自体血小板细胞治疗：自体血小板细胞治疗：理论和临床应用理论和临床应用南方医科大学国际代谢病中心东莞南方医大代谢医学研发有限公司n n血小板简介血小板简介n n血小板细胞治疗的基本流程血小板细胞治疗的基本流程n n血小板细胞治疗的临床应用实例血小板细胞治疗的临床应用实例n n血小板细胞治疗的优点血小板细胞治疗的优点血小板细胞治疗内容纲要血小板简介n n血小板（platelet）是哺乳动物血液中的天然存在的有形成分之一。n n由骨髓中成熟的巨核细胞裂解，胞质脱落而形成n n正常人血液中的血小板浓度为100300109L红色为红血球；绿色为白血球；黄色为血小板。血小板血小板n n血小板的主要功能是凝血和止血。 n n具有修复血管，保护血管内皮、参与内皮修复、防止动脉粥样硬化的作用。血小板的生理功能血小板的生理功能血小板的活化血小板的活化n n血小板的功能是通过血小板活化血小板活化过程过程而实现的：粘附-变形-释放-聚集。反应中所释放的颗粒内容物会引发许多生物学效应。多种因多种因素诱导素诱导多种生长多种生长因子因子血小板的活化血小板的活化n n纤维蛋白原、纤维蛋白原、n n血小板第血小板第4 4因子、因子、n n组织蛋白酶组织蛋白酶A A、n n组织蛋白酶组织蛋白酶D D、n n酸性水解酶等酸性水解酶等n n多种生长因子和细胞因子多种生长因子和细胞因子多种生长因子和细胞因子多种生长因子和细胞因子 n n5 5羟色胺、羟色胺、n nADPADP、n nATPATP、n n钙离子、钙离子、n n肾上腺素、肾上腺素、n n抗血纤维蛋白酶、抗血纤维蛋白酶、n n焦磷酸等。焦磷酸等。血小板颗粒致密颗粒活化n n血小板内有超过30种种生长因子被确认。名称名称名称名称英文英文英文英文功效功效功效功效血小板衍生生长因子Platelet derived growth factor, PDGF 促进多种细胞增殖生长，诱导成纤维细胞趋化和有丝分裂，调节胶原酶分泌和胶原合成。转化生长因子Tansforming growth factor-beta, TGF- 诱导内皮细胞趋化和血管生成，调节其他生长因子的促有丝分裂效应，抑制巨噬细胞和淋巴细胞的增殖。表皮生长因子Epidermal Growth Factor, EGF 诱导内皮细胞趋化和血管生成，调节胶原合成，刺激内皮细胞、间质细胞增殖。血管内皮生长因子Vascular endothelial growth factor, VEGF 刺激血管内皮细胞的有丝分裂和血管的发生，提高单层内皮的通透性。碱性成纤维细胞生长因子Basic fibroblast growth factor, bFGF 促进软骨细胞和成骨细胞的生长和分化，促使间质细胞、软骨细胞和成骨细胞的有丝分裂。纤维母细胞生长因子Fibroblast growth factor, FGF 刺激细胞生长，还促进血管再生，胶原蛋白合成和伤口收缩胰岛素样生长因子-1Insulin-like growth factor 1, IGF-1 加强胶原蛋白的合成，促进成纤维细胞分化。血小板释放的血小板释放的生长因子和细胞因子（1）n n血小板活化释放多种生长因子，这些局部存在的高浓血小板活化释放多种生长因子，这些局部存在的高浓度生长因子，能促进周围度生长因子，能促进周围细胞的再生和生长细胞的再生和生长。n n能够促进局部伤口的愈合治疗，且快速简便，安全无能够促进局部伤口的愈合治疗，且快速简便，安全无副作用。副作用。血小板释放的血小板释放的生长因子和细胞因子（2）血小板细胞治疗的方法血小板细胞治疗的方法- PRP技术技术 (Platelet Riched Plasma) n nPRP是利用自体来源自体来源的血液制作的富含血富含血小板小板和生长因子生长因子的高浓度血浆。n n这些因子能促进创伤愈合、细胞的增殖、诱导分化、有助组织形成。