对仿制药研发对仿制药研发“两座大山两座大山”的深入解析（溶出度部分）的深入解析（溶出度部分） 请大家将手机调至请大家将手机调至“振动振动”档！档！( (包括闹钟、叫醒、工包括闹钟、叫醒、工作安排、约会等作安排、约会等) ) 谢谢您的配合！谢谢您的配合！本人工作经历与行业成长史的融合本人工作经历与行业成长史的融合1990年年1998年年 本科（本科（5年）年）+硕士研究生硕士研究生 1998年年至今至今 在上海市药品检验所工作至今在上海市药品检验所工作至今 经历了经历了“1998年年2002年强仿期年强仿期”和和“20022006仿制药疯狂期仿制药疯狂期” 十分了解行业现状、内幕十分了解行业现状、内幕 在在2003年赴日本进修前，对国内仿制药研发中年赴日本进修前，对国内仿制药研发中出现的种种乱象疑惑不已，对其中的核心技术要素出现的种种乱象疑惑不已，对其中的核心技术要素找不到科学合理的答案。找不到科学合理的答案。 带着太多的疑问踏上了征途带着太多的疑问踏上了征途2003年年8月月 2004年年2月月 承蒙单位领导厚爱、公承蒙单位领导厚爱、公派赴日本国立医药品食品卫生研究所药品部（即国派赴日本国立医药品食品卫生研究所药品部（即国家药品检验所）进修，家药品检验所）进修，主要收获如下：主要收获如下：(1)通过翻阅该国仿制药与创新药申报资料，并在老通过翻阅该国仿制药与创新药申报资料，并在老师指导下，掌握了技术审评要点与审评师指导下，掌握了技术审评要点与审评“门槛门槛”，知晓了我国仿制药审评中存在的一些技术缺失知晓了我国仿制药审评中存在的一些技术缺失（引申至技术门槛与批准数量的关系）（引申至技术门槛与批准数量的关系）如口服固体制剂仿制药研发要求如口服固体制剂仿制药研发要求 连续三批、每批连续三批、每批10万片。万片。批批样品多条溶出曲线均与原研品一致批批样品多条溶出曲线均与原研品一致 （再辅以有关物质的（再辅以有关物质的“锦上添花锦上添花”）今后市场抽查今后市场抽查只抽只抽“多条溶出曲线多条溶出曲线” (2)掌握了药物各剂型关键评价指标与检测方掌握了药物各剂型关键评价指标与检测方法，法，即药品质量不仅可以生产出来，也可以即药品质量不仅可以生产出来，也可以检验出来。检验出来。关键就看设定的检测法关键就看设定的检测法/检测指标检测指标能否能否“一针见血、切中要害一针见血、切中要害”，这也是我们这也是我们药检人员工作中应不懈追求的挑战！药检人员工作中应不懈追求的挑战！ 从而指导我们如何更科学有效地开展工作从而指导我们如何更科学有效地开展工作 （口服固体制剂关键性评价指标（口服固体制剂关键性评价指标多条溶出曲线多条溶出曲线 ） 片剂片剂/硬胶囊硬胶囊 ：多条溶出曲线多条溶出曲线/释放曲线释放曲线、崩崩解时限（如需要）、有关物质、解时限（如需要）、有关物质、含量均匀度、硬度含量均匀度、硬度/脆脆碎度碎度。 注射用粉末：注射用粉末：(1)表面层次指标：表面层次指标：有关物质、溶液颜色、溶液澄清度、有关物质、溶液颜色、溶液澄清度、水分、水分、pH值、无菌、热原值、无菌、热原/内毒素和不溶性微粒内毒素和不溶性微粒等等。(2)深层次指标：深层次指标：粒度分布、粒子形状、晶型、粒度分布、粒子形状、晶型、晶格能、比表面能、分散性、流变学特性等晶格能、比表面能、分散性、流变学特性等 复溶复溶/溶解时间溶解时间列举各剂型关键性评价指标列举各剂型关键性评价指标(3)其时其时恰逢恰逢该国该国药品品质再评价工程如火药品品质再评价工程如火如荼开展如荼开展，师从该项工程技术负责人，全面系，师从该项工程技术负责人，全面系统地学习了溶出度技术理念与应用。统地学习了溶出度技术理念与应用。 该国彼时情况与我国现今极为相似，日本采该国彼时情况与我国现今极为相似，日本采用用“体外多条溶出曲线对已上市口服固体制剂体外多条溶出曲线对已上市口服固体制剂进行了与原研品一致性的再评价工作进行了与原研品一致性的再评价工作” 。（该（该国注射剂仿制药很少，无必要进行）。国注射剂仿制药很少，无必要进行）。(4)系统学习了系统学习了ICHQ系列指导原则系列指导原则 该系列该系列指导原则指导原则是本行业的精髓与核是本行业的精髓与核心，心，可谓可谓“武林秘籍武林秘籍”和和“葵花宝葵花宝典典”，如能融会贯通、举一反三，定可成为如能融会贯通、举一反三，定可成为业内研发高手！业内研发高手！回国后所做的主要工作：回国后所做的主要工作：一、一、撰写了多篇撰写了多篇药品质量评价文章（主要为药品质量评价文章（主要为溶出度溶出度 文章）文章），在国内在国内率先提出率先提出“采用体外多条溶出采用体外多条溶出 曲线进行口服固体制剂曲线进行口服固体制剂研发与品质评价研发与品质评价”的的 理念理念和和观点观点。二、二、2009年伊始年伊始，在国内知名药学网站在国内知名药学网站丁香园丁香园 开办了开办了“溶出度研究溶出度研究”专栏专栏；其上文章迄今为；其上文章迄今为止止 已成为国内做口服固体制剂仿制药研发的已成为国内做口服固体制剂仿制药研发的必必 读手册读手册。三、三、2009年年5月起月起，担任国家食品药品监督管理局担任国家食品药品监督管理局 市场监督办公室顾问，在市场监督办公室顾问，在“全国评价性抽验全国评价性抽验 工作工作”中全面引入了体外多条溶出曲线这一检中全面引入了体外多条溶出曲线这一检 测手段，收到显著效果测手段，收到显著效果。四、四、2010年年，为国家药品审评中心翻译了日本为国家药品审评中心翻译了日本 橙皮书橙皮书 近近700个品种的溶出曲线数据库个品种的溶出曲线数据库。五、五、2012年年6月月起，作为专家组成员参与到国家起，作为专家组成员参与到国家仿仿 制药一致性评价制药一致性评价工作中。负责撰写工作中。负责撰写如何测得如何测得 原研品多条特征溶出曲线指导原则原研品多条特征溶出曲线指导原则和和如何比如何比 较仿制制剂与原研制剂体外溶出曲线指导原则较仿制制剂与原研制剂体外溶出曲线指导原则以及各品种具体测定法。以及各品种具体测定法。本本人人体体会会 工作中一定要注重思考，带着问题去学习、有的放矢工作中一定要注重思考，带着问题去学习、有的放矢地去攻读，多查文献、多领会，日积月累、潜移默化地去攻读，多查文献、多领会，日积月累、潜移默化之中就会水到渠成、瓜熟蒂落！之中就会水到渠成、瓜熟蒂落！ 思维要开放、活跃，不要固步自封、按部就班，因循思维要开放、活跃，不要固步自封、按部就班，因循守旧。守旧。 研发人员的思路与方向研发人员的思路与方向极为重要。大量的交流令我深极为重要。大量的交流令我深感：由于方向性错误、固有概念性错误、固有思维的感：由于方向性错误、固有概念性错误、固有思维的局限，导致许多人力、物力、财力与时间的浪费！局限，导致许多人力、物力、财力与时间的浪费！十分荣幸有这样一个机会十分荣幸有这样一个机会与大家交流、研讨！与大家交流、研讨！ 寄望大家在这寄望大家在这一天时间里，多一天时间里，多思考、多提问！思考、多提问！对固体制剂的关注点与着眼点：对固体制剂的关注点与着眼点： 疗效才是硬道理疗效才是硬道理 即生物利用度即生物利用度 ！客观看待安全性！客观看待安全性 ！对质量标准中各项指标的深入剖析对质量标准中各项指标的深入剖析 含量（均匀度）没有任何技术含量。含量（均匀度）没有任何技术含量。 深入讲述制剂生产过程深入讲述制剂生产过程 仅是将一物件使成仅是将一物件使成均匀状后按照一定规格制作而已。均匀状后按照一定规格制作而已。 阐述含量与生物利用度几近无关的根据所在。阐述含量与生物利用度几近无关的根据所在。 一定牢固树立一定牢固树立“吃药不是吃含量、而是吃生物吃药不是吃含量、而是吃生物利用度利用度”的科学理念！的科学理念！对质量标准中各项指标的深入剖析对质量标准中各项指标的深入剖析有关物质与毒副作用的关系有关物质与毒副作用的关系 能够建立起准确测定杂质的检验方法固然重要，能够建立起准确测定杂质的检验方法固然重要，但与主药在体内吸收的重要性相比就显得无足轻重但与主药在体内吸收的重要性相比就显得无足轻重了。因为如果主药尚无有效吸收、主体吸收，即便了。因为如果主药尚无有效吸收、主体吸收，即便有有12%杂质存在也无关痛痒了！除非一些明确的、杂质存在也无关痛痒了！除非一些明确的、毒性较强的杂质。毒性较强的杂质。 毒副作用的引起往往由低劣辅料所致！毒副作用的引起往往由低劣辅料所致！只有溶出度只有溶出度/释放度才是释放度才是 这里所指的溶出度这里所指的溶出度/释放度是指：释放度是指：在多在多pH值溶出值溶出介质中溶出曲线介质中溶出曲线的测定，绝非一个介质、一个时间的测定，绝非一个介质、一个时间点、一个限度的测定！点、一个限度的测定！ 该测定已成为该测定已成为“剖析剖析”和和“肢解肢解”原研固体制原研固体制剂内在品质一种擘肌分理、抽丝剥茧的重要手段；剂内在品质一种擘肌分理、抽丝剥茧的重要手段；成为固体制剂内在品质呈现于外在的一种成为固体制剂内在品质呈现于外在的一种“表象表象”、“映射映射”与与“载体载体”。“固体制剂内在品质的灵魂与核心所在固体制剂内在品质的灵魂与核心所在”！溶出度核心理念溶出度核心理念多条溶出曲线是多条溶出曲线是口服固体制剂的口服固体制剂的“指纹图谱指纹图谱”！“多条溶出多条溶出/释放曲线的测定释放曲线的测定”(1)可用于评价不同来源同一制剂内在品质差距，从而可用于评价不同来源同一制剂内在品质差距，从而为彼此间临床疗效差距提供佐证，为彼此间临床疗效差距提供佐证，国家评价性抽验就采国家评价性抽验就采用了该理念（效仿日本作法）。用了该理念（效仿日本作法）。(2)可用于固体制剂药物研发与质量评价。可用于固体制剂药物研发与质量评价。(3)可用于生物等效性试验的前期预测。可用于生物等效性试验的前期预测。(4)可用于各类变更的评价。可用于各类变更的评价。(5)可用于与口服固体制剂内在品质相关的所有环节。可用于与口服固体制剂内在品质相关的所有环节。 A 药厂 / 原研制剂疗效差B 药厂 / 仿制制剂 疗效好制药行业作制药行业作为高科技行为高科技行业的体现在业的体现在哪里？哪里？两者两者为什么会有差异为什么会有差异?两者血药浓度为什么不一致两者血药浓度为什么不一致?仿制药仿制药研发的研发的瓶颈在瓶颈在哪里？哪里？药品疗效的优劣主要表现在药品疗效的优劣主要表现在一一个个高高品品质质药药品品（如如原原研研制制剂剂），患患有有该该疾疾病病的的任任何何人人群群服服用用都都会会有有一一定定的的疗疗效效和和作作用用，即即有有效性广。效性广。一一个个低低品品质质药药品品（如如仿仿制制制制剂剂），可可能能只只会会对对患患有有该该疾疾病病的的某某一一部部分分人人群群有有效效（如如体体内内环环境境正正常常者者），而而对对另另一一部部分分病病人人疗疗效效甚甚微微（如如胃胃酸酸缺缺乏者、年老体弱者），即有效性低。乏者、年老体弱者），即有效性低。体外溶出度试验体外溶出度试验体内消化道体内消化道固体制剂固体制剂固体制剂固体制剂生物利用度与体外溶出度试验的相生物利用度与体外溶出度试验的相关性，这一点已被人们所知！关性，这一点已被人们所知！