病毒疫苗制造.疫苗？ 疫苗是指为了预防、控制传染病的发生、流行，用于人体预防接种的疫苗类预防性生物制品。.吸附柱添加吸附柱添加500ul的的BL 疫苗的制造一、细菌性灭活疫苗的制造一、细菌性灭活疫苗的制造二、细菌性活疫苗的制造三、病毒疫苗的制造三、病毒疫苗的制造.病毒疫苗的制造病毒疫苗的制造 病毒性禽胚培养疫苗制造 病毒性细胞培养疫苗制造 病毒性动物组织疫苗制造 .病毒性禽胚培养疫苗制造病毒性禽胚培养疫苗制造 鸡胚选择鸡胚选择 痘痘病病毒毒、正正粘粘病病毒毒、副副粘粘病病毒毒和和疱疱疹疹病病毒毒等等一一类类生生物物制制品品，目目前前仍仍然然利利用用禽禽胚胚特特别别是是鸡鸡胚胚制制备备，如如鸡鸡新新城城疫疫苗苗、禽禽流流感感疫疫苗苗、犬犬瘟瘟热热鸡鸡胚胚弱弱毒疫苗等。毒疫苗等。 禽禽胚胚疫疫苗苗生生产产的的原原材材料料来来源源方方便便、质质量量比比较较容容易易控控制制，制制造造程程序序简简单单，不不需需要要过过高高的的设设备备条条件，生产的疫苗质量可靠件，生产的疫苗质量可靠。.（一）鸡胚选择 受精卵应来自SPF鸡群，至少源于未用抗生素药物的非免疫鸡群，以免受母源抗体的干扰和残留抗生素的影响。 从受精卵入孵开始至培养全过程都应保持无菌，要求一定的温度和湿度，且需不断翻动，然后选择。选择一定日龄、发育正常的胚用于接毒培养。 .（二）种毒与毒种继代（二）种毒与毒种继代 目前适应于鸡胚的种毒多系弱毒，包括自然弱毒与人工培育的弱毒两类。各种制苗用的种毒多数由国家菌毒种保藏部门或指定单位保存，保存的种毒多为冻干毒。 冻干毒种需按规定要求在鸡胚继代复壮，通常继代3代以上，经检定符合标准后方可作力生产疫苗的毒种，毒种检定内容包括无菌检验、毒价测定和其他项目的检定等。 .（三）接毒与收获（三）接毒与收获 1.1.接毒接毒 鸡胚接毒涉及接毒途径和接毒量两方面。根据不同的病毒与不同疫苗生产程序，选择最佳接种途径和接种量。 接种途径：绒毛尿囊膜接种 1112日龄胚 尿囊腔接种 911日龄胚 羊膜腔接种 1012日龄胚 卵黄囊接种 58日龄胚 如鸡新城疫I系和II系毒采取尿囊腔接毒，前者接种10-3稀释毒种0.1ml，后者接种10-4稀释毒种0.1ml。鸭瘟鸡胚化弱毒疫苗采用绒毛尿囊膜接种50-100倍稀释毒0.2ml。.2.2.培养收获培养收获 鸡胚接毒后培养增殖的时间和温度、湿度以及收获的标准与内容物依不同的病毒和不同的疫苗而异。 如鸡新城疫I系疫苗，接毒后于38.539C、相对湿度60%70%条件培养增殖，收集接毒后2448h内死亡胚，置010C冷却424h，收获胚液，进行无菌检验，供制备湿苗用。 .（四）配（四）配 苗苗 按规定收获的胚液、胎儿和绒毛尿囊膜乳剂经无菌检验合格后即可进行配苗。 1.1.湿苗湿苗 通常于鸡胚液内，按每毫升加入青霉素和链霉素5001000U，放置010C 冷暗处处理后分装。 2.2.冻干苗冻干苗 经无菌检验后合格的胚液或胚液、胎儿、绒毛尿囊膜乳剂，按比例加入保护剂，充分混合后滤过，于滤液内按每毫升加入青、链霉素5001000U，混合后分装冻干。 3.3.灭活苗灭活苗 收获鸡胚液经无菌检验及毒价测定合格后，按规定比例加入平衡液，按不同病毒的灭活温度、时间进行灭活，加入相应的佐剂，制备成灭活疫苗，放置4-10C保存。. 流程图流程图.流流程程图图病病毒毒性性禽禽胚胚疫疫苗苗制制造造工工艺艺流流程程受精卵受精卵禽禽 胚胚毒毒 株株种种 毒毒灭活病毒液灭活病毒液鉴定培育检验检验配制原原 料料佐佐 剂剂配苗、乳化配苗、乳化灭活疫苗灭活疫苗含病毒尿囊液或禽胚组织含病毒尿囊液或禽胚组织含病毒悬液含病毒悬液配配 苗苗活疫苗活疫苗保护剂保护剂分装、冻干分装、冻干分分 装装灭活原原 料料种种 子子扩增收获配制纯化病毒悬液纯化病毒悬液接种.影影 响响 疫疫 苗苗 质质 量量 的的 因因 素素毒种：毒种的优劣不仅影响疫苗的产量，而且也影响疫苗的质量，毒种不纯会产生相互干扰，减毒活疫苗毒种若毒力回升易造成事故，因此毒种的选择应挑选那些致病性低，免疫效价高而持久，抗原谱广的，易增殖，便于生产，可在传代细胞上传代的毒种。培养病毒的细胞：细胞若有潜在的致癌性病毒或慢病毒，以及有支原体污染均不能用作疫苗生产。对此因素应严格检查。此外若细胞本身发生转化后，不宜于制备活疫苗，只能制备一些灭活疫苗或亚单位疫苗。培养液：培养细胞的营养液中多少含有一定量的血清蛋白，在疫苗使用中常会出现某种程度的过敏反应，为此，应尽量使细胞适应于无血清蛋白的培养基中，以消除过敏源。甲醛灭活剂的使用：甲醛能使病毒灭活，但仍保持其抗原性，因此普遍用来制备灭活病毒疫苗，但要控制含量。.Thank you ! Thank you ! .