分子寄生虫学分子寄生虫学Molecular parasitology第一讲第一讲 概念和发展历程概念和发展历程分子寄生虫学：分子寄生虫学是运用分子生物学、分子寄生虫学：分子寄生虫学是运用分子生物学、生物化学、遗传学、免疫学和细胞学等的理论和生物化学、遗传学、免疫学和细胞学等的理论和技术，从分子水平研究病原寄生虫及宿主、环境技术，从分子水平研究病原寄生虫及宿主、环境的关系，阐明寄生虫生长、发育、繁殖及致病和的关系，阐明寄生虫生长、发育、繁殖及致病和传播规律的一门科学，以期为预防、控制寄生虫传播规律的一门科学，以期为预防、控制寄生虫病提供科学依据。病提供科学依据。第一讲第一讲 绪论绪论发展历程：发展历程：20世纪上半叶，寄生虫学涉及的分子研究落后于细菌和脊世纪上半叶，寄生虫学涉及的分子研究落后于细菌和脊椎动物椎动物二战期间，出现寄生虫生物化学领域的转变，这个时期的二战期间，出现寄生虫生物化学领域的转变，这个时期的主要研究是方向是寄生虫与宿主的分子差异，虫体分子主要研究是方向是寄生虫与宿主的分子差异，虫体分子特征，药物筛选特征，药物筛选20世纪世纪60年代，在寄生虫的中间代谢的研究进一步开展，年代，在寄生虫的中间代谢的研究进一步开展，搞清一批抗寄生虫药物的作用机制搞清一批抗寄生虫药物的作用机制20世纪世纪70年代介入生物化学和生物物理新技术、新方法年代介入生物化学和生物物理新技术、新方法20世纪世纪80年代后，分子生物学和免疫学发展，寄生虫进入年代后，分子生物学和免疫学发展，寄生虫进入全新的分子寄生虫学领域全新的分子寄生虫学领域第一讲第一讲 绪论绪论发展历程：发展历程：特别是寄生虫体外培养的成功是分子寄生虫学研究特别是寄生虫体外培养的成功是分子寄生虫学研究中具有革命性的一步，其中中具有革命性的一步，其中1976年年Trager和和Jensen体外培养恶性疟原虫获得成功，其次体外培养恶性疟原虫获得成功，其次1978年年Hill等成功培养布氏锥虫血液期，不久，等成功培养布氏锥虫血液期，不久，又发展到生活史各期，从而使这两种原虫分子寄又发展到生活史各期，从而使这两种原虫分子寄生虫学研究飞速发展生虫学研究飞速发展锥虫成为研究生物化学和分子遗传学的生物模型锥虫成为研究生物化学和分子遗传学的生物模型寄生虫表面膜的研究可能为研究寄生虫致病机制以寄生虫表面膜的研究可能为研究寄生虫致病机制以及在宿主免疫攻击作用下寄生虫存活机制提供有及在宿主免疫攻击作用下寄生虫存活机制提供有益启示益启示第一讲第一讲 绪论绪论发展历程：发展历程：20世纪世纪90年代因分子生物学、分子免疫学在方法年代因分子生物学、分子免疫学在方法学上的快速发展，寄生虫病疫苗研究进入兴盛时学上的快速发展，寄生虫病疫苗研究进入兴盛时期期寄生虫基因组和蛋白质组研究，恶性疟原虫全基因寄生虫基因组和蛋白质组研究，恶性疟原虫全基因组组寄生虫功能基因组计划，即蛋白质组学的研究寄生虫功能基因组计划，即蛋白质组学的研究第一讲第一讲 绪论绪论分子寄生虫学今后的研究方向：分子寄生虫学今后的研究方向：与寄生虫生长、发育、分化等关键因子相关的功能与寄生虫生长、发育、分化等关键因子相关的功能基因组学基因组学寄生虫免疫的分子机制和疫苗寄生虫免疫的分子机制和疫苗寄生虫代谢系统所涉及的生物化学和遗传学机制，寄生虫代谢系统所涉及的生物化学和遗传学机制，以及寄生虫在宿主免疫和代谢系统的环境中得以以及寄生虫在宿主免疫和代谢系统的环境中得以生存的机制生存的机制寄生虫表面抗原变异的遗传学及其生物合成、加工、寄生虫表面抗原变异的遗传学及其生物合成、加工、传膜转运的机制传膜转运的机制药物作用的靶点、抗性的分子机制药物作用的靶点、抗性的分子机制转基因寄生虫动物模型和其它动物模型转基因寄生虫动物模型和其它动物模型第二讲第二讲 分子寄生虫学的内容和主要成就分子寄生虫学的内容和主要成就基因组和蛋白组基因组和蛋白组基因组即是对生物体遗传物质的总称，基因组计划即是对基因组即是对生物体遗传物质的总称，基因组计划即是对遗传密码（碱基对）排序并进行解读遗传密码（碱基对）排序并进行解读蛋白质组（蛋白质组（proteome）是基因组所编码全部蛋白质的总称。）是基因组所编码全部蛋白质的总称。在蛋白质水平上系统分析各种生命现象的本质的相关内在蛋白质水平上系统分析各种生命现象的本质的相关内容称之为蛋白质组研究。随高分辨液相层析、双相凝胶容称之为蛋白质组研究。随高分辨液相层析、双相凝胶电泳和质谱技术发展和完善，蛋白质组学研究和基因组电泳和质谱技术发展和完善，蛋白质组学研究和基因组学几乎同步发展学几乎同步发展10多个寄生虫种系均已开展类似的基因组研究多个寄生虫种系均已开展类似的基因组研究http:/www.ebi.ac.uk/parasites/parasite-genome.html，有关寄生虫基因组资料，并已开发出专门用于寄生虫，有关寄生虫基因组资料，并已开发出专门用于寄生虫基因的识别软件基因的识别软件第二讲第二讲 分子寄生虫学的内容和主要成就分子寄生虫学的内容和主要成就研究寄生虫基因组和蛋白组的意义：研究寄生虫基因组和蛋白组的意义：第一，寻找抗寄生虫药物作用的靶子及研究寄生虫第一，寻找抗寄生虫药物作用的靶子及研究寄生虫抗药性机制。找出与营养代谢相关的酶和途径，抗药性机制。