PRP技术技术 (Platelet Riched Plasma)血小板细胞治疗的基本流程（血小板细胞治疗的基本流程（1）n n方案1n n方案2血小板分离血小板分离和浓缩和浓缩血小板活化血小板活化制备血小板制备血小板凝胶凝胶临床应用：临床应用：溃疡、溃疡、伤口等外敷伤口等外敷血小板分离血小板分离和浓缩和浓缩血小板活化血小板活化分离生长因子分离生长因子上清上清临床应用：临床应用：注射治疗注射治疗自自体体血血液液制备凝胶制备凝胶凝血酶凝血酶血小板细胞治疗的基本流程（血小板细胞治疗的基本流程（2）n n方案1外敷血小板细胞治疗的基本流程（血小板细胞治疗的基本流程（2）n n方案2活化活化注射血小板细胞治疗的应用血小板细胞治疗的应用临床应用领域临床应用领域n n在发达国家和地区，该技术已经运用到各种在发达国家和地区，该技术已经运用到各种外科、烧伤科和皮肤科外科、烧伤科和皮肤科外科、烧伤科和皮肤科外科、烧伤科和皮肤科等等的治疗的治疗上上 ，且取得很好的疗效。，且取得很好的疗效。糖尿病足溃疡糖尿病足溃疡12各种原因引起的难治性伤口不愈各种原因引起的难治性伤口不愈防止脱发，毛发移植防止脱发，毛发移植防止脱发，毛发移植防止脱发，毛发移植64颌面外科、骨科手术颌面外科、骨科手术颌面外科、骨科手术颌面外科、骨科手术3牙科损伤修复牙科损伤修复牙科损伤修复牙科损伤修复7美容、抗衰老美容、抗衰老美容、抗衰老美容、抗衰老5肌运动损伤的修复肌运动损伤的修复肌运动损伤的修复肌运动损伤的修复1、糖尿病足溃疡、糖尿病足溃疡糖尿病患者由于合并糖尿病患者由于合并神经病变神经病变神经病变神经病变及各种不同程度末及各种不同程度末梢梢血管病变血管病变血管病变血管病变而导致下肢感染、溃疡形成和（或）深而导致下肢感染、溃疡形成和（或）深部组织的破坏部组织的破坏 。表现为足部麻木，感觉迟钝、发冷、疼痛等。表现为足部麻木，感觉迟钝、发冷、疼痛等。糖尿病足糖尿病足n n中国目前有9200万的糖尿病病人，糖尿病足作为糖尿病患者常见的慢性并发症之一.约占糖尿病患者总数的0.9%至至1.7%，在老年人中发病率为14.5%至至20.8%。n n许多糖尿病患者因有足溃疡而截肢，截肢截肢术成为最终治疗足溃疡不愈合的无奈选择术成为最终治疗足溃疡不愈合的无奈选择糖尿病足的发病率糖尿病足的发病率n n全身治疗：药物控制血糖、降低血酯，扩张血管，营养神经，全身治疗：药物控制血糖、降低血酯，扩张血管，营养神经，抗感染。抗感染。n n局部治疗：抗感染，清创，敷料覆盖。局部治疗：抗感染，清创，敷料覆盖。n n对难治性溃疡及内科治疗不佳时进行外科治疗、自体皮瓣转对难治性溃疡及内科治疗不佳时进行外科治疗、自体皮瓣转移或移植、血管介入、动脉重建术，乃至上述治疗无效时进移或移植、血管介入、动脉重建术，乃至上述治疗无效时进行截肢术。行截肢术。糖尿病足传统治疗糖尿病足传统治疗-全身治疗和局部治疗全身治疗和局部治疗n n活化的血小板能释放出多种生长因子，例如血小板活化的血小板能释放出多种生长因子，例如血小板衍生生长因子衍生生长因子-BB-BB（PDGF-BBPDGF-BB）、血管内皮生长因）、血管内皮生长因子（子（VEGFVEGF）、胰岛素样生长因子（）、胰岛素样生长因子（IGF-1IGF-1）、内皮生）、内皮生长因子（长因子（EGFEGF） 和转化生长因子（和转化生长因子（TGF-1TGF-1）等。等。n n 这些生长因子已被证实在单独应用或联合应用时这些生长因子已被证实在单独应用或联合应用时可可显著加速软组织愈合显著加速软组织愈合。n n用自体血小板凝胶覆盖溃疡伤口，用自体血小板凝胶覆盖溃疡伤口，局部释放的高浓局部释放的高浓度生长因子会大大促进伤口的愈合速度度生长因子会大大促进伤口的愈合速度。YUAN Nan-bing ，2009 40(2)血小板凝胶治疗糖尿病足溃疡治疗机制血小板凝胶治疗糖尿病足溃疡治疗机制n n伤口久治不愈的原伤口久治不愈的原因主要是：因主要是：1.1.反复感染导致伤口持续溃反复感染导致伤口持续溃烂；烂；2.2.创面局部生长因子数量减创面局部生长因子数量减少；少；3.3.活性降低，多种因子间网活性降低，多种因子间网络调节失控。