免疫学进展二柳忠辉柳忠辉教授教授 博士生导师博士生导师吉林大学基础医学院免疫学系吉林大学基础医学院免疫学系 医学免疫学免疫学 (Immunology) 是研究免疫系统结构与功能的学科，涉及免疫识别、免疫应答、免疫耐受与免疫调节等免疫学基本理论，以及免疫在相关疾病发生发展中的作用、在疾病诊断、治疗与预防中的应用。免疫学不仅仅局限于基础免疫学理论研究与免疫学技术的建立，其最大特点是与其他生命科学的广泛交叉，进而极大地推动了免疫学理论与技术在临床疾病发病机制研究以及疾病预防治疗中的应用。现代免疫学研究主要包括三个方面，一是基础免疫学，二是临床免疫学，三是免疫学技术。 基础免疫学免疫系统的形成机制、免疫细胞组成及不同种类免疫细胞和亚群的形成过程与相互调控机制；抗原的结构特性与免疫应答；免疫细胞感受外界危险信号、识别抗原的物质结构基础；天然免疫应答的细胞与分子机制；获得性免疫应答的细胞与分子机制；免疫耐受及免疫调控的方式与机制；免疫效应分子的结构、功能与作用机制；免疫细胞的迁移与定居机制; 免疫记忆形成的细胞与分子机制。 临床免疫学涉及的内容非常广泛，主要围绕疾病如感染性疾病（急性感染与免疫病理损伤机制，慢性感染与免疫耐受机制）、肿瘤（肿瘤免疫逃逸机制与肿瘤防治新方法）、自身免疫性疾病与过敏性疾病以及器官移植排斥（预警与免疫药物和免疫调控）等的发生发展机制、诊断与预后分析、治疗与预防措施开展的应用性研究。 固有免疫识别的物质基础热点领域是天然免疫(Innate immunity) 识别机制，主要是研究抗原提呈细胞（DC、M）及NK等如何识别病原体感染及随后触发的免疫与炎症应答过程和调控。 固有免疫（innate immunity） 是指机体在种系发生和进化过程中逐渐形成是指机体在种系发生和进化过程中逐渐形成的一种天然免疫防御功能，构成机体抵御病原微的一种天然免疫防御功能，构成机体抵御病原微生物入侵的第一道防线。固有免疫是与生俱来的，生物入侵的第一道防线。固有免疫是与生俱来的，可稳定遗传，因此又称可稳定遗传，因此又称天然免疫（天然免疫（natural natural immunityimmunity）；因其作用广泛、可以同时识别多种病；因其作用广泛、可以同时识别多种病原体，通常又称原体，通常又称非特异性免疫（非特异性免疫（nonspecific nonspecific immunityimmunity）。 是生物体在长期种系进化过程中逐渐形成的是生物体在长期种系进化过程中逐渐形成的天然免疫系统，主要由天然免疫系统，主要由组织屏障组织屏障、固有免疫细胞固有免疫细胞及及固有免疫分子固有免疫分子构成，其作用机制主要是通过固构成，其作用机制主要是通过固有免疫的有免疫的模式识别（模式识别（pattern recognitionpattern recognition）来区分来区分“ “自己自己” ”和和“ “非己非己” ”，进而启动固有免疫应答。，进而启动固有免疫应答。 固有免疫系统（innate immune system） 一、屏障结构一、屏障结构 （一）皮肤黏膜一）皮肤黏膜 1. 1. 物理屏障物理屏障 2. 2. 化学屏障化学屏障 3. 3. 微生物屏障微生物屏障 （二）血（二）血- -脑屏障脑屏障 （三）血（三）血- -胎屏障胎屏障 （四）血（四）血- -胸腺屏障胸腺屏障 参与固有免疫的组分参与固有免疫的组分病原体 物理屏障 化学屏障 微生物屏障 皮肤黏膜 皮肤黏膜 皮肤黏膜 分泌物 抑菌杀菌非致病菌 致病菌 二、固有免疫的效应细胞二、固有免疫的效应细胞 固有免疫细胞主要包括单核固有免疫细胞主要包括单核巨噬细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞、中性粒细胞、树突状细胞、NKNK细胞、细胞、NKTNKT细胞、细胞、TT细胞、细胞、B1B1细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞和细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞等。嗜酸性粒细胞等。 