找出与营养代谢相关的酶和途径，找出寄生虫生活过程中这些不同于宿主的薄弱环找出寄生虫生活过程中这些不同于宿主的薄弱环节；抗性组（节；抗性组（resistome）的概念，专门研究与）的概念，专门研究与寄生虫抗性相关的分子及其作用机制寄生虫抗性相关的分子及其作用机制研究寄生虫的免疫逃避机制和疫苗研制基础：抗原研究寄生虫的免疫逃避机制和疫苗研制基础：抗原的变异和伪装，寄生虫基因组中存在数量可观的的变异和伪装，寄生虫基因组中存在数量可观的可变抗原基因家族。免疫组（可变抗原基因家族。免疫组（immunome）第三，为寄生虫演化和寄生虫病的分子诊断提供更第三，为寄生虫演化和寄生虫病的分子诊断提供更确切的依据确切的依据第二讲第二讲 分子寄生虫学的内容和主要成就分子寄生虫学的内容和主要成就转基因：转基因：转基因的概念：通过物理、化学或生物学的方法向转基因的概念：通过物理、化学或生物学的方法向细胞中导入外源基因，是定向改变细胞遗传性状细胞中导入外源基因，是定向改变细胞遗传性状的常用技术手段的常用技术手段寄生虫转基因：多起始于寄生虫转基因：多起始于20世纪世纪80年代末年代末90年代年代初，主要得益于电转化技术的成熟、寄生虫培养初，主要得益于电转化技术的成熟、寄生虫培养技术的完善以及快速有效的筛选标（技术的完善以及快速有效的筛选标（selectable marker）发现与应用。）发现与应用。1989年在锥虫中第一次年在锥虫中第一次表达来源于细菌的报告基因。寄生虫的转基因发表达来源于细菌的报告基因。寄生虫的转基因发展经历了从瞬时转染到稳定转染再到基因打靶等展经历了从瞬时转染到稳定转染再到基因打靶等几个发展阶段。几个发展阶段。第二讲第二讲 分子寄生虫学的内容和主要成就分子寄生虫学的内容和主要成就转基因：转基因技术主要开展以下几个方面的研究转基因：转基因技术主要开展以下几个方面的研究 基因表达的调控研究期特异性抗原，如疟原虫子孢基因表达的调控研究期特异性抗原，如疟原虫子孢子、裂殖子和配子体转换过程中均有一些蛋白质表达被激子、裂殖子和配子体转换过程中均有一些蛋白质表达被激活，而另一些蛋白质的表达被关闭活，而另一些蛋白质的表达被关闭 重要蛋白质的结构和功能以及与宿主相互作用重要蛋白质的结构和功能以及与宿主相互作用 转基因寄生虫：如将寄生虫致病相关基因进行突变或缺转基因寄生虫：如将寄生虫致病相关基因进行突变或缺失，使转基因的寄生虫失去致病性，但仍保留原有的免疫原失，使转基因的寄生虫失去致病性，但仍保留原有的免疫原性，可构建减毒活虫疫苗。通过转基因技术对中间宿主或媒性，可构建减毒活虫疫苗。通过转基因技术对中间宿主或媒介昆虫的基因组进行改造，使它们不能感染和传播寄生虫介昆虫的基因组进行改造，使它们不能感染和传播寄生虫病，如通过转基因敲除媒介按蚊中传疟相关基因，从而失去病，如通过转基因敲除媒介按蚊中传疟相关基因，从而失去传播疟疾的作用。传播疟疾的作用。第二讲第二讲 分子寄生虫学的内容和主要成就分子寄生虫学的内容和主要成就基因的不连续转录（基因的不连续转录（discontinuous transcription）-表面抗表面抗原的变异是锥虫逃避宿主免疫系统攻击的有效手段，涉及一原的变异是锥虫逃避宿主免疫系统攻击的有效手段，涉及一系列重复、有规律的基因表达的开启和关闭，即基因的不连系列重复、有规律的基因表达的开启和关闭，即基因的不连续转录。现在认为不连续转录是动基体目原虫在续转录。现在认为不连续转录是动基体目原虫在mRNA合成合成中存在的一种普遍现象中存在的一种普遍现象RNA的编辑（的编辑（RNA editing）-在锥虫，初始在锥虫，初始mRNA转变成成转变成成熟熟mRNA时，由于存在时，由于存在RNA编辑，某个蛋白质的遗传信息可编辑，某个蛋白质的遗传信息可以分布在几个不同的基因上。以分布在几个不同的基因上。RNA编辑是锥虫线粒体基因转编辑是锥虫线粒体基因转录过程中的一种普遍模式录过程中的一种普遍模式rRNA基因与转录基因与转录rRNA是细胞内含量最多的是细胞内含量最多的RNA，数百个，数百个到上千个纵列串联基因单位的重复。而疟原虫拷贝数则很低，到上千个纵列串联基因单位的重复。而疟原虫拷贝数则很低，18SrRNA的的rDNA只有只有48个拷贝数，是所有已知真核生物个拷贝数，是所有已知真核生物中拷贝数最少的。在疟原虫生活史中，中拷贝数最少的。在疟原虫生活史中，18SrRNA转录调控具转录调控具有期特异性特点有期特异性特点基因转录与基因转录与RNARNA编辑编辑第二讲第二讲 分子寄生虫学的内容和主要成就分子寄生虫学的内容和主要成就寄生虫感染与吞噬细胞，寄生虫感染与吞噬细胞，NO是吞噬细胞在细胞因子是吞噬细胞在细胞因子IFN-和和TNF-诱导下产生的一种强力非依氧毒素，嗜酸性粒细胞在诱导下产生的一种强力非依氧毒素，嗜酸性粒细胞在抵抗蠕虫感染时发挥重要作用抵抗蠕虫感染时发挥重要作用寄生虫感染与寄生虫感染与T细胞免疫，细胞免疫，CD4+和和CD8T细胞均发挥重要作细胞均发挥重要作用。用。