络调节失控。治疗机制治疗机制n nPRP PRP 治疗：治疗：1. 1.作为作为化学趋化剂化学趋化剂趋化炎性细胞与组织修复细胞，趋化炎性细胞与组织修复细胞，为创面杀菌以及后期修复创造条件；为创面杀菌以及后期修复创造条件；2. 2.含含多种生长因子，多种生长因子，直接作用于组织修复细胞上生直接作用于组织修复细胞上生长因子受体，通过其促分裂效应加快细胞周期转长因子受体，通过其促分裂效应加快细胞周期转变来变来促进创面修复促进创面修复；3. 3.激活上调组织修复激活上调组织修复细胞上生长因子受体活性，细胞上生长因子受体活性，加加快信号传递快信号传递。n n疗效：疗效：1. 1.促进机体抗感染，加速促进机体抗感染，加速伤口修复进程；伤口修复进程；2. 2.高浓度生长因子促修复；高浓度生长因子促修复；3. 3.参与创伤修复的因子相参与创伤修复的因子相互作用增强；互作用增强；血小板凝胶治疗血小板凝胶治疗糖尿病足临床适应症：临床适应症：年龄1875岁的慢性糖尿病足溃疡病患者型或型糖尿病患者空腹血糖10mmol/L持续2至52周至少一处深达皮下的足部皮肤溃疡，且面积在1-20cm2排除对象：病人有对辅料过敏史；妊娠期孕妇。Marcus Grgen，EWMA Journal 2008, 8(2): 5-9 n n血小板凝胶治疗糖尿病足溃疡，临床血小板凝胶治疗糖尿病足溃疡，临床总有效率为总有效率为总有效率为总有效率为50-50-8585%。n n溃疡愈合时间缩短，创面痊愈率提高，经济负担减轻，溃疡愈合时间缩短，创面痊愈率提高，经济负担减轻，没有副作用报道。没有副作用报道。血小板凝胶治疗血小板凝胶治疗糖尿病足溃疡Seong-Ho Jeong, M.D. Plastic and Reconstructive Surgery March 2010血小板凝胶治疗血小板凝胶治疗糖尿病足溃疡（1）治疗后5周手术前清创处理后治疗后3天治疗后3周治疗后7周血小板凝胶治疗血小板凝胶治疗糖尿病足溃疡（2）治疗前2周后5周后8周后10周后血小板凝胶治疗血小板凝胶治疗糖尿病足溃疡（3）治疗前2周后7周后5周后2、各种原因引起的难治、各种原因引起的难治性伤口不愈性伤口不愈血小板凝胶治疗慢性难愈性伤口2周后4周后7周后治疗前3、口腔牙科损伤修复、口腔牙科损伤修复PRP应用于口腔医学应用于口腔医学n n近年来,PRP开始用于口腔医学中,主要为局部应用,用于促进组织尤其是骨组织的修复再生,具有良好的应用前景。n nWhitman(1997)Whitman(1997)率先将自体率先将自体PRPPRP用于口腔科用于口腔科, ,由于由于PRPPRP中含有大中含有大量骨再生所需的生长因子量骨再生所需的生长因子, ,且各生长因子是自身形成的且各生长因子是自身形成的, ,因此因此PRPPRP引起了骨缺损修复者的关注。引起了骨缺损修复者的关注。n nPRPPRP可用于治疗牙周骨缺损、拔牙伤口、上颌窦底扩增移植、可用于治疗牙周骨缺损、拔牙伤口、上颌窦底扩增移植、植牙区骨不足和种植体暴露等。植牙区骨不足和种植体暴露等。GruberR, Varga F, J.Clin Oral ImplantsRes, 2002, 13(5): 529-535.Camargo PM, PeriodontRes, 2002, 37(4): 300-306.PRP可用于口腔疾病治疗4、颌面外科、骨科手术、颌面外科、骨科手术n nPRP可促进体外培养的成骨细胞及成骨样细胞增殖。GruberR,VargaF,FischerMB,et al.ClinOralImplantsRes,2002,13(5):529-535.PRP可促进骨愈合SubaSuba等应用等应用-TCP-TCP复合复合PRPPRP治治疗犬牙槽骨缺损，研究表明疗犬牙槽骨缺损，研究表明PRPPRP在体内具有在体内具有促进骨再生促进骨再生促进骨再生促进骨再生的功能，的功能，其促进骨再生的作用早期较为明其促进骨再生的作用早期较为明显。