红细胞血型血清学疑难问题傅启华红细胞血型系统l29个血型系统，260多个血型抗原l最具临床意义的：ABO,Rh表49-1红细胞血型系统的抗原、基因和染色体定位ISBT编号血型系统抗原数基因名染色体上基因定位001ABO4ABO9q34.1-34.2002MNS40GYPA、GYPB、GYPE4q28-31003P1P122q11.2-ter004Rh45RHD、RHCE1p34.2-36005Lutheran18LU19p12-13006Kell22KEL7q33007Lewis3FUT319p13.3008Duffy6FY1q22-23009Kidd3JK18q11-12010Diego7AE117q12-21011Yt2ACHE7q22012Xg1XGXp22.32013Scianna3SC1p22.1-36.2014Dombrock5DO12p12.1-13.2015Colton3AQP17p14016LandsteinerWiener3LW19p13.2-cen017Chido/Rodgers9C4A、C4B6q21.3018Hh1FUT119q13019Kx1XKXp21.1020Gerbich7GYPC2q14-21021Cromer10DAF1q32022Knops5CR11q32023Indian2CD4411p13024OK1OK19p13.2-ter025RAPH1MER211p15ABO血型系统ABO血型的形成红细胞血型血清学的内容红细胞血型鉴定不规则抗体筛选和鉴定交叉配血试验其它新生儿溶血病检查产前血型血清学检查溶血性输血反应实验室检查.ABO血型鉴定l正反定型玻片法试管法微量板法微柱凝胶试验（microcolumgeltest，MGT）不规则抗体筛选和鉴定l盐水l聚凝胺试验l抗人球蛋白试验l木瓜酶试验l柱凝集试验交叉配血试验盐水交叉配血试验不完全抗体交叉配血试验聚凝胺试验抗人球蛋白试验木瓜酶试验柱凝集试验新生儿溶血病检查l血型鉴定l不规则抗体筛选和鉴定l直接抗人球蛋白试验l游离抗体和释放抗体检测l血型血清学疑难问题的范围 异常或矛盾的ABO或Rh血型鉴定结果意外的、复杂的、有临床意义的抗体检测和鉴定冷性或温性反应自身抗体的分析药物诱发的血清学异常结果分析疑难配血疑难输血反应的血清学分析阳性DAT标本的处理疑难HDN的血清学分析异常抗原抗体反应格局的分析红细胞以外各类成分输血的交叉配合试验红细胞以外各类成分抗体的检测和鉴定其他解决血型血清学疑难问题的关键 原始记录、试剂、标本等资料的全面评估、分析和确认掌握技巧，对各种方法综合利用从病史中获得解决问题的珍贵线索可引起血清学问题的一些临床疾病 lDAT阳性类风关类风关l多凝集现象细菌感染细菌感染lA/B抗原表达减弱白血病白血病lABO异常卵巢囊肿卵巢囊肿l获得性B抗原细菌感染、结肠癌、肠梗阻细菌感染、结肠癌、肠梗阻lKell血型系统抗原抑制慢性肉芽肿病慢性肉芽肿病l溶血PNHPNH、红细胞酶缺乏、过度加热红细胞酶缺乏、过度加热l温性自身抗体癌、癌、HLEHLEl冷性自身抗体冷凝集素疾病、淋巴瘤、梅毒、病毒感染冷凝集素疾病、淋巴瘤、梅毒、病毒感染l串钱状凝集多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤lABO同种抗体缺乏或减弱低（无）丙种球蛋白血症低（无）丙种球蛋白血症l免疫性ABO抗体新生儿、妊辰新生儿、妊辰l自身（同种）抗N血液透析病人血液透析病人lHLA抗体经产妇、移植病人、多次输血者经产妇、移植病人、多次输血者lABO同种抗体的缺乏或减弱3 3岁新生儿，岁新生儿，7070岁老年人岁老年人药物的使用与血型血清学疑难问题 假凝集血浆扩张剂血浆扩张剂串钱状凝集右旋糖酐右旋糖酐混合外观红细胞输异型红细胞、骨髓（最近或过去输异型红细胞、骨髓（最近或过去）获得额外抗原同上同上DAT阳性输注输注/ /注射免疫球蛋白注射免疫球蛋白意外的同种抗体输注含同种抗体的血浆输注含同种抗体的血浆、输注过免疫球蛋白输注过免疫球蛋白以往输红细胞免疫以往输红细胞免疫意外的ABO同种抗体输注冷沉淀输注冷沉淀、因子因子浓缩剂、血小板浓缩剂、血小板血型血清学疑难问题解决技巧 选择和使用各类细胞选择和使用各类反应增强剂正确使用酶试剂：酶反应结果只能用肉眼判断。