寄生虫感染与体液免疫，寄生虫感染可激发机体产生高水平寄生虫感染与体液免疫，寄生虫感染可激发机体产生高水平抗体，包括抗体，包括IgG、IgM及及IgE等等寄生虫感染与免疫逃避机制，寄生虫为维持其寄生能力，也寄生虫感染与免疫逃避机制，寄生虫为维持其寄生能力，也已经进化了多种途径逃避宿主的免疫攻击，甚至可以主动调已经进化了多种途径逃避宿主的免疫攻击，甚至可以主动调节宿主的免疫应答过程。节宿主的免疫应答过程。寄生虫病疫苗：采用基因工程技术，鉴定具有免疫保护作用寄生虫病疫苗：采用基因工程技术，鉴定具有免疫保护作用的抗原片段；核酸疫苗是将编码保护性抗原的基因片段克隆的抗原片段；核酸疫苗是将编码保护性抗原的基因片段克隆到真核表达载体上，通过直接注射人体，使外源基因在活体到真核表达载体上，通过直接注射人体，使外源基因在活体内表达，诱导免疫反应；采用多种疫苗传递载体研制多价多内表达，诱导免疫反应；采用多种疫苗传递载体研制多价多途径免疫的疫苗；采用遗传工程技术，通过对关键基因或致途径免疫的疫苗；采用遗传工程技术，通过对关键基因或致病基因的缺失和改造，产生减毒的寄生虫病疫苗。病基因的缺失和改造，产生减毒的寄生虫病疫苗。寄生虫免疫与疫苗寄生虫免疫与疫苗第二讲第二讲 分子寄生虫学的内容和主要成就分子寄生虫学的内容和主要成就寄生虫疫苗的设计应着重考虑以下几个方面问题：寄生虫疫苗的设计应着重考虑以下几个方面问题：保护性抗原的选择；保护性抗原的选择；多期多价疫苗；多期多价疫苗；人群遗传多态性；人群遗传多态性；疫苗诱导的免疫反应类型疫苗诱导的免疫反应类型寄生虫免疫与疫苗寄生虫免疫与疫苗第二讲第二讲 分子寄生虫学的内容和主要成就分子寄生虫学的内容和主要成就概念：程序性死亡（概念：程序性死亡（programmed cell death,PCD），又称凋），又称凋亡（亡（apoptosis），是一类主动的、生理性的，并受基因调控），是一类主动的、生理性的，并受基因调控的，不同于细胞坏死的细胞死亡过程，广泛存在于自然界生的，不同于细胞坏死的细胞死亡过程，广泛存在于自然界生物体的发育过程中。物体的发育过程中。发生发生PCD的细胞在形态上的主要变化有的细胞在形态上的主要变化有DNA碎裂、染色质聚碎裂、染色质聚集、细胞皱缩、线粒体肿胀、形成凋亡小体被吞噬降解等集、细胞皱缩、线粒体肿胀、形成凋亡小体被吞噬降解等2002年诺贝尔生理和医学奖被授予年诺贝尔生理和医学奖被授予Brenner,Horvitz和和Sulston，以表彰他们在研究器官发育和，以表彰他们在研究器官发育和PCD过程中的基因调控作用过程中的基因调控作用所作贡献。所作贡献。秀丽隐杆线虫（秀丽隐杆线虫（Canenorhabditis elegans），该虫结构简单，），该虫结构简单，仅仅1090个细胞，该虫有个细胞，该虫有6个谱系，其中个谱系，其中3个谱系发生个谱系发生PCD。特。特定的细胞分化为特定的组织犹如程序般地早被设定。定的细胞分化为特定的组织犹如程序般地早被设定。在秀丽隐杆线虫中发现以下与在秀丽隐杆线虫中发现以下与PCD相关的基因：相关的基因：启动基因：启动基因：ced-1、ced-2、ced-3、ced-4；效应基因：效应基因：ced-3、ced-4、ced-9和和egl-1；其中；其中ced-3、ced-4在启动和执行在启动和执行PCD中起重要作用中起重要作用寄生虫感染与程序性死亡寄生虫感染与程序性死亡第二讲第二讲 分子寄生虫学的内容和主要成就分子寄生虫学的内容和主要成就药物和宿主免疫反应可以诱导寄生虫的凋亡。药物和宿主免疫反应可以诱导寄生虫的凋亡。寄生虫利用寄生虫利用PCD调节种群密度调节种群密度在媒介体内，寄生虫无节制地生长将导致媒介的死亡，在媒介体内，寄生虫无节制地生长将导致媒介的死亡，只有通过自身控制荷虫使部分寄生虫发育至感染期，只有通过自身控制荷虫使部分寄生虫发育至感染期，才能完成生活史才能完成生活史凋亡在寄生虫媒介，寄生虫宿主相互作用中相当凋亡在寄生虫媒介，寄生虫宿主相互作用中相当普遍普遍宿主细胞的凋亡宿主细胞的凋亡寄生虫感染与程序性死亡寄生虫感染与程序性死亡第二讲第二讲 分子寄生虫学的内容和主要成就分子寄生虫学的内容和主要成就抗蠕虫药抗性：对寄生蠕虫抗性研究的很多资料来源抗蠕虫药抗性：对寄生蠕虫抗性研究的很多资料来源于动物寄生虫，但动物寄生虫的抗药性会通过人畜共于动物寄生虫，但动物寄生虫的抗药性会通过人畜共患蠕虫传播至人类，导致临床抗蠕虫失败患蠕虫传播至人类，导致临床抗蠕虫失败胆碱能激动剂：产生抗药性是因为长期高浓度药物压胆碱能激动剂：产生抗药性是因为长期高浓度药物压力下，力下，Ach（乙酰胆碱）受体发生突变（乙酰胆碱）受体发生突变谷氨酸门控的氯离子通道：受体改变使得药物运输及谷氨酸门控的氯离子通道：受体改变使得药物运输及内流改变是抗性的分子基础内流改变是抗性的分子基础微管蛋白结合剂：微管蛋白结合剂：微管蛋白结构改变，对药物亲微管蛋白结构改变，对药物亲和力下降，表现为对药物敏感性下降和力下降，表现为对药物敏感性下降多药抗性：多药抗性（多药抗性：多药抗性（MDRMDR）与膜结合糖蛋白有关）与膜结合糖蛋白有关吡喹酮（吡喹酮（praziquantelpraziquantel）抗性：吡喹酮的作用机制并）抗性：吡喹酮的作用机制并不清楚，但抗性并不表现在各发育期，有抗性的成虫，不清楚，但抗性并不表现在各发育期，有抗性的成虫，所产的虫卵并不都携带抗性基因所产的虫卵并不都携带抗性基因寄生虫对药物的抗性寄生虫对药物的抗性第二讲第二讲 