炎或肺炎，其危险性分别为为2050和和1020。 淋球菌和沙眼衣原体感染的危害淋球菌和沙眼衣原体感染的危害淋球菌和沙眼衣原体感染的危害淋球菌和沙眼衣原体感染的危害为降低出生缺陷发生风险，提高出生人口素质，为降低出生缺陷发生风险，提高出生人口素质，经国务院批准，国家人口计生委、财政部共同组经国务院批准，国家人口计生委、财政部共同组织实施国家免费孕前优生健康检查项目试点工作，织实施国家免费孕前优生健康检查项目试点工作，其中临床实验室检查内容中包含了沙眼衣原体和其中临床实验室检查内容中包含了沙眼衣原体和淋球菌两项生殖道感染病原微生物检测。淋球菌两项生殖道感染病原微生物检测。 淋球菌常用检测方法所面临困境淋球菌常用检测方法所面临困境 革兰氏染色镜检革兰氏染色镜检 特异性差、易发生漏诊和误诊，仅适用于男性患者，特异性差、易发生漏诊和误诊，仅适用于男性患者，女性泌尿生殖道中由于杂菌含量较多，仅仅从形态上很难女性泌尿生殖道中由于杂菌含量较多，仅仅从形态上很难进行判断进行判断 培养法培养法 阳性率一般在阳性率一般在85-90，但培养法耗时长，无法快速，但培养法耗时长，无法快速诊断与及时治疗，同时受标本的采集、运输、保存等因素诊断与及时治疗，同时受标本的采集、运输、保存等因素影响较大，限制了培养法在基层医疗机构的顺利开展影响较大，限制了培养法在基层医疗机构的顺利开展 多聚酶链式反应（多聚酶链式反应（PCR）法）法 灵敏度与特异性较高，对各期淋病均适宜，但需要专灵敏度与特异性较高，对各期淋病均适宜，但需要专业实验环境和专业实验人员，对操作要求极为严格业实验环境和专业实验人员，对操作要求极为严格, 成本成本高，难以在计划生育技术服务机构得到开展。高，难以在计划生育技术服务机构得到开展。 试纸法试纸法 操作简单，但临床出现较多的假阴性和假阳性，只能操作简单，但临床出现较多的假阴性和假阳性，只能作为初筛实验，检测准确性低使得该方法也无法应用到孕作为初筛实验，检测准确性低使得该方法也无法应用到孕前优生健康检查项目试点工作前优生健康检查项目试点工作。淋球菌常用检测方法所面临困境淋球菌常用检测方法所面临困境 细胞培养法细胞培养法 检测沙眼衣原体的金标准方法，灵敏度和特异性等均检测沙眼衣原体的金标准方法，灵敏度和特异性等均较好，孕前干预工程中推荐采用培养法开展沙眼衣原体孕较好，孕前干预工程中推荐采用培养法开展沙眼衣原体孕前筛查试点工作。前筛查试点工作。 但培养法耗时长，操作繁锁，实验影响因素较多，对但培养法耗时长，操作繁锁，实验影响因素较多，对实验设备及操作技术要求较高，国内仅有少数科研机构能实验设备及操作技术要求较高，国内仅有少数科研机构能开展，故该技术并不适用于在孕前干预工程中应用，只能开展，故该技术并不适用于在孕前干预工程中应用，只能作为其他检测方法的参比标准。作为其他检测方法的参比标准。 沙眼衣原体常用检测方法所面临困境沙眼衣原体常用检测方法所面临困境 胶体金法胶体金法 操作简单快速，全部检测过程需半个小时，因此该方操作简单快速，全部检测过程需半个小时，因此该方法在临床上使用比较普遍。但由于胶体金技术灵敏度较低，法在临床上使用比较普遍。但由于胶体金技术灵敏度较低，易造成漏检，所以实际检测效果并不是很好。易造成漏检，所以实际检测效果并不是很好。PCR法法 诊断较为快速，灵敏度与特异度也较高，但会出现一诊断较为快速，灵敏度与特异度也较高，但会出现一定的假阳性。