对 秦 艽 的 研 究西孙北文大基学目目录录一一. . 本草学及植物学方面的研究本草学及植物学方面的研究 1. 本草学研究 2. 种植方面的研究 3. 组培研究二二. . 秦艽的化学成分秦艽的化学成分 1. 秦艽中所含的化学成分种类 2. 秦艽根中分离到的主要成分 3. 从叶中分离到的化合物 4. 从麻花秦艽花中分离到的化学成分三三. . 龙胆苦苷的化学特征龙胆苦苷的化学特征 1. 龙胆苦苷的波谱学特征 2. 龙胆苦苷的结构特性 3. 秦艽药材中龙胆苦苷的定量分析 4. 龙胆苦苷结构修饰四四. .以秦艽为原料的新药研究以秦艽为原料的新药研究 1. 龙胆总苷 2.龙胆苦苷一、对秦艽本草及植物学方面的研究本草纲目植物学1.秦艽GentiannamacrophyllaPall.又名大叶秦艽陕、甘为主秦陕西是地道产区“秦艽出秦中”2.麻花艽G.Strminea.Maxm主产青海、西藏艽3.粗茎秦艽G.CrassicaulisD.B主产云南、西藏4.小秦艽G.dahuricaFisch主产东北、华北“以根作罗纹交织者佳”濒危植物 种植和组培 在陇县设种植基地，开展了病种害防治研究在陇县设种植基地，开展了病种害防治研究 组培研究组培研究 内生菌研究内生菌研究 转基因研究转基因研究 种植基地种植基地二、秦艽的化学成分1.秦艽中所含的化学成分种类秦艽中已分离到的化学成分共计有41种归类为环烯醚萜类苯甲酸衍生物类黄酮类三萜类甾醇类1.R=H龙胆苦苷3.R=H獐牙菜苷2.R=-D-葡萄糖6-O-葡萄糖龙胆苦苷4.R=OH獐牙菜苦苷 2.秦艽根中分离到的主要成分秦艽酰胺红白金花内酯红白金花酸其中秦艽酰胺和红白金花酸为两个新化合物红白金花酸X-衍射图我们从秦艽根中分离到主要成分龙胆苦苷（4号峰），微量成分有獐牙菜苷（5号峰），獐牙菜苦苷（3号峰），6-O-葡萄糖基龙胆苦苷（1号峰），6-O-葡萄糖基獐牙菜苷（2号峰）。3.从叶中分离到的化合物红白花酸 ，龙胆苦苷，6-O-葡萄糖龙胆苦苷苯甲酸腺苷4.从麻花秦艽花中分离到的化学成分 1. R=H 龙胆苦苷 3.落干酸（马钱苷酸） 2. R=-D-葡萄糖 6-O-葡萄糖龙胆苦苷 4.R=H獐牙菜苷6.异牡荆黄素5.R=OH獐牙菜苦苷7. 4,5,7-三羟基黄酮-8-C-D-葡萄糖8.异荭草甙 9.异牡荆黄素-4-O-葡萄糖苷 10. -谷甾醇 11.齐墩果酸 12.胡萝卜苷 13.熊果酸 我们从麻花秦艽花中分离得到的环烯醚萜和黄酮类成分有： 落干酸（IG1）、6-O-葡萄糖龙胆苦苷 （IG2）、獐牙菜苦 苷（IG3）、龙胆苦苷 （IG4）、獐牙菜苷 （IG5）、 异牡荆黄素-4-O-葡萄糖苷（F1）、异荭草甙 （F2）、 4,5,7-三羟基黄酮-8-C-D-葡萄糖和异牡荆黄素（F3）。秦艽中主要成分是环烯醚萜类，既有裂环环烯醚萜类， 又有闭环环烯醚萜类，它们的生源途径为伊蚁二醛烯醇式伊蚁二醛环烯醚萜醇裂环环烯醚萜类醇烯醇化 羟醛缩和 开环小结：陕西产秦艽中主要成分为龙胆苦苷，占到总成分的90%以上，其次为苯甲酸衍生物类。龙胆苦苷成为秦艽的“明星分子”。三.龙胆苦苷的化学特征1.龙胆苦苷的波谱学特征UV光谱 IR光谱 HNMR谱 13C NMR谱谱 H-H Cosy谱 H-C Cosy谱CD谱 DEPT谱 MS谱 X-衍射光谱UV光谱光谱254K带270R带IRIR光谱光谱HNMRHNMR谱谱1313C NMRC NMR谱谱H-H CosyH-H Cosy谱谱H-C CosyH-C Cosy谱谱DEPTDEPT谱谱MSMS谱谱CDCD谱谱X-X-衍射光谱衍射光谱2.龙胆苦苷的结构特性甲、不稳定性分析分子中具有缩醛结构，苷健容易分解，分解后形成羟醛结构，易发生聚合反应，所以水解后很难得到完整的苷元结构。