分子寄生虫学的内容和主要成就分子寄生虫学的内容和主要成就原虫抗药性目前研究很多，但结果不理想原虫抗药性目前研究很多，但结果不理想如球虫、疟原虫等如球虫、疟原虫等寄生虫对药物的抗性寄生虫对药物的抗性 大学课件出品 版权归原作者所有 联系QQ ：910670854 如侵权，请告知，吾即删 更多精品文档请访问我的个人主页 http:/www.docin.com/611696569 附赠人生心语附赠人生心语人生太短，聪明太晚人生太短，聪明太晚人生太短，聪明太晚人生太短，聪明太晚(1)我们都老得太快却聪明得太迟把钱省下来，等待退休后再去享受结果退休后，因为年纪大，身体差，行动不方便，哪里也去不成。钱存下来等养老，结果孩子长大了，要出国留学，要创业做生意，要花钱娶老婆，自己的退休金都被拗走了。人生太短，聪明太晚人生太短，聪明太晚(2)当自己有足够的能力善待自己时，就立刻去做，老年人有时候是无法做中年人或是青少年人可以做的事，年纪和健康就是一大因素。小孩子从小就告诉他，养你到高中，大学以后就要自立更生，要留学，创业，娶老婆，自己想办法，自己要留多一点钱，不要为了小孩子而活我们都老得太快却聪明得太迟，我的学长去年丧妻。这突如其来的事故，实在叫人难以接受，但是死亡的到来不总是如此。学长说他太太最希望他能送鲜花给他，但是他觉得太浪费，总推说等到下次再买，结果却是在她死后，用鲜花布置她的灵堂。这不是太蠢愚了吗？！等到.、等到.，似乎我们所有的生命，都用在等待。人生太短，聪明太晚人生太短，聪明太晚(3)等到我大学毕业以后，我就会如何如何我们对自己说等到我买房子以后！等我最小的孩子结婚之后！等我把这笔生意谈成之后！等到我死了以后人人都很愿意牺牲当下，去换取未知的等待；牺牲今生今世的辛苦钱，去购买后世的安逸在台湾只要往有山的道路上走一走，就随处都可看到农舍变精舍，山坡地变灵塔，无非也是为了等到死后，能图个保障，不必再受苦。许多人认为必须等到某时或某事完成之后再采取行动。明天我就开始运动，明天我就会对他好一点，下星期我们就找时间出去走走；退休后，我们就要好好享受一下。人生太短，聪明太晚人生太短，聪明太晚(4)然而，生活总是一直变动，环境总是不可预知，现实生活中，各种突发状况总是层出不穷。身为一个医生，我所见过的死人，比一般人要来得多。这些人早上醒来时，原本预期过的是另一个平凡无奇的日子，没想到一个意料之外的事；交通意外、脑溢血、心脏病发作等等。剎那间生命的巨轮倾覆离轨，突然闯进一片黑暗之中。那么我们要如何面对生命呢？我们毋需等到生活完美无瑕，也毋需等到一切都平稳，想做什么，现在就可以开始做起。一个人永远也无法预料未来，所以不要延缓想过的生活，不要吝于表达心中的话，因为生命只在一瞬间。人生太短，聪明太晚人生太短，聪明太晚(5)记住！给活人送一朵鲜花，强过给死人送贵重的花圈，每个人的生命都有尽头，许多人经常在生命即将结束时，才发现自己还有很多事没有做，有许多话来不及说，这实在是人生最大的遗憾。别让自己徒留为时已晚的空余恨。逝者不可追，来者犹未卜，最珍贵、最需要实时掌握的当下，往往在这两者蹉跎间，转眼错失。人生太短，聪明太晚人生太短，聪明太晚(6)人生短暂飘忽，包得有一首小诗这样写：高天与原地，悠悠人生路；行行向何方，转眼即长暮。正是道尽了人生如寄，转眼即逝的惶恐。有许多事，在你还不懂得珍惜之前已成旧事；有许多人，在你还来不及用心之前已成旧人。遗憾的事一再发生，但过后再追悔早知道如何如何是没有用的，那时候已经过去，你追念的人也已走过了你。人生太短，聪明太晚人生太短，聪明太晚(7)一句瑞典格言说：我们老得太快，却聪明得太迟。不管你是否察觉，生命都一直在前进。人生并未售来回票，失去的便永远不再得到。将希望寄予等到方便的时间才享受人生太短，聪明太晚人生太短，聪明太晚(8)我们不知失去了多少可能的幸福不要再等待有一天你可以松口气，或是麻烦都过去了。生命中大部分的美好事物都是短暂易逝的，享受它们、品尝它们，善待你周围的每一个人，别把时间浪费在等待所有难题的完满结局上。找回迷失的生命死亡也许是免费的但是，却要付出生命的代价。劝大家一句话：把握当下，莫等待。成功人生的十堂课成功人生的十堂课人生成功第人生成功第1课课做一个终生学习的人，离开学校并不意味着学习就结束了。学习可以成为一种生活方式，帮助你发挥最大的潜能。我们从未停止学习，总会有新的，有趣的东西等待我们去发现。学习新的技能可能让人感到有一点恐惧，但每当我们在个人学习上停滞不前时，我们都需要去学习新的东西。积极地寻求支援和建议，突破停滞期。参加一些培训，进修，夜校任何新的兴趣都将会有助于发展你的优势。多看，多听，让你的头脑保持活跃。活到老，学到老。人生成功第人生成功第2课课令自己感到沮丧的秘诀就是用空闲时间去烦恼自己是否快乐。所以不要费事去想它！摩拳擦掌干起来吧。你将热血沸腾，你会头脑清醒。很快，在你身体中的这种高涨的积极人生观将把烦恼从你的头脑中赶出去。行动起来，忙碌起来。这是世界上最便宜的一种药，也是最好的一种。人生成功第人生成功第3课课在困境中寻找成功的希望逆境是一所最好的学校。每一次失败，每一次打击，每一次损失，都蕴育着成功的萌芽，都教会我在下一次有更出色的表现。