该法需要专业实验环境和专业实验人员，对定的假阳性。该法需要专业实验环境和专业实验人员，对操作要求极为严格，目前难以在计划生育技术服务机构得操作要求极为严格，目前难以在计划生育技术服务机构得到开展。到开展。 沙眼衣原体常用检测方法所面临困境沙眼衣原体常用检测方法所面临困境 原理原理 将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在单克隆抗体将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在单克隆抗体上与相应抗原结合，在荧光显微镜下呈现特异性荧光反应上与相应抗原结合，在荧光显微镜下呈现特异性荧光反应 优势优势 特异性强、敏感性高、检测速度快，并且操作简便，特异性强、敏感性高、检测速度快，并且操作简便，便于推广便于推广单克隆抗体免疫荧光技术在孕前干单克隆抗体免疫荧光技术在孕前干预工程中的应用预工程中的应用l沙眼衣原体沙眼衣原体 荧光素标记的沙眼衣原体外膜蛋白单克隆抗体检测人荧光素标记的沙眼衣原体外膜蛋白单克隆抗体检测人体内的沙眼衣原体是应用最为成熟和广泛的沙眼衣原体非体内的沙眼衣原体是应用最为成熟和广泛的沙眼衣原体非培养快速检测法，是目前美国等发达国家应用最广的沙眼培养快速检测法，是目前美国等发达国家应用最广的沙眼衣原体确诊实验方法，也是我国卫生部推荐的沙眼衣原体衣原体确诊实验方法，也是我国卫生部推荐的沙眼衣原体的检测方法之一的检测方法之一 单克隆抗体免疫荧光技术在孕前干单克隆抗体免疫荧光技术在孕前干预工程中的应用预工程中的应用单克隆抗体免疫荧光技术在孕前干单克隆抗体免疫荧光技术在孕前干预工程中的应用预工程中的应用奈瑟氏淋球菌奈瑟氏淋球菌 荧光素标记的单克隆抗体可特异性结合标本中奈瑟氏荧光素标记的单克隆抗体可特异性结合标本中奈瑟氏淋球菌抗原，结合形态学特点，在荧光显微镜下直接检测淋球菌抗原，结合形态学特点，在荧光显微镜下直接检测奈瑟氏淋球菌，灵敏度高、特异性强，操作简单，检测速奈瑟氏淋球菌，灵敏度高、特异性强，操作简单，检测速度快，在卫生部度快，在卫生部淋病诊断标准淋病诊断标准中把免疫荧光法列为分中把免疫荧光法列为分离培养淋球菌确诊的一种检测手段。离培养淋球菌确诊的一种检测手段。 单克隆抗体免疫荧光技术在孕前干单克隆抗体免疫荧光技术在孕前干预工程中的应用预工程中的应用l单克隆抗体免疫荧光法操作简便，只需一台荧光单克隆抗体免疫荧光法操作简便，只需一台荧光显微镜即可观察结果，在孕前干预工程中检测沙显微镜即可观察结果，在孕前干预工程中检测沙眼衣原体和淋球菌可操作性较强，具有良好的应眼衣原体和淋球菌可操作性较强，具有良好的应用前景用前景l深圳市迈科龙生物技术有限公司已成功研制沙眼深圳市迈科龙生物技术有限公司已成功研制沙眼衣原体免疫荧光检测试剂盒和奈瑟氏淋球菌免疫衣原体免疫荧光检测试剂盒和奈瑟氏淋球菌免疫荧光检测试剂盒，两种试剂盒均已通过国家药监荧光检测试剂盒，两种试剂盒均已通过国家药监局注册，获得上市许可局注册，获得上市许可迈科龙试剂盒在孕前干预工程工作迈科龙试剂盒在孕前干预工程工作模式下的性能评估模式下的性能评估 