正确掌握反应温度：控制孵育温度（4、2225、37）在离心后保持相应温度预热技术正确使用各类抗人球蛋白试剂选择和使用各类中和和抑制技术正确判断各类反应结果正确使用各类试剂酶处理效应l用酶处理后，反应性能增强的红细胞血型：ABH、Rh、Lea、Leb、Ii、P1、Jka、Jkb、Vel、Coa等。l用酶处理后，反应性减弱或破坏的红细胞血型：M、N、S、Fya、Fyb、Xga、Pr1、Pr2、Ch、JMH、Tn等。一些血型抗体的性质l盐水反应性抗体：抗A、抗B、抗H、抗I、抗P1、抗M、抗N、抗S、抗Lua、抗Lea、抗Leb以及Rh、Kell血型系统的一些抗体。l溶血性抗体：抗Lea、抗Leb、Vel、P+P1+Pk(Tja)、A、B、I。反应的最适温度 l4l抗A、抗B、抗H、抗I、抗N、抗P1l1618l抗Lea、抗Leb、抗Ml37l其他具有剂量效应的血型抗原 lRh:C、c、E、elDuffy:Fya、FyblKidd:Jka、JkblMNSs:M、N、S、s能以可溶性状态存在的血型抗原 ABH分泌型的唾液等Lewis唾液、Le(a+)或Le(b+)个体的血浆/血清I奶P1、Pk包虫囊液、鸽子蛋白ABO血型鉴定的疑难问题l正反定型矛盾ABO正反定型矛盾 抗体问题正定型反定型抗A抗B抗A.BA1RBCBRBC00000抗体减弱或不产生原因l新生儿（46个月）l老年人l白血病、淋巴瘤患者l使用免疫抑制剂的患者l免疫缺陷患者l骨髓移植患者ABO正反定型矛盾抗原问题正定型反定型抗A抗B抗ABA1细胞B细胞l4+4+04+获得性“B”现象l由肠梗阻、结肠或直肠癌和其他低位肠道有关的疾病引起。l肠壁渗透性增加，细菌多糖吸附到红细胞上产生B特异性。l也见于普通变形杆菌引起的败血症。红细胞血型抗原减弱或消失lA亚型和/或B亚型l白血病、何杰金氏病等l某些疾病引起的血型物质增多，如胃癌，胰腺癌ABO正反定型矛盾血浆异常（1）：缗钱状凝集正定型反定型抗A抗B抗ABA1细胞B细胞4+2+4+24+缗钱状凝集原因l白/球蛋白倒置l血浆扩容剂，如右旋糖酐l华通氏胶状物（Whartonsjelly)：存在于脐带血中。ABO正反定型矛盾血浆异常（2）：多凝集正定型反定型抗A抗B抗ABA1细胞B细胞2+1+4+44+多凝集现象原因l病人红细胞被细菌或病毒感染，使T抗原激活。l所有正常人血清均含有T抗体。l反应强度取决于血清中T抗体的量。ABO正反定型矛盾血浆异常（3）：丫啶黄抗体正定型反定型抗A抗B抗ABA1细胞B细胞03+044+ABO正反定型矛盾血浆异常（4）：不规则抗体正定型反定型抗A抗B抗ABA1细胞B细胞4+4+4+ABO正反定型矛盾血浆异常（5）：其他原因l高效价冷凝集素l抗A1（A2,A2B型）l抗H（A1,A1B型）ABO正反定型矛盾的处理方法l重复所有试验l直接抗人球蛋白试验l受检RBC用N.S洗3次，用抗A、抗B、抗A.B、抗H和抗A1检查。l用A1、A2、B、O细胞反定型l抗体筛选l自身对照处理方法个案分析（1）超量血型物质l用N.S洗涤被检红细胞多次，将红细胞配成盐水溶液，即可得到正确的正定型。处理方法个案分析（2）获得性“B”现象l将抗B试剂酸化到pH6.0，就可区别“真B”和获得性“B”。l酸化的抗B试剂仅与“真B”反应。处理方法个案分析（3）缗钱状凝集l用N.S洗涤被检红细胞，或在反应管中滴加12滴N.S。l脐带血用N.S洗涤68次。处理方法个案分析（4）冷凝集l将反应管置37C水浴，晃动35minl冷吸收放散试验交叉配血中的疑难问题l交叉配血不合主侧交叉配血不合l受血者因素存在不规则抗体（同种抗体、自身抗体、冷凝集素等）l献血者因素红细胞被致敏次侧交叉配血不合l受血者因素红细胞被致敏l献血者因素存在不规则抗体双侧交叉配血不合l多见于自身免疫性溶贫患者l高冷凝集素患者或供血者交叉配血不合的处理l复核受血者和供血者血型鉴定结果l抗体筛选试验和抗体鉴定试验l抗人球蛋白试验l吸收放散试验l自身交叉反应试验l试剂问题血型血清学试验应做项目lABO血型鉴定（正反）lRh血型鉴定l抗体筛选试验l盐水交叉配血试验l介质交叉配血试验（酶、聚凝胺、抗人球蛋白等）血型血清学试验中应该注意的一些问题l盐水：pH值非常重要，应在6.57.5之间。不然，可以引起假阴性。l木瓜酶试验：木瓜酶可以破坏MN、Ss、Fya、Fyb和Xga等抗原。l聚凝胺试验：聚凝胺对Kell血型系统的抗原抗体反应不敏感；肝素可以中和聚凝胺。输血相容率 l检查项目输血总相容率（%）l不做检查64.4lABO定型99.4lRh定型99.8l抗体筛选99.94l交叉配血99.96谢谢！