我再也不会逃避现实，也不会拒绝从以往的错误中获取经验，我不再因此而促成自己的失败。因为我知道，宝玉不经磨砺就不能发光，没有，我也不能完善自我。现在我知道，灵魂倍受煎熬的时刻，也正是生命中最多选择与机会的时刻。任何事情的成败取决于我在寻求帮助时是抬起头还是低下头。无论何时，当我被可怕的失败击倒，在最初的阵痛过去之后，我都要想方设法将苦难变成好事。伟大的机遇就在这一刻闪现这苦涩的根必将迎来满园芬芳！我将一直在困境中寻找成功的希望。人生成功第人生成功第4课课没有人可以使你感到自卑我选择自我感觉良好，这样我能更加开放地学习。如果人们给我负面的回应或是批评我做的事情，我不会认为他们所说的就表明我是一个“差劲的”人。我坚信自尊由我掌控，这让我毫无戒心地去听取别人的反馈，想看看是否有我可以学习的东西。我们每天都有两种选择。我们可以感到自己很棒，也可以感到自己很差劲。难道有人会选择后者吗？人生成功第人生成功第5课课紧紧抓住梦想我们每个人都有梦想。我们每个人都希望能发自内心地相信自已有一种特殊的天赋，相信自己能发挥重要的作用，相信自己能以一种特殊的方式感动他人，相信自己能够把世界变得更加美好。在一生中，我们都曾经对自己渴望并追求的生活品质抱有憧憬。然而，对我们大多数人来说，这些憧憬在日常生活的成规和挫败中已经变得如此渺茫，以到于我们甚至不再努力去实现它们。对太多人来说，梦想已经远离，随之远离的还有塑造我们命运的意愿。很多人已经推动了坚定的信念，而正是坚定的信念为胜利者创造了优势。我们所要做的就是重拴梦想，并实现梦想，让我们每个人都记住，并去运用深藏在自己身上的无限潜能。人生成功第人生成功第6课课毅力无法替代世界上没有任何东西可以替代毅力。才干不可以，无所作为的能人十分普遍；天分不可以，碌碌无为的天才尽人皆知;教育不可以，受过良好教育的没落者更是随处可见。只要有毅力和决心，就是无所不能的。毅力并不总是意味着永远坚持做同一件事。它意味着无论你做任何事情，你都要立刻全心投入，竭尽全力；它意味着先做艰苦的工作，再去期待随之而来的满足和回报。它意味着开心地工作，渴望更多的知识和进步。它意味着多打几个电话，多夏装几里路，多除草，早起床，意味着总是寻求更好的方式去做你在做的事情。毅力就是经历考验和过失的成功。人生成功第人生成功第7课课驻足片刻闻花香在现代生活的忙忙碌碌中，人们很少会停下来欣赏自然的美。问问自己，你有多少次倾听过鸟儿的歌唱。你最近一次抬头仰望闪耀的星空又是在什么时候？时光飞逝，人生苦短。不要忘记驻足闻闻花香。我们在急于谋生的过程中，往往忽视了我们生活的品质。多少次，你听见人们为这为那说“我忙死了。”多可惜啊！有一天，当他们真的找到时间能够驻足片刻闻花香时，可能已经太迟了。人生成功第人生成功第8课课加入到微笑者和赞美者的行列来当你对别人，别人也会对你报以，你自然会感觉很棒。即使他有对你报以，你也会感觉很棒，因为你认识到世界上最贫穷的人就是从不微笑的人，当你对那个人微笑，你立刻变得更加富有。赞美也是这个道理。当你真诚地毛病抑或恭维一个人时，他将立刻受益，更喜欢自己。当你让别人感觉更好时，你自己也会感觉更好。人生成功第人生成功第9课课让自己快乐。调查表明，我们当中70%的人在生活中时间有临床性的抑郁现象。如今我们有这么多的机遇，为什么我们还这么不快乐呢？人们尝试各种东西：金钱，权利，事业，婚姻，离婚，酒精，摇滚甚至毒品，但我们大多数人只是想要得到一样东西快乐。快乐是人的一种自然的身心状态；我们只要去相信快乐，让自己感受快乐。要宣称：我应当得到快乐。说出来，唱出来，喊出来。优先考虑快乐，让快乐成为你最重要的事情。对你所拥有的一切抱以感激之情吧。人生成功第人生成功第10课课我拥有无与伦比的想象力现在我将通过这种神奇的力量得到我想要的。如果我害怕发表演讲，我就想象自己在公众场合无所畏惧，充满信心；如果我在病魔的煎熬，我就想象我以前健康的样子；如果我感到贫穷，我就想象我将要富有。现在我明白了：人类惟一的限制就是想象力。我之所以没有成功，原因就在于我不知道如何使用我的想象力。现在，我精通这个技巧，我将从中受益。最大的回报将是成功和愈加快乐。你会管理时间吗你会管理时间吗?如何让自己一天的时间不止24小时呢?这里有一些总结:你会管理时间吗你会管理时间吗?（1）1.对目标、任务、会议等事件分别按优先级进行排序；2.从优先级最高的事物着手；3.和拖延做斗争，如果事情重要，从现在开始做；4.把大的、艰难的任务细分为小的、容易的部分；5.为自己创造一小时的宁静，哪怕这需要很强的意志力，或者有时不起作用；你会管理时间吗你会管理时间吗?（2）6.找到一个隐蔽的地方，如图书馆或空闲的办公室；7.当你有重要的事情要处理时，学会对别人说“不”；8.学会委派别人做事；9.归纳相似的事情，把它们放在一起处理；10.减少例行事务：它们不值得花费过多时间。缩短低价值的事件。抛开没有价值的信件和文书工作。委派别人完成、减少或推迟优先级很低的任务；你会管理时间吗你会管理时间吗?（3）11.避免完美主义。记住80/20定律；12.避免做出过多许诺。对你在有限时间内能完成的工作持现实态度；13.不要把时间表排得满满的，为自己留下一定机动时间应付突发事件；14.