三、固有免疫的效应分子三、固有免疫的效应分子 （一）补体（一）补体 （二）细胞因子（二）细胞因子 （三）溶菌酶（三）溶菌酶 （四）抗菌肽（四）抗菌肽（五）其它效应分子：（五）其它效应分子： 参与固有免疫的其他效应分子还有乙型溶素、参与固有免疫的其他效应分子还有乙型溶素、吞噬细胞杀菌素、吞噬细胞杀菌素、NONO、活性氧（、活性氧（ROIROI）、）、C C反应蛋反应蛋白和组蛋白等。白和组蛋白等。 v天然免疫是由能够识别病原相关分子模式(Pathogen-associated molecular patterns, PAMPs)的受体介导的，这些受体统称为模式识别受体(Pattern recognition receptor, PRR)。PRR包括TLR受体及识别胞内危险信号的NLR (NOD-like receptor)。v模式识别受体（pattern recognition receptor，PRR）是指存在于细胞表面或细胞内以及血清中的一类能够直接识别病原体及其产物或宿主死亡细胞及衰老损伤细胞表面某些共有的特定分子结构的受体。固有免疫细胞的模式识别受体 PRR PRR所识别的分子是病原体赖以生存且变化较所识别的分子是病原体赖以生存且变化较少的保守结构即少的保守结构即病原体相关分子模式病原体相关分子模式（pathogen pathogen associated molecular patternassociated molecular pattern，PAMPPAMP）及）及损伤相关损伤相关分子模式分子模式（danger associated molecular patterndanger associated molecular pattern，DAMPDAMP），如细菌的脂多糖和病毒的双链），如细菌的脂多糖和病毒的双链RNARNA。PRR识别的分子 v1. 病原体相关分子模式PAMPv 1）病原微生物所特有：宿主不产生，固有免疫细胞可通过PRR对PAMP识别，是区别“自身”与“非己”的物质基础；v 2）同一种类微生物表达相同的PAMP：该分子高度保守，即多种微生物可具有相似的PAMP；v 3）微生物生存或致病所必须。 v2. 损伤相关分子模式DAMPv DAMPDAMP是是指指组组织织或或细细胞胞损损伤伤而而产产生生的的内内源源性性模模式式分分子子。感感染染、缺缺氧氧、应应激激、无无菌菌性性炎炎症症、坏坏死死或或凋凋亡亡均均可可导导致致组组织织损损伤伤，细细胞胞死死亡亡或或损损伤伤细细胞胞的的胞胞内内成成分分一一旦旦释释放放到到胞胞外外或或细细胞胞外外基基质质降降解解，即即可可形形成成DAMPDAMP。如如热热休休克克蛋蛋白白（HSPHSP）、尿酸、肝癌来源生长因子（尿酸、肝癌来源生长因子（HDGFHDGF）等。）等。 炎性复合体（Inflammasome ）近年研究发现多种PAMPs、DAMPs (Danger-associated molecular patterns) 等都可以活化炎性复合体。 NLRPs（NLR proteins）也称作NALPs，是NLRs中最大的亚家族，由14个成员组成。NLRPs活化后与Caspases-1及接头蛋白组成多分子复合物，称炎性复合体（inflammasome）。炎性复合体活化的caspase-1通过对IL-1和IL-18前体进行剪切，进而释放大量成熟的IL-1和IL-18参与炎症应答，炎性复合体对促炎性细胞因子的产生具有重要调节作用。LPS、Bacterial RNA、Poly I:C等PAMPs、以及ATP、MSU、ROS等DAMPs均能活化NALP3 炎性复合体。 炎性复合体的形成及其作用 固有免疫应答的主要特点 v1. 1. 泛特异性泛特异性v2. 2. 反应迅速反应迅速v3. 3. 无免疫记忆无免疫记忆v4. 4. 参与并调节适应性免疫应答参与并调节适应性免疫应答 活化吞噬细胞作用活化固有杀伤细胞作用病毒滴度活化T杀伤细胞作用病毒感染后天数 免疫细胞新型亚群的研究淋巴细胞分化发育与成熟机制不仅是基础免疫学的重要研究内容，也是阐述免疫性疾病发生发展机制所必需的研究内容，包括T细胞的发育、B 细胞的形成过程与抗体产生及类别转换等。