l自自2008年年9月起，迈科龙公司与广东省惠东县计月起，迈科龙公司与广东省惠东县计划生育服务站合作对单克隆抗体免疫荧光检测技划生育服务站合作对单克隆抗体免疫荧光检测技术在孕前干预工程试运行工作中对沙眼衣原体和术在孕前干预工程试运行工作中对沙眼衣原体和奈瑟氏淋球菌检测的应用价值进行了实际运作与奈瑟氏淋球菌检测的应用价值进行了实际运作与性能评估性能评估迈科龙试剂盒在孕前干预工程工作迈科龙试剂盒在孕前干预工程工作模式下的性能评估模式下的性能评估l截至截至2010年年6月止，共检测沙眼衣原体临床样本月止，共检测沙眼衣原体临床样本1657例、奈瑟氏淋球菌临床样本例、奈瑟氏淋球菌临床样本1423例，并采用例，并采用临床金标准开展双盲法对比试验临床金标准开展双盲法对比试验迈科龙沙眼衣原体检测试剂盒与金标准试验结果迈科龙沙眼衣原体检测试剂盒与金标准试验结果迈科科龙试剂盒盒金金标准准合合计阳性阳性( + )阴性阴性()阳性阳性( + )15818176阴性阴性()1114701481合合计16914881657 迈科龙沙眼衣原体试剂盒准确率为迈科龙沙眼衣原体试剂盒准确率为98.25%，灵敏性为，灵敏性为93.49%，特异性为，特异性为98.79%，一致性系数，一致性系数Kappa(K)=0.9062，两种试剂盒，两种试剂盒检测结果在统计学意义上无显著差异检测结果在统计学意义上无显著差异 。迈科龙奈瑟氏淋球菌检测试剂盒与金标准试验结果迈科龙奈瑟氏淋球菌检测试剂盒与金标准试验结果迈科科龙试剂盒盒金金标准准合合计阳性阳性( + )阴性阴性()阳性阳性( + )72678阴性阴性()1013351345合合计8213411423 迈科龙淋球菌试剂盒准确率为迈科龙淋球菌试剂盒准确率为98.88%，灵敏性为，灵敏性为87.8%，特，特异性为异性为99.55%，一致性系数，一致性系数Kappa(K)=0.894，两种试剂盒检测结，两种试剂盒检测结果在统计学意义上无显著差异果在统计学意义上无显著差异 。迈科龙试剂盒对环境和设备要求低，操作简便快迈科龙试剂盒对环境和设备要求低，操作简便快捷，在孕前干预工程的县乡共同服务模式下可在捷，在孕前干预工程的县乡共同服务模式下可在乡镇服务现场当场顺利完成检测工作乡镇服务现场当场顺利完成检测工作如采用智能化生殖道病原体检测设备，可无需操如采用智能化生殖道病原体检测设备，可无需操作人员专业医学知识，减轻了计生技术服务站人作人员专业医学知识，减轻了计生技术服务站人员培训负担员培训负担 孕前干预工程县乡共同服务模式操作流程孕前干预工程县乡共同服务模式操作流程孕前干预工程县级直接服务模式操作流程孕前干预工程县级直接服务模式操作流程单克隆抗体免疫荧光技术在孕前干单克隆抗体免疫荧光技术在孕前干预工程中的应用预工程中的应用l单克隆抗体免疫荧光技术具有灵敏度高、特异性强、简便单克隆抗体免疫荧光技术具有灵敏度高、特异性强、简便快速的特点，一小时内出结果，对环境和设备要求低，适快速的特点，一小时内出结果，对环境和设备要求低，适用于我国各地区计划生育技术服务机构开展孕前干预工程用于我国各地区计划生育技术服务机构开展孕前干预工程中沙眼衣原体和淋球菌两项检测中沙眼衣原体和淋球菌两项检测l迈科龙公司的沙眼衣原体和淋球菌免疫荧光试剂盒获得国迈科龙公司的沙眼衣原体和淋球菌免疫荧光试剂盒获得国家上市许可，在实际临床应用中性能表现优秀，可为孕前家上市许可，在实际临床应用中性能表现优秀，可为孕前干预工程检测衣原体和淋球菌提供强有力的技术支持，在干预工程检测衣原体和淋球菌提供强有力的技术支持，在全国范围内进行大规模推广全国范围内进行大规模推广