设置时间限制。例如，做某些决定时，不应超过3分钟；15.聚精会神地做手头的事情；你会管理时间吗你会管理时间吗?（4）16.处理重要事情时，使用大块的时间；17.迅速处理困难的事情，等待和拖延不会使它们变容易；18.文书工作争取只处理一次；19.在行动以前，彻底地思索整件工作；20.第一次就做好。成功是一种习惯，习惯是需要培成功是一种习惯，习惯是需要培养的养的成功是一种习惯，习惯是需要培养成功是一种习惯，习惯是需要培养的（的（1）1：找方法，不找借口。2：遇到挫折时，对自己说“太棒了”。3：不说消极的话，不落入消极的情绪，一旦出现立即正面处理。4：随时用零碎时间做零碎的事。5：写下来，不要太依靠脑袋记忆。6：随时记录灵感。7：守时8：把重要的观念方法写下来，并随时提醒自己。9：走路时，比平时快30%，肢体语言要健康，有力，不懒惰，不萎靡。10：每天自我反省一次。11：每天坚持一次运动。12：开会坐在前排。13：微笑。14：说话时，声音有力。15：说话之前，先考虑对方的感受16：每天有意识或真诚地赞美别人3次17:不要用训斥指责的口吻跟别人说话.18:每天做一件分外事.19:节俭.20:恪守诚信,说到做到.成功是一种习惯，习惯是需要培养成功是一种习惯，习惯是需要培养的（的（2）“好的习惯让人立于不败之地，坏的习惯则让人从成功的宝座上跌下来”。拿破仑希尔认为，保罗盖蒂的这句话很有道理。有一段时期，盖蒂抽烟抽得很凶。一天，他去法国度假的途中，在一个小旅馆投宿。晚上下起了大雨，地面特别泥泞，开了好几个钟头的车之后，盖蒂实在是累极了。吃过晚饭，他就回到自己的房间里，睡着了。但是清晨时分盖蒂突然醒了过来，他很想抽支烟，于是他就打开了灯，很自然的伸手去摸他一般都会放在床头的烟，但是没有。他下了床，到衣服的口袋里去找，也没有。于是他又在行李袋里找，结果他又一次失望了。他知道这个时候旅馆的酒吧和餐厅早就关门了。他想，这个时候把不耐烦的门房叫过来，实在是不可能。现在他唯一能得到香烟的方法就是穿好衣服，到火车站去，但是那还在6条街之外呢。成功是一种习惯，习惯是需要培养成功是一种习惯，习惯是需要培养的（的（3）看来情形并不乐观，外面还下着雨。他的汽车也停在离旅馆还有一段距离的车房里。而且，在他住店的时候，别人也提醒过他了。车房的门是午夜关，第二天早上6点才开门，现在能叫到出租车的机率也相当于零。显然，要是他真的迫切地需要一支烟，那么他只能在雨里走到黑暗中。抽烟的欲望不断地折磨着他。于是，他下了床，脱下睡衣，穿好衣服，准备出去。正在他伸手拿雨衣的时候，他突然笑了起来，笑自己傻。他突然觉得，自己的行为多荒唐可笑。盖蒂站在那里，心里不停地想着，一个所谓的知识分子，一个商人，一个认为自己有足够的智慧可以对别人下命令的人，居然在三更半夜要离开舒适的旅馆，冒着大雨走上好几条街去买香烟。盖蒂也是生平第一次注意到，他现在早就养成了一个坏习惯，那就是为了一个不好的习惯，他可以放弃极大的舒适。看来，这个习惯对他并没有什么好处，于是，他的头脑立刻就清醒了过来，很快他就做出了决定。成功是一种习惯，习惯是需要培养成功是一种习惯，习惯是需要培养的（的（4）他已经决定好了，就走到桌子旁边把那个烟盒团起来扔出去，然后重新换上睡衣，回到舒服的床上。心里怀着一种解脱，甚至是一种胜利的感觉，很满足地关上灯，合上了眼睛。在窗外的雨声里，他进入了一个从来没有过的深沉的睡眠。自从那个晚上之后，他再也没抽过一根烟，也再没有想过要抽烟。盖蒂说，他并不是想用这件事来指责那些有抽烟习惯的人。但是他经常回忆那天晚上的情形，他只是为了表示，按照他当时的情况，他差点被一种恶习俘虏。经常做一件事就会形成习惯，而习惯的力量是难以抗拒的。但是人类还有一种潜藏的缓冲能力，也不容小觑。既然人有可能养成一种习惯，那肯定他也有能力改掉这种习惯。还有些人说，奇怪的是，养成好习惯很难，但是一个坏习惯却在不知不觉中就已经形成了。但是，事实并非如此，这还要看一个人的毅力。不管怎么说，习惯终归是习惯，并没有合理的理论说坏习惯要比好习惯更容易养成。成功是一种习惯，习惯是需要培养成功是一种习惯，习惯是需要培养的（的（5）动作敏捷或迟缓只是个时间的问题，一个人要么习惯了准时，要么他就会习惯迟到。一个准时的人，总会体会到这种习惯给他带来的好处，无论是约会，会议，还是什么别的方面的承诺。如果别人请你吃饭，你迟到了，那就会给主人和其他的客人造成不便。你可能会因此而变得很不受欢迎，以后人家都不会再请你吃饭了。拿破仑希尔认为，对商人来说，准时是一项特别宝贵的资产。俗话说得好，“时间就是金钱”，这句话永远是正确的，现在这个时代里，这个原则比以前更加重要。现代企业的步调是一日千里，分秒必争。主管和高级职员的每日安排都是满满的，因为他们可没有多余的时间可以浪费，就像生产线不能耽搁一样。守信对生意人来说，是个难得的品德，最有希望成功的商人和公司，他们一定是准时接受定单，准时回复并交货，提供服务，准时付款，准时还债。如果等时间已过去了，订货还没到，那顾客下次可能就不找你了。成功是一种习惯，习惯是需要培养成功是一种习惯，习惯是需要培养的（的（6）节俭是另外一种可以养成的习惯，对天生节俭的人来说，这个习惯给他带来的成功的机会要比别人多。