制制剂剂的的优优劣劣关键、核心关键、核心溶出度试验的重要意义溶出度试验的重要意义消化道Tablet头部头部到达作用部位心脏崩解溶 液溶出进入血液循环环境（用环境（用pH值表达）值表达）蠕动强度（虽年龄增长、减弱）蠕动强度（虽年龄增长、减弱）消化道各器官消化道各器官变化范围变化范围胃胃pH1.2-7.6表面张力表面张力(dyne/cm2)35-50胃液体积胃液体积(ml)5-200十二指肠十二指肠pH3.1-6.7收缩压收缩压(mmHg)3-30小肠小肠pH5.2-6.0胆汁酸胆汁酸(mM)0-17液体流速液体流速(ml/min)0-2胃酸随年龄变化统计表胃酸随年龄变化统计表（日本学者（日本学者2001年发表的统计数据）年发表的统计数据）02040608010203040506070年年龄龄胃酸缺乏者的比例胃酸缺乏者的比例(%)19841989-19941995-1999从专业角度看：疗效的优劣，即药物在体内从专业角度看：疗效的优劣，即药物在体内吸收的多寡，是与生物利用度紧密相关的。吸收的多寡，是与生物利用度紧密相关的。优质药品，可在任何体内环境下优质药品，可在任何体内环境下（即（即pH值的值的宽范围内）宽范围内）都有一定的崩解、溶出，即对任何都有一定的崩解、溶出，即对任何人群均有较高的生物利用度。人群均有较高的生物利用度。劣质药品，可能只在一种体内环境下（如胃劣质药品，可能只在一种体内环境下（如胃酸正常者）才有一定的溶出和吸收，而在其他酸正常者）才有一定的溶出和吸收，而在其他体内环境下可能崩解、溶出就会很差，生物利体内环境下可能崩解、溶出就会很差，生物利用度也就很低。用度也就很低。L如果某制剂，仅在如果某制剂，仅在pH1.2条件下体外溶出条件下体外溶出较好，在较好，在pH6.8条件下体外溶出较差，结果条件下体外溶出较差，结果也许只能保证对于胃酸正常的患者吸收良好，也许只能保证对于胃酸正常的患者吸收良好，而对胃酸缺乏的患者可能就会很差了。而对胃酸缺乏的患者可能就会很差了。溶出度试验装置溶出度试验装置/转速与消化道蠕动的关系转速与消化道蠕动的关系一个优质药品，在采用一定的装置与转速条件一个优质药品，在采用一定的装置与转速条件下下（通常认为桨板法（通常认为桨板法/50转最接近中老人人群），转最接近中老人人群），应在应在pH值的宽范围内值的宽范围内（即多种溶出介质中）（即多种溶出介质中）尽可尽可能均有一定溶出与释放，这样就可保证该药品用能均有一定溶出与释放，这样就可保证该药品用于人体时，可在各种体内环境下，对任何体质患于人体时，可在各种体内环境下，对任何体质患者均有一定疗效！者均有一定疗效！ 溶出度试验中的溶出度试验中的“转速转速”与生物利用度的相关性与生物利用度的相关性桨板法桨板法100转转桨板法桨板法50转转0500100015000246810Time (h)Conc (ng/ml)020406080100024681012Time (h)% dissolvedA药厂产品药厂产品B药厂产品药厂产品020406080100024681012Time (h)% dissolved身体机能良好者体内身体机能良好者体内02004006008000246810Time (h)Conc. (ng/ml)身体机能虚弱者体内身体机能虚弱者体内相相关关不相关不相关相相关关100 转0204060801000102030Time (min)% dissolvedAB50 转0204060801000102030Time (min)% dissolvedAB0.00.51.01.52.02.502468Time (h)Concentration (ug/ml)Capsule ACapsule B具体实例：具体实例：两两吲哚美辛胶囊吲哚美辛胶囊溶出度溶出度与生物利用度的相关性与生物利用度的相关性不相关不相关相相关关在身体机能虚弱者体内在身体机能虚弱者体内02461000246中年妇女中年妇女0.6A药厂产品药厂产品B药厂产品药厂产品05002460.20.400246Time (h)老年患者老年患者02460246年轻小伙年轻小伙不同制剂的溶出度试验曲线与不同制剂的溶出度试验曲线与不同患者体内生物利用度的关系不同患者体内生物利用度的关系引申至转速比较引申至转速比较溶溶出出度度试试验验不同不同患者患者体内体内生物生物利用利用度度桨板法、桨板法、50转转桨板法、桨板法、75转转桨板法、桨板法、100转转彼此间就不相关了！彼此间就不相关了！l由此可见，溶出度（释放度）研究一定要由此可见，溶出度（释放度）研究一定要全面、即多全面、即多pH值溶出曲线的测定。值溶出曲线的测定。l机械参数的选择一定要具有区分力。如设机械参数的选择一定要具有区分力。如设定得宽松定得宽松（如桨板法（如桨板法/100转、加高浓度表面活转、加高浓度表面活性剂、甚至有机溶剂），性剂、甚至有机溶剂），则于体内的评价可能则于体内的评价可能就会失去意义，建立不起体内外相关性，也无就会失去意义，建立不起体内外相关性，也无法评价生物等效性了！法评价生物等效性了！对于仿制药、对于仿制药、为提高生物等效性试验的成功为提高生物等效性试验的成功率、率、如何确定体外溶出度试验条件与参数呢？如何确定体外溶出度试验条件与参数呢？如无原研缓控释制剂、不建议自行开发！且该如无原研缓控释制剂、不建议自行开发！且该原研品最好为原研品最好为ICH组织内国家出品。组织内国家出品。至关重要至关重要溶出度溶出度/释放度应用（一）：释放度应用（一）：对于仿制药的研发对于仿制药的研发 如何提高如何提高BE试验成功率？试验成功率？ 不可能试验一个处方、进行一次生物等效性试验！不可能试验一个处方、进行一次生物等效性试验！ 体内外相关性理解体内外相关性理解()： 体外一致体外一致 体内多数一致、体内多数一致、BE试验成功率高！试验成功率高！ 何谓何谓“体外一致体外一致”？均能够具有相似均能够具有相似的溶出曲线的溶出曲线生物等效生物等效大多数药物大多数药物极少数药物极少数药物生物不等效生物不等效这样就大大提高了生物等效性这样就大大提高了生物等效性(BE)试验的试验的成功率！成功率！但并不能替代但并不能替代BE试验！试验！原研药原研药仿制药仿制药相同相同相同相同不同不同90%企业界的使命企业界的使命仿制药研发的必由之路仿制药研发的必由之路“殊途同归殊途同归”仿制药研发的仿制药研发的“瓶颈瓶颈”即工艺放大即工艺放大!具体到：具体到：首先测定原研品的多条溶出曲线首先测定原研品的多条溶出曲线 仿制药研发进程：仿制药研发进程：小试小试 中试中试 放大放大 以上每一步骤样品的多条曲线均应与原研以上每一步骤样品的多条曲线均应与原研品一致，直至放大生产到一定规模、连续三品一致，直至放大生产到一定规模、连续三批（每批批（每批10万片或今后最大生产规模的万片或今后最大生产规模的1/10），即宣告），即宣告“仿制成功仿制成功”！pH=1.0pH=4.0pH=7.00204060801000204060801000204060801000204060Time (min)0.00.20.40.60.80.00.20.40.60.80.00.20.40.60.80246Time (h)AB溶出曲线溶出曲线体内血药浓度体内血药浓度ABAB日本仿制药申报要求，体外至少四条溶出曲线与原研制剂日本仿制药申报要求，体外至少四条溶出曲线与原研制剂一致，方可申报。并根据药物特性，如一致，方可申报。并根据药物特性，如BE试验需分别进行试验需分别进行“进食进食”和和“禁食禁食”两种状态，则体外溶出研究还需针对性两种状态，则体外溶出研究还需针对性进行加消化酶溶出介质中的比对试验。进行加消化酶溶出介质中的比对试验。世界卫生组织、美国与欧盟要求皆雷同日本。世界卫生组织、美国与欧盟要求皆雷同日本。我国新药审评中心我国新药审评中心2010年年9月发布了月发布了“关于仿制药关于仿制药通用技通用技术文件术文件（简称（简称:CTD）申报资料提交要求征求意见的通知）申报资料提交要求征求意见的通知”，其中明确规定，其中明确规定“需进行多溶出介质中的比对研究需进行多溶出介质中的比对研究”！（对！（对不起！正是不起！正是）那么，原研制剂什么样的溶出曲线是那么，原研制剂什么样的溶出曲线是(1)有有区分力、区分力、(2)有体内外相关性呢？有体内外相关性呢？如去验证，对于仿制药企业可能会劳民伤如去验证，对于仿制药企业可能会劳民伤财。为此，根据最具制剂难度的五大类药物，财。为此，根据最具制剂难度的五大类药物，本人给出直截了当的曲线形态，本人给出直截了当的曲线形态，这些溶出曲这些溶出曲线都是针对大量已上市的此类原研制剂和本线都是针对大量已上市的此类原研制剂和本人在日本学习体会的经验总结所得。人在日本学习体会的经验总结所得。这些曲线已基本包括以上这些曲线已基本包括以上2点！点！pH1.0介质释放太快、介质释放太快、没有区分力没有区分力pH6.8介质释放太快、介质释放太快、没有区分力没有区分力pH3.0介质、介质、45-60min达到达到85%以上，以上，释放速度适中释放速度适中。pH4.5介质、介质、90-120min达到达到85%以上，以上，释放速度适中释放速度适中。如没有一条曲线能在如没有一条曲线能在45120min达到达到85%，则可适当放宽试验条件（以原研制剂样品，则可适当放宽试验条件（以原研制剂样品批内批内/批间精密度为准，加大转速或加入低浓批间精密度为准，加大转速或加入低浓度表面活性剂）、且无突释和拐点，度表面活性剂）、且无突释和拐点，这样的这样的曲线通常被认为是最具体内外相关性，也是曲线通常被认为是最具体内外相关性，也是最理想的曲线。最理想的曲线。如缓控释仿制制剂的制剂机理与原研制剂如缓控释仿制制剂的制剂机理与原研制剂不同、则无需强求体外溶出行为一致。此时，不同、则无需强求体外溶出行为一致。此时，只能通过大量的只能通过大量的动物实验动物实验或或人体预人体预BE实验实验来验证仿制制剂处方与工艺的合理性，来验证仿制制剂处方与工艺的合理性，但耗但耗资将很大！资将很大！欧美与我国允许欧美与我国允许“殊途同归殊途同归”日本要求制剂机理必须一致，因日本要求制剂机理必须一致，因BE实验实验不是金标准、存在严重不足不是金标准、存在严重不足pH1.2(桨板法桨板法/50rpm)、测试、测试2h日本的日本的“盐酸氨溴索缓释胶囊盐酸氨溴索缓释胶囊”仿制制剂研发实仿制制剂研发实例例（共共9个条件均需一致个条件均需一致）pH5.0(桨板法桨板法/50rpm)、测试、测试4hpH7.5(桨板法桨板法/50rpm)、测试、测试22h日本的日本的“盐酸氨溴索缓释胶囊盐酸氨溴索缓释胶囊”仿制制剂研发实仿制制剂研发实例例水水(桨板法桨板法/50rpm)、测试、测试5hpH7.5+1.0%吐温吐温-80(桨板法桨板法/50rpm)、测试、测试12h日本的日本的“盐酸氨溴索缓释胶囊盐酸氨溴索缓释胶囊”仿制制剂研发实仿制制剂研发实例例pH7.5(桨板法桨板法/100rpm)、测试、测试12h日本的日本的“盐酸氨溴索缓释胶囊盐酸氨溴索缓释胶囊”仿制制剂研发实仿制制剂研发实例例pH7.5(桨板法桨板法/200rpm)、测试、测试6hpH7.5(篮法篮法/100rpm)、测试、测试14h日本的日本的“盐酸氨溴索缓释胶囊盐酸氨溴索缓释胶囊”仿制制剂研发实仿制制剂研发实例例pH7.5(篮法篮法/200rpm)、测试、测试12h应同缓控释制剂：在各转速下应同缓控释制剂：在各转速下/各介质中各介质中均应进行比较均应进行比较（还要附加（还要附加“剂量倾泻试验剂量倾泻试验”和和“添加消化酶试验添加消化酶试验”），且均应与原研制，且均应与原研制剂溶出行为一致，剂溶出行为一致，以最大限度地保障临床用以最大限度地保障临床用药有效性和安全性。