显。PRPPRP在在促进骨延长促进骨延长促进骨延长促进骨延长中也有重中也有重要意义要意义FennisJP在28只山羊的下颌骨形成骨缺损,将截除的骨块内骨松质去除,分别用PRP+髂骨碎骨和单纯髂骨碎骨充填骨腔,然后将骨块原位回植,接骨板固定,通过3w3m的观察发现,PRP能促进骨的生长。PRP促进颌骨修复5、肌腱炎、肩周炎、关节、软、肌腱炎、肩周炎、关节、软骨损伤等运动损伤的修复骨损伤等运动损伤的修复急性和慢性肌腱损伤PRP疗法成功地被用于运动损伤的修复急性和慢性韧带损伤急性和慢性韧带损伤n nKajikawaKajikawa等研究了等研究了PRPPRP对鼠髌韧带的修复作用。对鼠髌韧带的修复作用。他们先建立了鼠髌韧带损伤模型，并在损伤部位他们先建立了鼠髌韧带损伤模型，并在损伤部位注入鼠自体血提取的注入鼠自体血提取的PRPPRP。n n组织学观察发现髌韧带组织学观察发现髌韧带型和型和型型胶原表达均上升胶原表达均上升，同时巨噬细胞数目增加，同时巨噬细胞数目增加，促促进进了成纤维细胞形成，进而了成纤维细胞形成，进而加速了肌腱组织的修复和重加速了肌腱组织的修复和重构过程构过程。PRP 对韧带的修复作用对韧带的修复作用Andrew M. Blecher, MD. Platelet Rich Plasma (PRP) and Andrew M. Blecher, MD. Platelet Rich Plasma (PRP) and Regenerative Medicine in Orthopedics and Sports Regenerative Medicine in Orthopedics and Sports Medicine.Medicine.Right patellar Right patellar tendon normaltendon normalLeft patellar tendon Left patellar tendon degenerated and degenerated and thickened at proximal thickened at proximal aspect and patellar aspect and patellar spurringspurringTendonisfenestratedandpatellarspurringdebridedbyneedle.Plateletrichplasmainjectedintodegeneratedandthickenedpartofpatellartendon.At2monthspost-procedure,nowtendonhasregeneratedtonormalthicknesswithexcellentfiberorganization.Patellarspurringhascompletelydisappeared.n n应用PRP治疗难治性髌腱炎，与只进行体育锻炼相比疗效更好。MARCACCIATTHERIZZOLIINSTITUTE,INTORTHOPEDICSJULY,2009慢性跳跃者膝病变慢性跳跃者膝病变（Jumpers knee）肌损伤肌损伤n n早期超声取出血肿，随后用PRGF填充n n20位运动员在预期时间的一半时间内就痊愈，没出现明显的纤维化迹象，且无复发。SANCHEZ,GERMANYMAY2005半月板修复半月板修复n nPRP在体内和体外均能加强兔子半月板的痊愈n n使用PRP进行半月板修复，临床疗效显示有80%的成功率ISHIDA:TISSUEENG2007ISHIDA:TISSUEENG2007SCAGLIONE,2009SCAGLIONE,2009肩关节脱臼修复肩关节脱臼修复n n纤维蛋白-PRP凝胶能加强肩脱臼的治愈（HIRAHURA.CANADIANORTHOPEDICASSOCIATIONJULY2009)HIRAHURA.CANADIANORTHOPEDICASSOCIATIONJULY2009)膝关节炎膝关节炎n nPRP应用于关节炎患者，能增强透明质酸的分泌，并诱导滑液中纤维母细胞生成肝细胞生长因子。