实验内容实验内容录像：真菌、鸡胚接种录像：真菌、鸡胚接种示教：真菌、病毒的病变效应示教：真菌、病毒的病变效应操作：鸡胚接种、小鼠脑内接种操作：鸡胚接种、小鼠脑内接种1南医大微免实验(3)真菌真菌形态与结构形态与结构单细胞真菌单细胞真菌 圆形或卵圆形圆形或卵圆形 酵母菌酵母菌(yeast) 多细胞真菌多细胞真菌 菌丝和孢子菌丝和孢子 丝状菌丝状菌(filamentous fungus) 交织成团交织成团 或霉菌或霉菌(mold)二相性二相性(dimorphic)2南医大微免实验(3)真真 菌菌（fungus）大大 分分 生生 孢孢 子子3南医大微免实验(3)厚厚 膜膜 孢孢 子子4南医大微免实验(3)白假丝酵母菌（白色念珠菌）白假丝酵母菌（白色念珠菌） G+5南医大微免实验(3)新生隐球菌（新型隐球菌）新生隐球菌（新型隐球菌） 墨汁负染墨汁负染6南医大微免实验(3)病病 毒（毒（Virus）病毒感染的检测方法病毒感染的检测方法v细胞培养细胞培养病毒在敏感细胞内增殖引起细胞病变病毒在敏感细胞内增殖引起细胞病变 （CPE细胞病变效应；包涵体）细胞病变效应；包涵体）v动物接种动物接种选用敏感动物及适宜部位接种选用敏感动物及适宜部位接种 （乙脑病毒（乙脑病毒小白鼠脑内）小白鼠脑内）v鸡胚培养鸡胚培养孵化孵化9-12天的鸡胚，接种鸡胚不同部位天的鸡胚，接种鸡胚不同部位 （流感病毒（流感病毒尿囊腔）尿囊腔）7南医大微免实验(3)正常细胞正常细胞病毒感染细胞病毒感染细胞（CPE）8南医大微免实验(3)包涵体包涵体胞浆、胞核胞浆、胞核内出现的圆内出现的圆形或椭圆形、形或椭圆形、嗜酸或嗜碱嗜酸或嗜碱性的小体性的小体狂犬病毒包涵体狂犬病毒包涵体内基小体内基小体9南医大微免实验(3)病毒培养：鸡胚接种病毒培养：鸡胚接种鸡胚培养鸡胚培养 鸡胚绒毛尿囊膜、鸡胚绒毛尿囊膜、尿囊腔尿囊腔、羊膜腔、卵、羊膜腔、卵黄囊黄囊鉴定：病毒增殖，鸡胚发生异常变化或鉴定：病毒增殖，鸡胚发生异常变化或羊水、尿囊液出现羊水、尿囊液出现红细胞凝集红细胞凝集现象现象 意义：常用于意义：常用于流感病毒流感病毒等的分离培养等的分离培养10南医大微免实验(3)11南医大微免实验(3)12南医大微免实验(3)鸡胚接种鸡胚接种鸡胚在照蛋灯下鸡胚在照蛋灯下标出标出气室和气室和接种接种点点，接种接种点点一定要一定要避开避开胚体和胚体和大血管大血管。用用碘碘酒酒及及酒酒精精在在标标记记处处消消毒毒，用用打打孔孔器器按按先先气室后接种气室后接种点点的顺序打孔。的顺序打孔。用用注注射射器器倾倾斜斜插插入入鸡鸡胚胚23毫毫米米，注注入入病病毒毒0.2毫升。毫升。用溶化石蜡按用溶化石蜡按先接种先接种点点后气室后气室的次序封口的次序封口。鸡胚上注明鸡胚上注明班级、姓名、周一下午、班级、姓名、周一下午、C309等等鸡胚鸡胚置孵箱培养置孵箱培养72小时后收获。小时后收获。13南医大微免实验(3)实验报告实验报告画图画图鸡胚接种过程鸡胚接种过程14南医大微免实验(3)注意：注意： 复习所有内容下周考查复习所有内容下周考查15南医大微免实验(3)