药有效性和安全性。溶出度工作量确实较大，但值得且应该！溶出度工作量确实较大，但值得且应该！酸性介质酸性介质(100rpm)pH6.8介质介质(50rpm)请注意：延迟释放！请注意：延迟释放！pH6.0介质介质(50rpm)pH6.0介质介质(100rpm)请注意：延迟释放！请注意：延迟释放！请注意：延迟释放！请注意：延迟释放！大量研发案例表明：未能做到多条溶出曲线一致，大量研发案例表明：未能做到多条溶出曲线一致，就冒然进行生物等效性试验导致失败的案例，可谓比比就冒然进行生物等效性试验导致失败的案例，可谓比比皆是！皆是！就目前的科技手段而言，这是口服固体制剂仿制药就目前的科技手段而言，这是口服固体制剂仿制药研发的必由之路！研发的必由之路！制剂人员的工作就是不断调整自制品的多条溶出曲制剂人员的工作就是不断调整自制品的多条溶出曲线，使其尽可能与原研品一致。因为只有这种线，使其尽可能与原研品一致。因为只有这种“微观上微观上的一致性的一致性”才能证明才能证明“内在品质的一致性内在品质的一致性”！仿制药药学研究主要信息汇总表仿制药药学研究主要信息汇总表中写到：中写到：需提供自研产品与已上市对照药品在处方开发过程中进需提供自研产品与已上市对照药品在处方开发过程中进行的质量特性对比研究结果，例如：行的质量特性对比研究结果，例如：(1)口服固体制剂溶出度：口服固体制剂溶出度：样品批号、对照药品批号和生产样品批号、对照药品批号和生产厂；溶出条件，取样点；说明自研产品与对照药品在不同溶厂；溶出条件，取样点；说明自研产品与对照药品在不同溶出条件下的溶出曲线比较研究结果，推荐采用出条件下的溶出曲线比较研究结果，推荐采用f2相似因子比相似因子比较方式。较方式。(2)有关物质：有关物质：样品批号、对照药品批号和生产厂；测定及样品批号、对照药品批号和生产厂；测定及计算方法；比较结果。计算方法；比较结果。体外不一致体外不一致体内多数不一致、体内多数不一致、BE试验成功率低！试验成功率低！日本药品品质再评价工程日本药品品质再评价工程就是充分利用了该点。就是充分利用了该点。再评价时，由于无法再进行大量再评价时，由于无法再进行大量“BE试验试验”，故只好，故只好采用体外溶出曲线比对方法。给予仿制药厂一定时间、采用体外溶出曲线比对方法。给予仿制药厂一定时间、更改处方与工艺，使多条溶出曲线与原研品一致！更改处方与工艺，使多条溶出曲线与原研品一致！pH7溶出度溶出度pH 10204060801000204060.0204060801000204060Time (min)02460510152025Time (h)02460510152025胃酸正常患者胃酸正常患者预测体内血药浓度预测体内血药浓度实测体内血药浓度实测体内血药浓度胃酸缺乏患者胃酸缺乏患者不同厂家生产的不同厂家生产的甲硝唑片甲硝唑片体外溶出度与体内学药浓度的相关性体外溶出度与体内学药浓度的相关性A药厂产品药厂产品B药厂产品药厂产品01234567010203040Time (h)01234567010203040Time (h)年年轻轻人人老老年年人人pH1.2两不同药厂生产的两不同药厂生产的地西泮片地西泮片体外溶出度试验与体内血药浓度的相关性体外溶出度试验与体内血药浓度的相关性020406080010% dissolvedpH4.60204060Time (min)AB胃酸缺乏者胃酸缺乏者胃酸正常者胃酸正常者0501001502002503003500246Time (min)Concentration (ng/ml)0246Time (min)Time (min)AB我国从我国从2008年起开始实施年起开始实施“国家评价性抽验国家评价性抽验”背景背景 按目前质量标准检验几乎皆合格，而临床疗效差按目前质量标准检验几乎皆合格，而临床疗效差异显著。力争通过异显著。力争通过“探索性研究探索性研究”，找到某种体外，找到某种体外检测指标上的差距，从而为临床疗效差距提供佐证！检测指标上的差距，从而为临床疗效差距提供佐证！结果结果 难溶性药物口服固体制剂与缓控释制剂，体外多难溶性药物口服固体制剂与缓控释制剂，体外多条溶出曲线与原研品皆一致的几乎没有，相当一部条溶出曲线与原研品皆一致的几乎没有，相当一部分品种多条溶出曲线皆相差甚远！建立起体内外相分品种多条溶出曲线皆相差甚远！建立起体内外相关性！也可作为质量评价指标关性！也可作为质量评价指标!以下五类制剂值得商榷以下五类制剂值得商榷难溶性药物制剂难溶性药物制剂缓控释制剂缓控释制剂肠溶制剂肠溶制剂pH值依赖型制剂值依赖型制剂治疗窗狭窄药物制剂治疗窗狭窄药物制剂2009年国家评价性抽验结果启示年国家评价性抽验结果启示(一一)原研品原研品3个批号个批号完美制剂的完美表达！完美制剂的完美表达！2009年国家评价性抽验结果启示年国家评价性抽验结果启示(一一)国内五家企业产品国内五家企业产品4条溶出曲线！条溶出曲线！2009年国家评价性抽验结果启示年国家评价性抽验结果启示(一一)国内另六家企业产品国内另六家企业产品4条溶出曲线！条溶出曲线！日本规定：日本规定：如不一致、如不一致、BE试验受试者必试验受试者必须酌情进行针对性选取！须酌情进行针对性选取！故日本故日本橙皮书橙皮书中，在已结束的中，在已结束的586个个品种中、约有品种中、约有10个品种为两套溶出曲线。个品种为两套溶出曲线。使用该药品的患使用该药品的患者是特定人群吗者是特定人群吗?溶溶出出度度试试验验是是普通受普通受试者试者是是胃酸缺乏受试者胃酸缺乏受试者否否体体内内研研究究针对性受试者针对性受试者否否是是在低转度和所有介质中，在低转度和所有介质中，溶出曲线均一致吗溶出曲线均一致吗?否否在中性介质条件下在中性介质条件下溶出曲线一致吗？溶出曲线一致吗？体内一致、即体内一致、即BE试验成功试验成功并不意味并不意味着仿制制剂临床疗效就一定与原研制剂相当。着仿制制剂临床疗效就一定与原研制剂相当。因因BE试验是采用年轻男性、是人体的最试验是采用年轻男性、是人体的最佳状态、这也是佳状态、这也是BE试验的局限性所在！试验的局限性所在！而原研制剂在临床阶段经过大量病例验而原研制剂在临床阶段经过大量病例验证。证。只有通过对体外溶出度（释放度）的严格只有通过对体外溶出度（释放度）的严格要求，才能尽可能地增加在年老患者、在体要求，才能尽可能地增加在年老患者、在体质虚弱患者体内生物利用度高的概率！质虚弱患者体内生物利用度高的概率！以上这一观点弥补了以上这一观点弥补了“生物等效性试验的生物等效性试验的局限与不足局限与不足”！体内不一致、即体内不一致、即BE试验失败试验失败则肯定会在体外某则肯定会在体外某个溶出度条件下呈现显著性差异，关键就看体外溶个溶出度条件下呈现显著性差异，关键就看体外溶出度研究的深度了。出度研究的深度了。(1)已帮助众多企业寻找到这种差异；已帮助众多企业寻找到这种差异；(2)越来越多的企业开始进行二次开发；越来越多的企业开始进行二次开发；(3)介绍自介绍自2008年始年始“国家评价性抽验国家评价性抽验”结果；结果；v原则上从市场上购买来不同时间点的不同批号，分别测原则上从市场上购买来不同时间点的不同批号，分别测定，观测溶出曲线波动情况。酌情审定定，观测溶出曲线波动情况。酌情审定（着重讲述）（着重讲述）。v生产规模生产规模10万单位或今后最大生产规模的万单位或今后最大生产规模的1/10（这就是仿制药研发瓶颈、高科技的体现！着重讲述）。（这就是仿制药研发瓶颈、高科技的体现！着重讲述）。v含量与参比制剂的差值应在含量与参比制剂的差值应在5%以内。以内。理论上个测定理论上个测定12个单位，现实情况测定个单位，现实情况测定6个单位即可，甚个单位即可，甚至可以更少至可以更少（预试验时）（预试验时）！v至少至少四种溶出介质：四种溶出介质：【普通制剂普通制剂】(1)酸性药物酸性药物pH值分别为值分别为1.2、5.56.5、6.87.5和水；和水；(2)中中/碱性药物和包衣制剂碱性药物和包衣制剂pH值分别为值分别为1.2、3.05.0、6.8和水；和水；(3)难溶性药物制剂难溶性药物制剂pH值分别为值分别为1.2、4.04.5、6.8和水；和水；(4)肠溶制剂肠溶制剂pH值分别为值分别为1.2、6.0、6.8和水；和水；【缓缓/控释制剂控释制剂】pH值分别为值分别为1.2、3.05.0、6.87.5和水。和水。与美国作法有所不同：美国统一采用与美国作法有所不同：美国统一采用1.0、4.5、6.8和水。和水。v以上以上pH值的选择依据：值的选择依据：(1)以以pKa值值3.0为界判断酸碱性为界判断酸碱性。(2)“溶解度溶解度-pH值曲线值曲线”绘制绘制（极其简单、又极为重要）（极其简单、又极为重要）。其上陡峭变化的其上陡峭变化的pH值应作为第值应作为第56条曲线予以绘制。条曲线予以绘制。(3)如该药物如该药物pKa1.0值未能涵盖于以上各值未能涵盖于以上各pH值中，建议增值中，建议增加加pKa1.0值溶出曲线测定。值溶出曲线测定。日本日本橙皮书橙皮书中一些特例。中一些特例。(4)无论何种制剂都不建议采用无论何种制剂都不建议采用pH8.0以上的介质进行表达；以上的介质进行表达；如确有必要，应提供充足理由。如确有必要，应提供充足理由。FDA公布的溶出度数据库中，公布的溶出度数据库中，“阿维阿维A胶囊胶囊”采用采用pH9.6溶出介质特例。溶出介质特例。讲述如何测定（日本橙皮书中收载）。讲述如何测定（日本橙皮书中收载）。由测定数据推算出该制剂是否为由测定数据推算出该制剂是否为“pH值依赖型制值依赖型制剂剂”，从而来指导仿制制剂研发与溶出度质量标准，从而来指导仿制制剂研发与溶出度质量标准拟定。拟定。绝非用该数据，根据漏槽条件来推算溶出介质中绝非用该数据，根据漏槽条件来推算溶出介质中添加表面活性剂的浓度！添加表面活性剂的浓度！漏漕条件的定义：溶出介质体积要大于溶解药物漏漕条件的定义：溶出介质体积要大于溶解药物主成分（该量为制剂最大规格量）所需体积的至少主成分（该量为制剂最大规格量）所需体积的至少3倍量，以保证药物溶出不受其溶解性的显著影响。倍量，以保证药物溶出不受其溶解性的显著影响。该理念的推出，是美国学者在最初建立溶出度试该理念的推出，是美国学者在最初建立溶出度试验方法时，斟酌确定溶出杯体积时所推出的一个概验方法时，斟酌确定溶出杯体积时所推出的一个概念，从当时所研究的药物出发，针对该理念，念，从当时所研究的药物出发，针对该理念，1000ml溶出杯可基本满足大部分药物。溶出杯可基本满足大部分药物。现今，溶出介质体积已固定、通常选用现今，溶出介质体积已固定、通常选用9001000ml。以此为出发点，如根据某药物在某。