ANITUA;RHEUMATOLOGY(OXFORD)2007ANITUA;RHEUMATOLOGY(OXFORD)20076、防止脱发，毛发移植、防止脱发，毛发移植n n血小板活化所释放的生长因子，可促进组织修复，血管生成及胶原产生并且促进毛囊恢复正常。n n当将PRP注入头皮的脱发区域时，可逆转毛囊萎缩逆转毛囊萎缩的进程。PRP促进毛囊恢复正常促进毛囊恢复正常n nJosephGrecoJosephGreco将将PRPPRP注入毛发移植的头皮，能注入毛发移植的头皮，能逆逆转毛发的减少转毛发的减少，并能维持，并能维持8 8个月时间。个月时间。n n在斑秃患者的头皮注入在斑秃患者的头皮注入PRPPRP，在治疗后，在治疗后1 1个月个月内有新生头发生长。内有新生头发生长。JosephGreco,HairTransplantForumInternational,2009.PRP治疗斑秃治疗斑秃PRP治疗斑秃治疗斑秃PDGF(血小板衍生生长因子）血小板衍生生长因子）细胞生长，血管的新生和修复，胶原生成FGF(成纤维细胞生长因子）成纤维细胞生长因子）组织修复，细胞生长，胶原生成，透明质酸生成VEGF(血管内皮生长因子）血管内皮生长因子）血管内皮细胞的生长和新生EGF(内皮生长因子）内皮生长因子）促进内皮细胞生长，血管生成，促进伤口愈合TGF-(转化生长因子）转化生长因子）内皮细胞和血管内皮细胞的生长和再生，促进伤口愈合血小板血小板从PRP中释放的多种生长因子使头发的毛囊再生7、美容、抗衰老、美容、抗衰老MycellsMycells已经获得美国已经获得美国FDAFDA、欧洲、欧洲CECE认证及其他地区认证及其他地区的广泛医学临床验证的广泛医学临床验证 。n n20032003年，年，KubotaKubota和和OttoOtto医生在医生在PRPPRP技术的基础上对其制作流程技术的基础上对其制作流程和应用进行了创新，开发了与众和应用进行了创新，开发了与众不同的不同的PRPPRP自体细胞回春术自体细胞回春术提取提取技术技术MycellsMycellsPRP自体细胞回春术-Mycellsn nPRPPRP技术用于注射美容方面，被称为技术用于注射美容方面，被称为PRP-ACRPRP-ACR自体细胞回春术，也叫做自体细胞回春术，也叫做ACRACR（AutologousAutologousCellularRejuvenationCellularRejuvenation），即），即自体细胞再生自体细胞再生。n n美容上用于面部，颈部，双手的除皱效果明显。美容上用于面部，颈部，双手的除皱效果明显。 ACRACR（AutologousCellularRejuvenationAutologousCellularRejuvenation）PRP-ACRPRP-ACR自体细胞回春术。自体细胞回春术。PRP-ACRPRP-ACR含有含有高浓度高浓度生因子生因子，注射到问题及老化皮肤组织中，能起到，注射到问题及老化皮肤组织中，能起到修修修修复复复复及及抗衰老抗衰老抗衰老抗衰老功效，可对功效，可对整个皮肤层整个皮肤层进行进行全面调节和全面调节和再生再生。PRP-ACR修复及抗衰老功效修复及抗衰老功效PRP-ACR修复及抗衰老功效修复及抗衰老功效n n眼周皱纹和黑眼圈眼周皱纹和黑眼圈治疗前两周后n n眼袋眼袋治疗前1个月后治疗前2个月后n n眼下皱纹眼下皱纹60岁男性72岁女性PRP美容效果美容效果n n治疗前n n治疗后血小板细胞治疗的优点血小板细胞治疗的优点血小板细胞治疗的血小板细胞治疗的优点：优点：n n血小板细胞治疗是一种自体疗法自体疗法；n n用自身血液制作的高高浓浓度生度生长长因子因子血浆，利用潜在可能性来刺激自然的生理过程自然的生理过程以获得治疗效果；n n不会产生排异反应；n n有效、安全；n n使用简单便捷。