而习惯了节俭的人，他只知道在乎时就要注意节减开支和成本。受用一生的教诲：职场受用一生的教诲：职场10只魔戒只魔戒 N条箴言条箴言第只魔戒第一条箴言：习惯仿佛像一根缆绳，我们每天给它缠上一股新索，要不了多久，它就会变得牢不可破。第二条箴言：人类所有优点都要变成习惯才有价值，即使爱这样一个永恒的主题，你也必须通过不断的修炼，变成你的习惯，才真正会化为你的行动。第三条箴言：很多好的观念、原则，我们知道是一回事，但知道了是否能做到是另一码事。这中间必须架起一座桥，这桥便是习惯。第四条箴言：科学家研究发现，一个习惯的养成需要天的时间，这天是个平均数，但习惯一旦养成就将终生受用。第五条箴言：任何一个习惯的培养都不会是轻而易举的，因此一定要遵循循序渐进、由浅入深、由近及远、由渐变到突变的原则。第只魔戒第一条箴言：人生来是简单的，和文明打交道之后变得复杂了，陷入了某种复杂的旋涡中无法自拔，这些羁绊使人忘记人性的最终追求是平静、简单、自由。第二条箴言：不经过复杂的简单是一种苍白，我曾经很人为地把金钱放在一边它却不安分，但今天当我驾驭了金钱，它就能很安分地呆在一边。第三条箴言：要锻炼一个人的财商，让他具有富人心态，首先他确实要学会放弃，同时也要学会克服，要学会走出很多障碍和阴影。第四条箴言：财商教育的根本目的是让人们获得自由，增加收入、减少财务问题的初衷是减少人们在金钱上的虚荣心和攀比风。第五条箴言：财商教育要解决人类面对金钱的两大问题：恐惧与贪婪。而为了生活稳定这个假象，人们常常沦为金钱的奴隶。第六条箴言：对于金钱，不是说你要成为它的主人，而是要做到与之和谐、平等，因为它反映的是你自己，所以对它要多一分宽容。第只魔戒第一条箴言：成功的实质就是获得自由度，就是当你想当的人，做你想做的事，去你想去的地方，说你想说的话。第二条箴言：世上没有懒惰的人，只有没有目标的人。世界上最贫穷的人就是没有目标的人，因为连梦想都没有，还会拥有什么？第三条箴言：只有明确而具体的目标才可衡量，而只有可衡量的目标才可能达到。第四条箴言：付出就表示富有，索取就是贫穷，快行动起来，用行动表现你的富有。第五条箴言：心态、目标、时间管理三者的集中点就是在行动上，三者的表现特征也是行动。它们共同形成知行合一的统一体。第只魔戒第一条箴言：人的一生就是不断地闯入一个又一个圈子并不断争取承认的过程。第二条箴言：在西方社会，特别是在北美，只有那些树立自我推销和成功意识的人，才有可能赢得机会与成功。第三条箴言：国际化人才不是一个地理意义上的概念，而是文化、心理层面的概念。是否是国际化人才取决于一个人的涵养、知识构成和思维模式。第四条箴言：创业的失败率是非常高的，在美国，每年有几十万人开公司，每年也有几十万家公司倒闭，所以创业只适合一部分人。第五条箴言：我时常摸着跳动的心口，数着那一下一下的脉搏，计算着我的生命长河究竟能卷起多少浪花。我要让短暂的生命，爆发出火花。第六条箴言：命运不是机遇，而是一种选择。命运从来都不是一种可以等到的东西，而是一件需要去完成的事情。第只魔戒第一条箴言：不管你对成功如何定义，积极总是有价值的。积极不一定成功，但消极肯定失败。第二条箴言：成功学的最大的特征就是强调标准化和量化，把认为说不清楚、不可琢磨的东西都变成可琢磨、可操作的东西。第三条箴言：成功绝对有捷径，当然它的捷径绝对不是整个过程，这个捷径告诉我们的是必须按照最有效的成功策略去做，否则你就会越忙越出错。第四条箴言：人的改变会遵循一定的轨迹，即：结果决定于行为，行为决定于态度，态度决定于信念，信念决定于自我期望。第五条箴言：人对环境有四种反应：第一是离开环境；第二是改变环境；第三是适应环境；第四是抱怨环境。前三种反应都有可能从中找到新的生机，只是千万不要选择第四种反应。第六条箴言：成功的秘诀第一个是坚持到底，永不放弃；第二个就是当你想放弃的时候，再照着第一个秘诀去做：坚持到底，永不放弃。第只魔戒第一条箴言：人们总是感到自己是对的，别人和世界都是不对的；所以人们总想改变世界、改变别人，很少想到改变自己。其实，改变世界应该先从改变自己开始。第二条箴言：不少老板都恨不得把员工改造成跟自己一样的人，其实最不像你的人、你最不喜欢的人，或许正是你的团队最需要的人。第三条箴言：性格本身并没有好坏之分，也没有谁对谁错。乐观和悲观对这个世界都有贡献，前者发明了飞机，后者发明了降落伞。第四条箴言：这是一个充斥着个性的时代，这是一个峥嵘着个性的社会，许多个性相差甚远的人都在适于自己的路上找到了自己最好的归宿。第五条箴言：个性是半个生命，丧失个性就是半个死亡。第只魔戒第一条箴言：中国人的问题是更重视历史，但缺少前瞻性的思维。其实我们更应该具有未来决定现在这样一种思考。第二条箴言：如果中国只变成一个世界工厂是不行的，我们的最大优势是人，但现在还只是重视数量而没重视质量。第三条箴言：社会认可是动态的，历史上有很多人就是生前不被社会认可的，像梵高的画，像马克思的思想。第四条箴言：个性化发展强调的是你自己的个性，是适合自己的途径，我切身的体会不是学识上的成长，而是精神上的成长。第五条箴言：科技发展的日新月异、信息的爆炸，使本领的地位比任何时代都高，本领恐慌比任何时代都更可怕。第六条箴言：在世纪，拥有创造性学习能力是最根本的应变之道。