以此为出发点，如根据某药物在某溶出介质中的溶解度值来推算采用溶出介质中的溶解度值来推算采用“何种溶出介质何种溶出介质”或或“添加多少浓度的表面活性剂添加多少浓度的表面活性剂”，将完全无视将完全无视“药物制剂药物制剂”的作用的作用！将将“药剂可以改善药物的水难溶性药剂可以改善药物的水难溶性”这一至关重这一至关重要的理念完全摈弃了！要的理念完全摈弃了！所以，该理念在现今溶出度所以，该理念在现今溶出度试验应用中已基本无用武之地。试验应用中已基本无用武之地。v溶出介质配制方法：溶出介质配制方法：(1)各国不尽相同、建议根据原研制剂生产厂商的国别而定。各国不尽相同、建议根据原研制剂生产厂商的国别而定。详细配制方法请参阅本人撰写的文章。详细配制方法请参阅本人撰写的文章。(2)表面活性剂加入时，一定采用煮沸法配制，绝对不要采表面活性剂加入时，一定采用煮沸法配制，绝对不要采用超声法（盐的溶解方式亦如此）。用超声法（盐的溶解方式亦如此）。(3)离子浓度越低、样品越不易溶出，则要求越高！离子浓度越低、样品越不易溶出，则要求越高！(4)试验前应首先进行原料药在各试验前应首先进行原料药在各pH值溶出介质中的稳定性值溶出介质中的稳定性考察，以确保试验数据的准确测定。考察，以确保试验数据的准确测定。在日本橙皮书中，就罗在日本橙皮书中，就罗列了该药物在各种溶出介质中的稳定性数据。列了该药物在各种溶出介质中的稳定性数据。v对原研制剂的剖析对原研制剂的剖析（知己知彼、百战不殆！）：（知己知彼、百战不殆！）：普通制剂与肠溶制剂可为普通制剂与肠溶制剂可为5、10、15、20、30、45、60、90、120分钟，此后每隔分钟，此后每隔1小时直至小时直至6小时止；缓控释制剂可小时止；缓控释制剂可为为15、30、45、60、90、120分钟，分钟，3、4、5、6、8、10、12、24小时。小时。当连续两点溶出率均达当连续两点溶出率均达90%（缓控释制剂为（缓控释制剂为85%）以上、且差值在）以上、且差值在5%以内时，试验则可提前结束。以内时，试验则可提前结束。在酸性介质中最长测定时间为在酸性介质中最长测定时间为2小时，在其他各小时，在其他各pH值介质值介质中普通制剂为中普通制剂为6小时，缓控释制剂为小时，缓控释制剂为24小时。小时。v对原研制剂的剖析：对原研制剂的剖析：片剂：桨板法片剂：桨板法/50转起始。转起始。胶囊剂：转篮法胶囊剂：转篮法/50转或桨板法转或桨板法/50转（加沉降蓝）起始。转（加沉降蓝）起始。不建议采用小杯法，不建议采用小杯法，一律采用一律采用900ml或或1000ml。如样品浓度过低，可采用加大进样量至如样品浓度过低，可采用加大进样量至50500l。v对原研制剂的剖析：对原研制剂的剖析：v在某溶出介质中最终溶出量未达要求、无法进行比较时，在某溶出介质中最终溶出量未达要求、无法进行比较时，首选加表面活性剂方式：浓度以首选加表面活性剂方式：浓度以0.01(w/v)为起点、按照为起点、按照1、2、5级别逐步增加，不建议采用级别逐步增加，不建议采用3.0%以上浓度。以上浓度。v但当精密度差、必须提高精密度才能使溶出均值更具代但当精密度差、必须提高精密度才能使溶出均值更具代表性时，采用提高转速至表性时，采用提高转速至75100转方式。转方式。有机溶剂：对比剖析时可加入，但最终拟定质量标准时有机溶剂：对比剖析时可加入，但最终拟定质量标准时决不允许添加。（其后决不允许添加。（其后“倾斜试验倾斜试验”详述详述）阐述最常用的十二烷基硫酸钠和吐温阐述最常用的十二烷基硫酸钠和吐温-80的优缺点的优缺点装置：桨板法装置：桨板法转速：转速：100转转加入表面活性剂：加入表面活性剂：3.0%浓度浓度引申至引申至创新药创新药：在以上条件下，如仍难以有任何一个介质：在以上条件下，如仍难以有任何一个介质达达85%以上溶出量，则建议慎重以上溶出量，则建议慎重考虑，放弃研发！（说明考虑，放弃研发！（说明这是比石头还坚硬的药物！）这是比石头还坚硬的药物！）v原研制剂曲线类型原研制剂曲线类型无需采用无需采用f1和和f2因子比较。因子比较。仿制制剂在仿制制剂在15分钟内平均溶出率也达分钟内平均溶出率也达85%以上。以上。强调强调:无需关注无需关注5、10分钟、分钟、20/30分钟溶出量，但需测定。分钟溶出量，但需测定。v原研制剂曲线类型原研制剂曲线类型采用采用f2因子比较时，比较因子比较时，比较5或或10、15、30分钟三个时分钟三个时间点。（根据溶出量等分原则选择间点。（根据溶出量等分原则选择5或或10min）对应于参比制剂平均溶出率分别为对应于参比制剂平均溶出率分别为60和和85两个两个时间点，两者平均溶出量差均在时间点，两者平均溶出量差均在15%范围内；范围内；采用采用f1和和f2因子比较法。因子比较法。F1 因因 子子 计计算算 公公 式式Rt和和Tt分别表示两制剂在第分别表示两制剂在第n个取样点的平均累积溶出率。个取样点的平均累积溶出率。F2 因因 子子 计计算算 公公 式式Rt和和Tt分别表示两制剂在第分别表示两制剂在第n个取样点的平均累积溶出率。个取样点的平均累积溶出率。n对于计算结果的贡献尤甚！对于计算结果的贡献尤甚！(1)溶出量在溶出量在85%（缓控释制剂（缓控释制剂80%）以上的时间）以上的时间点仅能选取一个。点仅能选取一个。(2)普通速释制剂选取普通速释制剂选取34个、缓控释制剂选取个、缓控释制剂选取35个时间点。个时间点。因因f2因子计算结果有依赖于比较时因子计算结果有依赖于比较时间点个数的特性（列举间点个数的特性（列举Excel软件计算具体实例，软件计算具体实例，本人可提供）。本人可提供）。(3)时间点的选择以溶出量尽可能等分为原则。时间点的选择以溶出量尽可能等分为原则。v精密度的优劣说明均值是否具有代表性精密度的优劣说明均值是否具有代表性：（注意非测定时间点、而是计算时间点）（注意非测定时间点、而是计算时间点）以上所选用的第一时间点溶出结果变异系数以上所选用的第一时间点溶出结果变异系数(RSD)应不得过应不得过20%，自第二时间点至最后时间点溶出结果变异系数，自第二时间点至最后时间点溶出结果变异系数(RSD)均应均应不得过不得过10%。若不符合，应从仪器适用性予以考虑解决，如若不符合，应从仪器适用性予以考虑解决，如增加转速增加转速。对于本身变异性较大的品种，对于本身变异性较大的品种，n应增至应增至1218。如如各时间点各时间点变异系数超出规定，说明变异系数超出规定，说明制剂工艺制剂工艺/处方筛选尚待处方筛选尚待优化、工艺尚未稳定。优化、工艺尚未稳定。 f1因子应介于因子应介于015；f2因子应至少大于因子应至少大于50。比较时间点溶出量平均差异比较时间点溶出量平均差异2%5%10%15%20%2因子临界值因子临界值8365504136 若直接观察，各时间点差异均在若直接观察，各时间点差异均在10%以内，则可断定以内，则可断定2因因子大于子大于50。体外溶出曲线比对的附加要求体外溶出曲线比对的附加要求()、弥补、弥补BE试验不足试验不足 当某些药物要求必须饭后服用、且生物等效性试验需分当某些药物要求必须饭后服用、且生物等效性试验需分别进行别进行“空腹空腹”与与“进食进食”两种状态下时，体外溶出度试验两种状态下时，体外溶出度试验则需进行溶出介质中添加酶液研究。则需进行溶出介质中添加酶液研究。 当原研制剂具有延迟释放现象时当原研制剂具有延迟释放现象时（现已发现至少（现已发现至少10%原原研品有该现象）研品有该现象），仿制制剂亦应具有该现象；两者平均延迟，仿制制剂亦应具有该现象；两者平均延迟时间差不应超出时间差不应超出35分钟，各自减去延迟时间后再行溶出曲分钟，各自减去延迟时间后再行溶出曲线比较。否则将会出现线比较。否则将会出现BE试验中的试验中的tmax不一致结果。不一致结果。 原研品使用说明书明确标注：本品吸收易受食物原研品使用说明书明确标注：本品吸收易受食物影响影响 所有缓控释制剂所有缓控释制剂 原研品标注为原研品标注为“本品仅能在进食状态下服用本品仅能在进食状态下服用”时，时，体内仅做进食状态下的体内仅做进食状态下的BE试验即可。试验即可。国外目前必须进行国外目前必须进行“进食进食”状态下的状态下的BE试验试验 为防止剂量倾泻（为防止剂量倾泻（dose-dumping）现象发生）现象发生在最具区分力的溶出介质中，还要增加在最具区分力的溶出介质中，还要增加100或或200转比较研究；肠溶制剂还要增加转比较研究；肠溶制剂还要增加pH6.0溶出介质稀释溶出介质稀释5倍后倍后的比对研究。的比对研究。在最具区分力的溶出介质中，增加在最具区分力的溶出介质中，增加5%、20%和和40%有机溶剂溶出介质测定比对。有机溶剂溶出介质测定比对。 观测仿制制剂能否像原研制剂那样观测仿制制剂能否像原研制剂那样“收放自如收放自如”！ 已上市缓控释制剂极发生已上市缓控释制剂极发生“剂量倾泻现象剂量倾泻现象”。体外溶出曲线比对的附加要求体外溶出曲线比对的附加要求()、弥补、弥补BE试验不足试验不足某一原研制剂某一原研制剂添加不同有机溶剂时的溶出曲线添加不同有机溶剂时的溶出曲线某一仿制制剂某一仿制制剂添加不同有机溶剂时的溶出曲线添加不同有机溶剂时的溶出曲线红色为原研制剂；蓝色为仿制制剂红色为原研制剂；蓝色为仿制制剂体外溶出度试验的意义体外溶出度试验的意义总之，体外溶出度试验比对得越充分、越全面，越可使仿总之，体外溶出度试验比对得越充分、越全面，越可使仿制品内在品质无限趋近于原研品。目前制品内在品质无限趋近于原研品。目前“关于通过关于通过BE试验试验的仿制品在临床疗效上依然有别于原研品的仿制品在临床疗效上依然有别于原研品”的报道也在逐渐的报道也在逐渐增多，故该实验可最大程度上弥补增多，故该实验可最大程度上弥补BE试验的不足。这就是试验的不足。这就是溶出度试验最值得借鉴之处！溶出度试验最值得借鉴之处！同时，这一要求也可为仿制药的申报审评设立一个科学合同时，这一要求也可为仿制药的申报审评设立一个科学合理的理的“高标准、严要求高标准、严要求”技术门槛，从而有效地遏制仿制药技术门槛，从而有效地遏制仿制药的申报数量、切实提高仿制药品质。的申报数量、切实提高仿制药品质。“日本日本薬薬品品品品質質再再評価評価工程工程”针对的药物类型针对的药物类型主要针对于生物药剂学分类系统的主要针对于生物药剂学分类系统的和和类药物。类药物。这些类型药物目前又多是较为热门药物：如心血管这些类型药物目前又多是较为热门药物：如心血管类、抗高血压、高血脂类。截止目前、日本已进行类、抗高血压、高血脂类。截止目前、日本已进行了约了约700个品种的标准溶出曲线绘制工作。个品种的标准溶出曲线绘制工作。u全部译文已于今年全部译文已于今年1月份在药审中心网站主页登出月份在药审中心网站主页登出“日本日本薬薬品品品品質質再再評価評価工程工程”的流程的流程v一年一年34次，一次次，一次2030个品种，每次结束后有专门的个品种，每次结束后有专门的书籍出版。书籍出版。原创厂先行测定本厂产品多条溶出曲线，报送给国家；经原创厂先行测定本厂产品多条溶出曲线，报送给国家；经专家与该企业协商沟通后确定并予以公布专家与该企业协商沟通后确定并予以公布“标准四条溶出曲标准四条溶出曲线线”。仿制厂家根据该仿制厂家根据该“曲线曲线”，测定本厂品种，并将资料报送，测定本厂品种，并将资料报送，一致一致则通过；如不一致将给一定的时间进行制剂工艺的改进。