这也就说明了1862年Canonica分离到它，1954年，1958年都报道过它的分离，但直到1960年才报道它的结构证明，1961年，1964年进一步证明它的结构，最后到1968年修正和确定了它的结构，从分离到这个化合物到确定它的结构用去了106年，结构最后认定用了8年时间。我们用X-衍射进一步表征了它的立体结构。分子中具有内酯结构，导致它对碱表现为不稳定性，成为4位具有羧基的化合物，较苷的分子显得更趋于稳定。8，10不共轭的孤立双键，易发生氧化反应。在证明分子结构时，原以为8，9具有双健，由于环张力的影响最后用合成的办法证明了双健处于8，10位。在氨的存在下易发生异构化，生成生物碱。NH3/H2O 龙胆苦苷 龙胆碱龙胆苦苷口服后完全破坏，完成下列的主要代谢龙胆苦苷的人肠内细菌转化途径龙胆苦苷的人肠内细菌转化途径Gentiopicral+2H-glc-2H+2H-H2OErythrocentaurin乙、稳定性分析在环烯醚萜类分子中，当形成单糖苷后促进了分子的稳定性，主要是稳定了缩醛结构，环烯醚萜类主要是以苷的形式存在。龙胆苦苷结构中，碳2，3，4，5，6，7位形成了一个大的共轭体系，形成了苷元的骨架，其中7位是超共轭作用，有利于双健上电荷的分散。 热分析： DSC分析曲线 升温速率为10/min时的TGDTG曲线 OH伸缩振动出的峰面积随温度变化曲线 不同温度的FTIR图谱事实：1将龙胆苦苷有效部位水溶液在沸水浴中放置24小时，HPLC法测定含量未发生变化。2.纯品龙胆苦苷室温放置10年，未见杂质峰出现，只是颜色变灰。小小结结：龙胆苦苷分子结构是不稳定的，在酸、碱、酶、氨外因条件下都会发生结构的变化。在药物中常常表现出的越是不稳定分子越具有活性。龙胆苦苷分子结构本身在合适的条件下是稳定的，在贮藏及加热下不发生分解，表明原料及制剂在生产和运输过程中是安全的。3.秦艽药材中龙胆苦苷的定量分析秦艽药材中龙胆苦苷的定量分析自2000年版以前的中国药典内在质量未作规定，即秦艽无含量测定项。我们为2000年版药典制定了含量测定方法，经中国药品生物制品检定所复核检验后收入中国药典，规定秦艽中龙胆苦苷的含量不低于2%。我们分析了龙胆苦苷在秦艽根、茎、叶中的分布，主要器官中及不同生长年限中龙胆苦苷的含量，结果如下表：不同生长年限秦艽中龙胆苦苷的含量No.龙胆苦苷含量（%）生长年限118.5二年生212.0三年生311.4四年生410.7五年生58.9六年生68.2野生不明年限711.1市售不明年限生长年限样品为陇县栽培品4.龙胆苦苷结构修饰四.以秦艽为原料的新药研究 明本草纲目载：“秦艽出秦中”1.龙胆总苷以秦艽为原料的类新药研究艽龙胶囊在研究了秦艽化学成分的基础上，知道龙胆苦苷是主要成分，以龙胆苦苷为主的混合成分称其为活性部位，即龙胆总苷，制成胶囊剂，开发为类新药，原名金替那胶囊，现名艽龙胶囊，申请了发明专利，用于消化道动力学药，药效和临床都是以西药西沙比利作对照，效果非常明显，疗效和西沙比利无差异。临床未见毒副反应。秦艽入胃经性味苦、平， 微温、无毒 2.龙胆苦苷以龙胆总苷为原料，研究中药类新药秦龙苦素从秦艽药材中分离到有效部位龙胆总苷，又从龙胆总苷中分离纯化出龙胆苦苷，名秦龙苦素，含量在90%以上，一般达97%以上，符合中药类新药要求，具有保肝、利胆、抗炎、抗乙肝病毒作用。经、临床研究，未见毒副反应，效果非常显著。归肝、胆经小结：秦艽是陕西特产药材，辛、苦、平，微温，归胃、肝、胆经。我们在研究了它化学成分后，有效部位开发为中药类新药，治疗消化道疾病，符合秦艽归胃经的记述。后又在有效部位的基础上开发了龙胆苦苷中药一类新药，具有保肝、利胆作用，与秦艽归肝、胆经相一致。完全用新的观点、新的剂型诠释了中药归经的基本理论。是中药新药的示范研究，是中药理论与现代科学相结合的示范研究。