第只魔戒第一条箴言：在生活中所极力追求的，应该是按自己内心深处确认的人类的永恒价值，而不是流行的市场价值。第二条箴言：人的智慧力、道德力和意志力，是重要的“人格三要素”。这三种力量越强的人，越容易达到自我实现的最高境界。第三条箴言：高峰体验既是一种最佳状态，又是一种终极体验。经历了这种高峰体验的人，也就会产生这辈子没有白活的感觉。第四条箴言：物质需要属于匮乏性需要，它的满足引起的感觉是短暂的、肤浅的；自我实现需要是成长性需要，它的满足才会产生持久的、深刻的感觉。第五条箴言：第一流的菜汤比第二流的绘画更具有创造性。第只魔戒第一条箴言：任何职业生涯规划都不能对未来进行非常精确的预测，但人们可以进行环境分析、个人条件分析，然后在此基础上确定自己的目标。第二条箴言：评判职业成功与否没有统一的标准，这里有一个标准可做参考，即在实现目标的过程中快乐一定要多于痛苦。第三条箴言：人的自我实现就是人的创造性潜能的充分发挥，求知是自我实现的前提，求美是自我实现的过程。第四条箴言：职业生涯开发与管理讲求的是：只要开始，永远不晚；只要进步，总有空间。重要的不是目前所处的位置，而是迈出下一步的方向。第五条箴言：当你还没有把一件工作做好的时候，就没有资格说不喜欢；只有把工作做好了，甚至超过了领导的期望，你才有资格谈离开的问题。第只魔戒第一条箴言：职场革命引发了新的学习革命，所以我们需要对学习进行新的理解。第二条箴言：我们通常把学习当做传统教育的一部分，而不是把它当做工作的一部分，其实大多数人是一边工作一边学习的。第三条箴言：有好文凭就有好工作的观念正在受到质疑，人事主管们对学历并不特别看重，他们更看重的是有无经验、品质才能如何以及有没有创造性。第四条箴言：当你为自己的成功担负起责任时，工作之于人就变成了一次历险。我开始把生命看做是自己经营的一项事业。第五条箴言：教育应该提供的是一个市场，让每个人在里面找到相应的资源。要有多种多样的特点，而不能按一套模式进行。第六条箴言：不少专家谈起理论头头是道，可在培养自己孩子的问题上却一塌糊涂。对于培养孩子来说，没有人掌握了完美的方法。办公室白领经典描述办公室白领经典描述1：自我感觉最牛的人财务部员工老子不求人，人人求老子！于是乎，这帮狗屎们天天拽得好像自己是救世主是其他员工的再生父母一样，牛！超级牛！100牛！我活这么大了还真没看到过不牛的财务，这帮人其实在公司是同事们最不敢得罪、但更是最让人看不起，人际关系最差的一群人，当然，据我观察，也是离婚率最高的一类人。2：最有城府最有心计的人人力资源部员工每天的工作就是算计如何搞出用最小代价换取最大回报的提议来讨好老板，看谁不顺眼就想方设法算计如何在考核、薪酬奖金分配方面给他穿小鞋的鸟人。3：智商最高情商最差的人研发部员工技术过硬，为人木衲。上台发言三分钟搞不出一句话来，向领导汇报工作结结巴巴没个半小时理不出个头绪来。企业中最好管理的一群伪知识分子，可以被任意剥削，基本上不会反抗，或者从来就没有过反抗的意识4：最吊儿郎当和无耻的人销售部员工老板们财富的来源，老板们最想讨好的一群人，这群人其实也是最无耻公司内口碑最差却又人际关系最和谐的一群人。天天吊儿郎当的来公司报个到，调戏一下前台，和狐朋狗友打打电话，10点不到就开始琢磨找借口出门拜见客户，其实下午就是在家睡大觉，晚上则开始一天最疯狂和最性福的生活。不过虽然无耻，但因其八面玲珑，见人说人话，见鬼说鬼话，反而在公司中人缘最好。5：最表里不一内心最龌龊的人采购部员工天天在老板面前装孙子，天天在同事面前装老实，公司的任何办公室政治从不参与，老老实实，哈巴狗、老黄牛般不理尘世的卖力的工作着。其实这帮人，最敏感、最贪、最不把公司利益当一回事，吃着碗里看着锅里的是再正常不过的事情，你以为他们真的老实，真的不贪？老板你把他工资减掉一半试试，看他还干不干？呵呵，工资啊，对他们来说，毛毛雨而已，虽然从此以后有了更多表面的牢骚。6：最轻闲最没有上进心的人前台一部电话、一台打印机、一部传真、一台电脑、一张桌子、一小叠钞票就是工作的全部。每天75的时间上网聊QQ，15的时间琢磨晚上的活动偷偷照镜子化妆、挤青春痘，5的时间在工作，5的时间在传播小道消息。晚上到的厅转转，在那蹦的的女孩，除了15是学生MM，10是打工妹外，剩下的基本上都是这些文员了，即便现在不是，但以前肯定是。7：最没分量最窝囊的人行政部员工天天累得跟猪爬树一样，琐事最多，功劳最小，批评最多，所以导致牢骚也最多，因心情郁闷所以传播小道消息也最热衷，因不被承认，被人看不起，所以这群人内心最畸形。行政部经理表现最明显，行政助理和文员说白了就是他们蹂躏和发泄的极好对象。8：最计较最不安好心的人司机如果你得罪他们了，从此你申请派车急着外出时，司机告诉你车正巧坏了要去修；从此你在车上发的丁点牢骚，不出半天就会被添油加醋的传到老板耳里这还不算什么，最让人受不了的是，掐公司的汽油倒卖，和车修所的串通吃回扣，闲的时候借口修车外出陪女老乡，呵呵，龌龊的事情不少呢。9：最蚕古的员工客服部员工对客户要客客气气，对同事也得客客气气，有气只能哑巴吃黄连.说白了整个夹心饼干评价：2个字作孽.10：最风光却内心最煎熬的人当然是老板有一帮子难对付的员工，有变化莫测的外部市场，还有剪不断理还乱的内部协调和管理，或许还有个别养在外面的金丝雀。