则通过；如不一致将给一定的时间进行制剂工艺的改进。仍未果、文号撤销！仍未果、文号撤销！卡马西平片的四条溶出曲线卡马西平片的四条溶出曲线桨板法、桨板法、75转、在四种介质中转、在四种介质中，5分钟和分钟和30分钟时分别取样测定，限度分别为不得分钟时分别取样测定，限度分别为不得过过60%和不得少于和不得少于70%。我国药典：桨板法、我国药典：桨板法、150转、转、0.1mol/L盐盐酸酸1000ml、60min、65公布标准批号的意义公布标准批号的意义完美制剂的完美表达！完美制剂的完美表达！尼群地平片的四条溶出曲线尼群地平片的四条溶出曲线桨板法、桨板法、100转、在四种介质中（其中均含转、在四种介质中（其中均含0.15的吐温的吐温-80），45分钟，限度均为分钟，限度均为70%中国药典：桨板法、中国药典：桨板法、100转、转、0.1mol/L盐酸溶盐酸溶液乙醇液乙醇(70:30)900ml，60分钟，分钟，60%。法莫替丁片的四条溶出曲线法莫替丁片的四条溶出曲线“错落有致错落有致”与与“溶解度溶解度”相一相一致致阐述仿制阐述仿制药意义！药意义！奥美拉唑肠溶片四条溶出曲线奥美拉唑肠溶片四条溶出曲线pH4.06.0间的间的研究国内几乎无人研究国内几乎无人去做！国产肠溶衣去做！国产肠溶衣缺陷所在。缺陷所在。延迟释放请注意！延迟释放请注意！茶茶碱碱缓缓释释片片桨板法、桨板法、50转、在四种介质中转、在四种介质中完美缓释制剂的完美表达！完美缓释制剂的完美表达！（予以着重诠释！）（予以着重诠释！）硝硝苯苯地地平平缓缓释释片片完美缓释制剂的完美表达！完美缓释制剂的完美表达！（予以着重诠释！）（予以着重诠释！）日本的仿制药申报规定与其后的质量控制日本的仿制药申报规定与其后的质量控制第一步：第一步：生产规模不小于生产规模不小于10万单位或今后最大生产规模万单位或今后最大生产规模的的1/10。第二步：第二步：四条溶出曲线与原研制剂（或公布出来）一致。四条溶出曲线与原研制剂（或公布出来）一致。如不一致，根据不一致的如不一致，根据不一致的pH值，有针对性地选取值，有针对性地选取BE试试验受试者。（故验受试者。（故日本橙皮书日本橙皮书中极个别品种有两套中极个别品种有两套“标准四条溶出曲线标准四条溶出曲线”）第三步：上市后的产品抽查采用多条溶出曲线评价。第三步：上市后的产品抽查采用多条溶出曲线评价。【这样就起到了事半功倍、一针见血的监管功效这样就起到了事半功倍、一针见血的监管功效】“第三条规定第三条规定”所带来的震撼力！所带来的震撼力！严格控制生产工艺，每批生产样品均要保持均一。严格控制生产工艺，每批生产样品均要保持均一。批间差异评价：均以绘制得到的原研制剂标准曲线为批间差异评价：均以绘制得到的原研制剂标准曲线为蓝本，最终导致蓝本，最终导致“质量源于设计（简称质量源于设计（简称QbD）”理念理念的形成！的形成！该规定如同该规定如同“紧箍咒紧箍咒”，对企业生产提出了更高、更，对企业生产提出了更高、更严谨的要求！严谨的要求！因溶出曲线自该样品合法诞生之日起，便因溶出曲线自该样品合法诞生之日起，便开始伴随，其必须保持恒定性与稳定性！开始伴随，其必须保持恒定性与稳定性！（讲述案例）（讲述案例）“撬动撬动”了整个日了整个日本制药行业和相关产本制药行业和相关产业的全面发展业的全面发展!对固体制剂溶对固体制剂溶出度的深入研出度的深入研究和严格要求究和严格要求犹如犹如“四两拨千斤四两拨千斤”美国美国FDA/CDER属下的仿制药办公室里的生物等效部，属下的仿制药办公室里的生物等效部，为提高仿制药的内在品质、强化检测的各项规范，也采取额为提高仿制药的内在品质、强化检测的各项规范，也采取额同样的做法，规定了一个最能反映内在品质的溶出介质。其同样的做法，规定了一个最能反映内在品质的溶出介质。其出发点与日本是完全一致的！该工作从出发点与日本是完全一致的！该工作从2004年初开始，每季年初开始，每季度更新一次。（度更新一次。（bytheDivisionofBioequivalence,OfficeofGenericDrugs.）网址：网址：http:/www.accessdata.fda.gov/scripts/cder/dissolution/index.cfmDrugNameDosageFormUSPApparatusSpeed(RPMs)MediumVolume(mL)RecommendedSamplingTimes(minutes)DateUpdatedAcarboseTabletII(Paddle)75Water(deaerated)90010,20,30and4501/12/2004溶出度技术应用（二）溶出度技术应用（二）(1)pKa值或其他常数测定，以及药物成盐形式值或其他常数测定，以及药物成盐形式(2) 原料药在各原料药在各pH值溶出介质中的溶解度值溶出介质中的溶解度(3)粒径分布及比表面积对溶出度的影响粒径分布及比表面积对溶出度的影响 （应注意的是（应注意的是“粒径并非越小越好粒径并非越小越好”！）！）(4)多晶型药物（有效晶型及形状）、各晶型溶解性多晶型药物（有效晶型及形状）、各晶型溶解性(5) 原料药直接做溶出度试验（考察以上各参数）原料药直接做溶出度试验（考察以上各参数） 通过溶出度试验对以上这些有可能影响到生物利用度通过溶出度试验对以上这些有可能影响到生物利用度的特性予以优化，以获得更佳药物特性！的特性予以优化，以获得更佳药物特性！对于原料药和辅料相关性质的研究对于原料药和辅料相关性质的研究溶出度技术应用（三）溶出度技术应用（三） 通过对产品溶出曲线的测定，可以评价出生产工艺是否通过对产品溶出曲线的测定，可以评价出生产工艺是否稳定；还可通过批间稳定；还可通过批间/批内样品溶出曲线的比较，辨明内在批内样品溶出曲线的比较，辨明内在质量是否发生改变。质量是否发生改变。 值得一提的是：在质量研究稳定性考核中，对于考核各值得一提的是：在质量研究稳定性考核中，对于考核各时间点样品内在品质是否有所变化亦可通过溶出曲线的测时间点样品内在品质是否有所变化亦可通过溶出曲线的测定和比较予以知晓和确证。定和比较予以知晓和确证。 14号资料中增加测定号资料中增加测定6个月长期试验与加速试验样品多个月长期试验与加速试验样品多条溶出曲线测定、起到条溶出曲线测定、起到“画龙点睛画龙点睛”之效！之效！对于生产工艺稳定性、批间对于生产工艺稳定性、批间/批内以及批内以及稳定性考核样品内在质量均一性的评价稳定性考核样品内在质量均一性的评价生物利用度的不同同一厂家不同批号间内在品质差异性同一厂家不同批号间内在品质差异性在胃肠道溶出的不同溶出度试验溶出度试验可以反映可以反映溶出度技术应用（四）溶出度技术应用（四） 药物在一个长时间生产过程中，出于各种各样的药物在一个长时间生产过程中，出于各种各样的目的可能会发生众多变更，如处方变更、工艺变更、目的可能会发生众多变更，如处方变更、工艺变更、生产规模变更（放大或缩小）、原辅料来源变更、生产规模变更（放大或缩小）、原辅料来源变更、生产场地变更等情况。以上这些变更在一定范围内生产场地变更等情况。以上这些变更在一定范围内的变化是否会影响到该药物的生物特性，亦可通过的变化是否会影响到该药物的生物特性，亦可通过比较变更前后产品体外溶出曲线的方法来予以科学比较变更前后产品体外溶出曲线的方法来予以科学评估与预测，从而佐证变更前后是否需要再进行评估与预测，从而佐证变更前后是否需要再进行BA或或BE研究。研究。对于各类变更的评价（尤为对于各类变更的评价（尤为“放大放大”）溶出度技术应用（五）溶出度技术应用（五） 目前、仿制药市场蓬勃发展、方兴未艾，同一产目前、仿制药市场蓬勃发展、方兴未艾，同一产品皆有众多厂家生产。针对这些产品内在品质的差品皆有众多厂家生产。针对这些产品内在品质的差异，亦可通过相互间溶出曲线的测定和比较予以揭异，亦可通过相互间溶出曲线的测定和比较予以揭示和判断，因为每一产品皆采用示和判断，因为每一产品皆采用BE/BA试验来予以试验来予以评价是不现实的！评价是不现实的！对于不同来源同一制剂产品内在品质的评价对于不同来源同一制剂产品内在品质的评价溶出度技术应用（六）溶出度技术应用（六） 在以上各方面、亦可通过测定和比较溶出曲线来在以上各方面、亦可通过测定和比较溶出曲线来判断流通环节样品、有效期内样品、市场监督样品判断流通环节样品、有效期内样品、市场监督样品内在品质是否发生变化。内在品质是否发生变化。 简述日本国家药监部门的市场监督作法。简述日本国家药监部门的市场监督作法。用于流通环节样品、有效期内样品、用于流通环节样品、有效期内样品、市场监督样品市场监督样品内在品质的评价内在品质的评价对以上应用的感悟对以上应用的感悟国内某知名企业在期刊杂志上的广告：国内某知名企业在期刊杂志上的广告：原料药相关杂质质量标准与进口注册标准一致。原料药相关杂质质量标准与进口注册标准一致。胶囊采用先进的固体分担技术，确保溶解度与溶出度。胶囊采用先进的固体分担技术，确保溶解度与溶出度。胶囊采用塑泡罩式包装，外加复合膜袋，确保产品的溶胶囊采用塑泡罩式包装，外加复合膜袋，确保产品的溶出度与标示量的稳定性。出度与标示量的稳定性。溶出度技术应用（七）溶出度技术应用（七） 体外溶出度试验还有助于对潜在风险的评价和预体外溶出度试验还有助于对潜在风险的评价和预测，特别是对治疗窗（亦称测，特别是对治疗窗（亦称“治疗指数治疗指数”）狭窄药）狭窄药物的突释等方面的一些指示作用。物的突释等方面的一些指示作用。 例如：中国药典格列齐特片例如：中国药典格列齐特片(II)拟定拟定60分钟和分钟和180分钟时分别不得过分钟时分别不得过50%和不得少于和不得少于75%；卡马西平；卡马西平片和氨茶碱片在片和氨茶碱片在日本橙皮书日本橙皮书中拟定中拟定5分钟和分钟和30分钟时分别不得过分钟时分别不得过60%和不得少于和不得少于70%。对于对于“治疗窗狭窄治疗窗狭窄”药物的评价药物的评价“治疗窗窄治疗窗窄”的药物清单的药物清单盐酸阿普林定、盐酸异丙肾上腺素、炔雌醇、乙琥胺、盐酸阿普林定、盐酸异丙肾上腺素、炔雌醇、乙琥胺、卡马西平、卡马西平、硫酸奎尼丁、硫酸胍乙啶、盐酸克林霉素、氯硝硫酸奎尼丁、硫酸胍乙啶、盐酸克林霉素、氯硝西泮、盐酸可乐定、洋地黄毒苷、环孢素、地高辛、磷酸丙西泮、盐酸可乐定、洋地黄毒苷、环孢素、地高辛、磷酸丙吡胺、唑尼沙胺、他克莫司、西罗莫司、吗替麦考酚酯、丙吡胺、唑尼沙胺、他克莫司、西罗莫司、吗替麦考酚酯、丙戊酸（钠）、苯妥英、苯巴比妥、盐酸哌唑嗪、扑米酮、盐戊酸（钠）、苯妥英、苯巴比妥、盐酸哌唑嗪、扑米酮、盐酸普鲁卡因胺、酸普鲁卡因胺、甲氨蝶呤、甲氨蝶呤、碳酸锂、华法林（钠）、格列本碳酸锂、华法林（钠）、格列本脲、甲苯磺丁脲、格列吡脲、醋酸己脲、妥拉磺脲、格列齐脲、甲苯磺丁脲、格列吡脲、醋酸己脲、妥拉磺脲、格列齐特、茶碱、二羟丙茶碱、氨茶碱、胆茶碱、硫酸奥西那林、特、茶碱、二羟丙茶碱、氨茶碱、胆茶碱、硫酸奥西那林、米诺地尔、双丙戊酸钠。米诺地尔、双丙戊酸钠。溶出度技术应用（八）溶出度技术应用（八） 溶出曲线与原研制剂相差甚远，从而证明其为假溶出曲线与原研制剂相差甚远，从而证明其为假药。