调节性T细胞（regulatory T cell, Treg）， 在人体正常免疫系统中天然存在的一群免疫抑制性T 细胞亚群。如同其他T 细胞，由胸腺发育为成熟的天然调节性T 细胞（natural Treg, nTreg），并移至外周免疫器官，nTreg 占胸腺T 细胞的5%。外周成熟的初始CD4+Th0 细胞，在抗原刺激下，可分化为诱导性Treg（inducible Treg, iTreg ）。 nTreg ，高表达FoxP3，主要通过分泌TGF和表面CTLA-4 发挥抑制功能。iTreg 又分为Tr1 和Th3，Tr1 不表达FoxP3，高分泌IL-10，在肠道黏膜免疫调控中发挥重要作用。Th3 分泌TGF 和IL-10，在口服耐受中发挥重要调节作用。除此还发现更多精细的诸如CCR6+Treg 等。 调节性T细胞 Th17是最近研究发现的一类不同于Th1、Th2 和Treg的CD4+ T细胞亚群，在自身免疫性疾病发病中发挥重要的作用。T17 细胞亚群的发现，丰富了T细胞亚群的种类以及对T细胞分化的认识，增进了人们对T 细胞与疾病关系的了解。越来越多的研究证明IL-17 / IL-23途径在炎症性肠病(Inflammatory bowel disease , IBD) 、类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis, RA)、过敏性疾病（如哮喘）以及病原体感染等的发生发展中发挥重要作用。 滤泡性辅助T细胞(T follicular helper cells, Tfh)是一群区别于Th1及Th2的新型T 细胞亚群，可表达趋化因子受体CXCR5，定位于淋巴组织的B淋巴细胞滤泡，并通过分泌IL-21 促进体液免疫应答。B 细胞作为产生保护性抗体参与体液免疫的细胞，亦可分化为不同亚群参与到机体的免疫调控过程。对于具有不同表型、功能特点的B 细胞亚群，特别是具有免疫抑制功能的调节性B 细胞的研究正得到越来越多的关注。最近证实存在一组能分泌IL-10 的B细胞(B10 cells) ，其在体内的发育及功能成熟需要抗原受体的多样性以及TLR活化信号，研究发现B10 cells能抑制T 细胞介导的过敏性应答反应。 NK/NKT细胞在天然免疫中起重要作用，最近的研究显示其参与了皮肤与粘膜免疫应答，NKT细胞亚群的深入认识，为我们进行细胞表面标志及其与细胞功能关系的研究提供了全新的思路与视角。肠道粘膜作为机体接触外界抗原种类最多也最为频繁的环境，孕育了一道坚固而灵活的粘膜免疫防线。 NK/NKT细胞通过分泌促炎症因子和介导细胞杀伤执行着固有免疫细胞的使命。 NK细胞与肿瘤细胞 M1及M2巨噬细胞巨噬细胞（Macrophages, M）是由血液中单核细胞迁入组织后分化而成的成熟细胞。巨噬细胞在不同微环境中可以发生不同性质的活化，成为具有不同表面标志和功能特征的亚群：经典活化的巨噬细胞 （classically activated macrophage），又称M1型；替代活化的巨噬细胞 （alternatively activated macrophage），又称M2型。M1型巨噬细胞具有杀灭微生物、参与炎症及抗肿瘤作用。M2型巨噬细胞具有很强的免疫调节、组织修复及抗炎能力。 M1及M2巨噬细胞 肿瘤相关巨噬细胞（TAM）1863 年Rudolf Virchow 首次发现肿瘤组织中有大量炎症细胞浸润，其中浸润到肿瘤内的巨噬细胞即为肿瘤相关巨噬细胞（tumorassociated macrophages，TAM）。以前多认为TAM 是一种重要的抗肿瘤效应细胞。1992 年，Mantovani 等提出了著名的“巨噬细胞平衡假说”，指出TAM 具有杀伤肿瘤和促瘤生长的双重作用。 免疫预防与治疗(Immunotherapy)免疫学研究的根本目的是为人类健康服务，希望能够研制出针对重大疾病例如恶性肿瘤、传染性疾病等有效治疗方法，也为自身免疫性疾病等难治性疾病的治疗带来曙光。通过增强或者抑制免疫功能的免疫治疗方法主要是：疫苗、单抗、基因工程细胞因子等的临床应用已经显示出良好疗效。