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DNA限制性内切酶双酶切分析 原原 理理限制性内切酶是一类具有严格识别位点，限制性内切酶是一类具有严格识别位点，并在识别位点内或者附近切割并在识别位点内或者附近切割双链双链DNA的脱氧核糖核酸酶的脱氧核糖核酸酶。BamHBamHGTCCAGGCCTAGGATCC G+GGATCCCCTAGGHindHindGTCGACCAGCTGGACCTG+平端切口平端切口粘端切口粘端切口Xba I: TCTAGA AGATCTSal I: GTCGAC CAGCTG实验步骤实验步骤10Cutsmart Buffer 2 l质粒质粒DNA 1 lXba 1 lSal 1 lH2O 15 l 20 l3737水浴酶切水浴酶切2 2小时。小时。1% 琼脂糖凝胶电泳鉴定琼脂糖凝胶电泳鉴定。NE buffer (pH 7.9)150 mM NaCl10 mM Tris-HCl10 mM MgCl21 mM DTT 二硫苏糖醇二硫苏糖醇基因组基因组DNA加样加样TE溶解液溶解液 10ul6 x loading buffer 2ulDNA染料染料 1ul质粒酶切体系加样质粒酶切体系加样酶切体系酶切体系 20ul6 x loading buffer 4ul
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