药。 处方工艺中加入表面活性剂，使其迅速溶出，为处方工艺中加入表面活性剂，使其迅速溶出，为使使“按质量标准检验时按质量标准检验时”溶出度合格。溶出度合格。对于对于“专业造假专业造假”的甄别的甄别不同不同“弧度弧度”的多条特定溶出曲线现已成为的多条特定溶出曲线现已成为“剖析剖析”和和“肢解肢解”固体制剂内在品质的一种固体制剂内在品质的一种手段、一种外在的表象与投影！手段、一种外在的表象与投影！溶出度技术应用（九）溶出度技术应用（九）(1)对于速释制剂仿制药的研发：对于速释制剂仿制药的研发： 当原料药属于当原料药属于BCS分类系统第一类药物时，原研制剂与仿分类系统第一类药物时，原研制剂与仿制制剂皆能在多种溶出介质中制制剂皆能在多种溶出介质中15分钟溶出量达分钟溶出量达85%以上。以上。(2)在既有大规格基础上、增加小规格制剂：在既有大规格基础上、增加小规格制剂： 处方处方/制剂工艺基本不变，体外溶出曲线一致时，则可减免制剂工艺基本不变，体外溶出曲线一致时，则可减免BE试验。试验。反之不可、还应进行反之不可、还应进行BE试验。（重点讲述）试验。（重点讲述）对于申请豁免对于申请豁免生物等效性生物等效性(BE)试验试验的作用的作用“生物药剂学（简称生物药剂学（简称BCS）分类系统）分类系统”l第一类药物：高溶解性第一类药物：高溶解性高渗透性高渗透性l第二类药物：低溶解性第二类药物：低溶解性高渗透性高渗透性l第三类药物：高溶解性第三类药物：高溶解性低渗透性低渗透性l第四类药物：低溶解性第四类药物：低溶解性低渗透性低渗透性高溶解性药物：最高剂量规格的制剂能在高溶解性药物：最高剂量规格的制剂能在pH值值1.08.0的的250ml或更少体积的水溶液中溶解的药物。或更少体积的水溶液中溶解的药物。高渗透性药物：是指绝对生物利用度超过高渗透性药物：是指绝对生物利用度超过90%的药物。的药物。（阐述溶出度试验与四种药物的关系、（阐述溶出度试验与四种药物的关系、研发重点研发重点）申请豁免生物等效性试验的其他条件申请豁免生物等效性试验的其他条件除满足以上条件外，还应满足：除满足以上条件外，还应满足：(1)该制剂中的辅料量与主药量相比，不能过大；该制剂中的辅料量与主药量相比，不能过大；(2)且辅料中不能加入表面活性剂；且辅料中不能加入表面活性剂；(3)活性成分应为宽治疗指数药物；活性成分应为宽治疗指数药物；(4)同一制剂不同规格的速释制剂。同一制剂不同规格的速释制剂。世界卫生组织世界卫生组织网站公布的药物清单（网站公布的药物清单（30个）个）（截止（截止2010年年11月）月）(http:/www.fip.org/bcs)对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 = = 扑热息痛扑热息痛 乙酰唑胺乙酰唑胺 阿昔洛韦阿昔洛韦盐酸阿米替林盐酸阿米替林 阿替洛尔阿替洛尔 磷酸氯喹磷酸氯喹硫酸氯喹硫酸氯喹 盐酸氯喹盐酸氯喹 西咪替丁西咪替丁盐酸环丙沙星盐酸环丙沙星 双氯芬酸钾双氯芬酸钾 双氯芬酸钠双氯芬酸钠盐酸强力霉素盐酸强力霉素 二盐酸乙胺丁醇二盐酸乙胺丁醇 呋塞米呋塞米布洛芬布洛芬 异烟肼异烟肼 拉米夫定拉米夫定左氧氟沙星左氧氟沙星 盐酸甲氟喹盐酸甲氟喹 甲硝唑甲硝唑酸甲氧氯普胺酸甲氧氯普胺 强的松龙强的松龙 强的松强的松盐酸普奈洛尔盐酸普奈洛尔 吡嗪酰胺吡嗪酰胺 硫酸奎纳定硫酸奎纳定盐酸雷尼替丁盐酸雷尼替丁 利福平利福平 盐酸维拉帕米盐酸维拉帕米溶出度技术应用（十）溶出度技术应用（十） 应以尽可能地在多应以尽可能地在多pH值溶出介质中具有较高的溶出量或尽可能值溶出介质中具有较高的溶出量或尽可能地在多地在多pH值溶出介质中具有缓释释放特性为出发点，来筛选制剂值溶出介质中具有缓释释放特性为出发点，来筛选制剂处方、工艺或辅料等影响生物特性的制剂因素，并寻找到能够区分处方、工艺或辅料等影响生物特性的制剂因素，并寻找到能够区分出这些因素优劣的溶出度试验条件。然后再逐步通过动物试验来予出这些因素优劣的溶出度试验条件。然后再逐步通过动物试验来予以佐证这种体外区分在动物体内生物利用度的差异，从而建立起体以佐证这种体外区分在动物体内生物利用度的差异，从而建立起体内外相关性；并最终依据以上原则科学、合理、系统化地拟定质量内外相关性；并最终依据以上原则科学、合理、系统化地拟定质量标准。标准。 当制剂工艺与处方确定后，溶出曲线的测定用于确定规格。当制剂工艺与处方确定后，溶出曲线的测定用于确定规格。对于对于“创新药创新药”和和“更改剂型更改剂型”的贡献的贡献(1)人人体体内内肠肠灌灌注注试试验验。当当该该法法用用于于渗渗透透性性研研究究时时，应应证证明明方方法法的的适适用用性性：包包括括相相对对于于已已经经证证明明剂剂量量的的吸吸收收比比例例至至少少达达85%的的参参比比物物物物质质的的相相对对渗渗透透性性测测定定，以以及及阴阴性性对对照照药药品品测测定；并应通过下列定；并应通过下列(2)(3)补充试验提供支持性数据补充试验提供支持性数据.(2)采用动物模型进行体内或原位肠灌注试验；采用动物模型进行体内或原位肠灌注试验；(3)采采用用渗渗透透性性已已知知的的活活性性药药物物成成分分以以及及经经过过验验证证的的方方法法，在在培培养养的的上上皮皮细细胞胞单单层层（例例如如，Caco-2）进进行行体体外外渗渗透透性性研究。研究。影响药物透膜性的主要因素有分子质量、亲脂性和分子中的氢影响药物透膜性的主要因素有分子质量、亲脂性和分子中的氢键。键。根据根据“ruleof5”规则，若药物分子（转运载体底物除外）规则，若药物分子（转运载体底物除外）满足下列任两个条件，往往预示该药物具有较差的透膜性，这对满足下列任两个条件，往往预示该药物具有较差的透膜性，这对新药设计和合成以及早期药物结构式的筛选皆具有重要意义：新药设计和合成以及早期药物结构式的筛选皆具有重要意义：含含5个以上氢键供体（个以上氢键供体（-OH或或-NH）；）；含含10个以上氢键受体（个以上氢键受体（N或或O）。）。logP5【P为在正辛醇为在正辛醇/水中的分配系数水中的分配系数】；分子量超过分子量超过500，尤其是，尤其是1000以上的多肽类药物或具有大分子以上的多肽类药物或具有大分子团结构式的抗生素类药物。团结构式的抗生素类药物。目前，在创新药物研发时，对于具有生理活性的新化合目前，在创新药物研发时，对于具有生理活性的新化合物是否适合制成制剂，是否有待做进一步的结构式修饰与调物是否适合制成制剂，是否有待做进一步的结构式修饰与调整后再制成制剂等问题上，对该结构式药物进行前期溶解性整后再制成制剂等问题上，对该结构式药物进行前期溶解性与渗透性研究将发挥决定性作用。所以、对于新型、前体药与渗透性研究将发挥决定性作用。所以、对于新型、前体药物的此部分研究愈发受到重视与瞩目；因此，设计出多种模物的此部分研究愈发受到重视与瞩目；因此，设计出多种模拟人体的模型用于此项研究，现阶段在全球制药业基础研究拟人体的模型用于此项研究，现阶段在全球制药业基础研究领域中正如火如荼、方兴未艾般地展开着！领域中正如火如荼、方兴未艾般地展开着！以上理论虽知晓，但要确定某药物的渗透性仍感以上理论虽知晓，但要确定某药物的渗透性仍感“力不力不从心从心”！好在美国口服药物传递研究公司（！好在美国口服药物传递研究公司（TherapeuticSystemsResearchLaboratoriesInc，简称，简称TSRL公司）公司）在该公司网站提供了免费查询系统，网址为：在该公司网站提供了免费查询系统，网址为：http:/166.78.14.201/tsrlinc.com/services/bcs/search.cfm，其中还有该药物的其他物理化学参数。同时、该网站还，其中还有该药物的其他物理化学参数。同时、该网站还有有关有有关BCS分类系统的详尽阐述，大家可参阅！分类系统的详尽阐述，大家可参阅！缓控释制剂研发成为近两年热点。缓控释制剂研发成为近两年热点。（研发移交（研发移交）出现问题与关注热点出现问题与关注热点(1)参比制剂的选择，如研发参比制剂的选择，如研发“硝苯地平缓释片硝苯地平缓释片”。(2)对工作难度、资金投入、时间消耗认识不足对工作难度、资金投入、时间消耗认识不足，依然秉承老，依然秉承老观念。观念。(3)对制药机械设备与分析仪器上的投入不足。对制药机械设备与分析仪器上的投入不足。(4)申报时如何规避无进口注册证的辅料（申报技巧）。申报时如何规避无进口注册证的辅料（申报技巧）。(5)“缓释掰服片缓释掰服片”的研发是一个卖点。（讲述质量评价要求）的研发是一个卖点。（讲述质量评价要求）目前国内研发现状目前国内研发现状秉承国家药审中心提出的秉承国家药审中心提出的“仿产品不是仿标准仿产品不是仿标准”，现今研，现今研发仿制药正确思路如下：发仿制药正确思路如下：第一步：第一步：查询既有质量标准：各国药典、国家药监局标准、查询既有质量标准：各国药典、国家药监局标准、进口质量标准以及其他资料进口质量标准以及其他资料日本橙皮书、美国溶出曲线数日本橙皮书、美国溶出曲线数据库以及美国临床用药手册（据库以及美国临床用药手册（PDR）、国内已发表文献）、国内已发表文献。日本仿制药技术申报资料概要（采用日本仿制药技术申报资料概要（采用“医医薬薬品品”在在Google上收索即可查询到，内容仅为日文）上收索即可查询到，内容仅为日文）。第二步：第二步：取取13批原研品，用多条溶出曲线循序渐进般批原研品，用多条溶出曲线循序渐进般“剖剖析与肢解析与肢解”后（再辅以有关物质的厘清），如既有质量标准后（再辅以有关物质的厘清），如既有质量标准与研究论证结果相符（既溶出度试验各参数），证明既有标与研究论证结果相符（既溶出度试验各参数），证明既有标准科学客观，可参照。如发现既有标准制订得不合理、无法准科学客观，可参照。如发现既有标准制订得不合理、无法正确反映该药品应具有的内在优良品质，此时决不能画地为正确反映该药品应具有的内在优良品质，此时决不能画地为牢、以讹传讹，应更改。牢、以讹传讹，应更改。相信，药审中心老师肯定会欢迎此种更改，因为这充分相信，药审中心老师肯定会欢迎此种更改，因为这充分说明该研发人员的说明该研发人员的“艺高人胆大艺高人胆大”！（呵呵！（呵呵）第三步：第三步：自身仿制品的开发，从小试、中试、放大直至具备自身仿制品的开发，从小试、中试、放大直至具备一定生产规模。每一阶段样品的多条释放曲线皆应与原研品一定生产规模。每一阶段样品的多条释放曲线皆应与原研品一致。一致。研发进程中、研发进程中、90%工作量在调溶出工作量在调溶出/释放曲线。释放曲线。研发时间：研发时间：速释制剂速释制剂处方筛选与制剂工艺研究处方筛选与制剂工艺研究/3个月个月+加速试验加速试验/3个月个月=约半年约半年/个。缓控释制剂：个。缓控释制剂：1.01.5年。年。工作量：工作量：速释制剂速释制剂/400500条曲线测定条曲线测定缓控释制剂缓控释制剂/10001200条曲线测定条曲线测定。费费用：用：第四步：第四步：深刻理解与把握研发进程中的深刻理解与把握研发进程中的“度度”！切忌切忌“用力过猛、陷入窠臼用力过猛、陷入窠臼”！搞技术不是搞艺术！