肿瘤疫苗的应用理念也发生了改变，以2006年6月8日美国FDA正式批准美国默克公司(Merck) 生产HPV 疫苗作为宫颈癌疫苗(Gardasil) 预防为标志的预防疫苗应用。 快速疫苗的制备，2009 年H1N1流感疫苗的上市有效控制全球范围内的甲流蔓延。治疗性疫苗受到越来越多的重视：如肿瘤治疗的树突状细胞疫苗已经在临床试用中显示出良好疗效，目前治疗性疫苗的研制工作在慢性乙型肝炎、类风湿性关节炎等多个领域也广泛开展。新一代高效抗体药物不断涌现，在器官移植、白血病、自身免疫病等多种疾病中发挥显著疗效，2009 年美国FDA新批准上市的抗TNF2单克隆抗体Golimumab，已被用于临床治疗风湿性关节炎、强直性脊柱炎等。 常用疫苗类型1灭活疫苗2减毒活疫苗 3类毒素 （toxiod）4亚单位疫苗 （subunit vaccine）5结合疫苗（conjugate vaccine）：使TI抗原 成为TD抗原。 6. 重组载体疫苗（recombinant vector vaccine） 或DNA疫苗(DNA vaccine) 疫苗研究情况 人肿瘤特异性抗原的筛查 人肿瘤特异性抗原表位发现 免疫治疗研究的现状 治疗性疫苗基因疫苗： 2010年，美国FDA批准了首个用于治疗人类黑色素瘤的DNA 疫苗。细胞疫苗： 2010 年4 月， 美国食品药品监督管理局（FDA） 正式批准Dendreon 制药公司开发的前列腺癌疫苗Provenge (Sipuleucel-T) 的上市申请。该疫苗以患者的自体树突状细胞荷载前列腺相关抗原，致敏后转输回机体，用于诱导增强的细胞免疫应答，攻击体内肿瘤。 免疫细胞治疗淋巴因子激活的杀伤细胞（lymphokine activated killer cell, LAK） 肿瘤浸润淋巴细胞（tumor infiltrating lymphocytes, TIL） 细胞因子诱导的杀伤细胞（Cytokine induced killer cell, CIK） 细胞毒性T细胞（Cytotoxic T lymphocytes，CTL） 针对TAM建立的肿瘤的治疗 针对CTLA-4免疫抑制分子建立的CTL细胞治疗肿瘤方案 用于肿瘤治疗的基因工程抗体 FDA批准的用于治疗恶性肿瘤的抗体Rituximab（Rituxan）：针对CD20抗原的嵌和抗体，治疗淋巴瘤Trastuzumab（Herceptin）：人源化的鼠IgG1抗体针对人表皮生长因子受体，治疗乳腺癌Mylotarg：针对CD33的人源化抗体与化疗药物的交联物，治疗淋巴瘤Alemtuzumab（CAMPATH）：针对CD52人源化抗体，治疗淋巴瘤。 细胞因子治疗INFEPOCSFIL-2免疫增强剂：非特异性免疫激活剂也是免疫治疗的研究方向之一。 IFNIFN肝炎、白血病肝炎、白血病( (毛白血病效果好毛白血病效果好) )、AIDSAIDS、癌症、癌症IFNIFN多发性硬化症、抗病毒多发性硬化症、抗病毒G-CSFG-CSF粒细胞减少症、自身骨髓移植粒细胞减少症、自身骨髓移植M-CSFM-CSF化疗导致的白细胞减少症、再障、自身骨髓移植化疗导致的白细胞减少症、再障、自身骨髓移植GM-CSFGM-CSF血细胞减少症、再障、自身骨髓移植、免疫缺陷血细胞减少症、再障、自身骨髓移植、免疫缺陷EPOEPO肾性贫血、癌症或化疗所致贫血、失血后贫血肾性贫血、癌症或化疗所致贫血、失血后贫血IL-2IL-2癌症、免疫缺陷、疫苗佐剂癌症、免疫缺陷、疫苗佐剂IL-11IL-11放化疗所致的血小板减少症放化疗所致的血小板减少症EGFEGF烧伤、溃疡烧伤、溃疡( (外用药，在中国应用外用药，在中国应用) )bFGFbFGF烧伤、外周神经炎烧伤、外周神经炎( (外用药，在中国应用外用药，在中国应用) )已批准上市的细胞因子药物 免疫治疗失败的原因抗原的认识不足，免疫治疗要发挥治愈疾病的作用，需要对抗原的高度识别，具有高度的特异性。体内免疫耐受或免疫逃避作用削弱了免疫治疗效应。体内抑制性分子和细胞的存在 。持续性感染、炎癌转变 。个体化治疗和综合性治疗。 谢谢！吉林大学基础医学院