搞技术不是搞艺术！如何事半功倍地进行研发工作？如何事半功倍地进行研发工作？(1-1)投样方式（桨板法）投样方式（桨板法）采用每间隔固定时间（如采用每间隔固定时间（如30秒）投样。秒）投样。(1-2)滤头滤头/针筒的取用针筒的取用建议采用建议采用“1个滤头个滤头/1个取样针筒方式个取样针筒方式”进行多样品抽取。进行多样品抽取。第第1份样品抽取份样品抽取1020ml后，过滤使滤膜吸附饱和，并将滤后，过滤使滤膜吸附饱和，并将滤液沿溶出杯壁缓慢注回，再抽取所需体积（如液沿溶出杯壁缓慢注回，再抽取所需体积（如HPLC法、法、12ml即可）即可，其后所有样品无需再弃去初滤液，直接即可）即可，其后所有样品无需再弃去初滤液，直接收集。收集。(2)尽可能采用尽可能采用HPLC法。一者可排除辅料法。一者可排除辅料/薄膜衣薄膜衣/肠溶衣肠溶衣/胶囊壳等易对紫外测定产生干扰的情况；二胶囊壳等易对紫外测定产生干扰的情况；二者，由于线性范围宽，样品均可直接进样测定，省者，由于线性范围宽，样品均可直接进样测定，省略了紫外测定要求吸收度值在略了紫外测定要求吸收度值在0.200.80间、样品间、样品需稀释的繁琐步骤，大大提高了工作效率。需稀释的繁琐步骤，大大提高了工作效率。(3-1)采用短色谱柱采用短色谱柱市售有市售有25cm长、粒径长、粒径510m的短分的短分析柱、析柱、(3-2)提高流动相中有机相比例。如此，虽然有杂质与主成提高流动相中有机相比例。如此，虽然有杂质与主成分未能分离的担忧，但考虑到样品已被稀释分未能分离的担忧，但考虑到样品已被稀释1000倍（溶出介倍（溶出介质体积通常为质体积通常为9001000ml），在此条件下，存在的微量杂），在此条件下，存在的微量杂质响应值已微乎其微，即便有所表现，其影响对于结果而言质响应值已微乎其微，即便有所表现，其影响对于结果而言亦是完全在误差范围之内，可忽略不计。亦是完全在误差范围之内，可忽略不计。(4)柱温升高至柱温升高至4050。色谱柱最高承受温度为。色谱柱最高承受温度为80，在，在60以下操作没有问题。以下操作没有问题。(5)流速亦可根据柱压提高至流速亦可根据柱压提高至1.52.0ml/min。(6)进样量可依据对照品溶液的精密度予以灵活调节。进样量可依据对照品溶液的精密度予以灵活调节。100l500l皆可。且对于小规格制剂，为提高精密度，缩皆可。且对于小规格制剂，为提高精密度，缩短保留时间，使色谱峰短保留时间，使色谱峰“变细变尖（锐）变细变尖（锐）”更为重要。更为重要。采用采用10%溶出量验证精密度。溶出量验证精密度。(7)HPLC法测定时取样量法测定时取样量12ml即可。对于小规格难溶性即可。对于小规格难溶性药物，可考虑取出后无需过滤，直接置于液相小瓶、放置药物，可考虑取出后无需过滤，直接置于液相小瓶、放置0.5小时后进样即可。小时后进样即可。因为在取样点位置处，吸取这么小体积携带出辅料的可能因为在取样点位置处，吸取这么小体积携带出辅料的可能性极小，即便有少量存在，静置后使其沉淀，就不会影响到性极小，即便有少量存在，静置后使其沉淀，就不会影响到测定，更不会堵塞色谱柱。测定，更不会堵塞色谱柱。这样，还可省略去溶出量累积计算的繁琐以及过滤时滤膜这样，还可省略去溶出量累积计算的繁琐以及过滤时滤膜吸附的担忧，起到吸附的担忧，起到“一举多得、事半功倍一举多得、事半功倍”的效果！的效果！(8)波长可根据峰面积，酌情选取末端吸收或非最波长可根据峰面积，酌情选取末端吸收或非最大吸收波长（详细讲述）。大吸收波长（详细讲述）。(9)如采用超高速液相测定，效果自然更好！但由如采用超高速液相测定，效果自然更好！但由于色谱柱粒径较小，样品液若不过滤，恐堵塞色于色谱柱粒径较小，样品液若不过滤，恐堵塞色谱柱，建议试验时验证后予以酌情考虑。谱柱，建议试验时验证后予以酌情考虑。(10)现今市场上主流品牌色谱仪皆已具有数据批量处理现今市场上主流品牌色谱仪皆已具有数据批量处理功能和打印功能（多张图谱结果打印在一张纸上），将功能和打印功能（多张图谱结果打印在一张纸上），将这些功能掌握后一次性编辑好模板，便可大大提高工作这些功能掌握后一次性编辑好模板，便可大大提高工作效率效率。本人曾在本人曾在20分钟内完成分钟内完成200个样品的数据处理（得到个样品的数据处理（得到溶出量），每一溶出量数据直接从软件中拷贝出、粘贴溶出量），每一溶出量数据直接从软件中拷贝出、粘贴至至Excel软件中、画出溶出曲线图的全部过程。软件中、画出溶出曲线图的全部过程。(11)如何进行累积计算，演示如何进行累积计算，演示Excel软件具体实例。软件具体实例。如何拟定质量标准中溶出度试验条件如何拟定质量标准中溶出度试验条件装置与体积的设定装置与体积的设定片剂片剂首选首选桨板法桨板法/50转转胶囊剂胶囊剂首选首选转蓝法转蓝法/50转，如体积过大或粉末过多堵塞网转，如体积过大或粉末过多堵塞网孔，可改为桨板法孔，可改为桨板法/50转、加沉降蓝。转、加沉降蓝。溶出介质体积统一采用溶出介质体积统一采用900ml1000ml。强烈不建议采用小杯法。强烈不建议采用小杯法。溶出介质的选择溶出介质的选择(1)在该介质中最终溶出量应达在该介质中最终溶出量应达85%以上。以上。(2)在体内吸收部位的生理在体内吸收部位的生理pH值。值。(3)建立起体内外相关性的那个介质。建立起体内外相关性的那个介质。(4)最有区分力的介质（对于来源不同的同一制剂）。最有区分力的介质（对于来源不同的同一制剂）。(5)最能反映工艺变化、偏差的那个介质（用于处方变更、最能反映工艺变化、偏差的那个介质（用于处方变更、生产场地的变更、工艺中关键参数的控制，即现在最耳熟生产场地的变更、工艺中关键参数的控制，即现在最耳熟能详的能详的QbD理念）理念）(6)最难溶的、即四条曲线中最低的介质最难溶的、即四条曲线中最低的介质（用于内控）。（用于内控）。(7)精密度更佳的介质。精密度更佳的介质。延伸至延伸至质量标准中应采用何介质？质量标准中应采用何介质？美国美国倾向于不用水，因受倾向于不用水，因受pH值影响！值影响！日本日本倾向于用水。倾向于用水。为环保、节能、清洁，便于清洗！为环保、节能、清洁，便于清洗！延伸至延伸至质量标准中取样时间点与限度如何拟定？质量标准中取样时间点与限度如何拟定？对于速释制剂对于速释制剂以第一次出现溶出量均在以第一次出现溶出量均在85%以上的两个时间点，且该两以上的两个时间点，且该两点溶出量差值在点溶出量差值在5%以内时，取前一个时间点作为质量标准以内时，取前一个时间点作为质量标准中的取样时间点，并将该点的溶出量减去中的取样时间点，并将该点的溶出量减去15%作为溶出限度，作为溶出限度，即得！（故仅有即得！（故仅有70%、75%、80%、85%四个数值）四个数值）国外已开始有两点法控制。对于国外已开始有两点法控制。对于治疗窗狭窄治疗窗狭窄药物药物/难溶性难溶性药物药物/需要缓慢释放等需要缓慢释放等的药物。的药物。增加前一时间点溶出度范围增加前一时间点溶出度范围的要求！的要求！对于缓控释制剂如何拟定取样时间点与限度如何拟定？对于缓控释制剂如何拟定取样时间点与限度如何拟定？S溶出度应至少设定三个取样时间点。第一点是为避免溶出度应至少设定三个取样时间点。第一点是为避免“突突释释”，故应设定为试验，故应设定为试验12小时后或溶出量相当于标示量小时后或溶出量相当于标示量2030%时间点；时间点；S第二点是为考察药品溶出特性，该限度应设定在溶出量约第二点是为考察药品溶出特性，该限度应设定在溶出量约50%时间点；最后一点是为确保药物（几乎）定量释放，通时间点；最后一点是为确保药物（几乎）定量释放，通常为药物溶出量超过常为药物溶出量超过80%时间点。时间点。S任何一点的拟定范围建议勿超过标示含量的任何一点的拟定范围建议勿超过标示含量的20%，且各点，且各点溶出限度交叉范围建议勿超过溶出限度交叉范围建议勿超过10%。S溶出介质首选水、绝不建议采用酸介质。溶出介质首选水、绝不建议采用酸介质。略略（你知道的！呵呵（你知道的！呵呵）此处需提醒的是：国内已上市药品质量皆值得商榷，此处需提醒的是：国内已上市药品质量皆值得商榷，故不能作为现今仿制药研发的参比制剂！故不能作为现今仿制药研发的参比制剂！概括而言概括而言原第一阶段：原第一阶段：研发阶段研发阶段错误理解溶出度理念错误理解溶出度理念原第二阶段：原第二阶段：生物等效性试验（现实情况不允许失败）生物等效性试验（现实情况不允许失败）第三阶段：第三阶段：上市了、销售了（拼价格、肉搏战！）上市了、销售了（拼价格、肉搏战！）第四阶段：第四阶段：上药典或标准转正时的出发点（为了让你合格，上药典或标准转正时的出发点（为了让你合格，你能不合格吗？想不合格都难！）你能不合格吗？想不合格都难！）第五阶段：第五阶段：临床疗效差强人意！临床疗效差强人意！作为企业的思考！作为企业的思考！Q如何在全国众多的仿制产品中、脱颖而出，独执如何在全国众多的仿制产品中、脱颖而出，独执牛耳？（取国外原发厂家产品比较各牛耳？（取国外原发厂家产品比较各pH条件下的条件下的溶出度曲线）溶出度曲线）Q市场销售的切入点？是以价格取胜，还是以技术市场销售的切入点？是以价格取胜，还是以技术取胜？（与其他各厂家产品的比较）取胜？（与其他各厂家产品的比较）Q介绍以色列和印度的作法；扎扎实实地做好仿制介绍以色列和印度的作法；扎扎实实地做好仿制药、做好药、做好“普药普药”！（国内有厂家在进行中）！（国内有厂家在进行中）企企业业研研发发时时一定要深刻领会国家新药审评中心提出的一定要深刻领会国家新药审评中心提出的“仿产仿产品不是仿标准品不是仿标准”的精神与内涵！的精神与内涵！原质量标准一定要参照，但绝非机械地生搬硬原质量标准一定要参照，但绝非机械地生搬硬套，不假思索地拿来，一定要予以科学、辩证地分套，不假思索地拿来，一定要予以科学、辩证地分析。析。千万不要迷信国外药典或进口质量标准！千万不要迷信国外药典或进口质量标准！质量标准本身就是一个不断完善、不断改变的过质量标准本身就是一个不断完善、不断改变的过程。千万不要不敢改！要敢于改！合理地改！程。千万不要不敢改！要敢于改！合理地改！对于企业界寄语（如何脱颖而出？）对于企业界寄语（如何脱颖而出？）F第一步：第一步：每一产品每一产品/剂型皆有其核心与灵魂性评价指标。企剂型皆有其核心与灵魂性评价指标。企业可通过对比现行国内质量标准中这些指标与国外同品种质业可通过对比现行国内质量标准中这些指标与国外同品种质量标准找到差距，且必须购买来原研产品，针对以上各关键量标准找到差距，且必须购买来原研产品，针对以上各关键性评价指标进行对比研究，发现自身产品内在品质上存在的性评价指标进行对比研究，发现自身产品内在品质上存在的不足，不足，随后有的放矢地进行随后有的放矢地进行“二次开发二次开发”，重新研究制剂工重新研究制剂工艺艺/处方筛选等，力争研制生产出与原研品相同内在品质的处方筛选等，力争研制生产出与原研品相同内在品质的自身仿制产品来。自身仿制产品来。对于企业界寄语（如何脱颖而出？）对于企业界寄语（如何脱颖而出？）F第二步：第二步：提高质量标准，彰显提高质量标准，彰显“与众不同与众不同“。列举如下：列举如下：(1)针对固体制剂的有效性针对固体制剂的有效性即生物利用度，提高溶出度即生物利用度，提高溶出度试验要求，如降低转速、增加各试验要求，如降低转速、增加各pH值溶出介质中的测定和值溶出介质中的测定和要求，甚至效仿发达国家，采用多条溶出曲线进行评估！要求，甚至效仿发达国家，采用多条溶出曲线进行评估！(2)针对液体制剂安全性针对液体制剂安全性杂质控制，增加已知杂质、单杂质控制，增加已知杂质、单个未知杂质、总杂质控制，且限度依照参比制剂拟定。个未知杂质、总杂质控制，且限度依照参比制剂拟定。(3)针对难溶性软膏剂型的有效性、增加粒度控制。针对难溶性软膏剂型的有效性、增加粒度控制。对于企业界寄语（如何脱颖而出？）对于企业界寄语（如何脱颖而出？）(4)针对注射用粉末剂型的有效性，增加粒度分布、晶型、针对注射用粉末剂型的有效性，增加粒度分布、晶型、比表面能、粒子形状、晶格能等物理化学参数的评估比表面能、粒子形状、晶格能等物理化学参数的评估（国产（国产注射用头孢曲松钠与原研品注射用头孢曲松钠与原研品“罗氏芬罗氏芬”在临床疗效上的差距在临床疗效上的差距便可在以上评价指标中得以体现）便可在以上评价指标中得以体现）复溶复溶/溶解时间的不同，溶解时间的不同，该指标很重要！该指标很重要！(5)对于重（装）量差异，不采用中国药典规定（对于重（装）量差异，不采用中国药典规定（其只有精其只有精密度、没有准确度要求，故可放心大胆地进行密度、没有准确度要求，故可放心大胆地进行“底限投料底限投料”！），），而采用国外药典的类似于而采用国外药典的类似于“含量均匀度检查法含量均匀度检查法”的评判的评判标准，生产出品质更加均一、含量更为靠近标示值标准，生产出品质更加均一、含量更为靠近标示值(100%)的的产品。产品。对于企业界寄语（如何脱颖而出？）对于企业界寄语（如何脱颖而出？）F第三步：第三步：向国家新药审评中心或药典会提出补充申请，向国家新药审评中心或药典会提出补充申请，同时递交更新的质量标准，其中的关键指标上皆要高于同时递交更新的质量标准，其中的关键指标上皆要高于现行标准。现行标准。F第四步第四步：凭借质量标准上的优势，在市场推广和技术：凭借质量标准上的优势，在市场推广和技术营销上营销上“做足文章做足文章”，进而寻求在各处招标定价上的优，进而寻求在各处招标定价上的优势。现今、一些国内合资药厂和进口仿制药厂纷纷采取势。现今、一些国内合资药厂和进口仿制药厂纷纷采取此种方式。此种方式。对于企业界寄语（如何脱颖而出？）对于企业界寄语（如何脱颖而出？）F第五步：第五步：申请发改委申请发改委“差别定价差别定价”！2009年年8月月10日、国日、国家发改委已率先在广东的家发改委已率先在广东的“药品招标药品招标”中引入了中引入了“差别定差别定价政策价政策”，拟定了三大类、，拟定了三大类、11小类产品可提出申请！其中：小类产品可提出申请！其中：(1)获得国家级资质机构认定其药品有效性、安全性、质量可获得国家级资质机构认定其药品有效性、安全性、质量可控性明显优于其他企业同品种剂型药品的；控性明显优于其他企业同品种剂型药品的；(2)获得国家药品审评等资质机构认定该药品注册标准指标明获得国家药品审评等资质机构认定该药品注册标准指标明显优于同类其它品种的。显优于同类其它品种的。(3)获得国际认证并能够出口的药品制剂。现阶段暂考虑国内获得国际认证并能够出口的药品制剂。现阶段暂考虑国内加工生产并能够出口到欧盟、美国、日本或澳大利亚市场，加工生产并能够出口到欧盟、美国、日本或澳大利亚市场，且连续出口超过且连续出口超过2年。年。(4)着重讲述着重讲述对于企业界寄语（本人诌见对于企业界寄语（本人诌见）是否有必要致力于创新药研发？是否有必要致力于创新药研发？F如有国家或地方政府资助、可以考虑。如有国家或地方政府资助、可以考虑。F如是高校、海归等，因所处环境、可以考虑。如是高校、海归等，因所处环境、可以考虑。F作为国内企业、即便是上市公司也应慎重，深入调研后再做出作为国内企业、即便是上市公司也应慎重，深入调研后再做出决定。如财力充裕，莫不如将仿制药做精、做好、做大、做透，决定。如财力充裕，莫不如将仿制药做精、做好、做大、做透，这才是企业发展的这才是企业发展的“王道王道”!F如已如已“骑虎难下骑虎难下”，要拿出，要拿出“壮士断腕壮士断腕”之勇气之勇气!F讲述原因（因为国际大公司在制剂上的优势无可替代）讲述原因（因为国际大公司在制剂上的优势无可替代）看到国家层面的希望和曙光看到国家层面的希望和曙光讲述讲述20082009年全国评价性抽验工作的历史背景与现年全国评价性抽验工作的历史背景与现今发现的问题！今发现的问题！药审中心已全面引入多条溶出曲线比对要求！药审中心已全面引入多条溶出曲线比对要求！国家发改委为改变国家发改委为改变“药价虚低药价虚低”问题，正在研讨引入问题，正在研讨引入“差别定价政策差别定价政策”以激励国内仿制品中率先脱颖而出者！以激励国内仿制品中率先脱颖而出者！十二十二五期间，国家发改委制订了五期间，国家发改委制订了关于药品制剂质量保关于药品制剂质量保障体系升级专项实施方案障体系升级专项实施方案，即将获批。具体措施为：，即将获批。具体措施为：(1)国家将用专项资金方式，支持研发和产业化综合性国际化国家将用专项资金方式，支持研发和产业化综合性国际化平台示范企业平台示范企业5家；家；(2)支持具有原料药和制剂一体化能力的国际化企业支持具有原料药和制剂一体化能力的国际化企业15家；家；(3)支持制剂出口加工企业支持制剂出口加工企业15家；家；(4)凡是产品通过凡是产品通过cGMP认证的企业，有望在各省药品集中招认证的企业，有望在各省药品集中招标采购中享受定价方面区别对待；标采购中享受定价方面区别对待；(5)通过国外通过国外cGMP认证并成功将制剂出口到国际主流市场的认证并成功将制剂出口到国际主流市场的制药企业，国家还将在出口退税和进口关税方面给予扶持。制药企业，国家还将在出口退税和进口关税方面给予扶持。对于对于“国务院关于印发国家药品安全十二五规划的通知国务院关于印发国家药品安全十二五规划的通知”(2012年年2月月)的体会与思考的体会与思考撷取精华、诠释精神撷取精华、诠释精神(1)原文：全面提高药品标准，进一步提高药品质量。原文：全面提高药品标准，进一步提高药品质量。可谓一针见血：唯有从质量标准入手，才能彻底撬可谓一针见血：唯有从质量标准入手，才能彻底撬动药品品质的提升。动药品品质的提升。(2)原文：原文：2007年修订的年修订的药品注册管理办法药品注册管理办法施行前批准施行前批准生产的仿制药中，国家基本药物和临床常用药品质量达生产的仿制药中，国家基本药物和临床常用药品质量达到国际先进水平。到国际先进水平。进行进行“药品品质再评价工程药品品质再评价工程”似乎已势在必行。各似乎已势在必行。各企业应提前做好内功，先知先觉。企业应提前做好内功，先知先觉。对于对于“国务院关于印发国家药品安全十二五规划的通知国务院关于印发国家药品安全十二五规划的通知”(2012年年2月月)的体会与思考的体会与思考撷取精华、诠释精神撷取精华、诠释精神(3)原文：全面提高仿制药质量。对原文：全面提高仿制药质量。对2007年修订的年修订的药品注册管药品注册管理办法理办法施行前批准的仿制药，分期分批与被仿制药进行质量施行前批准的仿制药，分期分批与被仿制药进行质量一致性评价，其中纳入国家基本药物目录、临床常用的仿制药一致性评价，其中纳入国家基本药物目录、临床常用的仿制药在在2015年前完成，未通过质量一致性评价的不予再注册，注年前完成，未通过质量一致性评价的不予再注册，注销其药品批准证明文件。药品生产企业必须按销其药品批准证明文件。药品生产企业必须按药品注册管理药品注册管理办法办法要求，将其生产的仿制药与被仿制药进行全面对比研究，要求，将其生产的仿制药与被仿制药进行全面对比研究，作为申报再注册的依据。作为申报再注册的依据。国家已下定决心对既有问题进行解决，必定会对企业带国家已下定决心对既有问题进行解决，必定会对企业带来深远影响。来深远影响。“大浪淘沙大浪淘沙”后彰显英雄本色！后彰显英雄本色！对于对于“国务院关于印发国家药品安全十二五规划的通知国务院关于印发国家药品安全十二五规划的通知”(2012年年2月月)的体会与思考的体会与思考撷取精华、诠释精神撷取精华、诠释精神(4)原文：建立政府主导，企业、检验机构、高校和科研机原文：建立政府主导，企业、检验机构、高校和科研机构共同参与的标准提高机制，引导和鼓励企业通过技术构共同参与的标准提高机制，引导和鼓励企业通过技术进步提升质量标准。进步提升质量标准。欲脱颖而出的企业，唯有通过行业内唯一的联系纽欲脱颖而出的企业，唯有通过行业内唯一的联系纽带带“质量标准质量标准”彰显自身产品的差异化、彰显与众不彰显自身产品的差异化、彰显与众不同，这才是企业发展的王道！同，这才是企业发展的王道！对于对于“国务院关于印发国家药品安全十二五规划的通知国务院关于印发国家药品安全十二五规划的通知”(2012年年2月月)的体会与思考的体会与思考撷取精华、诠释精神撷取精华、诠释精神(5)原文：研究完善药品经济政策，对已达到国际水平的仿制药，原文：研究完善药品经济政策，对已达到国际水平的仿制药，在药品定价、招标采购、医保报销等方面给予支持，形成有利在药品定价、招标采购、医保报销等方面给予支持，形成有利于提高药品质量、保障药品安全的激励机制。于提高药品质量、保障药品安全的激励机制。明确指明了国内企业现阶段努力方向之一：走国际化道路，曲明确指明了国内企业现阶段努力方向之一：走国际化道路，曲线救国。线救国。“回来时回来时”国家必定给予价格上的扶植。这是企业发国家必定给予价格上的扶植。这是企业发展的百年大计啊！展的百年大计啊！努力方向之二（再次强调）：提升质量标准、彰显与众不同！努力方向之二（再次强调）：提升质量标准、彰显与众不同！对于企业界的寄语（穷则独善其身）对于企业界的寄语（穷则独善其身）所以，在座所以，在座“有想法的有想法的”企业可向浙江华海、浙企业可向浙江华海、浙江海正、江海正、北京赛科北京赛科等率先走出国门的企业学习，申等率先走出国门的企业学习，申请美国请美国ANDA批准或争取国外制剂加工订单批准或争取国外制剂加工订单(OEM)，力争，力争“曲线救国曲线救国”！这才是企业发展的王道！这才是企业发展的王道！提高技术要求和门槛方能从根源解决提高技术要求和门槛方能从根源解决同类产品甚多、市场混乱、低水平重复！同类产品甚多、市场混乱、低水平重复！技术门槛甚低，导致技术门槛甚低，导致审批过多审批过多“撬动撬动”整个制药行业和相关整个制药行业和相关产业的全面发展产业的全面发展!使广大人民群众能够使用到品使广大人民群众能够使用到品质优良、价廉物美的质优良、价廉物美的“有效药有效药”!溶出度的深溶出度的深入研究和严入研究和严格要求格要求愿与大家一起：愿与大家一起：共同呼吁业内对体外溶出度共同呼吁业内对体外溶出度的重视！的重视！为制药行业发展共勉共励！为制药行业发展共勉共励！回想起自己在日本地铁里意回想起自己在日本地铁里意识到祖国制药行业之孱弱、识到祖国制药行业之孱弱、懵懂时，泪流满面情景懵懂时，泪流满面情景期待着与您的进一步交流！期待着与您的进一步交流！